地县二级医院与武汉三级医院临床分离细菌耐药性比较分析

目的探讨湖北省地县二级医院、武汉市三级医院临床分离细菌耐药率的差别。方法药物敏感性试验采用纸片扩散法,以WHONET5、SPSS软件进行结果分析。结果2003年自地县二级医院分离细菌655株,三级医院7020株。前十位病原菌除凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、克雷伯菌属、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肠球菌属、肠杆菌属外．二级医院还包括沙门菌属、变形杆菌属、志贺菌属,三级医院包括链球菌属、不动杆菌属、嗜血杆菌属。多重耐药性细菌流行率：地县二级医院苯唑西林耐药金黄色葡萄球菌5％(4/86),与三级医院(41％)之间差异极显著(P＜0．01);二级医院耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌为70％(109／156),与三级医院(73％)之间差异无显著性。抗菌药物耐药性二级医院低于三级医院,但一些常用药物(环丙沙星、红霉素、克林霉素、复方新诺明等)与三级医院接近。结论二级医院与三级医院临床分离细菌病原谱、抗菌药物耐药率存在差异。应加强耐药性监测工作,为临床合理应用抗菌药物奠定基础。     

药敏试验方法的局限性及改进的建议

以CLSI提出的两种细菌药敏试验方法(纸片扩散法和肉汤稀释法)和对"breakpoint"标准的拟定为例,基于菌群生长动力学和临床对抗菌药物选择的需要,分析现行药敏试验存在的问题,并就病原菌的生态学、breakpoint制定、药敏试验方法的规范和抗药性网络建设等方面提出建议。     

2009-2011年住院患者临床分离肠球菌耐药性分析

目的：分析2009-2011年我院临床分离肠球菌的耐药特点及流行分布,为合理治疗肠球菌感染提供依据。方法：收集我院住院及门诊患者连续分离的、不重复的肠球菌92株,以2010CLSI纸片扩散法为判断标准,对分离菌进行耐药性分析。结果：3年来从各种临床标本中共分离到粪肠球菌52株,屎肠球菌23株。标本主要来源于尿液（41%）和腹腔引流液（24%）。屎肠球菌对青霉素类、氟喹诺酮类、大环内酯类和高水平庆大霉素的耐药性均高于粪肠球菌;未检出耐万古霉素和利奈唑胺的肠球菌。结论：屎肠球菌的耐药性高于粪肠球菌,应加强对屎肠球菌的耐药监测,防止多重耐药菌的发生和传播。     

人淋巴因子激活的杀伤细胞抗生素肽的分离纯化

目的　分离纯化人淋巴因子激活的杀伤细胞 (lym phokine activated killer,L AK)内源性抗生素肽。方法　采用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞 ,并用 IL- 2和 PHA刺激培养。 5 %乙酸匀浆细胞获得其酸溶性提取物。应用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和反相高效液相色谱技术分离纯化多肽 ,Tricine- SDS-PAGE鉴定其分子量 ,并运用琼脂糖弥散法鉴定其抗菌活性。结果　从人 L AK细胞酸溶性提取物中纯化出多个多肽 ,其中 HL P- 2 b、HL P- 3a完全纯化 ,分子量分别为 7.9× 10 3u和 4× 10 3u。HL P- 2 a、HL P- 2 c、HL P- 3b和 HL P- 3c基本纯化 ,主带分子量分别为 7.2× 10 3u、10 .4× 10 3u、6 .4× 10 3u、6 .4× 10 3u。 HL P- 3a具有抗金黄色葡萄球菌活性 ,HL P- 2 a、HL P- 2 b、HL P- 2 c、HL P- 3b、HL P- 3c具有抗金黄色葡萄球菌活性和抗白色念珠菌活性。结论　人 L AK细胞含多种内源性抗生素肽分子     

急性白血病患者合并感染病原菌分布及耐药性分析

目的 分析急性白血病患者合并感染的病原菌分布及耐药性,为临床防治感染提供依据.方法 菌株分离与鉴定按照〈全国临床检验操作规程〉进行细菌分离培养,药敏试验按照CLSI规定的判断标准进行判定.结果 215株病原菌中,革兰阴性杆菌占57.67%,革兰阳性球菌占28.37%,真菌占13.95%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物敏感,其次对阿米卡星和头孢他啶敏感,铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦耐药率最低,为12.5%,金黄色葡萄球菌对糖肽类抗菌药物敏感,而对青霉素类药物耐药.结论 急性白血病患者是感染的易感人群,以革兰阴性杆菌感染为主,对常用抗菌药物耐药性增加,积极防治感染,有助于降低感染相关死亡率.     

Antimicrobial secondary metabolites from marine gastropod egg capsules and egg masses

Marine organisms have attracted special attention in the last three decades for their ability to produce interesting pharmacological active compounds. Even though all marine organisms have the potential to produce antimicrobial secondary metabolites, the gastropod has the vital sources of secondary metabolites particularly their egg capsule which has the promising antimicrobial secondary metabolites. In the present review, we intend to focus on marine secondary metabolites from marine gastropod egg capsule. The following compounds i.e. Kabiramid C, Aplysianin E, Aplysianin A, Thisaplysianin E and Tyrian purple have been documented in egg capsule of various gastropod and most of the antimicrobial secondary metabolites have not been isolated from the egg capsule because of the odious, and complex chemical structure. Stability of the compounds is unknown.     

我院急诊静脉用抗菌药物应用分析

目的：了解我院急诊静脉用抗菌药物的应用情况，以促进临床合理用药，在提高疗效的同时减少抗菌药物使用的不良后果。方法：采用回顾性分析方法，选取2007年急诊输液处方1000张，对抗菌药物的种类、用法、用量等进行统计分析。结果：头孢类抗生素应用量最大，其次为克林霉素。其中不合理使用抗菌药物处方有175张，占使用抗菌药物的17．5％。结论：用药情况基本合理，但仍需进一步提高用药水平，尤其是静脉抗菌药物在临床上的合理应用。     

人胚胎皮层神经前体细胞的分离培养及鉴定

目的 从20周人胚皮层中分离神经前体细胞并鉴定其增殖及分化能力。方法 应用包含碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)和表皮细胞生长因子（EGF）的无血清限制培养基从20周自然流产人胚胎皮层组织中分离神经前体细胞,通过神经球形成法使其不断增殖,利用BrdU检测细胞的增殖能力,去除生长因子后诱导神经前体细胞分化。利用流式细胞仪检测神经球内细胞的增殖细胞周期。结果 人胚胎皮层存在神经前体细胞,这些细胞于EGF及bFGF作用下可不断增殖形成神经球,并能自我更新和结合BrdU,于生长因子去除后能够分化成熟的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。反复传代后这些细胞可保持其增殖及分化能力。细胞周期结果显示神经球内细胞增殖较为活跃。结论 从人胚胎中分离的细胞能于体外自我更新和分化为成熟的细胞,证实为神经前体细胞。     

肿瘤科住院病人临床感染病原菌分布和耐药性分析

目的分析肿瘤科住院病人临床感染病原菌分布及其耐药状况,以指导临床合理用药。方法收集2007年9月至2008年9月我院肿瘤科住院病人有关的病原学资料,进行统计分析。结果606例病人共检出196株细菌。其中真菌101株（51．5％）,革兰阴性杆菌70株（35．7％）,革兰阳性球菌25株（12．8％）。真菌对氟康唑耐药率相对较高,对其余4种抗真菌药物比较敏感。肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌是临床最常见的革兰阴性杆菌。三种常见病原菌对亚胺培南敏感性较高,敏感率在95．2％-100％。常见的阳性球菌为金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、粪肠球菌对万古霉素、呋喃妥因、替考拉宁的敏感性均为100％。结论临床医生应该关注分离菌的变迁及敏感性的情况,合理使用抗生素。     

Physico-chemical analysis and antimicrobial potential of A pis dorsata,A pis mellifera and Z iziphus jujube honey samples from Pakistan

ObjectiveTo evaluate physico-chemical properties and antimicrobial potential of indigenous honey samples against different reference strains including Escherichia coli ATCC 8739, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Pseudomonas aeroginosa ATCC 9027, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Salmonella typhi ATCC 14028, Klebsiella pneumonia ATCC 13883, Aspergillus niger ATCC 16404, Rhizopus oligosporus PCSIR1, Candida albicans ATCC 14053 and Candida utilis ATCC 9950.MethodsBy using standard methods samples were evaluated for their antimicrobial properties including additive effect of starch and non-peroxidase activity, antioxidative properties (phenol contents, flavonoid contents, 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging activity). Prior to this evaluation, complete physico-chemical properties including pH, color, ash contents, protein contents, moisture contents, hydroxymethyl furfural contents, total sugar contents, reducing sugar and non-reducing sugar contents were analyzed.ResultsRelatively higher ash contents were found in the Siddar honey i.e. (0.590 0±0.033 6)% and small honey showed relatively higher protein contents i.e. (777.598±9.880) mg/kg. The moisture contents of tested honey samples ranged between 13.8%-16.6%, total sugar contents from 61.672%-72.420% and non-reducing sugar contents from 1.95%-3.93%. Presences of phenolic contents indicate higher antioxidant potential of these honey samples. All bacteria showed clear inhibition zones in response to tested honey samples whereas fungi and yeast showed inhibition at higher concentrations of these honey samples. For Escherichia coli, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Pseudomonas aeroginosa and Aspergillus niger, overall the small honey showed the higher activity than other honey samples.ConclusionPhysico-chemical analysis of honey samples confirmed good quality of honey according to the standards set by European Union Commission and Codex Alimentarius Commission. Evaluation of these honey samples confirms antimicrobial potential of particular types of honeys indigenous to Pakistan.     

某院2010年革兰阴性杆菌分布及耐药性监测

目的了解我院2010年临床分离革兰阴性杆菌分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药提供参考依据。方法用常规方法分离鉴定细菌,K-B法进行药敏试验,数据分析采用WHONET5.4软件。结果 1 996株革兰阴性杆菌主要以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌为主,分别占34.3%、15.2%、13.3%、13.1%和6.0%。肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌中产ESBLs株检出率分别为64.6%、50.8%、33.3%和17.1%。药敏实验结果显示肠杆菌科细菌中不同菌种对碳青霉烯类抗菌药仍呈敏感,耐药率〈5%,其次为2种β-内酰胺酶抑制剂复方,耐药率大多低于20%。铜绿假单胞菌对阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟和头孢他啶的耐药率较低,均不到30%。鲍曼不动杆菌仅对米诺环素和头孢哌酮/舒巴坦较为敏感,分别为18%和27%。结论我院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药仍较敏感,非发酵菌对多种抗菌药高度耐药。     

小鼠小肠抗生素肽的初步分离

目的 初步分离小鼠小肠抗生素肽.方法 将12只健康ICK小鼠剖腹切取从屈氏韧带到回盲部的小肠,以10%乙酸溶液冲洗肠腔收集灌洗液,并以30%乙酸溶液制备小肠组织匀浆,反复离心,聚乙二醇浓缩后透析,冰冻干燥,进行AU-PAGE、Tricine-SDS-PAGE、考马斯亮蓝R-250染色或银染显示多肽条带,然后进行凝胶成像分析和杀菌试验.结果 小鼠小肠组织匀浆和灌洗液中均含有可杀灭细菌、真菌的抗生素多肤,其中组织匀浆中所含的此类多肽较多;小鼠小肠抗生素肽的杀菌作用具有剂量依赖关系,且对不同细菌、真菌的杀灭作用也不同;小鼠小肠抗生素肽的分子量主要集中于3.0kD～14.3kD和29.0kD.结论 小鼠小肠含有多种抗生素肽,具有广谱的杀灭微生物的作用.     

颌面部放疗致口干5例患者唇腺干细胞的分离培养与多向分化潜能鉴定

目的 分离培养颌面部放疗患者唇腺间充质干细胞(MSCs),并对其增殖特征和多向分化潜能进行研究。 方法 收集颌面部放疗致口干患者5例,无菌条件下切取唇腺组织;用组织块贴壁法分离培养唇腺干细胞;CCK-8试剂盒检测细胞增殖曲线;流式细胞仪检测干细胞表面标志物;干细胞成骨向诱导分化后,以增殖培养基组为对照组,以成骨培养基组为成骨诱导组,用碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红染色检测成骨向分化潜能,real time-PCR检测成骨相关基因的mRNA表达;干细胞成脂向分化后以增殖培养基组为对照组,以成脂培养基组为成脂诱导组,用油红-O染色观察成脂向分化,real time-PCR检测成脂向相关基因的mRNA表达。 结果 分离获得了颌面部放疗致口干患者的原代唇腺干细胞,其增殖曲线符合干细胞“S型”增殖曲线的特征;干细胞表面标记物CD29、 CD44、 CD73、CD90 和CD105呈阳性表达,而CD34、CD45 和CD106均呈阴性表达,与对照组标记物表达无明显差异;成骨诱导7 d后,ALP染色法和茜素红染色法结果显示成骨诱导组唇腺干细胞中ALP和矿化结节均成强阳性表达,real time-PCR检测结果显示成骨诱导组与对照组成骨相关基因表达的差异有统计学意义;成脂诱导21 d后,油红-O染色结果显示成骨诱导组干细胞内可见大小不等的脂滴,real time-PCR检测成脂向相关基因表达显示成脂诱导组与对照组差异有统计学意义。 结论 颌面部放疗致口干患者唇腺中可分离获得MSCs,获得的MSCs具有增殖和多向分化潜能,可利用该唇腺干细胞作为唾液腺功能再建的种子细胞,为唾液腺组织工程提供新的思路。     

碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌临床分布及耐药特征分析

目的 分析综合性三甲医院住院患者临床标本分离碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(CRE)的临床分布及耐药特征,为临床抗感染治疗及院感防控提供参考.方法 收集2015年7月至2017年6月安徽医科大学第二附属医院住院患者临床标本分离CRE药敏数据及相关临床资料,应用WHONET 5.6软件统计分析CRE临床分布及耐药率,药敏折点参照CLSI 2016版标准.结果 2015年7月至2017年6月期间,自住院患者临床标本共分离CRE 82株,由肺炎克雷伯菌(42株,51.22%)、大肠埃希菌(23株,28.05%)、阴沟肠杆菌(9株,10.98%)、黏质沙雷菌(5株,6.10%)、弗劳地枸橼酸杆菌(2株,2.44%)及产酸克雷伯菌(1株, 1.22%)构成.临床标本以痰标本(29株,35.37%),分泌物/脓液标本(20株,24.39%)及尿液标本(14株,17.07%)为主.CRE分布广泛,检出的临床科室包括ICU(14株,17.07%)、呼吸内科(10株,12.20%)等.CRE菌株对临床常用抗菌药物耐药性较高,仅对阿米卡星较为敏感,耐药率为23.17%.结论 CRE菌株临床分布广泛且对常用抗菌药物耐药率高,临床科室应积极送检病原学检验并根据药敏结果合理选择抗菌药物.医院感控部门应联合微生物实验加强对CRE菌株的监测与防控.     

甜菜碱体外抑菌活性的研究

目的 研究甜菜碱对临床病原菌的体外抑菌活性.方法 采用试管二倍稀释法进行体外抑菌试验,测定甜菜碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度.结果 甜菜碱对4种病原菌标准菌株的最小抑菌浓度（MIC）为大肠杆菌的MIC 6.25 mg/ml、铜绿假单胞菌的MIC 3.125 mg/ml、金黄色葡萄球菌的MIC 6.25 mg/ml、白色念珠菌的MIC 25 mg/ml.结论 甜菜碱对4种病原菌的标准菌株都有明显的抑菌作用,尤其对铜绿假单胞菌的MIC值最低.     

2008～2012年无菌部位肠杆菌科细菌的分离情况及耐药性分析

目的了解本院无菌部位标本常见肠杆菌科细菌的分布和耐药情况。方法回顾性分析2008～2012年我院临床无菌部位标本连续分离获得的常见肠杆菌科细菌对临床上常用抗菌药物的体外药敏试验结果,并用WHONET-5软件进行数据分析。结果共分离到1305株非重复肠杆菌科细菌,前5位病原菌分别为大肠埃希菌（586株,占44．9％）、肺炎克雷伯菌（413株,占31．6％）、阴沟肠杆菌（92株,占7．0％）、奇异变形杆菌（80株,占6．1％）和产气肠杆菌（34株,占2．6％）。体外药敏试验结果如下：肠杆菌科细菌对替加环素（0～9．1％）、阿米卡星（12．9％）、美洛培南（14．1％）、亚胺培南（16．8％）、厄他培南（17．5％）、阿莫西林／克拉维酸（20．5％）、哌拉西林／他唑巴坦（20．8％）、头孢哌酮／舒巴坦（21．4％）和头孢两丁（29．7％）的总耐药率较低,而其他药物基本大于40％。结论肠杆菌科细菌耐药问题严峻,临床上应加强监测其耐药变化趋势以指导合理用药。     

2014-2018年ICU真菌血症病原菌分布及抗菌药物敏感性分析

目的:研究我院ICU科室真菌血症病原菌的分布特点和药敏结果,为真菌血症的临床诊断和抗菌药物治疗提供依据。方法:对我院2014-2018年,5年间ICU科室血培养分离酵母样真菌且符合真菌血症诊断标准的临床资料进行回顾性分析,应用WHONET 5.6软件对菌株分布和药敏结果进行统计。结果:ICU确诊真菌血症患者共129例,致病菌主要为近平滑念珠菌（59株,45.7%）、白色念珠菌（22株,17.1%）、光滑念珠菌（14株,10.9%）和热带念珠菌（12株,9.3%）。真菌血症以男性患者（72.1%）居多,好发于65岁及以上老年（64.3%）;重症医学科（55.8%）和老年病房ICU（20.2%）分离率较高。所有菌株对5-氟胞嘧啶和两性霉素B敏感性较高,对唑类药物出现不同程度耐药。结论:我院真菌血流感染以近平滑念珠菌为多见。光滑念珠菌、热带念珠菌、红酵母属对唑类药物的敏感性相对较低。推广质谱、分子生物学等快速鉴定技术,了解真菌血症病原菌对抗菌药物的敏感性,对ICU真菌血流感染患者的早期诊治和预后有着重要意义。     

六种粘细菌095B06次生代谢产物的分离、鉴定及初步生物学活性研究

目的:研究粘细菌的活性次生代谢产物的分离、鉴定及生物学活性.方法:利用稻瘟霉模型筛选活性菌株,对活性菌株Myxococcus xanthus 095B06发酵液的甲醇提取物采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等手段进行分离纯化化学成分,通过1HNMR、13CNMR和ESI-MS对化合物进行结构鉴定,利用纸片扩散法和四甲基偶氮唑盐比色法对单体化合物进行生物活性评价.结果和结论:从粘细菌095B06发酵液中分离鉴定了4个大环内酯类化合物、1个甾醇类化合物及1个生物碱类化合物,它们分别为Avermectin A1a(1)、Avermectin A2a(2)、Avermectin B1a(3)、Avermectin B2a(4)、麦角甾-7,22-双烯-3,5,6-三醇(赛勒维甾醇)(5)和4-喹啉羧酸(6).化合物1～5为首次从粘细菌中分离得到,且化合物2和4对肿瘤细胞SMMC-7721具有较强的抑制作用,其IC50均为5 μg/ml.     

我院肺炎克雷伯杆菌耐药性的调查与分析

目的：了解和掌握2007年1月～2009年9月我院肺炎克雷伯杆菌的耐药性变化的趋势,加以分析,为临床治疗提供可靠依据。方法：采用美国德灵公司的WalkAway40系统及VITEK2系统进行细菌鉴定,用K-B法及VITEK2进行药物敏感性试验,用WHONET5.3软件分析细菌的耐药性。结果：近3年的时间里肺炎克雷伯杆菌对9种常用抗菌药物的耐药率存在普遍的增高趋势,对其中喹诺酮类抗菌药物的耐药率变化显著。结论：及时有效的细菌鉴定及药物敏感性实验,尽早发现肺炎克雷伯杆菌的院内感染情况,能够为临床提供重要的实验依据。     

大肠埃希菌感染的临床分布与耐药性分析

目的调查医院大肠埃希菌感染的临床分布及耐药,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法对286株临床分离的大肠埃希菌的药物敏感试验结果进行回顾性分析。结果大肠埃希菌感染的部位主要见于泌尿道、呼吸道、伤口、引流液、血液等;大肠埃希菌耐药率低的抗菌素是亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星,耐药率≤14.3%,对喹诺酮类及头孢菌素类耐药率较高。结论治疗大肠埃希菌感染时,需根据药敏结果及患者病情选用碳青酶烯类、氨基糖苷类、β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂等。