RhoC基因mRNA在食管鳞癌中的表达及其意义

目的:探讨RhoC基因在食管鳞癌组织中的表达情况及其与食管鳞癌发生、发展的关系.方法:采用半定量RT-PCR和原位杂交方法检测62例食管鳞癌、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中RhoC mRNA的相对表达量及细胞定位.结果:食管鳞癌组织中RhoC mRNA表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P <0.05); 在食管鳞癌癌变过程中,RT-PCR检测RhoC mRNA在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达量依次降低, 分别为0.902±0.119、0.731±0.065、0.653±0.069, 组间比较有明显差异(H= 99.629, P <0.01); 原位杂交检测RhoC转录本主要位于细胞质中, 其在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低, 分别为80.6%(50/62)、32.3%(10/31)、21.0%(13/62), 组间比较有明显差异(χ2 =47.735, P <0.01), 两种方法检测的RhoC mRNA表达具有一致性.结论:RhoC mRNA在食管鳞癌组织中显著增加, 并与食管鳞癌生物学行为关系密切, 提示RhoC mRNA过表达与食管鳞癌的发生、发展有关, RhoC mRNA可作为食管鳞癌早期诊断和判断预后的辅助指标.     

食管鳞癌组织中JWA、FAK表达变化及其与淋巴结转移的关系

目的观察食管鳞癌组织中JWA蛋白和黏着斑激酶（FAK）的表达变化,并探讨其与食管鳞癌淋巴结转移的关系。方法采用蛋白免疫印迹法检测37例食管鳞癌患者肿瘤组织及其癌旁组织中的JWA、FAK蛋白。结果食管鳞癌组织与癌旁组织中JWA蛋白的相对表达量分别为0.302±0.119、0.638±0.128,FAK分别为0.717±0.153、0.432±0.097,二者JWA、FAK蛋白表达量相比,P均〈0.05。有、无淋巴结转移者JWA蛋白相对表达量分别为0.163±0.37、0.383±0.06,FAK蛋白分别为0.832±0.134、0.658±0.109,P均〈0.05。JWA、FAK蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈负相关（r=-0.736,P〈0.01）。结论食管鳞癌组织中JWA蛋白表达下调,FAK蛋白表达上调,且其表达变化与食管鳞癌淋巴结转移有关。JWA可能通过抑制FAK的表达,发挥抑制食管鳞癌淋巴结转移的作用。     

抑癌基因PTEN在人食管鳞癌中的表达及其意义

目的 研究食管鳞癌中PTEN的表达，探讨其与临床病理参数的关系及对患者预后的判断价值。方法 应用免疫组织化学S-P法检测62例食管鳞癌组织标本中PTEN的表达水平。结果 （1）PTEN的表达与食管壁浸润程度、淋巴结转移情况、远处转移情况、pTNM分期、肿瘤分化程度呈负相关关系（P〈0．05）。（2）高表达组患者的术后3年生存率明显低于低表达组，组间比较有统计学意义（P〈0．01）。结论 PTEN表达与反映食管鳞癌恶性度的临床病理参数呈负相关关系，是独立的预后评价因素之一。     

食管鳞癌组织中hMLH1 mRNA的表达变化及意义

目的观察食管鳞癌组织中错配修复基因hMLH1 mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR法检测60例食管鳞癌组织与癌旁组织中的hMLH1 mRNA。结果食管鳞癌组织中hMLH1 mRNA相对表达量（0.761 7±0.035 7）明显低于癌旁正常组织（1.025 2±0.047 4）,P〈0.05;hMLH1 mRNA的相对表达量与食管鳞癌分化程度、肿瘤浸润深度和淋巴结转移无关（P均〉0.05）,与病理分期有关（P〈0.05）。结论hMLH1 mR-NA表达缺失参与了食管鳞癌的发生或发展。     

食管鳞状细胞癌组织上皮细胞钙粘蛋白表达量的意义

对４７例食管鳞状细胞癌组织的上皮细胞钙粘蛋白表达量进行了观察，结果显示：上皮细胞钙粘蛋白的表达与患者的性别、年龄和临床分期无关（Ｐ〉０．０５）。在分化差及有转移的食管癌中表达量呈阴性或弱阳性民分化好和中度分化癌相比具有显著性差异，与原位癌相比也具有显著性差异。提示上皮细胞钙粘蛋白表达与食管癌的分化程度和转移行为有关，测定上皮细胞钙粘蛋白表达量对食管鳞状细胞癌的预后判断和制定治疗方案有重要意义。     

DAPK mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的:探讨河南省食管癌高发区居民食管鳞癌组织中DAPK mRNA和蛋白的表达特征及意义.方法:应用原位杂交和免疫组织化学法检测50例食管鳞癌组织、17例癌旁不典型增生组织及20例正常食管黏膜组织中DAPK mRNA和蛋白的表达,并分析DAPK表达与临床病理特征的关系.结果:在食管鳞癌癌变过程中DAPK在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中mRNA及蛋白的表达组间比较有明显差异(X2 =14.655,7.998,均P<0.05);不同TNM分级及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间DAPKmRNA及蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.05).DAPK mRNA及蛋白食管鳞癌组织中的表达呈正相关关系(γ=0.743,P=0.000).结论:食管鳞癌组织中DAPK mRNA与蛋白表达均降低,其表达降低或者缺失可能与食管鳞癌发生发展有关;检测DAPK mRNA及蛋白的表达有望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

食管鳞癌中Dickkopf-3蛋白的表达

目的 探讨Dickkopf-3(Dkk-3)在不同分化程度的食管鳞癌、正常食管黏膜组织中的表达及其与食管鳞癌生物学行为的关系.方法 采用免疫组化S-P法,检测Dkk-3蛋白在67例食管鳞癌组织及5例非瘤食管组织的组织芯片中的表达情况,并结合临床病理资料进行分析.结果 67例食管鳞癌组织中Dkk-3蛋白阳性率为65.7%(44/67),5例非瘤食管组织中只有1例的微血管中Dkk-3蛋白表达阳性.Dkk-3蛋白的阳性表达与食管鳞癌纤维膜浸润、淋巴结转移、浸润深度和TNM分期呈正相关(P<0.05),而与性别、年龄、病理分级的相关性均无统计学意义(P>0.05).结论 Dkk-3在食管鳞癌中高表达,其可能参与了食管鳞癌的浸润及转移,有助于对食管鳞癌发展的判断和预测有无淋巴结转移.     

膜联蛋白A2在食管鳞状细胞癌中的表达及其与浸润转移的关系

目的 探讨膜联蛋白A2(Annexin A2)在人食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达变化与浸润转移的关系.方法 收集新疆医科大学第一附属医院2000年至2008年间,手术切除并经病理证实的ESCC组织作为实验组、对应癌旁5cm以上的组织作为对照组;随机选取了ESCC与癌旁配对的22对新鲜组织和175对石蜡包埋组织作为研究对象.应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)、蛋白免疫印迹和免疫组织化学的方法,从mRNA和蛋白两个方面检测Annexin A2的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果 在22对新鲜ESCC与癌旁组织中,Annexin A2在癌旁组织中的mRNA表达量(0.06±0.06)显著高于癌组织(0.02±0.02,P<0.05);Annexin A2在癌旁组织中的蛋白表达量(0.95±0.42)高于癌组织(0.81±0.36,P<0.05).在175对ESCC与癌旁组织石蜡标本中,Annexin A2蛋白的阳性表达率为82.3%(144/175),低于配对的癌旁组织中的阳性表达率[92.0%(161/175),P<0.05].此外,Annexin A2的表达与ESCC患者的淋巴结转移及分化程度相关(P<0.05),而与ESCC患者的大体类型关系不明显(P＞0.05).结论 Annexin A2在ESCC中的低表达可能对ESCC的发生发展及浸润转移起着一定的作用.     

下咽鳞癌组织中Paxillin mRNA的表达变化及意义

目的观察下咽鳞癌组织中桩蛋白（Paxillin）mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用荧光定量RT-PCR法检测38例下咽鳞癌患者癌组织及癌旁组织中的Paxillin mRNA。结果下咽癌组织中Paxillin mRNA表达量为12 871.5,正常组织中为3 405.0,两者比较,P〈0.05。下咽癌组织中,低、中、高分化者Paxillin mRNA表达量分别为17 163.0、11 333.5、6 760.5,三者比较,P〉0.05;浸润程度浅者为7 821.0,深者为16 783.0,两者比较,P〈0.05;有淋巴结转移者为19 832.0,无转移者为6 721.0,两者比较,P〈0.05。结论下咽鳞癌组织中Paxil-lin mRNA表达增加,Paxillin与下咽癌的发生发展有关。     

APRIL mRNA在食管鳞癌组织中的表达及意义

应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法检测63份食管鳞癌、30份正常食管上皮、36份单纯增生、29份轻度不典型增生、10份重度不典型增生、4份原位癌组织中APRIL mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系.结果 食管鳞癌组织APRIL mRNA表达显著高于正常黏膜组织(P<0.05),且在轻度不典型增生、原位癌及浸润癌中的表达均高于正常黏膜组织(P<0.01或P<0.05).APRIL mRNA的表达水平与淋巴结转移相关(P<0.05).提示APRIL mRNA可作为食管癌早期诊断及预后判断的参考指标.     

食管癌中桩蛋白、CD44V6的表达及意义

目的探讨桩蛋白（Paxillin）和CD44V6在食管癌组织中的表达及其与食管癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测食管癌组织中Paxillin和CD44V6的表达及两者的相关性。结果Paxillin和CD44V6在食管鳞癌和腺癌中的表达高于食管正常黏膜（P〈0．01）;Paxillin和CD44V6在食管鳞癌中表达与临床分期（P〈0．01）、浸润深度（P〈0．01）和淋巴结转移（P〈0．05）有关;Paxillin和CD44V6在食管鳞癌中表达无相关性（P〉0．05）。结论Paxillin和CD44V6的表达在食管鳞癌的侵袭转移过程中发挥着重要的作用,可作为反映食管癌肿瘤生物学指标和抗肿瘤治疗的靶点。     

RNAi对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白表达的沉默作用观察

目的观察RNA干扰（RNAi）对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白（Paxillin）表达的沉默作用。方法构建针对Paxillin基因序列的短发卡RNA（shRNA）表达载体,并转染至结肠癌HCT-8细胞,72 h后分别用实时定量PCR和Western blot法测定转染细胞中Paxillin mRNA及蛋白。结果根据针对Paxillin基因设计了小干扰RNA（siRNA）序列,构建了shRNA表达载体,并成功转染至HCT-8细胞。以空白对照组作均一化,转染Paxillin-shRNA_1、Paxillin-shRNA_2、Paxillin-shRNA_3、Paxillin-shRNA_NC的细胞及空白对照组细胞Paxillin mRNA相对表达量分别为0.66±0.28、0.31±0.11、1.00±0.22、1.05±0.32、1.00±0.29,Paxillin蛋白相对表达量分别为0.62±0.11、0.39±0.13、0.74±0.21、0.94±0.09、1.00±0.16。结论 RNAi可沉默结肠癌HCT-8细胞Paxillin的表达。     

WNT5A/JNK signaling regulates pancreatic cancer cells migration by Phosphorylating Paxillin

BackgroundExpression of WNT5A associated with aggressive tumor biology and poor clinical outcome of various types of cancer. However its function in the metastasis property of pancreatic cells still needs to be elucidated.MethodsWe detected the expressions of WNT5A, JNK1/p-JNK1 and Paxillin/p-Paxillin in cancer and the para-carcinoma tissues of pancreatic cancer. To understand how WNT5A/JNK signaling affects pancreatic cancer cell migration through the phosphorylation of cellular substrates of Paxillin, In vitro, we knocked down the WNT5A in PANC1, Capan-2 and HT1080 cell lines, and then tested the expression of JNK1. We detected the proteins of phosphorylation of Paxillin after JNK1 was inhibited and then the cells migration assay was evaluated. Moreover, JNK1 functionally phosphorylates serine178 on paxillin in vitro was detected .At last we subsequently observed whether WNT5A/JNK signaling modulates some molecule expressions relevant to focal adhesion (FA) formation and mesenchymal transition (EMT) and cell cycle.ResultsWNT5A, p-JNK1 and p-Paxillin were highly expressed in early stage of tumor tissues. In vitro, WNT5A/JNK signaling promotes cell migration in pancreatic cancer by phosphorylating serine178 on Paxillin, an FA adaptor, which means WNT5A may regulate FA's function.WNT5A up-regulates the molecule's expressions relevant to cell adhesion through the phosphorylation of JNK1, including MMP1, MMP2, ICAM and CD44. In addition, WNT5A/JNK signaling promoted the mRNA expressions of vimentin, but decreased in E-Cadherin expression, which suggested its regulatory effects on the EMT processes. WNT5A/JNK signaling didn't modulate cell proliferation.ConclusionWNT5A/JNK signaling initiate cell migration of pancreatic cancer through activation of Paxillin, which suggested WNT5A has the potency of being an effective therapeutic target for the metastasis of pancreatic cancer.     

食管癌环氧化酶-2的高表达与淋巴转移的关系

目的　探讨环氧化酶 -2 (COX -2 )在食管癌中的表达情况及其与淋巴结转移的关系。方法　应用免疫组织化学方法(SP法 ) ,检测 1999～ 2 0 0 1年手术切除的 76例食管癌病人中COX -2的表达。其中有食管旁淋巴结转移者 18例 ,胃左动脉旁淋巴结转移者 11例。结果　COX -2在食管癌中的表达率为 81 6 %,主要为癌组织的表达 ,而在癌旁组织几乎不表达 ;食管癌旁和胃左动脉旁淋巴结转移组COX -2的表达水平均高于未转移组 (P <0 0 0 1)。结论　食管癌中COX -2的高度表达与食管癌的发生、发展及淋巴结转移有关 ,提示COX -2可能是防治食管癌的一个靶位。     

Paxillin、FAK和PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

背景：研究表明Paxillin、黏着斑激酶（FAK）和PTEN在许多肿瘤的发生、发展、侵袭、转移中发挥重要作用,但联合检测三者在胃癌中表达的报道罕见。目的：研究正常胃黏膜和胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN的表达及其临床意义。方法：以免疫组化SP法分别检测40例正常胃黏膜组织和88例胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN表达,并分析其与胃腺癌临床病理特征的关系以及Paxillin与PTEN表达之间的相关性。结果：与正常胃黏膜组织相比,胃腺癌组织Paxillin（65．9％对32．5％,P〈0．05）、FAK（56．8％对17．5％,P〈0．05）阳性表达率显著增高,PTEN阳性表达率显著降低（47．7％对100％,P〈0．05）。Paxillin、FAK和PTEN表达与胃腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关（P〈0．05）．与性别和年龄无关。胃腺癌组织中Paxillin表达与PTEN表达呈显著负相关（r=-0．369,P〈0．05）。结论：Paxillin、FAK高表达和PTEN低表达可能与胃腺癌的浸润、淋巴结转移等恶性生物学行为相关,联合检测三者可能有助于判断胃腺癌恶性程度和患者预后。     

幽门螺杆菌L型感染与食管癌及癌前病变中bcl-2表达关系的研究

目的研究幽门螺杆菌L型(HpL)感染对食管癌及癌前病变凋亡调节基因bcl2蛋白表达的影响,探讨Hp-L在食管癌发生发展过程中可能的致癌机制。方法应用免疫组化和革兰染色技术检测51例食管鳞状细胞癌(原位癌16例,浸润癌35例)及69例鳞状上皮增生性病变(单纯增生15例,轻、中、重度不典型增生分别为21例、18例、15例)和20例正常食管粘膜鳞状上皮组织中HpL型和bcl2蛋白的表达情况,对HpL型阳性和阴性组织的bcl2蛋白表达进行比较分析。结果不同组织类型HpL型检出率在中、重度不典型增生、原位癌、浸润癌均比较高(55.6%～62.9%),与正常组相比均有显著性差异(P<0.005)。在120例食管病变组织中,61例HpL型阳性者的bcl2蛋白表达阳性有48例,占78.7%;79例HpL型阴性者的bcl2蛋白表达阳性24例,占40.7%,两者比较有显著性差异(P<0.005)。各病变组中HpL型感染阳性组的bcl2蛋白表达阳性率高于HpL型阴性组的bcl2蛋白表达阳性率,其差异均有显著性(P<0.005～P<0.025)。表明HpL型感染与bcl2蛋白表达存在着相关性。结论HpL型可能通过影响bcl2蛋白表达,使食管粘膜上皮细胞凋亡调控异常而涉及食管癌的发生发展过程。     

Relationship between biomarker expression and allelic alteration in esophageal carcinoma

BACKGROUND AND AIM: Expression of biomarkers and probable allelic alterations were studied in esophagus tissue samples from patients with esophageal carcinoma. METHODS: A total of 116 esophagus tissue samples were obtained from 25 patients with esophagus cancer. Histological studies revealed 23 samples were adenocarcinoma and 14 samples were epidermoid carcinoma while 79 samples were non-tumor. Expression of biomarkers was determined by enzyme immunoassay, and allelic alterations on chromosome 17p were performed by polymerase chain reaction (PCR) using primers D17S513 and D17S514. RESULTS: The adenocarcinoma group exhibited an increase of matrix metalloproteinase (MMP)-1 (P < 0.0001) and sialyl Le (a) (P < 0.001) mean levels when compared with the non-tumor group. Adenocarcinoma samples from patients with more than three positive lymph nodes had lower levels of tissue-inhibitor metalloproteinase (TIMP)-1 than those with negative nodes (P < 0.0005). Positive allelic alteration was associated with high levels of MMP-1 expression (P = 0.003). Epidermoid carcinoma samples showed higher expression of MMP-1 (P < 0.0001) and TIMP-1 (P < 0.02) than non-tumor samples. Both epidermal growth factor receptor and sialyl Le (a) levels were overexpressed in tumors of patients with more than three positive lymph nodes (P < 0.005). Carcinoembryonic antigen levels were higher in tumors associated with allelic wild type group (P = 0.0001) and patients with negative lymph nodes (P < 0.05). Furthermore, variability in expression of biomarkers was observed according to sample location, and allelic alterations were also found both in tumor and in some non-tumor samples. CONCLUSION: The data suggest that overexpression of tissue biomarkers associated with allelic alterations may have potential prognostic implications with different behavior in esophagus cancer.     

胃癌细胞PTEN甲基化与其表达的相关性

目的:探讨胃癌细胞PTEN基因启动子区域甲基化与其mRNA表达的关系.方法:采用甲基化特异性PCR法(MSP)检测四种胃癌细胞系SGC-7901(中度分化)、BGC-823(低度分化细胞)、MGC-803(低度分化细胞)、HGC-27中PTEN基因甲基化状态,RT-PCR检测四种胃癌细胞系PTEN表达水平(未分化).结果:HGC-27、MGC-803、BGC-823细胞系可检测到PTEN基因启动子的甲基化,SGC-7901细胞未检测到甲基化,甲基化水平的顺序依次为:HGC-27最高(138.217±7.898,P<0.01),MGC-803、BGC-823次之(P>0.05).PTENmRNA表达水平的依次顺序为:SGC-7901最高(0.336±0.079,P<0.01),BGC-823、MGC-803次之(P>0.05),HGC-27表达水平最低(0.113±0.047,P<0.05),其表达水平随着其启动子区甲基化水平增高而降低.PTENmRNA表达及其启动子甲基化水平还与胃癌细胞分化程度相关.结论:胃癌细胞PTEN基因启动子区域出现异常甲基化,可能是导致其mRNA表达异常的主要原因,也可能是导致胃癌发生、发展的重要机制之一.