地塞米松和维生素B12对A系小鼠胚胎腭突细胞生长因子基因表达的影响

目的：揭示地塞米松（DEX）引起腭裂发生及维生素B12阻抑腭裂发生的分子机理。方法：应用RT－CPR技术，半定量研究DEX和维生素B12对培养的A系小鼠腭突细胞生长因子基因表达的影响。结果：DEX能明显刺激腭突细胞EGF及TGFβ1基因的表达，而对TGFα基因表达无明显影响，维生素B12对EGF、TGFα、TGFβ1的基因表达无明显影响；维生素B12可抑制DEX促进腭突细胞EGF、TGFβ1基因表达的作用。结论：DEX可能是通过改变腭突细胞一些生长因子基因表达，干扰了正常的腭突发育，导致腭裂畸形。维生素B12则通过减弱DEX对腭突细胞一些生长因子基因表达而抑制DEX引起腭裂畸形的作用。     

初级纤毛相关信号通路在小鼠腭发育中的机制研究进展

初级纤毛是以微管为基础的细胞器,可感知细胞外机械和化学信号变化,并通过介导多种分子信号通路将信息传导至细胞内,在发育、细胞迁移和细胞分化过程中,扮演着重要角色。近年来有研究发现,小鼠胚胎腭突上皮和间充质细胞上存在初级纤毛,并且,初级纤毛自身及其传递的信号因子与腭发育密切相关。因此本文将近年来针对初级纤毛及相关信号通路导致腭发育异常机制的研究进展作一综述,以期为唇腭裂这一领域的研究者提供新的思考。     

Shh信号通路变化对小鼠胚胎腭突间充质细胞自噬的影响

目的：探讨地塞米松（dexamethasone,DEX）及平滑激动剂（smoothened agonist,SAG）干预下小鼠胚胎腭突间充质细胞Shh信号通路改变后,小鼠胚胎腭突间充质细胞自噬状态的变化。方法：体外培养胚胎14.5 d的C57BL/6J小鼠胚胎腭突间充质细胞,根据干预方式分为4组：对照组、地塞米松组（DEX组）、地塞米松+SAG组（DEX+SAG组）、单独SAG干预组（SAG组）。通过透射电镜观察各组细胞自噬体或自噬溶酶体的数量,Western blot检测各组Shh、Ptch1、Smo、Gli3A/R、Cyclin D1及自噬标志物LC3Ⅱ/Ⅰ和P62、Beclin-1的表达情况。结果：电镜结果显示,对照组和DEX组中自噬体/自噬溶酶体的数量无明显差异,而SAG干预后可观察到大量自噬体/自噬溶酶体。Western blot结果显示,与对照组相比,P62、Ptch1、Smo、Gli3A/R、CyclinD1在DEX组中明显降低（P<0.05）,LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达无明显变化（P>0.05）;DEX+SAG组及SAG组中Ptch1、Smo、Gli3...     

小鼠胚胎腭突融合过程中IRF6蛋白在腭突组织中表达的实验研究

目的观察小鼠胚胎腭突融合过程中IRF6蛋白在腭突组织中的表达情况,探讨唇腭裂发生原因。方法 60只C57BL/6J近交系受孕小鼠分别于妊娠第13.0天(GD13.0)、GD14.0、GD14.5及GD15.0时断颈处死,取小鼠胚头经固定、石蜡包埋、切片,行苏木素-伊红染色及免疫组织化学检测不同胚胎发育时期的腭突组织中IRF6蛋白的表达。结果 GD13.0时,腭突上皮、舌上皮可见IRF6蛋白表达;GD14.5时,腭突中嵴上皮接触,IRF6蛋白的表达水平达到高峰;GD15.0时,表达水平下降(P<0.05)。结论 IRF6蛋白在两侧腭胚突的接触、融合期发挥调节作用。     

布比卡因复合地塞米松和维生素B12用于硬膜外术后镇痛100例疗效观察

目的：观察布比卡因复合地塞米松和维生素B12用于硬膜外术后镇痛的效果。方技：100例中低位硬膜外麻醉患者注入混合液，观察术后的镇痛效果、不良反应及对远期腰背痛的影响。结果：显效50例，有效30例，无效20例，镇痛有效率80％。结论：此方法用于术后镇痛有效，副作用少，还可以预防因硬膜外穿刺引起的腰背痛。     

维生素B12滴鼻剂的鼻粘膜纤毛毒性评价研究

目的;研究维生素B12滴鼻剂中维生素B12原料及附加剂－－4种鼻粘膜吸收促进剂,4种高分子材料,2种防腐剂及2种等渗睦鼻粘膜纤毛运动的影响。方法;在体蟾蜍上腭模型法。结果：维生素B12原料,1％PVP溶液,1％HPMC溶液,0．8％MC溶液,0．05％CP溶液,0．01％新洁尔灭溶液,0．05％EDTA溶液,2．56％甘油溶液,5．3％甘露醇溶液,2％β－环糊精混悬液对纤毛运动均无明显影响;1．8％氮酮混悬液,5％吐温－80溶液,枸橼酸盐缓冲液对纤毛运动有一定影响。结论：维生素B12与适宜附加剂组合制成鼻腔给药制剂是可行的。     

布比卡因配伍地塞米松、维生素B6、维生素B12用于剖宫产术后硬膜外镇痛的观察

目的观察布比卡因配伍地塞米松、维生素B6、维生素B12用于剖宫产术后硬膜外镇痛的效果.方法将50例剖宫产术后产妇随机分为两组,每组25例,于硬膜外分别注入0.75%布比卡因2ml加生理盐水3ml(A组)和0.75%布比卡因2ml、地塞米松5mg和维生素B650mg、维生素B120.5mg(B组),拔除硬膜外导管,送回病房.结果两组镇痛效果满意,差异无显著性,P＞0.05,B组切口痛觉恢复时间为11.21±2.68h,较A组4.6±1.51h显著延长,P<0.01.结论布比卡因配伍地塞米松、维生素B6、维生素B12用于剖宫产术后硬膜外镇痛与单纯布比卡因相比具有镇痛时间延长的特点,在临床上有应用价值.     

小鼠胚胎腭突间充质细胞的分离与体外培养方法研究

目的改进小鼠胚胎腭突取材方法,原代培养C57BL／6J小鼠胚胎腭突间充质细胞并加以纯化。方法通过改良方法在显微镜下切取胚胎腭突,然后应用Dispase酶消化离体腭突,纯化腭突胚胎间充质细胞,免疫荧光染色法鉴定腭突间充质细胞生物学特性。结果改良的取材方法使小鼠胚胎腭突取材更精确,操作更简单;纯化后的原代间充质细胞几乎不含上皮细胞;免疫荧光显示细胞HNK-1、S-100、波形蛋白标记阳性,角蛋白标记阴性。结论建立了一种小鼠胚胎腭突精确取材及纯化腭突外胚间充质细胞的方法,为下一步研究工作打下基础。     

布比卡因配伍地塞米松、维生素B6、维生素B12用于剖宫产术后硬膜外镇痛观察

目的观察布比卡因配伍地塞米松、维生素B6、维生素B12用于剖宫产术后硬膜外镇痛的效果.方法将50例剖宫产术后产妇随机分为两组,每组25例,于硬膜外分别注入0.75%布比卡因2ml加生理盐水3ml(A组)和0.75%布比卡因2ml、地塞米松5mg和维生素B650mg、维生素B120.5mg(B组),拔除硬膜外导管,送回病房.结果两组镇痛效果满意,差异无显著性,P＞0.05,B组切口痛觉恢复时间为11.21±2.68h,较A组4.6±1.51h显著延长,P<0.01.结论布比卡因配伍地塞米松、维生素B6、维生素B12用于剖宫产术后硬膜外镇痛与单纯布比卡因相比具有镇痛时间延长的特点,在临床上有应用价值.     

赖氨基醇B12、维生素D3联合重组人生长激素治疗矮小症的效果分析

目的 探讨赖氨基醇B₁₂、维生素D₃联合重组人生长激素(rhGH)治疗矮小症对患儿骨密度、25-羟维生素D[25(OH)D]、胰岛素生长因子-1(IGF-1)、类胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)水平的影响。方法 选取2020年1月—2021年9月在景德镇市妇幼保健院治疗的矮小症患儿104例。采用信封法将患儿随机分为观察组和对照组,每组52例。观察组给予赖氨基醇B₁₂、维生素D₃联合rhGH治疗,对照组给予rhGH治疗,观察两组治疗效果及治疗前后血清25(OH)D、IGF-1、IGFBP-3等的变化。结果 观察组治疗前后身高、体重、生长速率、骨密度、骨龄及血清骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)、25(OH)D、IGF-1、IGFBP-3的差值高于对照组(P <0.05)。结论 赖氨基醇B₁₂、维生素D₃联合rhGH治疗矮小症疗效较好,可改善患儿骨矿物质密度和骨代谢,并有助于提高血清25(OH)D、IG...     

荧光共振能量转移淬灭法测定维生素B2的含量

以L-谷胱甘肽(GSH)为稳定剂合成了性能良好的水溶性ZnSe量子点,并利用其与维生素B₂（VB₂）组成荧光共振能量转移体系,考察ZnSe量子点（供体）和VB₂（受体）之间荧光共振能量转移的最佳条件,建立了荧光共振能量转移淬灭法测定VB₂的新方法。VB₂在1.54×10^-8~2.77×10^-7 mol/L浓度范围内与ZnSe量子点的荧光强度变化F₀/F呈现良好线性关系(r=0.996 7),检测下限（S/N=3）为1.0×10^-8mol/L。将1.54×10^-7 mol/L VB₂标准溶液平行测定9次,RSD为1.2%。将该方法用于3个不同厂家生产的VB₂的含量测定,用加标的方法测得平均回收率为99.28%~101.9%（n=6）,结果满意。相比紫外分光光度法,本方法测得VB₂的含量更接近于标示量,这为痕量VB₂的含量测定提供了一种简便灵敏的方法。     

RP-HPLC法测定维生素D3制剂中的有关物质

建立维生素D₃制剂中有关物质检查的反相HPLC方法。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈为流动相;柱温20 ℃;检测波长为265 nm;流速1.0 mL/min。建立的方法可以使维生素D₃与相邻杂质有效分离。通过光热反应特性和LC-MS-DAD对相邻杂质进行了定性。维生素D₃与其主要杂质前维生素D₃、反式维生素D₃和速甾醇D₃互为同分异构体,在LC-MS上具有相同的特征离子峰m/z 385.27,四者的最大紫外吸收波长分别为265,265,275,279 nm。该法专属性、耐用性较好,检测限和定量限分别为0.1μg/mL和0.3 μg/mL。供试品溶液在室温下放置24 h稳定。应用本法对3种维生素D₃制剂进行有关物质检查,并与正相HPLC法比较,两种方法结果一致,表明本法适用于维生素D₃制剂中有关物质检查。     

72例克罗恩病患者中血清同型半胱氨酸、叶酸和维生素B12水平分析

目的 探讨血清同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）、叶酸和维生素B₁₂水平与克罗恩病（Crohn''s disease,CD）的关系。方法 收集72例CD患者和128名性别、年龄相匹配的健康对照者,采用简化克罗恩病活动指数（CDAI）评估CD疾病活动度。采用循环酶法检测Hcy水平,化学发光免疫法检测叶酸和维生素B₁₂水平。采用Pearson相关性分析和多元线性回归分析探讨CD组中Hcy水平与CDAI评分及叶酸、维生素B₁₂、白蛋白等血清学指标的关系。最后采用Logistic回归分析评估CD的独立危险因素。结果 与对照组相比较,CD组中Hcy平均水平显著增高（P=0.002）,而叶酸和维生素B₁₂平均水平显著降低（P均=0.000）。CD组中高同型半胱氨酸血症（>15.0μmol/L）、叶酸缺乏（<4.0ng/ml）和维生素B₁₂缺乏（<203.0pg/ml）比例均显著高于对照组（P均<0.01）。与缓解期患者（CDAI<5）比较,活动期CD患者（CDAI≥5）中Hcy平均水平显著增高（P=0.001）,而叶酸和维生素B₁₂平均水平显著降低（P均=0.000）。经性别、年龄因素校正后,多元线性回归分析显示CD组中Hcy水平与叶酸和维生素B₁₂呈独立负相关（β=-0.262,P=0.037;β=-0.293,P=0.020）。Logistic回归分析结果提示叶酸缺乏和维生素B₁₂缺乏为CD的独立危险因素（OR=4.421,P=0.006;OR=9.036,P=0.000）。结论 浙江籍汉族CD患者中可能普遍存在高同型半胱氨酸血症、叶酸缺乏和维生素B₁₂缺乏,血清Hcy、叶酸和维生素B₁₂水平与CD疾病活动度密切相关,叶酸缺乏和维生素B₁₂缺乏是CD的独立危险因素。     

RP-HPLC法同时测定原花青素中儿茶素、表儿茶素、没食子酸、原花青素B2的含量

建立同时测定原花青素中儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、没食子酸(GA)、原花青素B₂(PCB₂)含量的方法,比较不同厂家的原花青素中这4种物质含量的差异。采用RP-HPLC法,利用Waters高效液相色谱仪,色谱柱为Hypersil ODS2(4.0 mm×200 mm,5 μm),以2%冰醋酸溶液和甲醇为流动相,梯度洗脱,检测波长280 nm。结果显示:C、EC、GA和PCB₂的质量浓度分别在0.1~50 μg/mL(r=0.998 6),0.1~50 μg/mL(r=0.994 5),0.05~50 μg/mL(r=0.999 9)和0.1~50 μg/mL(r=0.992 2)范围内与峰面积呈良好的线性关系;C、EC、GA、PCB₂的平均加样回收率(%)分别为98.36、98.21、89.60、98.47,RSD(%)分别为1.39、0.84、2.12、2.46。该方法简便、准确、重复性好,可用于同时测定原花青素中C、EC、GA、PCB₂的含量,不同厂家不同批号的原花青素中这4种物质的含量差异较显著。     

胎儿生长受限孕妇血清microRNA-424、sFlt-1 mRNA相对表达量对叶酸、维生素B12水平的影响

目的 探讨胎儿生长受限孕妇血清microRNA-424（miR-424）、可溶性血管内皮生长因子受体-１（sFlt-1）mRNA相对表达量对叶酸（FA）、维生素B₁₂（VitB₁₂）水平的影响。方法 回顾性分析2017年1月—2019年1月在石家庄市妇幼保健院住院分娩的116例胎儿生长受限孕妇（FGR组）和116例分娩正常胎儿孕妇（对照组）的临床资料。采用实时荧光定量PCR检测miR-424 mRNA、sFlt-1 mRNA相对表达量,采用电化学发光法检测FA、VitB₁₂水平。比较两组胎儿生长参数［出生体重、身高、腹围、头围、体质量指数（BMI）］、miR-424 mRNA、sFlt-1 mRNA、FA及VitB₁₂;采用Pearson法分析血清各指标与胎儿生长参数的相关性及血清miR-424 mRNA、sFlt-1 mRNA与FA、VitB₁₂的相关性;采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-424 mRNA、sFlt-1 mRNA预测胎儿生长受限的效能。结果 FGR组胎儿出生体重、身高、腹围、头围及BMI低于对照组（P <0.05）;FGR组miR-424 mRNA、sFlt-1 mRNA相对表达量高于对照组,FA、VitB₁₂水平低于对照组（P <0.05）;miR-424 mRNA和sFlt-1 mRNA与胎儿出生体重、身高、腹围、头围及BMI呈负相关（P <0.05）;FA和VitB₁₂与胎儿出生时体重、身高、腹围、头围及BMI呈正相关（P <0.05）。miR-424 mRNA预测胎儿生长受限的AUC为0.790,截断值>0.18时,敏感性为74.14%（95% CI：0.476,0.790）,特异性为71.55%（95% CI：0.378,0.800）;sFlt-1 mRNA预测胎儿生长受限的AUC为0.777,截断值> 6.39时,敏感性为56.03%（95% CI：0.448,0.664）,特异性为91.38%（95% CI：0.207,0.985）;FA预测胎儿生长受限的AUC为0.826,截断值≤ 11.24 μg/L时,敏感性为85.34%（95% CI：0.576,0.892）,特异性为66.38%（95% CI：0.500,0.716）;VitB₁₂预测胎儿生长受限的AUC为0.831,截断值≤ 255.24 ng/L时,敏感性为85.34%（95% CI：0.322,0.948）,特异性为67.24%（95% CI：0.517,0.802）;各指标联合预测胎儿生长受限的AUC为0.909,敏感性为85.34%（95% CI：0.672,0.957）,特异性为82.76%（95% CI：0.767,0.905）（P <0.05）;血清miR-424 mRNA和sFlt-1 mRNA与FA和VitB₁₂呈负相关（P <0.05）。结论 胎儿生长受限孕妇血清miR-424 mRNA、sFlt-1 mRNA呈高表达,并能通过影响FA、VitB₁₂水平,负调控胎儿生长发育,检测各指标有望成为预测胎儿生长受限的一个血清学方法。     

丁苯酞对Aβ25-35诱导的PC12 细胞线粒体损伤的保护作用

 目的探讨丁苯酞（NBP）对β淀粉样肽25-35（Aβ_25-35）诱导的PC12 细胞线粒体损伤的保护作用及其机制。方法对数生
长期的PC12 细胞分为6 组：正常对照组、模型组、不同浓度（0.1,1.0,10,100 μmol/L）NBP 组。将不同浓度的NBP 作用到经
Aβ_25-35诱导的PC12 细胞上,MTT 法分析细胞存活率,电镜观察线粒体超微结构的变化,分光光度法检测丙二醛（MAD）及超氧化
物歧化酶（SOD）活性,观察细胞氧化应激。结果MTT 显示NBP组细胞存活率明显高于未经NBP 预处理组（P < 0.05）,并且中
剂量存活率最高;电镜结果显示模型组线粒体数量和形态发生了明显的改变,而NBP 组线粒体数量多,结构比较完整;SOD 活
性NBP组较模型组细胞明显增加,而MDA 活性降低。结论NBP 对Aβ_25-35诱导的PC12 细胞线粒体损伤有保护作用,其机制
可能和NBP 抑制MDA 活性、降低脂质过氧化、激活SOD 清除氧自由基有关。     

维生素D3对实验性自身免疫性甲状腺炎Th1/Th2细胞平衡和MCP-1/CCR2信号的影响

目的:探讨维生素D3对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠炎症、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(helper T cell 1/helper T cell 2,Th1/Th2)及单核细胞趋化蛋白1/细胞表面趋化因子受体2(monocyte chemoattractant protein-1/cell surface chemokine receptor 2,MCP-1/CCR2)信号的影响.方法:将Lewis大鼠按随机数字表法分为对照组(n=10)、模型组(n=15)和治疗组(n=15),采用免疫猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin,pTG)诱导建立实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠模型,治疗组按照每只5 mg/kg的剂量腹腔注射1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3],隔天1次,共用4周,其余2组均给予等体积生理盐水.采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin stain,HE)染色观察大鼠甲状腺组织形态学变化;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)检测血清中促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、自身抗体抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroid peroxidase antibody,TPOAb)及细胞因子干扰素-γ(interferon,IFN-γy)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素-4 (interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10 (inter-leukin-10,IL-10),逐步线性回归分析TSH与自身抗体、细胞因子的关系;免疫组织化学检测甲状腺组织中的NF-κB p65;Western blot检测甲状腺组织中MCP-1/CCR2信号轴.结果:模型组甲状腺滤泡结构破坏、炎性细胞浸润,治疗组甲状腺病理变化明显改善并趋向于对照组.治疗组TSH、TGAb、TPOAb水平与模型组相比均明显降低(t=4.000、2.603、5.279,P=0.000、0.015、0.000),但仍明显高于对照组(t=2.400、2.216、7.392,P=0.025、0.037、0.000).与模型组相比,治疗组IL-4、IL-10水平明显升高(t=3.522、2.432,P=0.001、0.022),IFN-γ、IL-12水平及IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-10比值明显降低(t=2.940、4.700、5.416、8.178,P=0.007、0.000、0.000、0.000),均趋向于对照组水平.逐步回归分析结果显示,TSH与TGAb、TPOAb、IFN-γ、IL-12均呈正相关,与IL-4和IL-10呈负相关(r=0.872、0.868、0.731、0.706、-0.557、-0.236,均P＜0.001),其中TGAb、TPOAb和IL-12对TSH的影响最明显.与模型组比较,治疗组大鼠甲状腺组织中的NF-κB p65、MCP-1及CCR2水平均下降,差异具有统计学意义(t=2.432、2.267、5.143,P=0.000、0.031、0.000).结论:维生素D3可能是通过抑制NF-κB通路以下调Th1型细胞因子、上调Th2型细胞因子进而降低Th1/Th2比值,还可能是通过抑制MCP-1/CCR2信号轴,最终减轻EAT大鼠甲状腺炎,改善甲状腺功能,抑制甲状腺抗体生成,保护甲状腺.     

结直肠癌中辅酶Q10的功能及分子机制探讨

目的：探索辅酶Q₁₀(coenzyme Q₁₀,CoQ₁₀)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响及潜在分子机制。方法：使用CoQ₁₀分别处理SW480细胞和RKO细胞后,采用细胞计数和细胞划痕实验探究CoQ₁₀对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响;采用流式细胞术探究CoQ₁₀对结直肠癌SW480细胞周期和细胞凋亡的影响;采用RNA-seq测序分析CoQ₁₀对结直肠癌RKO细胞系基因表达谱的影响,将差异表达基因进行GO和KEGG通路分析,最后采用定量RT-PCR验证RNA-seq结果。结果：(1)CoQ₁₀对结直肠癌细胞系SW480的细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞迁移均无明显影响,对结直肠癌细胞系RKO的细胞增殖也无明显影响,但可抑制RKO细胞迁移。(2)CoQ₁₀处理结直肠癌RKO细胞后的RNA-seq结果表明,差异表达基因明显富集于细胞黏附分子信号通路、细胞外基质受体信号通路和胆固醇信号通...     

自身免疫甲状腺疾病进展与25(OH) D水平相关性研究

目的 探讨自身免疫甲状腺疾病（AITD）与25（OH） D水平的相关性。方法 选取初诊Graves病（GD）42例,缓解期GD 38例,慢性淋巴细胞性甲状腺炎（HT）24例,健康对照组38例。检查血清25（OH） D、促甲状腺受体抗体（TR-Ab）、抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）、总甲状腺素（TT₄）、总三碘甲状腺原氨酸（TT₃）、游离甲状腺素（FT₄）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT₃）、促甲状腺素（TSH）水平。并对25（OH） D水平、甲状腺功能及甲状腺抗体进行相关性分析。结果 与对照组相比,初诊GD组、缓解GD组及HT组的血清25（OH） D均显著下降,差异有统计学意义（P<0.05）。GD组（初诊期、缓解期）血清25（OH） D与FT₃、FT₄、TT₃、TT₄ TSH TR-Ab水平无相关性。HT组25（OH） D与TPO-Ab、FT₃、FT₄、TT₃、TT₄之间无相关性（P>0.05）。结论 AITD患者血中25（OH） D水平的不足,显示其可能在甲状腺自身免疫反应的发生、发展中起重要作用。