真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响

目的 研究分别来源于镰刀菌Fusarium solani和黑曲霉Aspergillum niger的真菌诱导子(fungal elicitors)对长春花愈伤组织中吲哚生物碱积累的影响。方法 用真菌诱导子对长春花愈伤组织进行诱导处理后提取吲哚总碱，并用RP—HPLC法测定其中阿玛碱和长春质碱含量。结果 两种真菌诱导子对吲哚总碱及其中阿玛碱和长春质碱的积累均有较明显的正向调节作用，并且确立了真菌诱导子最佳处理时间。结论 这两种真菌诱导子对长春花愈伤组织中吲哚生物碱的积累有显著影响。     

三种长春花细胞系阿玛碱合成能力的比较

比较激素自北京电视台型细胞系C20D和C20在生长和生产培养基中细胞生长，阿玛碱生成情况，结果表明：三最大生物量无显差异，在生长和生产培养基中，C20hi的阿玛碱含量均显高于C20D和C20，说明所筛选的激素自养型细胞系C20hi是一株高产优质的细胞系。     

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织的过过程中,叶片中含量较高的文多灵和长春质碱迅速降解有低水平,而叶片中含量较低的阿玛码和蛇根碱的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。     

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关酶的分析

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织发生的过程中,叶片中含量较高的文多灵（ｖｉｎｄｏｌｉｎｅ）和长春质碱（ｃａｔｈａｒａｎｔｈｉｎｅ）迅速降解至极低水平,而在叶片中含量较低的阿玛碱（ａｊ－ｍａｌｉｃｉｎｅ）和蛇根碱（ｓｅｒｐｅｎｔｉｎｅ）的合成却逐渐增加,同时酸性和碱性过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）活性呈上升趋势,尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。光照和黑暗中的变化趋势基本一致,但光照可提高过氧化物酶的活性,对培养物的长春质碱、文多灵和蛇根碱的合成有利。不同的培养基对生物碱的合成影响较大,２,４－Ｄ显著抑制生物碱的合成,持续光照使愈伤组织的生长受到抑制,使阿玛碱向其蛇根碱转化。     

柴胡愈伤组织生长和不定根诱导的研究

目的探讨柴胡愈伤组织生长和其不定根诱导的适宜培养条件。方法以无菌苗为外植体诱导获得愈伤组织后,对不同种类和不同质量浓度的生长素进行实验,并对光和温度对柴胡愈伤组织生长和其不定根诱导的影响进行了研究。结果柴胡的愈伤组织适宜于在MS NAA4mg/L KT0.2mg/L培养基或MS NAA2mg/L KT0.2mg/L培养基上继代培养。诱导其不定根时宜采用的培养基为MS IBA2mg/L KT0.2mg/L。25℃条件下,黑暗培养既有利于柴胡愈伤组织的生长又有利于其不定根的诱导。结论比较适宜于柴胡愈伤组织生长的生长素为NAA,而有利于不定根诱导的生长素为IBA。温度对愈伤组织的生长影响非常明显,光照是其发根的限制因素。     

L-谷氨酰胺和桂皮酸对云南红豆杉愈伤组织生长的影响

研究了不同化合物对褐化严重的云南红豆杉愈伤组织生长的影响。结果表明,在培养基中添加０．２９ｍｇ／ＬＬ－谷氨酰胺和０．０７４－０．２２ｍｇ／Ｌ桂皮酸后能有效地抑制愈伤组织和培养基的褐化,显著改善愈伤组织的生长,并对紫杉醇的含量影响不大;     

稀土对黄连愈伤组织生长的影响

目的与方法：探讨稀土对药用植物细胞组织培养的作用和意义。以药用植物黄连为材料，研究不同浓度的稀土对愈伤组织鲜重增加的影响。将从黄连外植体上诱导出的愈伤组织接种于添加不同浓度稀土Ｙｂ＾３＋和Ｅｕ＾３＋的６７－Ｖ培养基上，培养一段时间后，精密称量鲜重，研究了不同浓度稀土对黄连愈伤组织生长的影响和对转入无稀土培养基中的愈伤组织后续生长的影响。结果：０．１ｍｇ．Ｌ＾－１Ｙｂ＾３＋和１ｍｇ．Ｌ＾－１Ｅｕ＾３     

绞股蓝原植物及愈伤组织总皂甙动态分析

采用比色法和ＴＬＣ法对江西省几个具有代表性分布的绞股蓝及所诱导的愈伤组织进行了总皂甙分析。结果表明：原植物中总皂甙的质与量因产地、生育期、器官的不同有较大差异；绞股蓝愈伤组织总皂甙的质与量也因无性系的来源不同有所差异，为绞股蓝药材的生产、收购提供了依据。     

长春花毛状根再生植株的获得及抗癌生物碱的产生

目的 建立长春花转基因毛状根再生植株快速繁育体系,获得生物碱量提高的长春花再生植株。方法 研究外源植物生长调节剂对长春花毛状根愈伤组织诱导、不定芽分化、不定根分化和再生植株移栽的影响,采用HPLC法测定长春花再生植株生物碱量,并采用定量PCR技术分析目的基因的表达情况。结果 转基因长春花毛状根愈伤组织诱导和不定芽诱导的最佳培养基均是MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.3 mg/L,不定根分化的最适培养基是1/2 MS＋NAA 0.3 mg/L。采用炼苗的改进方法可使长春花再生植株的移栽成活率达90%。HPLC分析结果表明,长春花再生植株中长春碱、长春新碱和阿吗碱量分别比对照提高4.0、5.8、1.8倍,其中,优良单株OG30-3的长春新碱和长春碱量比对照提高7倍和10倍。定量PCR分析结果表明,转基因植株orca3基因和g10h基因的表达量比非转基因植株的高。结论 转基因长春花毛状根再生植株可促进抗癌生物碱的产生。     

长春花突变细胞生理特征的研究

目的研究以秋水仙碱处理的长春花突变细胞在继代培养过程中的生长规律、吲哚生物碱积累的规律及营养成分的适宜浓度等方面的特征,期望得到适于工业化细胞培养的理想材料。方法将突变细胞培养于MS固体培养基上,定期称取其鲜质量,用有机溶剂萃取吲哚生物碱,应用RP-HPLC法检测药用成分阿玛碱和长春质碱。结果突变细胞培养至第30代时,生长速度和吲哚总碱积累得最快,培养至第45代时,两者均明显下降。而药用成分的量于第20代达到最高;在培养基中添加适量的色氨酸能提高药用成分的量;培养基中Ca2 和Zn2 的质量浓度分别为1760和12.6mg/L时,明显促进了药用成分的积累。结论长春花突变细胞可能是一种适于工业化细胞培养的理想材料。     

NaCl胁迫对膜荚黄芪种子萌发和幼苗生理特性的影响

目的 通过对不同浓度NaCl胁迫下膜荚黄芪种子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高膜荚黄芪种子及幼苗在NaCl胁迫下抗性能力的途径。方法 测定不同浓度NaCl胁迫下膜荚黄芪种子的发芽势（G_v）、发芽率（G_r）、相对发芽率、相对NaCl害率,并对幼苗的叶绿素量、可溶性蛋白质量、丙二醛（MDA）量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）的活性进行测定。结果 低浓度的NaCl胁迫对膜荚黄芪种子的萌发具有促进作用,当NaCl胁迫浓度＞50 mmol/L时,随着NaCl浓度的增大,种子的G_v、G_r、相对发芽率逐渐降低,相对NaCl害率逐渐增大,对种子萌发有抑制作用。随着NaCl处理浓度的增大,膜荚黄芪幼苗中叶绿素量逐渐减少,可溶性蛋白质量也逐渐降低,二者都与NaCl处理浓度呈负相关;随着NaCl处理浓度的增加,幼苗中MDA量呈增加趋势,呈正相关;SOD、POD活性均不同程度地表现为先上升后下降的趋势,在75 mmol/L时达到最大值。结论 膜荚黄芪具有一定的抗NaCl胁迫能力,具有向盐碱地引种驯化的潜力。     

不同处理对鱼香草种子萌发的影响

目的 研究鱼香草的种子形态和不同处理对种子萌发的影响,为鱼香草人工栽培种苗培育提供科学依据。方法 测定种子长宽、千粒质量,对种子设置不同温度、不同光质以及不同浓度的赤霉素（GA₃）和KNO₃浸种处理,观察记录种子发芽数,计算发芽率、发芽指数和活力指数。结果 鱼香草种子椭圆形,长（1.77±0.01）mm,宽（1.13±0.01）mm,千粒质量（1 175.5±21.02）mg,吸水量为其风干种子质量的8.8倍;种子发芽最适宜温度为30 ℃;白色光照最有利于种子萌发,全黑暗最不利于种子萌发;GA₃、0.25% KNO₃浸种可显著提高种子发芽率、发芽指数及活力指数。结论 得到鱼香草种子萌发最适宜的处理条件,对鱼香草人工栽培种苗培育具有重要指导作用。     

亚精胺对盐胁迫下紫苏种子萌发和幼苗生理特性的影响

目的 通过对紫苏种子萌发和幼苗生理特性的研究,寻找提高紫苏种子及幼苗在盐胁迫条件下的抗盐能力的方法。方法 测定不同浓度亚精胺（Spd）处理后的盐胁迫下紫苏种子的发芽势（G_v）、发芽率（G_r）和发芽指数（G_i）,并对紫苏幼苗叶片的相对含水量、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性进行了测定。结果 盐胁迫下的紫苏种子萌发受到显著抑制,但是经过不同浓度的Spd处理后,萌发指标均有所升高,其中经过0.25 mmol/L Spd处理,各项指标均达到最大,G_v为59.7%,G_r为69.4%,G_i为12.8。Spd处理减缓了盐胁迫下紫苏叶片的相对含水量和总黄酮降低的趋势,并且降低了叶片MDA的量。Spd处理后SOD、POD和CAT 3种酶的活性均有所增加,但在Spd为0.25 mmol/L时达到最大值,分别为72.4 U/g、8.7 U/mg、8.8 U/mg。结论 0.25 mmol/L的Spd能够有效地减缓盐胁迫对紫苏种子及幼苗产生的伤害,提高了种子及幼苗的抗盐能力。     

地榆总皂苷促造血细胞增殖效应研究

目的 观察地榆总皂苷对3种造血细胞Baf3/Mpl、UT-7和NSF-60的促增殖效应。方法 分别培养依赖血小板生成素（TPO）、红细胞生成素（EPO）和粒细胞集落生长因子（G-CSF）生长的Baf3/Mpl、UT-7和NSF-60细胞,在加或不加细胞因子条件下,用不同质量浓度地榆总皂苷处理细胞72 h后,采用MTT法检测3种细胞的增殖;采用RT-PCR法检测3种细胞因子受体表达水平的变化。结果 地榆总皂苷单独处理细胞72 h,明显促进Baf3/Mpl细胞和NSF-60细胞增殖,但不影响UT-7细胞生长;在TPO和G-CSF存在条件下,地榆总皂苷能分别增强两种细胞因子的促细胞增殖作用。此外,地榆总皂苷能明显增强Baf3/Mpl细胞TPO受体表达,对NSF-60细胞G-CSF受体表达没有影响。结论 地榆总皂苷具有单独或协同细胞因子的促造血细胞增殖作用,其促增殖作用与上调TPO受体的表达有关。     

高温胁迫对蛇足石杉生理特性的影响

目的 研究蛇足石杉的最高耐受温度及耐受时间,为人工栽培蛇足石杉提供温度调控参考。方法 通过在25、30、35、40 ℃的不同温度下胁迫处理蛇足石杉,测定其叶片中的可溶性糖量、可溶性蛋白质量、游离脯氨酸量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）活性在不同处理时间的量,并对其进行相关性分析。结果 随着温度的升高,各项指标均有大幅度的变化,可溶性糖和游离可溶性脯氨酸的量呈上升的趋势,可溶性蛋白质量呈下降趋势,POD和SOD活性均呈现下降的趋势。35 ℃高温胁迫达8 d后,对蛇足石杉的各项生理指标有较大影响,外部形态表现轻度失水,继续处理至12 d后,叶片发黄,植株基本死亡;40 ℃高温胁迫6 d后,蛇足石杉的各项生理指标均出现较大幅度的变化,SOD活性显著下降,叶片发黄,第8天植株完全死亡。结论 高温对蛇足石杉的生长有明显影响,其生长温度在25～30 ℃为宜,长时间持续超过35 ℃对其生长有明显的影响,40 ℃为极限高温,短期内会引起植株死亡。     

外源性5-氨基乙酰丙酸对盐胁迫下决明子萌发及幼苗生理特性的影响

目的 通过对决明子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高决明子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径。方法 测定盐胁迫下决明子在经过不同质量浓度的外源性5-氨基乙酰丙酸（ALA）处理后,种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,并对决明幼苗叶片叶绿素量、叶绿素荧光参数、原生质膜透性、叶片丙二醛（MDA）量、可溶性糖量、可溶性蛋白量及脯氨酸量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性进行测定。结果 100 mmol/L盐胁迫下的决明子萌发受到显著抑制,但是经过不同质量浓度的ALA处理后,萌发指标均有升高。结果表明,外源性ALA处理显著提高了决明子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,提高了叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素量,显著提高了最大光化学效率（Fv/Fm）,PSII有效光化学效率（Fv′/Fm′）,PSII实际光化学效率（ΦPSII）,光化学淬灭系数（qP）,降低了原生质膜透性、叶片的MDA量及非光化学淬灭系数（NPQ）,提高了盐胁迫下幼苗叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸量,显著提高了叶片SOD、POD、CAT活性。结论 外源性ALA通过提高决明子的萌发指数,提高幼苗光合效率、渗透调节物质量及抗氧化酶活性,有效地减缓盐胁迫对决明子及幼苗产生的伤害,提高种子及幼苗的抗盐能力。