宫颈组织中Th、树突状细胞及自然杀伤细胞的表达及与免疫功能的关系

目的 探讨正常宫颈、CIN、宫颈癌组织的局部免疫功能差异及HPV感染与宫颈局部免疫功能的关系.方法 采用免疫组化和图像分析技术,通过CD4、S-100、CD57抗体测定正常宫颈组织、CIN宫颈组织、宫颈癌组织中Th细胞、树突状细胞、NK细胞的形态、数量、分布及表达强度.结果 在癌前病变中,CD4+ Th细胞、S-100+ DC细胞和CD57+ NK细胞随着病变加重而逐渐增多(P<0.05),表达强度增大;而在发生癌变之后,宫颈局部的免疫细胞减少(P<0.05),表达强度下降.结论 人宫颈癌前病变组织局部的免疫功能比较活跃,而癌变的组织免疫功能降低.     

罗格列酮抑制糖基化-人白蛋白诱导的人单核细胞源树突状细胞的免疫成熟

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)激动剂罗格列酮(rosiglitazone)对糖基化终产物(AGEs)诱导的人单核细胞源树突状细胞(DC)的免疫成熟的影响.方法:采用免疫磁珠法分离人外周血CDl4 单核细胞,经含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF,100μg/L)和重组人白细胞介素4(IL-4,20μg/L)的RPMIl640培养5天,使其分化为未成熟DC.先经罗格列酮(50μmol/L)干预24h后,加入糖基化.人血清白蛋白(AGE-HSA,200μg/ml)再干预48h,采用流式细胞术检测树突状细胞表型(CD1a、CD80、CD86和HIA-DR),混合T淋巴细胞反应检测DC对淋巴细胞增殖的影响,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子a(TNF-α)和γ干扰素(INF-γ)的浓度.结果:与对照组相比,经罗格列酮处理的DC可明显下调由AGE-HSA促进的CD80、CD86、HLA-DR和CD1a的表达.使AGE-HSA促进的对T淋巴细胞的增殖作用明显减弱,明显抑制DC细胞因子IL-10、IL-12、TNF-α和IFN-γ的分泌(P<0.05).结论:过氧化物酶体增殖物激活型受体γ激动剂罗格列酮可以抑制糖基化-人血清白蛋白诱导的树突状细胞的免疫成熟及其免疫功能,这可能是它抗炎的重要机制之一.     

NF-κB与系统性红斑狼疮鼠树突状细胞参与免疫耐受机制的关系

目的 探讨NF-κB与系统性红斑狼疮鼠树突状细胞(DCs)参与免疫耐受机制的关系.方法 系统性红斑狼疮模型小鼠18只,随机分为激素组、NF-κB特异性抑制剂吡咯啉烷二甲基硫脲(PDTC)组及病理对照组,每组6只;C57BL/6小鼠6只作为正常对照组.病理对照组与正常对照组每天予等量盐水灌胃,激素组以醋酸泼尼松混悬液2 mg/(kg·d)灌胃,PDTC组以PDTC 70 mg/kg隔天腹腔注射,干预8周后处死所有小鼠,取骨髓干细胞分离诱导培养DCs,观察并检测DCs,检测混合淋巴细胞反应(MLR)后IL-10、IFN-γ水平.结果 成熟树突状细胞(mDCs)与未成熟树突状细胞(iDCs)各组间比较:光镜下两者明显不同;流式细胞仪分析:iDCs激素组较病理对照组表面标志物CD80、CD86和 MHC-Ⅱ下降(P<0.05),PDTC组较激素组、病理对照组、正常对照组表面标志物表达均下降(P<0.05);mDCs激素组较病理对照组仅CD86表达下降(P<0.01),PDTC组CD80、CD86和 MHC分子表达均明显下降(P<0.001);MLR表明激素组刺激同种异体T细胞活化增殖能力下降(P<0.05),PDTC组较激素组明显下降(P<0.001);ELISA检测IL-10、IFN-γ表明激素组MLR培养上清液中IL-10、IFN-γ水平均下降(P<0.001),PDTC组较激素组明显下降(P<0.001).结论 系统性红斑狼疮鼠DCs参与免疫耐受机制可能与NF-κB有关.     

树突状细胞在膀胱癌中的浸润及其意义

目的 探讨树突状细胞(DC)在膀胱癌中的浸润及其在膀胱癌免疫逃逸中的作用.方法 采用免疫组织化学SP法及流式细胞仪检测36例膀胱移行细胞癌(TCCB)和10例正常膀胱黏膜组织中S-100加浸润性树突状细胞(TIDC)的数目及TIDC表面CD83及共刺激分子CD80、CD86的表达情况.结果 TCCB组织中S-100加TIDC的数目与正常膀胱组织比较无明显减少,与膀胱癌的病理分级、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移、复发等临床病理参数无关.而TCCB组织中TIDC表面分子CD83及共刺激分子CD80、CD86的表达水平较正常膀胱组织降低(P＜0.05),且随着肿瘤的病理分级、临床分期的升高而下降,瘤体≥3cm、有淋巴结转移及复发者TIDC表面分子CD83及共刺激分子CD80、CD86的表达低于瘤体＜3cm、无淋巴结转移及初发者.结论 TIDC的成熟受抑、共刺激分子表达下调在膀胱移行细胞癌的发生发展过程中起重要作用,可能是TCCB发生免疫逃逸的机制之一.     

慢性乙型肝炎患者树突状细胞与CD4+Th细胞分化的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎患者树突状细胞(dendritic cells,DCs)与CD4+Th细胞亚群分化的关系.方法 分离慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞,以rhlL-4(50ng/mL)、rhGM-CSF(10ng/mL)和rhTNF-α(100μ/mL)诱导培养DC.以流式细胞仪检测DCs表面CD1a、CD83、CD80、CD和HLA-DR分子的表达情况.免疫磁珠分离外周血CD4+T细胞亚群,PMA+Ionomycin刺激后胞内荧光染色,流式细胞仪检测Th细胞内特征性细胞因子IFN-γ/IL-4以判断Th1/Th2分化.ELISA法检测DCs或Th细胞培养上清中IL-6、IL-12、IFN-γ和IL-4的含量.结果 慢性乙型肝炎患者的DCs表达CD1a、CD83、CD80、CD86和HLA-DR分子的水平明显低于正常人;培养至第7天.慢性乙型肝炎患者DCs分泌的IL-12水平低于正常人,而分泌的IL-6水平高于正常人.与正常人相比,慢性乙型肝炎患者外周血中Th1细胞占CD4+T细胞的百分比较低,Th细胞培养上清中IFN-γ的量也较低.患者DCs与同种异体的健康人Th细胞共培养,刺激Th1型细胞因子IFN-γ产生的能力低于正常人.结论 慢性乙肝患者体内DCs功能的异常可能导致了外周血Th1分化不足.     

肝癌组织中浸润树突状细胞的数量和表面分子表达的临床意义

目的:研究人肝癌组织中浸润树突状细胞(DC)的数量和表面分子表达的临床意义.方法:原发性肝细胞癌(肝癌)术后组织标本30例,采用免疫组化方法(即用型两步法SupervisionTM)检测肝癌组织中DC标志蛋白S-100的表达;从肝癌组织中分离浸润性单个核细胞,流式细胞术检测DC的表面分子表达,并用RT-PCR技术检测肝癌组织IL-10、TGF-β1和VEGF-AmRNA.结果:肝癌组织中DC的数量少,高分化肝癌组织中DC浸润数量[(27.22±15.38)个/HPF]高于低分化肝癌[(11.92±8.56)个/HPF](P＜0.01);肝癌组织中浸润DC的表面分子如CDla、HLA-DR、CD80、CD86和CD54等MHC-Ⅰ、Ⅱ类分子,共刺激分子和黏附分子存在低表达或不表达,与肝癌的分化程度密切相关.在mRNA水平上,IL-10、TGF-β1和VEGF-A基因在肝癌组织中的表达显著高于正常肝组织(P＜0.001,P＜0.05).结论:肝癌组织中浸润DC的数量减少并存在功能缺陷,与肝癌分化程度密切相关.     

来氟米特对系统性红斑狼疮患者树突状细胞细胞因子的影响

目的:检测来氟米特对体外培养的系统性红斑狼疮(SLE)患者树突状细胞(DC)产生细胞因子白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、α干扰素(IFNα)水平的影响。方法:体外培养SLE患者DC,用浓度分别为5、15、45μg/ml的A771726(来氟米特的活性代谢产物)与细胞共同培养48 h后,检测不同组别DC产生细胞因子的改变。结果:与健康对照者相比,SLE患者DC表达CD1lc+、CD123+的百分率明显下降(P<0.05);A771726抑制SLE患者DC产生IL-6、I IL-10、IFNα,且对IL-6、IFNα的抑制呈现剂量依赖。结论:来氟米特可抑制SLE患者DC产生细胞因子IL-6、I IL-10、IFNα,来氟米特可能通过下调SLE患者DC的功能而发挥免疫抑制作用。     

不同胆囊病变树突状细胞浸润的免疫组化研究

应用免疫组化对胆囊不同病变内S-100~ 树突状细胞浸润与肿瘤相关分子的表达相互关系进行对比研究.包括胆囊癌症病人切除标本30例,结石20例,慢性炎症20例.用单克隆抗p53蛋白、抗增殖细胞核抗原(PCNA)、抗癌胚抗原(CEA)及多克隆抗S-100蛋白抗体,LSAB法检查上述病变标本.结果发现癌症病人p53蛋白阳性为46.7%(14/30),PCNA为86.7%(26/30),CEA为30.0%(9/30),S-100~ DC浸润仅为40.0%(12/30);结石标本p~(53)蛋白阴性,PCNA为35.0%(7/20),CEA为15%(3/20),S-100~ DC浸润为50%(10/20);慢性炎病例p53蛋白、CEA均为阴性,PCNA为25%(5/20),而S-100~ DC浸润为 85%(17/20).S-100~ DC浸润病例数与细胞密度,在恶性肿瘤中明显低于非肿瘤良性病变(P<0.05).本研究说明:①炎性病变的上皮组织多属单纯性增生而无肿瘤相关标记分子表达,同时伴有较高的细胞免疫活性;②胆囊结石上皮存在某些不典型变化有少许肿瘤标记分子表达,并伴有机体抗肿瘤免疫反应的下降,易于癌变;③癌症病人标本突变型p53基因过度表达、PCNA明显多曾多及 S-100~ DC明显减少,可能反映了免疫监视系统受损,使肿瘤细胞逃避机体的免疫攻击以促进肿瘤发生与发展.     

人骨髓间质干细胞对树突状细胞成熟和功能影响的实验研究

目的探讨人骨髓间质干细胞对树突状细胞成熟和功能的影响以及人骨髓间质干细胞发挥免疫抑制作用的可能机制。方法以Friedenstein法分离培养骨髓间质干细胞,以密度梯度离心法分离培养外周血单个核细胞,在重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和重组人白介素-4的培养条件下制备树突状细胞。在LPS(1ng/mL)诱导下获得成熟树突状细胞。将骨髓间质干细胞与成熟树突状细胞共培养48h后,混合淋巴细胞反应检测经骨髓间质干细胞处理前后树突状细胞对同种异体T细胞的增殖能力,流式细胞仪检测处理前后其表面共刺激分子CD86和成熟标记物抗原CD83的表达,ELISA法测定混合淋巴细胞反应上清中细胞因子的表达。结果与未成熟DCs组比较,成熟DCs组表面抗原CD86,CD83的表达均增加,对T淋巴细胞刺激能力增强,致炎细胞因子分泌(IL-12,IFN-γ)增多,而抑炎因子(IL-10)分泌减少,成熟DCs组经hMSCs处理后,表面抗原表达水平明显下降,致炎细胞因子分泌减少,而抑炎因子分泌增加,对T淋巴细胞刺激能力减弱,与未处理成熟组比较差异具有显著性,而与未成熟组比较差异无显著性。结论hMSCs能逆转成熟DCs为未成熟DCs状态,从能间接抑制DCs启动的T淋巴细胞增殖,抑制炎症因子的分泌,发挥免疫抑制作用。     

普伐他汀对人单核细胞源树突状细胞免疫功能的影响

目的　探讨普伐他汀对在免疫调控中起重要作用的人单核细胞源树突状细胞(DC)免疫功能的影响。方法　采用免疫磁珠法分离人外周血CD14+单核细胞,经含重组粒细胞巨噬细胞刺激因子(100 ng/ml)和重组白介素(rhIL) 4(20 ng/ml)的Cellgro培养,使其分化为DC。DC与50~100μmol/L普伐他汀孵育72 h后,采用流式细胞术检测DC表型(CD1a、CD40、CD86、HLA DR),混合T淋巴细胞反应检测DC对淋巴细胞增殖的影响,采用酶联免疫吸附试验法检测细胞培养上清液中Th1/Th2 [白介素(IL)- 12、干扰素(IFN) γ/ IL- 2、IL- 10]细胞因子的浓度。结果　与对照组相比,经普伐他汀处理的DC可下调CD80、CD86、HLA DR和CD1a的表达,对T淋巴细胞增殖作用明显减弱,明显抑制DC- Th1 细胞因子IL -12 和IFN -γ的分泌(P<0.05),但对Th2细胞因子IL -2 和IL -10水平无明显影响。100μmol/L甲羟戊酸可逆转普伐他汀的作用。结论　普伐他汀可明显抑制DC的成熟和免疫活性,此作用与甲羟戊酸途径有关。这可能是他汀类药物免疫调节的新机制。     

S-100蛋白、PCNA在胃癌中的表达及意义

目的探讨胃粘膜中S-100阳性细胞(S-100 DC)浸润、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达在胃癌发生、发展中的作用及临床意义。方法应用免疫组织化学方法对57例胃癌、18例正常胃粘膜组织中的S-100 DC、PCNA进行检测。结果S-100 DC、PCNA在胃癌组中的表达均显著高于正常胃粘膜组(P<0.05)。在低分化、淋巴结转移阳性和有远处转移胃癌组织中S-100 DC数目明显减少(P<0.01)。PCNA阳性表达率与淋巴结转移、远处转移、分化程度、肿瘤大小密切相关(P<0.05),而与肿瘤浸润深度、临床分期无关(P>0.05)。胃癌组织中S-100 DC与PCNA的表达呈负相关性。结论胃粘膜微环境中S-100 DC与PCNA的变化与胃癌临床病理参数密切相关。胃癌组织内S-100 DC增多可抑制肿瘤细胞的增殖潜力,并具有抗肿瘤转移的作用。     

宫颈癌原发灶磁共振影像特征预测淋巴结转移的初步探讨

目的：探讨磁共振成像（MRI）在预测宫颈癌淋巴转移的应用价值。方法：对南京大学附属鼓楼医院2011年1月至2015年6月宫颈癌患者的 MRI 及病理资料进行回顾性分析。结果：肿瘤最大径、宫颈浸润深度、宫旁侵犯的差异均有统计学意义（P 均＜0.05）。肿瘤最大径＞4 cm、宫颈浸润深度＞1／2、存在宫旁侵犯是淋巴结转移的独立影响因素（P 均＜0.05）。结论：肿瘤最大径、宫颈浸润深度、宫旁侵犯与宫颈癌淋巴结转移存在相关性,上述宫颈癌原发灶 MRI 影像特征有助于宫颈癌淋巴结转移的预测。     

粘附分子CD44v3在胃癌中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌中CD44v3的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测63例胃癌组织中CD44v3的表达.结果 CD44v3在正常胃组织、癌周组织及远癌组织中无表达,癌组织中CD44v3阳性表达率为41.27%;其表达与胃癌的病理类型、远处转移、癌组织分化程度、TNM分期、Lauren分型、Borrmann分型无关(P＞0.05);有淋巴结转移的组中CD44v3阳性表达率高于无淋巴结转移组(P＜0.05);CD44v3表达强度与浸润深度呈正相关(rs=0.4253).结论 CD44v3在胃癌组织中有中等程度的表达,且与胃癌的淋巴结转移、浸润深度有关,CD44v3对提示胃癌病程进展和预测胃癌转移潜能有一定价值.     

根治性宫颈癌手术患者盆腔淋巴结转移和预后的影响因素分析

目的 探讨根治性宫颈癌手术患者盆腔淋巴结转移和5年生存率的影响因素。 方法 选择2007年1月-2012年12月嘉兴市妇幼保健院宫颈癌Ⅰa~Ⅱb期手术患者225例作为研究对象,收集患者的临床病理资料。 结果 225例宫颈癌患者中淋巴结转移者54例,转移率为24.0%。治疗前血红蛋白水平<110 g/L、FIGO分期Ⅱ期、肌层浸润深度 ≥ 1/2、有宫旁浸润、有淋巴血管间隙侵犯、肿瘤直径 ≥ 4 cm的淋巴结转移率高于治疗前血红蛋白水平 ≥ 110 g/L、FIGO分期Ⅰ期、肌层浸润深度<1/2、无宫旁浸润、无淋巴血管间隙侵犯、肿瘤直径<4 cm者(P<0.05)。治疗前血红蛋白水平、FIGO分期、宫旁浸润、淋巴血管间隙侵犯、肿瘤直径为宫颈癌淋巴结转移的独立影响因素(P<0.05)。宫颈癌患者的5年生存率为83.7%。年龄 ≥ 45岁、治疗前血红蛋白水平<110 g/L、FIGO分期Ⅱ期、肌层浸润深度 ≥ 1/2、有宫旁浸润、有淋巴血管间隙侵犯、肿瘤直径 ≥ 4 cm、非鳞癌、有淋巴结转移患者的5年生存率低于年龄<45岁、治疗前血红蛋白水平 ≥ 110 g/L、FIGO分期Ⅰ期、肌层浸润深度<1/2、无宫旁浸润、无淋巴血管间隙侵犯、肿瘤直径<4 cm、鳞癌、无淋巴结转移患者的5年生存率(P<0.05)。治疗前血红蛋白水平、淋巴血管间隙侵犯、非鳞癌和淋巴结转移是宫颈癌患者5年生存率的独立影响因素(P<0.05)。 结论 治疗前血红蛋白水平、FIGO分期、宫旁浸润、淋巴血管间隙侵犯、肿瘤直径为宫颈癌淋巴结转移的独立影响因素。治疗前血红蛋白水平、淋巴血管间隙侵犯、非鳞癌和淋巴结转移是宫颈癌患者预后的独立影响因素。      

结直肠癌淋巴结转移的多因素回归分析

目的探讨结直肠癌淋巴结转移规律及其影响因素，为临床诊断、治疗和预后评估提供参考。方法分类整理武汉大学中南医院1990年1月-2006年12月手术治疗的1127例结直肠癌病人的病历资料，采用χ^2检验及Logistic多因素回归分析方法，研究淋巴结转移与临床病理参数之间的相关性。结果单因素分析显示，患者的性别、肿瘤部位与淋巴结转移无明显相关性。影响淋巴结转移的因素有患者的年龄、肿瘤的大小、肿瘤浸润肠壁的深度、病理组织学类型和分化程度。40岁以下的结直肠癌患者淋巴结转移率明显高于40岁以上者（P〈0．01）；淋巴结转移率随肿瘤直径的增大而增加（P〈0．001）；肿瘤浸润肠壁的深度增加，淋巴结转移率增加（P〈0．001）；肿瘤的分化程度越低，淋巴结转移率越高（P〈0．001）。Logistic回归分析显示，结直肠癌淋巴结转移与病人的年龄、肿瘤的大小、肿瘤浸润肠壁的深度、肿瘤的分化程度相关，影响淋巴结转移的相关因素由强到弱依次为肿瘤浸润肠壁的深度、肿瘤的分化程度，在所选因素中肿瘤浸润肠壁的深度是影响淋巴结转移的最重要因素。结论结直肠癌淋巴结转移与病人的年龄、肿瘤的大小、肿瘤浸润肠壁的深度、病理组织学类型及分化程度相关，其中肿瘤浸润肠壁的深度是影响淋巴结转移的最重要因素。     

上皮钙粘附蛋白在胃癌及其淋巴结组织中表达的生物学意义

目的:探讨上皮钙粘附蛋白(E-cadherin,E-cad)与胃癌临床病理学特征的关系。方法:应用免疫组化SP法对80例胃癌及其转移淋巴结组织进行E-cad蛋白检测。结果:80例胃癌组织标本中E-cad表达率为55.00%。E-cad在胃癌组织中的表达与胃癌Lauren分型、分化程度、临床分期、浸润深度、淋巴结转移和远处转移显著相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤大小等参数无相关性。E-cad在有淋巴结转移的胃癌中原发灶和转移淋巴结中的表达率分别为35.48%和32.26%。E-cad的表达与有淋巴结转移的胃癌中的原发灶和转移淋巴结呈显著相关(列联系数R=0.4978,P<0.05)。结论:E-cad的表达与胃癌分化、侵袭转移密切相关。     

nm23—H1蛋白在原发性胆囊癌中的表达及临床价值探讨

目的：探讨转移抑制基因nm23-H1在原发性胆囊癌中的表达及其与临床病理参数的关系。方法：本研究包括45例胆囊癌和15例胆囊息肉样病变，相关临床病理资料如组织学类型，分化程度，临床分期，浸润[深度，局度淋巴结转移及肝脏浸润等一并记录。用免疫组化SABC法检测上述病变的nm23-H1表达。结果：胆囊癌的nm23－H1阳性表达率为46．7％，胆囊息肉样病变的阳性表达率为13．3％，两者比较有显著性差异（P＜0．05）；且其表达与胆囊癌分化程度，Nevin分期，浸润深度及有无淋巴结转移均密切相关。结论：nm23-H1蛋白表达可能有助于区分胆囊良恶性病变，对胆囊癌的临床分期，浸润转移的估计和病人预后的判断有重要的意义。     

胃癌组织中CD44的表达水平及其临床意义研究

目的测定细胞粘附分子CD44在胃癌组织中的表达水平并探讨其临床意义。方法 应用流式细胞免疫学方法测定40例手术切除的新鲜胃癌组织及正常胃粘膜组织中CD44的表达水平。结果 胃癌组织及正常胃粘膜组织中均有CD44表达，但胃癌组织中阳性细胞数百分比较正常胃粘膜组织明显增高(P＜0.05)；CD44的表达水平与肿瘤侵润深度、淋巴结转移、远处转移有关(均P＜0.05)，且与肿瘤pTNM分期关系密切(P＜0.05)。结论测定胃癌组织中CD44的水平对判断胃癌侵润、转移及病期进展情况有一定的帮助，CD44高水平表达常提示胃癌恶性程度较高且病期较晚，临床上对CD44水平高的病例应采取更加积极有效的治疗措施。     

胃癌组织E-钙粘蛋白和β-连环素检测及临床价值

目的:探讨胃癌组织中E-钙粘蛋白(E-cad)和β-连环素(β-Cat)的表达及其临床价值。方法:免疫组化法检测85例胃癌组织和30例胃良性病变组织中E-cad和β-Cat表达。结果:胃良性病变组织中E-cad和β-Cat阳性表达率均为100%,而胃癌组织E-cad和β-Cat阳性表达率分别仅为41.2%和34.1%,两者对照均有极显著性差异(p<0.01)。随着胃癌浸润深度增加、有淋巴结转移以及分期晚者β-Cat阳性表达率愈低(p<0.05)。结论:E-cad和β-Cat在胃癌组织中表达下调。检测胃癌组织中β-Cat表达有助于在术前判断胃癌的浸润转移及TNM分期。     

EphA4在胃癌胃镜标本和术后标本中的表达与胃癌生物学行为的关系

目的研究EphA4在胃癌胃镜标本和术后标本中的表达,分析其与胃癌生物学行为的关系,探讨其临床价值。方法应用免疫组织化学方法对50例胃癌患者的胃镜标本、术后标本和癌旁组织及淋巴结,正常胃粘膜20例,胃良性病变18例,进行EphA4的检测。结果胃癌组织中EphA4表达水平明显高于癌旁和正常胃组织。EphA4表达与胃癌临床分期、浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。结论 EphA4在胃癌组织中的表达状态与胃癌的浸润深度和转移关系密切,为胃癌的临床诊断提供了有效的参考。