幽门螺杆菌vacA基因分型和cagA基因检测

〔目的〕建立检测幽门螺杆菌（Ｈｐ）的ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因及其基因型的方法,观察ｖａｃＡ基因型与ｃａｇＡ状态的相关性。〔方法〕应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１７２份Ｈｐ阳性标本进行Ｈｐ ａｃｇＡ和ｖａｃＡ基因检测及其基因型分析。〔结果〕１７２份Ｈｐ阳性标本中,ｖａｃＡ阳性数１７２（１００％）,ｃａｇＡ阳性数９３（５４．０７％）;４９例萎缩性胃炎患者中,ｃａｇＡ阳性菌株感染４７例（９５．９２％）,６４例浅表性胃炎患者中,ｖａｃＡ阳性菌株感染２８例（４３．７５％）,两者有显著差异（ｐ〈０．０５）;ｖａｃＡ中间区域型ｍ１和ｍ２分别为８０和９２例,两者无明显差异（ｐ〉０．０５）,信号序列型ｓｌａ、ｓｌｂ、ｓ２分别为８２、６８、２２例,ｓｌａ与ｓｌｂ无明显差异（Ｐ〉０．０５）,ｓｌａ、ｓｌｂ、ｓｌ（ｓｌａ＋ｓｌｂ）均显著多     

浙江人群幽门螺杆菌cagA/vacA优势基因型和不同基因型混合感染的调查

目的　了解消化性溃疡和慢性胃炎患者感染的幽门螺杆菌 (Hp)cagA vacA优势基因型及不同基因型Hp感染、混合感染与疾病的关系。 方法　选择胃窦、胃体双份活检标本均培养出Hp的 42例慢性胃炎 (CG)和 3 6例消化性溃疡 (PU )患者作为研究对象 ,采用聚合酶链反应 (PCR)检测156份Hp分离株的cagA基因、vacA基因的信号区 (s)和中间区 (m )亚型 ,分析Hp基因型及多株Hp混合感染在CG和PU中的分布。结果　胃窦标本cagA基因的检测中 78例患者中有 75例 (96.2 % )为cagA阳性 ,相应的胃体标本中 ,76例患者 (97.4% )为cagA阳性 ,有 1例 (1.3 % )患者胃窦、胃体检出cagA状态不一的Hp混合菌株。在胃窦标本的vacA基因分型中 ,s1a m1、s1a m2、s1a m1b、s1a m1b m2 4种vacA基因型在 78例患者中所占比例分别为 6.4% (5 78)、55.1% (43 78)、2 6.9% (2 1 78)和 1.3 % (1 78) ,多株混合感染为 3 .8% (3 78) ;而相应的胃体标本中 ,前述四种vacA基因型所占比例依次为 6.4% (5 78)、53 .8% (42 78)、2 5.6% (2 0 78)和 3 .8% (3 78) ,多株混合感染为 5.1% (4 78)。cagA+ s1a m2和cagA+ s1a m1b在胃窦标本中占 51.3 % (40 78)和 2 6.9% (2 1 78) ,而在相应的胃体标本中占 52 .6% (41 78)和 2 5.6% (2 0 78)。少量胃窦、胃体     

淮南地区矿工幽门螺杆菌vacA、cagA基因分布特征

[目的]研究淮南地区煤矿工人幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)vacA、cagA基因分布特征。[方法]选择经胃镜及病理组织检查诊断证实有相关胃、十二指肠疾病的349名矿工为研究对象,取其胃窦部活检黏膜作H.pylori的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出H.pylori菌株的vacA、cagA基因,并进行分型。[结果]349份样本中共分离培养出244株H.pylori菌株,其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠溃疡幽门螺杆菌培养阳性率分别为61.61%(69/112)、61.54%(48/78)、75%(72/96)及87.30%(55/63);基因测定结果显示,244株H.pylori菌株临床分离株中,84.84%(207/244)含vacA基因,73.36%(179/244)含cagA基因;其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠溃疡cagA、vacA基因检出率分别为66.67%(46/69)、50.72%(35/69)、85.42%(41/48)和70.83%(34/48)与93.06%(67/72)、84.72%(61/72)、96.36%(53/55)和89.09%(49/55),4种疾病间差异均具显著性(P<0.01)。进一步分型发现,慢性胃炎、萎缩性胃炎,胃溃疡及十二指肠溃疡患者中vacA 、cagA 分别为44.93%(31/69)、66.67%(32/48)、79.17%(57/72)、87.27%(48/55),差异具显著性(χ2=30.80,P<0.01)。vacA 、cagA 菌株主要多见于损害较严重的胃黏膜表面,如萎缩性炎症、炎性坏死等,23例腺体不典型增生的胃黏膜表面均为vacA 、cagA 菌株。[结论]淮南地区矿工H.pylori感染多为vacA 、cagA 菌株,vacA 、cagA H.pylori菌株为高毒力菌株,且与较严重的胃黏膜病理改变有关,可能是导致矿工慢性胃炎、消化性溃疡的重要因素,临床应充分重视H.pylori菌株毒力因子的监测。     

幽门螺杆菌中国菌株致病相关基因cagA、iceA、vacA及HP0519分布分析

目的分析中国不同人群及不同胃部疾病病例来源的幽门螺杆菌致病相关基因cagA、iceA、vacA及HP0519的分布.方法采用特异引物聚合酶链式反应（PCR）方法分析150株幽门螺杆菌上述基因的多态性分布特点,并对其分布作初步统计分析.结果93%（139/150）中国菌株cagA基因3′端重复序列的PCR产物具有东方菌株特征.75%（113/150）菌株iceA基因为iceA1,19%（29/150）为iceA2,不同地区间iceA基因的分布差异无统计学意义.云南菌株iceA1、iceA2的分布与菌株分离个体的种族特点及临床疾病类型无显著关系.96%中国菌株（144/150）vacA基因s区的等位基因为s1;m区等位基因m2、m1b和m1b-m2的比例分别为57%（85/150）、27%（41/150）和11%（16/150）,仅2株福建菌株为m1a.不同地区间vacA s1、m2、m1b分布的差异无统计学意义.云南菌株m1b-m2的分布高于福建和北京菌株.云南菌株vacA s区等位基因的多样性与分离个体的种族及临床疾病类型无显著关系.vacA m区等位基因的多样性与分离个体的临床疾病类型无显著关系,但不同民族间m2的分布有显著差异,白族人群m2的分布显著少于汉族和纳西族.93%（140/150）的中国菌株HP0519基因具有24 bp和15 bp DNA插入和缺失的多态性特点.不同地区间HP0519基因的多态性无显著不同.云南菌株HP0519的多态性与菌株分离个体的临床疾病类型无显著关系,但来源不同民族菌株的HP0519基因存在差异.结论幽门螺杆菌中国菌株cagA 3′端JF/TR特异引物的扩增结果具有东亚菌株特点.中国菌株vacA基因多为s1,其分布与菌株分离个体的临床疾病类型无关.中国菌株vacA基因m区的分布具有多样性.中国菌株HP0519基因具有24 bp和15 bp插入和缺失的多态性特点.     

幽门螺杆菌耐药性与细胞毒相关基因A分型关系

目的 探讨对克拉霉素耐药的幽门螺杆菌(Hp)携带细胞毒相关基因A(CagA)状况及其与基因分型的关系.方法收集右江民族医学院附属医院确诊Hp感染患者的胃窦部黏膜标本482份,进行Hp分离培养和鉴定;采用PCR方法扩增CagA,采用E实验(E-test)进行克拉霉素耐药试验,采用细菌基因组重复性元件序列PCR技术(REP-PCR)方法对携带CagA+的克拉霉素耐药株进行基因分型,运用NTsys_2软件进行聚类分析.结果分离培养出374株Hp,其中CagA阳性87株,阳性率23.3％;随即选取携带Cagk基因的克拉霉素耐药的26株Hp,根据78％的相似性分析结果显示,可分成6类基因型,分别是Group I、GroupⅡ、GroupⅢ、GroupⅢ、GroupⅣ、Group V,GroupⅥ,每类分别有3、3、8、4、6、2株Hp.结论携带CagA基因的克拉霉素耐药的Hp可分成6类基因型,Hp的克拉霉素耐药性基因分型与CagA基因无密切关联.     

荧光定量PCR快速检测幽门螺杆菌的研究

目的:建立一种快速检测幽门螺杆菌的荧光定量PCR方法。方法:根据每个幽门螺杆菌有一个拷贝的尿素酶A基因,设计并优化SYBGReen荧光定量PCR条件,评价荧光定量PCR的灵敏度与重复性;收集胃粘膜标本65份,并对其同时进行培养和荧光定量PCR检测。结果:该方法连续8个浓度模板良好线性关系(相关系数,0.997),灵敏度达1拷贝/微升;随机选取两个浓度的样本做重复试验,结果显示具有较高的重复性。65份标本中采用荧光定量PCR方法检出幽门螺杆菌42例(64.62%);细菌培养方法检出31例HP(47.69%)。结论:荧光定量PCR技术能够快速、准确检测幽门螺杆菌,适合于临床检测及科学研究。     

西藏拉萨市1351例患者幽门螺杆菌感染情况分析

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)是人类上消化道疾病的重要致病菌[1-3].HP的感染与社会经济状况、卫生习惯、饮食习惯有关,且有家庭聚集性,不同国家、地区、人群感染率有明显差异.为了解拉萨市居民HP的感染情况及与相关疾病的关系,对西藏军区总医院1351例随机就诊患者进行了调查分析.     

幽门螺杆菌cagA、oipA、iceA1基因的检测及其意义

〔目的〕检测分离自胃炎、胃溃疡患者的幽门螺杆菌 (Hp)cagA、oipA、iceA1基因 ,了解这些基因与消化性疾病的关系。〔方法〕取 163份临床胃活检标本 ,用布氏平板分离培养Hp ,分离培养出来的细菌 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增cagA、oipA、iceA1基因片段 ,用卡方检验进行统计学分析。〔结果〕163份标本中检出Hp 5 8株 ,检出率为 3 5 .6%。ca gA基因的阳性率为 75 .9%(4 4 5 8) ,其中胃炎 66.7%(2 8 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;oipA基因的阳性率为 46.6%(2 7 5 8) ,其中胃炎 2 6.2 %(11 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;iceA1基因的阳性率为 3 1.0 %(18 5 8) ,其中胃炎 2 1.4%(9 42 ) ,胃溃疡 3 3 .3 %(9 16)。卡方检验分析表明胃溃疡患者HpcagA、oipA、iceA1阳性率均显著高于胃炎患者。〔结论〕HpcagA、oipA、iceA1毒力基因在胃溃疡患者的检出显著高于胃炎患者。     

胃溃疡及胃炎患者幽门螺杆菌耐药性分析

目的 了解胃溃疡及胃炎患者幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)对甲硝唑等抗生素的耐药情况.方法 采集右江民族医学院附属医院近3年确诊为Hp感染患者的胃窦部黏膜样本进行Hp分离培养和鉴定,经鉴定后选择374株Hp菌株,采用纸片扩散法测定其对甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素等抗生素的敏感性.结果 Hp对甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素的耐药率从2006年的68.6%,10.2%,15.3%分别上升到2008年的91.7%,21.2%,28.8%;部分Hp同时对多种抗生素耐药,同时对甲硝唑、克拉霉素和阿莫西林耐药的有14株,耐药率为3.74%.结论 胃溃疡及胃炎患者Hp对甲硝唑、阿莫西林、克拉霉素均有一定耐药性,有必要使用其他抗生素替代.     

唐山煤矿工人幽门螺杆菌感染的影响因素调查

目的 了解煤矿工人幽门螺杆菌(Hp)感染情况及其影响因素。方法 采用多阶段分层随机整群抽样方法选取425名煤矿工人,进行问卷调查。同时行胃镜检查,采取胃黏膜标本用于菌培养和病理诊断;Hp感染的检测方法采用细菌培养法和ELISA法;全部调查资料采用X~2分析和分层分析。结果 煤矿工人Hp总的感染率为69.9％,井下工人的Hp感染率比井上工人的高,差异有显著性(P=0.004);大兴矿、鲍店矿、唐山矿工人Hp的感染率差别无显著性(P>0.05)。影响煤矿工人Hp感染的主要因素有年龄、未成年时月人均经济收入、未成年时住房形式、现家庭人口数等社会经济因素,个人嗜好中的饮酒状况。影响井下工人Hp感染还有家庭进餐形式。结论 井下工人Hp感染率比井上工人的高;影响因素有社会经济因素、个人嗜好、家庭进餐形式。     

儿童幽门螺杆菌感染的检测

目的利用蛋白芯片技术检测患者血清中幽门螺杆菌(Hp)毒素相关蛋白(CagA)、尿素酶(UreC)及热休克蛋白(Hsp60)抗体,并与胃黏膜标本快速尿素酶试验(RUT)和改良的Giemsa染色技术进行客观分析评价。方法对42例因上消化道不适就诊的儿童患者留取血清,深低温冻存同时作蛋白芯片检测和胃黏膜标本快速尿素酶试验(RUT)和改良的Giemsa染色检测。结果经χ2检验,蛋白芯片检测CagA,UreC,Hsp60抗体与胃黏膜活检组织快速尿素酶试验和Giemsa染色联合检测的结果对比P>0.05;儿童CagA 型菌感染仅占21.4%。结论蛋白芯片技术与胃黏膜活检标本联合检测相比,检测结果差异无显著性;蛋白芯片技术能对Hp菌株感染分型及现症感染鉴定,具有快速,准确,检测指标多等优点,是一种很有发展前途的检测技术,值得推广应用。     

浙江省麻风休养员幽门螺杆菌感染的流行病学调查

浙江省于1995年通过卫生部考核验收达到基本消灭麻风病指标,但目前还有近370名治愈残疾者寄养在省内各地的麻风院或村中(即麻风休养员).浙江省皮肤病医院麻风病区共有休养员120余人,约占全省休养员的1/3.麻风休养员作为一个特殊的群体,大部分都反复存在着不同程度的上消化道不适症状,现有资料证实幽门螺杆菌(Hp)感染是上消化道疾病的重要原因之一,为了解该群体Hp现时感染的情况及相关流行特点,于2007年8-12月开展此项调查.     

幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体构建及鉴定

目的 构建幽门螺杆菌热休克蛋白GroEL基因的真核表达载体pcDNA3.0-GroEL,为幽门螺杆菌的基因疫苗研制提供参考依据.方法 提取幽门螺杆菌基因组DNA,PCR扩增GroEL基因,克隆至pMD19-T载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将GroEL基因片段用限制性内切酶切下,克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA3.0-GroEL重组质粒;采用PCR、酶切对重组质粒pcDNA3.0-GroEL进行鉴定.结果 扩增出幽门螺杆菌GroEL基因片段约1 640 bp;pcDNA3.0-GroEL重组质粒经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切,产生1个与GroEL基因PCR产物大小一致的小片段和1个不同于pcDNA3.0-GroEL重组质粒的大片段,表明GroEL基因已成功插入pcDNA3.0质粒中.结论 成功构建幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体pcDNA3.0-GroEL.     

幽门螺杆菌分离株iceA基因克隆及序列分析

目的 克隆幽门螺杆菌中国郑州市慢性萎缩性胃炎患者分离株MEL-Hp27iceA基因,测序后对其进行序列分析。方法 根据iceA基因上下游基因序列设计引物,PCR扩增iceA基因,并将其连接至pMD19-T载体,测序后采用相关数据库和生物信息学软件对基因序列进行分析。结果 成功克隆幽门螺杆菌Hp27菌株iceA基因序列,扩增产物大小约为790 bp;重组质粒pMD19-T-iceA单酶切产生3 820 bp片段,双酶切产生3 000和820 bp的2个片段;Hp27iceA基因与大多数美国来源菌株同源性>85%,与日本、印度等地区来源菌株同源性<70%。序列分析结果表明,所克隆到的基因为iceA2亚型,与美国株Alaska strain 219、Alaska strain 213关系最近,同源性分别为87%和95%,与芬兰株Finland strain 9496等菌株存在聚类关系,同源性88%～93%,与CR9等其他菌株距离较远。结论 成功克隆幽门螺杆菌Hp27菌株iceA基因序列;不同地区幽门螺杆菌分离株的iceA基因间存在着一定差异。     

健康体检人群幽门螺杆菌感染与白蛋白尿的相关性CSCD

Objective To investigate the correlation between Helicobacter pylori (H.pylori) infection and albuminuria inphysical examination population. Methods It was a cross‑sectional study. All the adults who received physical examination and underwent 13C‑urea breath test at the Physical Examination Center in Tongji Hospital in 2021 were selected as the study subjects. General data (such as demographic information and past medical history) were documented. The physical measurement and blood biochemical indicators were checked too. Multivariate analysis was used to analyze the relationship between H. pylori infection and albuminuria. Results A total of 30 311 subjects were included in this analysis. There were 17 123 males and 13 188 females with an age of (44.51±12.17) years. The positive rate of H. pylori infection was 27.3%. The incidence of albuminuria in subjects with H. pylori infection was 6.7%, and it was 6.1% in the subjects without H. pylori infection (P=0.031). After adjusting for the confounding factors such as gender, age, diabetes and hypertension, H. pylori infection was independently associated with the risk of albuminuria (odds ratio (OR)=1.133, 95%CI: 1.018-1.261, P=0.022). Conclusion H. pylori infection is positively correlated with the occurrence of albuminuria in the physical examination population. © 2021 Chinese Medical Journals Publishing House Co.Ltd.     

不同职业和地区人群幽门螺杆菌感染的调查情况

幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）是上消化道疾病常见的致病因素,与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤及胃癌有密切关联。Hp感染已经成为一个重要的公共卫生问题,也是近年来国内外消化病的热点研究内容。Hp感染多与职业因素、地区环境、生活饮食习惯、经济条件等方面有关,在不同国家、地区、人群中感染率存在明显差异。总结Hp感染的职业、地区分布特点,加强健康宣教,有针对性地开展Hp检测,并对Hp感染者进行合理的治疗干预,可以减少消化系统疾病的发病率,降低医疗成本,减少医疗费用,促进全民健康,对个人、家庭、社会都是很有意义的。作者就近年来不同职业、不同地区Hp的感染情况作一综述。     

云南云县彝族、汉族地区幽门螺杆菌感染的流行病学调查

在云南云县彝族、汉族地区用整群抽样方法对1184名自然人群进行前瞻性幽门螺杆菌（Hp）感染的血清学检测，并对其中325名同时检测抗-HAVIgG。结果发现：Hp总感染率为51．10％；彝、汉族感染率无差异。Hp感染随年龄增长而增加；饮用河水和生水明显高于饮用井水、自来水和开水；饲养家畜（禽）者明显高于未饲养者；吸毒者明显高于非吸毒者。Hp感染与HAV感染呈平行关系。多因素logistic最后筛选出饮用水源、饮水习惯、养鸡、养猪、养狗、吸毒和大蒜为Hp感染的7个重要流行因素。提示饮水是Hp感染的重要传播媒介；似支持Hp感染的动物来源理论和粪-口传播的观点；经常食用大蒜可起到长期人群防治Hp感染的作用。     

胃镜检查者对幽门螺杆菌感染知晓程度的调查

目的对门诊行胃镜检查者进行幽门螺杆菌(HP)感染相关知识认知度调查,为HP感染者及未感染者制定相关的健康维护指导。方法随机选择2005年10月在门诊消化内镜中心行胃镜检查者286例,进行关于HP感染相关知识的问卷调查。结果286例选择胃镜检查的患者中以诊断为目的177例(61.9%),上腹部不适持续时间>12个月的157例(54.9%);被调查者对调查表中设定的HP感染7项基本知识的回答有5项不了解的占60.0%;46.7%的患者希望获得疾病知识并得到健康指导,另外,调查显示疾病知识的认知率与文化程度无关。结论针对专科患者进行疾病知识认知程度的调查,可快捷地筛选出对相关疾病知识掌握处于盲区的患者及迫切需要提供健康指导者。     

104株幽门螺杆菌插入序列IS605、IS606的分布

目的 筛查中国5地区幽门螺杆菌（Hp）插入序列IS605、IS606的分布。方法 选取来自北京、福建、云南、沈阳、香港等地共104株Hp，用PCR及染色体打点杂交的方法筛查IS605、IS606的分布，并对其分布特点进行分析。结果 中国5地区Hp菌株IS605的阳性率为40%，IS606的阳性率为18%。云南菌株IS605的阳性率有高于其他地区的趋势，不同地区IS606的分布差异无显著性。不同临床诊断结果分离的菌株IS605、IS606的分布差异无显著性。IS605的两个开码读框ORFA、ORFB共存。结论 中国5地区Hp菌株广泛存在IS605、IS606，且IS605的分布可能与菌株分离个体的地理位置有关。     

幽门螺杆菌与白细胞介素-1基因交互作用

目的 探讨幽门螺杆菌（Hp）感染与白细胞介素-1基因家族中白细胞介索-1B（IL-1B）-31与IL-1B-511（IL-1B）位点单核苷酸多态性（SNP）、IL-1RN可变数目串连重复序列（VNTR）及二者交互作用与十二指肠溃疡病（DU）发病风险的关系。方法 用病例对照研究方法，调查94例对照和54例DU患者，ELISA方法检测患者IgG抗体，PCR扩增目的基因，电泳检测IL-1RN可变数目串连重复序列，限制性片段多态性分析（RFLP）检测IL-1B-31、IL-1B-511单核苷酸多态性。结果 Hp感染、IL-1B-511C／C型增加DU的患病危险，OR分别为8．26（95％CI=3．02～22．59），3．05（95％CI=1．23～7．57）。Hp感染和IL-1B-31T／T、IL-1B-511C／C、非Ⅰ型IL-1RN之间有交互作用存在，交互作用项OR分别为16．75（95％CI=3．64～77．04），41．42（95％CI=8．96～191，40），4．93（95％CI=1．35～17．99），交互作用系数（γ）分别为1．22，1．7，0．84。结论 IL-1B-31T／T、IL-1B-511C／C能增加Hp感染对十二指肠溃疡病患病的危险作用，而非Ⅰ型IL-1RN则减弱Hp的危险作用。这种交互作用的存在有助于解释Hp感染临床结局的复杂性。