四神丸和葛根芩连片对DSS诱导的小鼠实验性结肠炎的作用比较

目的: 比较四神丸和葛根芩连片对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导的小鼠急性和慢性结肠炎的治疗作用。 方法: 急性或慢性结肠炎实验中C57BL/6J小鼠均随机分为4组,即正常组,DSS急性或慢性模型组,四神丸组(2.25 g ·kg^-1),葛根芩连片组(6.5 g ·kg^-1)。4%DSS连续给小鼠自由饮用5 d制备急性结肠炎模型;3%DSS给小鼠4次循环饮用(1~5 d,8~12 d,15~19 d,22~26 d)制备慢性结肠炎模型。急性模型于DSS饮水次日开始给药,连续ig给药8 d;慢性模型于DSS饮水2次循环后开始给药,连续给药16 d。分别测定小鼠疾病活动度指数(DAI)和结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)活性,HE染色观察结肠组织学变化。 结果: 与正常组比较,模型组急性结肠炎与慢性结肠炎小鼠DAI均明显升高,结肠组织炎症损伤较为明显,MPO活性明显升高(P<0.05,P<0.01);急性结肠炎中葛根芩连片从第5天开始、四神丸从第7天开始显著改善小鼠DAI(P<0.05),二者均能显著减轻小鼠结肠组织炎症损伤(P<0.01,P<0.05),并降低结肠组织中MPO活性(P<0.05,P<0.01);慢性结肠炎中四神丸从第18至22天及24天可显著改善模型小鼠的DAI(P<0.05),并能减轻结肠组织炎症损伤(P<0.05),葛根芩连片对慢性结肠炎小鼠各指标均无显著性改善。 结论: 四神丸对DSS诱导的急性及慢性结肠炎均有显著改善作用,葛根芩连片仅对急性结肠炎有显著疗效。     

鸦胆子药渣抗葡聚糖硫酸钠诱导小鼠肠炎作用研究＊

目的 建立葡聚糖硫酸钠（Dextran sulphate sodium，DSS）诱导的小鼠肠炎模型，观察鸦胆子药渣提取物对溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis，UC）小鼠的治疗作用。方法 采用DSS自由饮水建立UC小鼠模型，将BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪（5-ASA，200 mg·kg^-1），鸦胆子药渣低剂量组（25 mg·kg^-1），中剂量组（50 mg·kg^-1），高剂量组（100 mg·kg^-1），通过观察小鼠一般情况并评估疾病活动指数（DAI），结肠大体形态，组织学改变，以及通过ELISA法测定小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平。结果 鸦胆子药渣能够明显改善DSS导致的小鼠体重下降，DAI评分和组织损伤评分的升高；以及通过鸦胆子药渣各剂量治疗后，小鼠结肠组织中TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平较模型组均显著下降。结论 鸦胆子药渣能有效缓解UC模型小鼠结肠炎症，其机制可能与抑制促炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平升高有关。     

左金丸对DSS诱导的溃疡性结肠炎的作用及其机制

目的 基于网络药理学与实验验证探究左金丸（ZJW）治疗溃疡性结肠炎（UC）的作用及机制。方法 借助网络药理学与分子对接初步明确ZJW治疗UC的活性成分与潜在机制,将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺吡啶组（300 mg·kg^-1）和左金丸低、中、高剂量组（1.82、3.64、7.28 g·kg^-1）,采用葡聚糖硫酸钠（DSS）构建UC模型,造模第3天开始灌胃给药,连续7 d,每日观察小鼠一般状态并评估疾病活动指数（DAI）。苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理学变化,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6和IL-10水平,并以蛋白免疫印迹法（Western blot）验证分子机制。结果 网络药理学预测发现磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路可能是ZJW调节UC的关键途径。分子对接结果表明ZJW关键成分与核心靶点之间均有良好的结合能力。动物研究结果显示,与正常组比较,模型组小鼠结肠长度显著缩短（P<0.01）,DAI评分、脾脏指数、结肠组织病理学评分与血清中TNF-α、IL-6水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,结肠组织PI3K、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）与B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）表达明显增加（P<0.05,P<0.01）,血清IL-10水平与结肠组织Bcl-2蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,左金丸各给药组小鼠UC症状明显改善,结肠组织病理损伤减轻,血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-6水平显著下调（P<0.01）,结肠组织PI3K、p-Akt与Bax蛋白表达明显抑制（P<0.05,P<0.01）,血清IL-10水平与结肠组织Bcl-2蛋白表达显著提高（P<0.01）,以高剂量组效果最佳。结论 ZJW可有效缓解DSS诱导的UC,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路、调节凋亡相关蛋白表达相关。     

白术内酯Ⅲ通过调节自噬水平清除过氧化物减轻小鼠溃疡性结肠炎＊

目的 探讨白术内酯Ⅲ是否通过调节自噬水平清除过氧化物减轻小鼠溃疡性结肠炎（UC）。方法 将32只健康雄性BALB/c小鼠随机分为空白组（n=8）和造模组（n=24），造模组小鼠均采用2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇诱导造UC小鼠模型，造模成功后小鼠随机分为模型组、白术内酯Ⅲ组（20 mg·kg^-1）、白术内酯Ⅲ+自噬抑制剂组（20 mg·kg^-1+2 mg·kg^-1），造模成功后第2天起按相应剂量给药，连续给药14天。进行小鼠疾病活动指数（Disease activity index，DAI）及结肠黏膜损伤指数（Colonic mucosal damage index，CMDI）评分；测量小鼠结肠长度及重量；苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin，HE）染色观察结肠组织病理学变化；酶联免疫吸附（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测结肠组织超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathioneperoxidase，GSH-PX）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量；蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB）检测结肠组织Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62蛋白表达；透射电镜观察结肠上皮细胞中的自噬泡。结果 与空白组比较，模型组小鼠DAI、CMDI评分、单位结肠重量、结肠组织MDA含量及p62蛋白表达明显升高（P<0.05），小鼠结肠长度明显缩短、结肠组织SOD、GSH-PX含量及Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达明显降低（P<0.05）。与模型组比较，白术内酯Ⅲ组小鼠DAI、CMDI评分、单位结肠重量、结肠组织MDA含量及p62蛋白表达明显降低（P<0.05），小鼠结肠长度、结肠组织SOD、GSH-PX含量及Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达明显升高（P<0.05）。自噬抑制剂阻止白术内酯Ⅲ诱导的Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达升高，抑制结肠组织SOD、GSH-PX含量。结论 白术内酯Ⅲ可明显改善UC病理损伤，通过调节自噬水平清除过氧化物发挥对UC小鼠的治疗作用。     

香参丸对结肠炎小鼠结肠黏膜TLR/NF-κB信号的调控作用

目的 基于Toll样受体（TLR）/核转录因子-κB（NF-κB）经典信号通路,探究香参丸对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（UC）的作用及机制。方法 实验小鼠分为正常组,模型组,香参丸组,美沙拉嗪组。除正常组外,其余各组均自由饮用3%DSS溶液7 d以建立急性UC模型,从造模第1天至第10天连续予香参丸（5 g·kg^-1）和美沙拉嗪（300 mg·kg^-1）给药治疗,分别观察各组小鼠体质量,疾病活动指数（DAI）,结肠质量,肠重指数,结肠长度,单位长度结肠质量和结肠病理改变以评价其疗效,同时蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠结肠组织内TLR5,髓样分化因子88（MyD88）,白细胞介素-1受体相关激酶4（IRAK4）,肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）,转化生长因子-β活化激酶1（TAK1）,p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）,NF-κB,白细胞介素-1受体相关激酶1（IRAK1）,转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白1（TAB1）,转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白2（TAB2）,丝裂原活化蛋白激酶激酶3（MKK3）,丝裂原活化蛋白激酶激酶6（MKK6）,环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠体质量减轻,DAI评分升高,结肠质量,肠重指数和单位长度结肠质量升高,结肠长度缩短,结肠黏膜损伤严重,结肠组织TLR5,MyD88,IRAK4,TRAF6,TAK1,p38 MAPK,NF-κB,IRAK1,TAB1,TAB2,MKK3,MKK6,CREB蛋白表达均明显上升（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,香参丸组和美沙拉嗪组小鼠体质量增加,DAI评分下降,结肠质量,肠重指数和单位长度结肠质量降低,结肠长度增加,结肠黏膜损伤程度好转,结肠组织TLR5,MyD88,IRAK4,TRAF6,TAK1,p38 MAPK,NF-κB,IRAK1,TAB1,TAB2,MKK3,MKK6,CREB蛋白表达明显下降（P<0.05,P<0.01）。结论 香参丸有效治疗DSS诱导的小鼠UC,可能与其抑制TLR/NF-κB信号通路有关。     

岭南山竹子醇提物对溃疡性结肠炎小鼠的作用＊

目的 研究岭南山竹子乙醇提取物（Garcinia oblongifolia ethanol extract， GOEE）对小鼠溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis， UC）的作用。方法 UC以3%葡聚糖硫酸钠（Dextran sulphate sodium， DSS）自由饮水造模，将C57BL/C小鼠随机分正常组、模型组、美沙拉嗪组、GOEE低（200 mg?kg^-1）、中（400 mg?kg^-1）、高（800 mg?kg^-1）剂量组，观察小鼠的结肠长度、疾病活动指数（Disease activity index， DAI）、病理组织学评分；检测血清和结肠的白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-4（IL-4）、白介素-10（IL-10）、髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）活力。结果 GOEE显著改善溃疡性结肠炎小鼠的结肠长度、DAI指数和结肠病理评分（P < 0.05）；与模型组比，GOEE显著降低UC小鼠血清IL-6、TNF-α、IL-1β的水平和结肠中MPO、MDA的含量（P < 0.05）；提高IL-4、IL-10水平和SOD、GSH-px活力（P < 0.05）。结论 GOEE对小鼠UC具有治疗作用，其机制可能通过调节炎症相关因子的释放和恢复结肠组织的抗氧化能力起作用。     

白花蛇舌草总黄酮对实验性溃疡性结肠炎的作用及免疫学机制研究

目的：观察不同剂量白花蛇舌草总黄酮（FOD）对溃疡性结肠炎（UC）模型小鼠结肠NF-κB及IL-8,TNF-α,IL-10表达的影响,探讨其抗UC的免疫学机制。方法：60只雄性昆明小鼠随机分成6组：对照组（Cont）蒸馏水灌胃,其余5组均自由饮用4%右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）水溶液7 d以造成急性UC,同时给予下列药物灌胃：蒸馏水（DSS组）,柳氮磺胺吡啶（SASP）500 mg·kg^-1·d^-1（DSS+SASP组）,FOD 60 mg·kg^-1·d^-1（DSS+FOD-H组）,FOD 40 mg·kg^-1·d^-1（DSS+FOD-M组）,FOD 26.7 mg·kg^-1·d^-1（DSS+FOD-L组）。造模给药期间,每天对各组小鼠进行疾病活动指数（DAI）评分。造模7 d后处死小鼠,取结肠组织标本,对结肠黏膜进行病理组织学损伤评估;用免疫组化法检测NF-κB p65的表达,ELISA法检测结肠组织中IL-8,TNF-α及IL-10的表达。结果：自由饮用4%DSS水溶液7 d可成功造成小鼠急性UC,与对照组比较,DSS组小鼠的DAI、结肠病理组织学损伤评分明显上升,结肠组织中NF-κB p65及IL-8,TNF-α表达显著增多,IL-10表达明显降低（P<0.05）。 FOD可对抗DSS所致的小鼠急性UC,FOD以60,40 mg·kg^-1·d^-1预防给药7 d,可完全或部分对抗DSS引起的上述改变。与DSS组比较,DSS+FOD-H组、DSS+FOD-M组的DAI、结肠病理组织学损伤评分降低,IL-8,TNF-α及NF-κB p65表达下调,IL-10 表达上调（P<0.05）。结论：FOD有明显的抗小鼠UC的作用,其机制可能与抑制NF-κB p65激活,从而减少促炎因子IL-8,TNF-α的表达,增加抗炎因子IL-10表达有关。     

慢溃宁方对溃疡性结肠炎小鼠炎症因子表达及肠道菌群的影响

目的 探讨慢溃宁方对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）小鼠的治疗作用及可能的作用机制。方法 90只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组（0.266 g·kg^-1）、慢溃宁方高、中、低（20、10、5 g·kg^-1）剂量组，每组15只。除正常组外，其余组小鼠自由饮用3% DSS溶液7 d复制UC模型，造模当天同时灌胃给药治疗，模型组、正常组给予等体积0.9%生理盐水，每日1次，共7 d。每天记录小鼠一般情况，进行疾病活动指数（DAI）评分。第8天采用颈椎脱臼法处死小鼠，收集所有结肠和粪便，记录结肠长度，苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理学变化，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测结肠组织中炎症因子的含量，16S rRNA测序技术检测小鼠粪便肠道菌群的变化。结果 与正常组比较，模型组小鼠结肠黏膜损伤严重，结肠长度显著缩短（P<0.01），DAI升高（P<0.01），结肠中白细胞介素-10（IL-10）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）降低（P<0.01），白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-17α（IL-17α）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）显著升高（P<0.01），肠道菌群丰度、多样性降低；与模型组比较，美沙拉嗪组、慢溃宁方高、中、低剂量组结肠黏膜损伤减轻，结肠长度均有所恢复（P<0.01），第5天开始，DAI显著降低（P<0.01），结肠IL-10、TGF-β₁显著升高（P<0.01），IL-1β、IL-6、IL-17α、TNF-α明显降低（P<0.05，P<0.01），肠道菌群丰度及多样性升高，厚壁菌门和AKK菌属、杜氏杆菌属、布劳特氏菌属丰度增加，拟杆菌门和Muribaculaceae、梭状芽孢杆菌属UCG-014、理研杆菌属丰度减少。结论 慢溃宁方在改善UC小鼠的症状上疗效确切，与中药浓度呈剂量依赖性，且不同浓度对菌群结构有不同的影响，其作用机制可能是通过改善肠道菌群紊乱进而恢复肠道免疫平衡，从而促进结肠黏膜恢复。     

慢溃宁方对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路和肠道菌群的影响

目的 探讨慢溃宁方对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）小鼠肠道菌群的调控作用,和对NOD样受体（NLR）P3/胱天蛋白酶（Caspase）-1/Gasdermin D（GSDMD）细胞焦亡通路所介导炎症的影响。方法 SPF级C57BL/6小鼠60只,随机分为空白组、模型组、慢溃宁方组（20 g·kg^-1）、美沙拉秦组（0.266 g·kg^-1）,各组15只。小鼠通过自由饮用3%DSS溶液,7 d构建UC模型。造模开始12 h后,治疗组每天灌胃给药,其余组灌胃等体积生理盐水。记录小鼠每日体质量等情况,并评估计算疾病活动指数（DAI）。第8天麻醉后,脱臼颈椎处死小鼠,收集结肠和粪便,记量结肠长度;观察结肠组织苏木素-伊红（HE）染色后的病理学改变;结肠中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）水平用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测;基于16S rRNA测序技术检测各组小鼠粪便中肠道菌群的差异;NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白结肠组织中含量用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测。结果 相较于空白组,模型组小鼠的DAI升高（P<0.01）,结肠长度显著缩短（P<0.01）,结肠黏膜损伤严重,TNFα、IL-1β、IL-18水平均明显升高（P<0.01）,且结肠组织中NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白含量显著升高（P<0.01）,肠道菌群结构改变,门水平上的放线菌门、拟杆菌门与变形菌门丰度减少,厚壁菌门丰度增加;属水平上的乳酸杆菌、普雷沃氏菌和鼠杆菌属丰度减少,拟杆菌属、芽孢杆菌、毛螺旋菌属NK4A136丰度增加。慢溃宁方组、美沙拉秦组相较于模型组,第3天后DAI显著降低（P<0.01）,结肠长度均显著增加（P<0.01）,结肠的炎症浸润及黏膜结构损伤减轻,且结肠TNF-α、IL-1β、IL-18水平均显著下降（P<0.01）,NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白在结肠组织中的含量明显降低（P<0.05,P<0.01）,门水平上的变形菌门和拟杆菌门丰度增加,厚壁菌门丰度减少。结论 慢溃宁方可通过抑制细胞经典焦亡通路,缓解UC小鼠结肠炎症反应,减轻结肠损伤,并对肠道菌群紊乱有改善作用。     

槐绛方调控NLRP3/Caspase-1通路抗溃疡性结肠炎损伤的机制研究

目的 探讨槐绛方对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）的治疗作用以及对NOD样受体热蛋白结构域3（NOD-like receptor family pyrin domain containing 3，NLRP3）/半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）通路的影响。方法 C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组以及槐绛方低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g/kg）组，对照组给予正常饮用水，其余各组自由饮用3%葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate，DSS）水溶液诱导UC模型，连续7 d。造模同时各给药组灌肠不同剂量槐绛方，对照组和模型组灌肠等体积0.9%氯化钠溶液，每日记录各组小鼠体质量、便血、便形等症状改变，并进行疾病活动指数（disease activity index，DAI）评分，采用苏木素-伊红（HE）染色评估小鼠结肠黏膜组织病理改变，ELISA法检测结肠组织中白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平，Western blotting法检测结肠组织中NLRP3、Caspase-1、Gasdermin D（GSDMD）蛋白表达。结果 与模型组比较，槐绛方明显减缓小鼠体质量下降，有效减轻小鼠结肠炎症状，降低炎症因子（TNF-α、IL-1β）和焦亡相关蛋白（NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD-N）表达（P<0.05、0.01），对UC损伤有较好的改善作用，且呈剂量相关性。结论 槐绛方具有改善UC小鼠炎症状态、恢复结肠形态、抑制细胞焦亡作用，其作用机制与调控NLRP3/Caspase-1通路密切相关。     

四君子汤对UC模型大鼠的治疗作用及其对紧密连接蛋白Occludin表达的影响

目的:观察四君子汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠治疗作用及其对黏膜上皮细胞紧密连接蛋白闭合蛋白(Occludin)表达的影响。方法:SD大鼠实验分为正常组,模型组,阳性药组(柳氮磺胺吡啶肠溶片,SASP,0.4 g·kg~(-1)),四君子汤高、中、低剂量给药组(生药5.6,2.8,1.4 g·kg~(-1)),每组8只。除正常组外,其余各组采用TNBS灌肠法制作溃疡性结肠炎模型,造模24 h后各组分别按设计剂量连续ig给药10 d。观察大鼠饮食、精神状态、疾病活动指数、大便次数与质量等情况,末次给药24 h后,处死动物取结肠,肉眼观察结肠黏膜的病变并进行结肠大体形态损伤评分,取病变部位进行HE染色,光镜下评价黏膜病理损伤指数,免疫组织化学法检测大鼠结肠Occludin蛋白的表达。结果:模型组大鼠DAI评分、结肠形态与组织学损伤评分等均比正常组高,Occludin蛋白表达较正常组低(P0.05),四君子汤与SASP治疗能不同程度减轻TNBS诱导的UC模型对黏膜的破坏,使紧密连接蛋白Occludin表达升高,抑制结肠通透性的增加,保护结肠黏膜屏障功能(P0.05)。结论:四君子汤能有效增加Occludin蛋白表达,促进实验性UC大鼠结肠黏膜屏障功能修复,这可能是其治疗结肠炎的机制之一。     

附子-干姜对慢性溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜微循环障碍的改善作用

目的研究附子-干姜对慢性溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)小鼠肠黏膜微循环障碍的改善作用。方法建立慢性UC小鼠模型,给予附子-干姜水煎液进行干预,记录各组小鼠体质量、大便性状及便血情况,进行疾病活动指数(disease activityindex,DAI)评分;采用激光多普勒血流仪检测各组小鼠肠黏膜血流灌注量、血细胞移动速度和移动血细胞浓度;采用ELISA法检测各组小鼠血清中血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)和组织因子(tissue factor,TF)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠结肠组织病理改变情况;采用免疫组化法检测各组小鼠肠黏膜毛细血管内皮细胞CD31表达并计算微血管密度(microvessel density,MVD)。结果与对照组比较,模型组小鼠DAI评分显著增加(P<0.01),肠黏膜血流灌注量、血细胞移动速度显著下降(P<0.01),肠黏膜移动血细胞浓度显著升高(P<0.01),血清PAF、TF水平显著升高(P<0.01),结肠组织CD31表达减少,肠黏膜微血管密...     

肠炎清对溃疡性结肠炎模型大鼠中分泌型免疫球蛋白A和P选择素的影响

目的： 探讨肠炎清对免疫复合法诱致溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织中分泌型免疫球蛋白A（sIgA）和P选择素的影响研究。 方法： SD大鼠64只,雌雄各半,随机分为正常对照组（12只）和模型组（52只）;模型组应用免疫复合法（注射抗原乳化剂+TNBS/乙醇）建立溃疡性结肠炎大鼠模型,正常组注射生理盐水。再喂养3周后,随机从造模组中抽取4只处死,检查结肠病变情况,确定溃疡性结肠炎模型建立;随后将造模大鼠随机分为4组：肠炎清低、高剂量组（10,40 g·kg^-1）,柳氮磺吡啶（SASP,0.1 g·kg^-1）组和模型对照组;每组12只,每天灌胃给药1次,连续给药4周。每周观察大鼠疾病活动指数（DAI）;末次给药后,处死动物,解剖观察并评分结肠黏膜损伤指数（CMDI）;光镜下观察结肠组织的病理学变化,并做组织病理变化评分（HS）;采用ELISA方法测定结肠组织中sIgA的含量变化;采用免疫组化法（SP法）检测P选择素的表达变化。 结果： 与正常组比较,模型大鼠的DAI,CMDI,结肠HS评分和髓过氧化物酶（MPO）均明显上升（P<0.01）;结肠组织中的sIgA含量显著下降,而P选择素表达明显增加 （P<0.01）;与模型组比较,肠炎清治疗4周后大鼠的DAI,CMDI,结肠HS评分和MPO值均能显著下降（P<0.01）;结肠组织中sIgA的浓度升高,同时减少了P选择素表达（P<0.01）。 结论： 肠炎清对免疫复合法诱致溃疡性结肠炎模型大鼠具有治疗作用,其机制可能与提升结肠组织内sIgA浓度和降低P选择素的表达有关。     

清热化湿祛瘀方对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜氧化应激和细胞凋亡的影响

目的:观察清热化湿祛瘀方对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠黏膜氧化应激和细胞凋亡的影响。方法:将40只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组和中药组。采用3%DSS诱导UC模型,于造模开始后的第3天开始给药干预,正常组和模型组分别给予0.9%氯化钠溶液灌胃,中药组和美沙拉嗪组分别给予中药水煎剂和美沙拉嗪混悬液灌胃。计算小鼠的疾病活动指数,测量结肠长度,通过HE染色进行病理观察,采用DHE染色检测组织ROS表达情况,采用MDA、SOD测定盒检测组织MDA、SOD表达水平,并采用TUNEL染色法检测组织细胞凋亡水平变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠DAI评分显著升高(P<0.01),结肠长度显著缩短(P<0.05),结肠组织病理学评分显著升高(P<0.05),ROS、MDA以及细胞凋亡水平显著升高(P<0.05),SOD表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,美沙拉嗪组及中药组小鼠第8、9天DAI评分显著降低(P<0.01),结肠长度显著延长(P<0.05),结肠组织病理评分显著降低(P<0.05),ROS、MDA以及细胞凋亡水平显著降低(P<0.05),SOD表达显著升高(P<0.05);中药组细胞凋亡百分率显著低于美沙拉嗪组(P<0.05)。结论:清热化湿祛瘀方对UC具有一定的改善作用,其作用机制可能与调节氧化应激、改善结肠上皮细胞凋亡有关。     

基于网络药理学和分子对接技术探究槐花散治疗溃疡性结肠炎的作用机制＊

目的 该研究采用网络药理学和分子对接的研究方法结合体内实验探讨槐花散治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis， UC）的主要化合物和靶点，并分析其作用机制。方法 利用多个数据库筛选药物活性成分、药物靶点和UC疾病基因，并进行拓扑分析，构建“化合物-药物靶点-疾病基因”关系网络。利用DAVID在线分析工具对候选靶点进行基因本体（Gene ontology， GO）功能和生物通路（KEGG）富集分析。通过SYBYL X2.0软件进行分子对接，获取总评分、共识评分和结合位点。利用硫酸葡聚糖钠盐（dextran sodium sulfate，DSS）建立UC小鼠模型，槐花散干预后，评估疾病活动指数和结肠病理，RT-qPCR检测白介素6（IL-6）、白介素17（IL-17）mRNA表达水平，Western Blot检测IL-6、IL-17蛋白表达水平。结果 槐花散中有20个化合物对应375个靶点对121个UC疾病基因产生影响。对72个关键靶点作GO功能分析筛选得303个GO条目，其中生物过程相关的条目223条，细胞组成相关的条目25条，分子功能相关的条目55条。KEGG富集分析筛选得到88条通路。分子对接结果显示关键靶点与对应的化合物有较好的结合活性。体内实验显示，槐花散可以改善UC小鼠DAI评分，下调IL-6、IL-17的表达，减轻结肠组织病理损伤。结论 槐花散治疗UC具有多成分、多靶点、多通路的特点，为槐花散治疗UC的进一步研究提供了理论依据。     

Treatment of Suqingwan watered pill reduces colon injury induced by experimental colitis

Ethnopharmacological relevance

Sunqingwan watered pill (SWP) is a Chinese medicine compound, traditionally used in the treating UC symptoms like diarrhea, bloody and purulent stool, abdominal pain, etc. The present study aim to examine the effects of SWP on ulcerative colitis using the modern pharmacological models.

Materials and methods

To address this question, we used two experimental models of colitis, mice induced by dextran sulfate sodium (DSS) as well as rats induced by 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB). For the mice with DSS-induced colitis, the disease activity index (DAI) and colon histological injuries were observed. For the rat models with DNCB-induced colitis, DAI, levels of nitric oxide (NO) in serum, macroscopic and histological colon injury were investigated. Besides, we also introduced a usually used model of ear swelling induced by xylene in mice to reveal the effect of SWP on acute inflammation.

Result

In the mice with DSS-induced colitis and the rats with DNCB-induced colitis, SWP could significantly decreased the DAI scores, which meant the body weights of animals were recovered and the gross rectal bleeding reduced. Under the microscope, the histology of colon was obviously changed in SWP administration groups. In the rat models with DNCB-induced colitis, SWP also significantly attenuated macroscopic and colon histological injury. The colon scores in SWP groups in rats was obviously lower than those in the control and similarly the serum levels of NO in the treatment groups were significantly lower than that of control group except for low dosage group of SWP. SWP with the dosages of 1.755 and 3.510 g/kg could inhibit the degree of ear swelling significantly compared with the blank control group (p < 0.01), showing it owned good anti-inflammatory activity after 14 days administration.

Conclusion

SWP is effective on treating UC, especially at the high dose and the mechanism may be related with adjusting the serum level of NO, inhibiting colonic mucosa damage and promoting ulcer repair.     

玫瑰花挥发油对小鼠急性心肌缺血损伤的保护作用研究

目的探讨玫瑰花挥发油抗小鼠急性心肌缺血损伤的心肌保护作用及机制。方法采用ip异丙肾上腺素的方法制备小鼠急性心肌缺血模型,以玫瑰花挥发油(160、80、40 mg/kg)进行药物干预,通过HE染色和TTC染色观察小鼠心肌组织病理变化和心肌损伤程度,观察药物对小鼠心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)以及小鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响。结果 HE染色结果表明,玫瑰花挥发油160、80、40 mg/kg均可以明显改善小鼠心肌组织的病理性损伤情况;TTC染色结果发现,玫瑰花挥发油160、80、40 mg/kg可以显著减小小鼠心肌缺血区的面积;与模型组相比,玫瑰花挥发油160、80 mg/kg组小鼠心肌组织中SOD、GSH-Px的酶活性显著增强(P0.05、0.01),血清中LDH和CK-MB水平显著降低(P0.05、0.01)。结论玫瑰花挥发油对异丙肾上腺素所致的小鼠急性心肌缺血有一定的保护作用,作用机制可能与玫瑰花挥发油抑制氧自由基的产生、增强抗氧化酶活性,以及降低脂质过氧化损伤有关。     

黄连解毒汤对UC小鼠的抗炎作用、入血成分测定及其作用靶点的虚拟筛选

考察黄连解毒汤(HLJD)对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的作用,测定入血成分以及虚拟筛选入血成分的作用靶点,分析作用机制。将60只Balb/c小鼠随机分成空白组、模型组、美沙拉秦组(0.3 g·kg^-1)以及HLJD高、中、低剂量组(24.66,12.33,6.17 g·kg^-1)。除空白组外,各组小鼠自由饮用2.5%葡聚糖硫酸钠溶液诱导UC,同时HLJD组和美沙拉秦组小鼠灌胃给予相应药物,连续7 d。每日观察小鼠,进行疾病活动指数(DAI)评分。实验末,HE染色观察小鼠结肠病理变化,ELISA测定结肠组织中IL-1β,IL-6和TNF-α含量,UPLC-Q-TOF-MS测定入血成分。通过PharmMapper反向对接筛选入血成分的作用靶点,通过TTD,OMIM,GeneCards数据库检索UC疾病靶点,选取成分靶点和疾病靶点的交集作为HLJD治疗UC的作用靶点。利用STRING数据库进行GO和KEGG富集分析。利用Discovery Studio将入血成分与排名靠前的作用靶点进行分子对接。结果显示,与空白组相比,模型组小鼠DAI显著上升(P<0.05),镜下可见炎症细胞数量和浸润程度明显增加。与模型组相比,HLJD组小鼠DAI显著降低(P<0.05),炎症细胞数量和浸润程度减轻。模型组IL-1β,IL-6和TNF-α水平显著升高(P<0.01),HLJD组炎症因子水平显著降低(P<0.05)。经UPLC-Q-TOF-MS鉴定10个入血成分。网络药理学分析结果显示,作用靶点主要富集在对有机物、化学物质、含氧化合物的反应等129条生物过程,以及IL-17,TNF,hepatitis B等16条信号通路。分子对接结果显示,黄柏内酯、巴马汀和小檗碱可通过氢键等形式与CASP3和MMP9靶点结合。综上所述,HLJD可减轻DSS诱导的UC小鼠结肠黏膜炎症浸润和黏膜损伤,其作用机制可能与黄柏内酯、巴马汀和小檗碱等入血成分作用于CASP3,MMP9等靶点,进而调控IL-17,TNF等信号通路有关,最终可降低结肠组织IL-1β,IL-6和TNF-α水平发挥抗炎作用。     

基于斑马鱼模型的吴茱萸提取物肝毒性评价

目的 基于斑马鱼模型,通过生化指标、病理组织学、体内细胞凋亡检测和分子生物学技术整合评价模式对吴茱萸提取物肝毒性进行综合评价.方法 给予亚致死剂量(＜LC10)下的吴茱萸提取物24 h,测定丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartic aminotr...