AMP对IEC-6细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨外源AMP对IEC-6细胞增殖和凋亡的影响。方法IEC-6细胞分成4组,1个对照组和3个实验组（A1、A2、A3组）,实验组分别添加10、100、1000μmol/L的AMP,在第2、3、4、5、6天分别检测细胞增殖情况。收集培养48 h后的细胞,检测细胞周期,细胞凋亡和细胞内Ca^2＋水平。结果不同浓度的AMP都能够抑制IEC-6的增殖（P〈0.01）,改变细胞周期中各期细胞的相对构成,使得S期细胞数量减少,G0/G1期细胞数量增多。AMP能够诱导细胞凋亡,尤其是1 000μmol/L的AMP,使得细胞凋亡率明显高于对照（P〈0.01）。添加AMP后Ca2＋水平与对照组略有提高,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论外源AMP能抑制IEC-6细胞增殖,影响细胞周期,促进细胞凋亡,且作用与其补充浓度有关,但与钙离子浓度无关。     

黄芪多糖影响Ca2+调节蛋白及其复合体而促进IEC-6细胞迁移的研究

目的：观察黄芪多糖对小肠上皮细胞（IEC-6）迁移过程多胺信号通路Ca2+调节指标的影响,以探讨益气健脾中药黄芪促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法：划痕法造细胞迁移模型并观察黄芪多糖在无钙培养时对细胞迁移的影响;荧光定量PCR法检测TRPC1、STIM1和STIM2 mRNA表达;免疫荧光法检测STIM1蛋白分布及表达;Western Blot法检测TRPC1、STIM1和STIM2蛋白表达;免疫沉淀法检测STIM1/TRPC1、STIM1/STIM2蛋白复合体表达。结果：①无钙培养（去除胞外Ca2+内流来源）减弱了黄芪多糖促进细胞迁移的作用;②黄芪多糖对钙通道蛋白TRPC1的影响：能提高TRPC1mRNA和蛋白表达,逆转DFMO（多胺合成抑制剂）所致的TRPC1mRNA和蛋白表达降低;③黄芪多糖对Ca2+感受器正、负向调节蛋白（STIM1和STIM2）的影响：促进STIM1向胞膜移位并提高其表达,改善DFMO所致的STIM1向胞膜移位延迟及表达抑制;提高STIM1mRNA和蛋白表达,逆转DFMO对STIM1mRNA和蛋白表达的抑制;降低STIM2mRNA和蛋白表达,逆转DFMO对STIM2mRNA和蛋白表达的提高;④黄芪多糖对Ca2+调节蛋白复合体（STIM1/TRPC1、STIM1/STIM2）的影响：提高STIM1/TRPC1表达,逆转DFMO对STIM1/TRPC1表达的抑制;通过提高复合体中STIM1表达和降低STIM2表达而调节STIM1/STIM2表达,并能拮抗DFMO对STIM1/ STIM2表达的影响。结论：黄芪多糖促进IEC-6细胞迁移的作用与其影响Ca2+调节蛋白及蛋白复合体表达有关。     

若羌灰枣多糖提取工艺优化研究

〔目的〕利用响应面分析法对新疆若羌灰枣多糖的提取进行优化,考察提取温度、时间、液料比对多糖提取率的影响。〔方法〕在单因素试验的基础上选取试验因素与水平,根据Box-Behnken试验设计原理,确定其最佳提取工艺条件为:提取时间1.68 h,提取温度78.27℃,液料比27.36∶1。〔结果〕在此最佳工艺条件下,枣多糖的提取率可达71.19%。〔结论〕在此基础上采用Sevage法除去枣多糖溶液中蛋白质,在样品、Sevage为1∶1,氯仿、正丁醇为4∶1的条件下,研究萃取次数对蛋白质和多糖的影响,得出最佳萃取次数为6次。     

响应面法优化超声辅助提取芒果多糖工艺

目的 确定芒果多糖的最佳超声辅助提取条件.方法 采用响应面法优化芒果多糖提取工艺,Plack-ett-Burman设计法对影响芒果多糖的提取条件进行筛选.选取的相关因素为超声温度、超声功率、超声时间、液料比以及提取次数,对影响最为显著的三个因素进行最陡爬坡实验,以确定中心点.通过Box-Benhnken De-sign实验得到最佳提取芒果多糖的工艺参数.结果 芒果多糖的最佳提取参数为液料比32:1(mL:g)、超声温度33℃、提取次数3次,实际多糖提取率是3.58％.结论 响应面法优化芒果多糖工艺研究是可靠的.     

响应面法优化黄芪多糖提取工艺研究

目的：确定黄芪多糖提取的最佳工艺。方法;方法：采用了苯酚硫酸法对黄芪多糖（APS）的含量进行测定,以APS得率为指标,拟用响应面法对主要工艺参数进行优化并得到回归模型,以确定黄芪多糖提取工艺。结果：响应面法优化提取工艺为：超声功率600w,提取时间45rain和料液比35：1,黄芪多糖得率为3．034％,该回归模型的预测值与实测值的相对误差〈1％,回归方程与实际情况拟合较好。结论：该法经济简便、科学合理。     

响应面法优化超声辅助提取沙棘叶多糖的工艺研究

目的 优选超声辅助提取沙棘叶中水溶性多糖的最佳工艺条件.方法 采用响应面法,以多糖提取率为响应值,通过回归分析建立各工艺参数与响应值之间的函数关系,并由此预测最佳工艺条件.结果 沙棘叶多糖的最佳超声辅助提取工艺条件为在80℃下、按料液比28ml/g超声提取35min,该条件下沙棘叶多糖提取率为4.47%,连续提取2次则多糖提取率为5.12%.结论 响应面法优化超声辅助提取沙棘叶多糖的预测准确、方便,所得最佳提取工艺高效、可行.     

响应面法对大黄多糖提取工艺优化研究

目的建立大黄多糖超声提取的优良工艺流程。方法采用超声提取工艺提取大黄多糖,以多糖得率为指标,以提取时间、液料比、提取温度及提取次数为参数,采用响应面设计方法对上述参数进行优化。结果采用超声提取大黄多糖的最佳工艺条件为提取时间140 min、提取温度100℃、液料比3∶1和提取次数3次。在此优化条件下最大提取率为7.40%。结论采用响应面法能够优化大黄多糖的超声提取工艺,提高得率。     

响应面法优化微波辅助提取苦瓜多糖工艺的研究

目的 优化苦瓜多糖的微波辅助提取工艺条件。方法 利用SAS软件和响应面分析相结合的方法,以料液比、微波功率以及提取时间为自变量,多糖提取率为响应值,研究各自变量及其交互作用对多糖提取率的影响。结果 微波辅助提取多糖的最佳条件为：微波功率413.10W,提取时间14.35min,料液比l∶19.22（W∶V）。多糖的平均提取率达到4.798%,与预测的理论值4.819%相差甚少。结论 响应面法优化微波辅助工艺提取苦瓜多糖所得到的条件参数具有一定的可靠性。     

超声辅助酶法优化鸡骨草多糖提取工艺与抗炎研究

目的：在单因素试验的基础上,采用响应面试验优化超声辅助酶法提取鸡骨草多糖的最佳工艺,并通过体外实验研究其抗炎活性。方法：单因素试验考查加酶量、液料比、酶解pH、酶解-超声功率、酶解-超声时间、酶解-超声温度对鸡骨草多糖提取率的影响,采用响应面试验优化多糖提取工艺。ELISA法检测炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10含量。结果：鸡骨草多糖最佳提取工艺：纤维素酶加酶量2.8%、液料比21∶1(mL/g)、酶解pH 5.0、酶解-超声功率250 W、酶解-超声时间90 min、酶解-超声温度49℃,提取率为13.26%。与LPS组比较,鸡骨草多糖可降低促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量,增加抗炎细胞因子IL-10含量,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：超声辅助酶法提取鸡骨草多糖效率高,获得的多糖具有较强的抗炎活性。     

响应面分析法优化白花蛇舌草水溶性多糖的提取工艺

[目的]利用响应面分析法(RSA)优化白花蛇舌草多糖的提取工艺。[方法]通过单因素试验考察提取温度、提取时间、料液比及提取次数4个因素对白花蛇舌草多糖提取率的影响,并在此基础上通过中心组合试验设计和响应面分析优化白花蛇舌草多糖的提取工艺。[结果]白花蛇舌草多糖的最佳提取工艺为:液固比为31.26∶1、提取温度为84.71℃、提取时间为2.07h,提取2次,在此条件下白花蛇舌草多糖提取量为6.721mg/g。[结论]采用RSA分析法优化得到的提取条件参数准确可靠,具有实用价值。     

ERp29基因的克隆及其在IEC-6细胞中的表达

目的克隆小鼠ERp29基因并在IEC-6细胞中表达.方法采用RT-PCR方法从小肠上皮细胞克隆该基因的编码区,经T-载体克隆并测序证实后构建真核表达载体,并转染IEC-6细胞,RT-PCR分析外源基因的表达.结果从小肠上皮细胞总RNA中成功地克隆了ERp29基因,序列测定结果表明克隆的序列与数据库中序列完全一致.构建的真核表达载体与预期一致,表达质粒转染细胞后的RT-PCR分析结果表明:外源的质粒得到了有效的表达.结论成功地克隆了ERp29基因,并获得真核表达.     

响应面法优化超声辅助提取南板蓝根多糖工艺

【目的】采用优选超声波法提取南板蓝根多糖的最佳工艺条件,为南板蓝根多糖的开发研究提供理论依据。【方法】选定提取温度、时间及水料比作为影响因素,以南板蓝根多糖提取率为评价指标。在单因素试验的基础上,通过3因素3水平Box-Behnken设计试验,建立多糖提取率的二次多项式回归方程,采用响应面回归分析得到优化组合条件。【结果】最佳提取工艺为提取温度60℃,提取时间35 min,水料比24．5∶1（V∶m, mL/g）,南板蓝根多糖的提取率为83．7 mg/g。【结论】此方法具有简单、快捷、高效等优点,可为南板蓝根多糖的综合开发应用奠定理论基础。     

响应面法优化诺丽多糖提取工艺

目的采用响应面法对诺丽多糖的提取工艺进行优化。方法在单因素实验的基础上,以提取温度、液料比、提取时间为自变量,总多糖含量为响应值,研究各因素及其交互作用对总多糖得率的影响。结果最优工艺条件为,液料比为1∶40g·m L-1,提取温度为100℃,浸提时间为4h,提取实际值为9.677mg·g-1。结论采用响应面法优化诺丽总多糖提取工艺是合理可行的,实验结果将为诺丽多糖新产品研发提供物质基础。     

响应面法优化白背三七多糖的提取工艺

以白背三七为原料,采用微波辅助法提取白背三七多糖。在单因素实验的基础上,采用响应面法优化白背三七多糖的提取工艺。实验结果表明,影响微波辅助提取白背三七多糖的主要因素依次为:液料比、微波时间、微波功率,其中料液比对提取率的影响达到了极其显著水平。白背三七多糖提取的最佳工艺参数为:液料比45∶1(mL/g)、微波功率390 W、微波时间22 min。在此条件下,白背三七多糖的提取率为15.36%,与模型预测值接近。因此,采用响应曲面法优化得到的工艺条件具有一定的实际应用价值。     

响应面分析法优化金樱子多糖的酶提取工艺

目的：采用响应面分析法优化金樱子多糖的酶提取工艺。方法在单因素试验基础上,采用响应面设计法考察酶解时间、酶解温度和酶添加量对多糖提取条件的影响,并以最佳水平为中心点,多糖提取率为响应值,依据Design-Expert 8.0.5软件对各试验点的响应值进行回归分析。结果在分析各因素的显著性和交互作用后,得出金樱子多糖的酶提取最佳工艺条件为：提取温度65℃,酶用量594 U·g-1,提取时间2.3 h,pH 5.0。在此条件下,金樱子多糖的提取率为14.49%,与理论提取率(14.72%)接近。结论在响应面分析法优选出来的最佳条件下,金樱子多糖的实际提取率与理论提取率接近,说明响应面分析法优选金樱子多糖的酶提取工艺条件可行。     

响应面法优化微波协助提取光慈姑多糖的工艺研究

目的:研究微波协助提取光慈姑多糖的最佳提取条件。方法:通过响应面试验设计,得到微波提取光慈姑多糖的数学回归方程;对影响光慈姑多糖提取率的关键因素及相互作用进行探讨,并得到最佳提取工艺条件。结果:最佳提取工艺条件:微波功率660 W,液料比8.7∶l,处理时间13.1min,光慈姑多糖提取率理论最大值可为10.34%。结论:响应面法较好的拟合了微波协助提取光慈姑多糖工艺过程。     

藏药鬼箭锦鸡儿中多糖提取工艺的响应面法优化

目的:优化藏药鬼箭锦鸡儿中多糖的提取工艺。方法:以鬼箭锦鸡儿中多糖提取率为指标,采用苯酚-硫酸法测其多糖含量,单因素实验确定提取因素水平,响应面法优化提取工艺。结果:鬼箭锦鸡儿中多糖最佳提取工艺为:提取所需时间3 h,提取所用料液比1:21 g/mL,乙醇浓度90%,多糖平均提取率为7.18%,与理论预测值7.19%的相对标准偏差为0.2201%。结论:该模型模拟得到的多糖提取工艺条件科学合理、准确可靠,为鬼箭锦鸡儿的开发利用提供了参考数据。     

微波辅助提取金钗石斛多糖的响应面优化

目的使用响应面法优化微波辅助提取金钗石斛多糖的工艺。方法金钗石斛多糖提取率为响应值,在单因素实验基础上,以响应面法优化金钗石斛多糖微波辅助提取工艺,采用Box-Behnken进行制备工艺设计,综合分析料液比、提取时间、提取温度因素之间的交互作用对提取率的影响。结果金钗石斛多糖提取的最优条件是:料液比(A)为1∶28.2,提取时间(B)为10.68 min,提取温度(C)为67.30℃,提取率预测值为18.91%。实际平均提取率为19.75%,相对误差小于1%,水提醇沉法多糖提取率(12.38%)之间具有极其显著性差异。结论微波辅助法能提高金钗石斛多糖提取率,采用响应面法对该方法进行工艺优化,所得工艺条件稳定可靠,方便可行。     

响应面分析法优化地木耳多糖提取工艺的研究

目的:研究地木耳多糖的水提法优化工艺.方法:采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,以多糖得率为考察指标,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法对地木耳多糖提取工艺进行优化研究.结果:提取温度、提取时间以及液料比与响应值地木耳多糖得率存在显著的相关性,最佳提取工艺条件:提取温度99℃,时间3.76 h,液料比52.1∶1,提取3次,在此条件下地木耳多糖得率理论值达到7.70%,验证试验的多糖得率为7.54%,地木耳多糖样品中多糖含量为53.5%.结论:该优化工艺的多糖得率高,可用于地木耳多糖的提取.     

中心组合设计——响应面法优化猪苓多糖提取工艺

目的：优化猪苓多糖提取工艺。方法：以猪苓中多糖得率为响应值,采用中心组合设计（CCD）-响应面法（RSM）对其提取工艺进行研究。结果：最优工艺参数为液固比11：1,醇沉浓度77%,提取温度95℃,提取时间2.73 h,提取2次。结论：中心组合设计-响应面法可在连续范围内进行分析,具有实验周期短、精密度高的优点。优化结果可为制剂生产提供参考依据。