LC-MS法测定人血浆中氨氯地平浓度及其生物等效性评价

目的建立液相-质谱联用（LC-MS）法测定人血浆中氨氯地平浓度，并进行两种制剂的生物等效性评价。方法采用随机双交叉试验设计，18名健康受试者口服受试制剂和参比制剂5mg，用LC-MS法测定人血浆中氨氯地平浓度。结果受试制剂和参比制剂的主要药动学参数：AUC0→t分别为（104．01±26．03）和（101．91±24．67）ng·h·ml^-1；AUC0→∞分别为（113．96±30．66）和（110．29±27．67）ng·h·ml^-1；Cmax分别为（2．44±0．40）和（2．43±0．38）ng·ml^-1；tmax分别为（7．28±2．92）和（7．50±3．04）h；t1／2分别为（33．33±6．30）和（30．93±4．18）h。受试制剂的相对生物利用度为（103．34±6．69）％。两种制剂主要动力学参数经统计学检验无显著性差异（P〉0．05）。结论该方法简单、快捷、准确，氨氯地平片的受试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中阿那曲唑的浓度及生物等效性研究

目的:建立人血浆中阿那曲唑的高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)测定方法,并评价两种阿那曲唑片的药动学和人体生物等效性。方法:12名男性健康受试者随机交叉口服阿那曲唑受试制剂和参比制剂各2mg,采用HPLC-MS/MS测定血药浓度,并计算其药动学参数,考察其生物等效性。结果:阿那曲唑的受试制剂与参比制剂Cmax分别为(33.31±7.31)、(32.37±5.71)μg/L,Tmax分别为(1.53,1.02)、(1.72,1.64)h,t1/2分别为(44.26±10.10)、(44.51 9.80)h,AUC0-120分别为(1420.52 324.79)、(1365.49 244.60)μg/h/L,AUC0-分别为(1707.07 508.03)、(1631.89 361.07)μg/h/L。与参比制剂相比,受试制剂的相对生物利用度为(104.7 18.6)%。结论:本方法特异性强,重复性好,灵敏度高,测定结果可靠。阿那曲唑片受试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

LC-MS/MS测定尿样瑞舒伐他汀浓度及人体药动学研究

目的 建立HPLC-MS/MS法测定尿样中的瑞舒伐他汀浓度,研究其在健康国人体内的药动学特征.方法 选择匹伐他汀为内标,尿样经叔丁基甲醚提取,采用GL Nuclosil C18(2 mm×50 mm,5 μm),以甲醇-水-甲酸(70:30:1)为流动相,流速0.25 mL·min-1;质谱检测为正离子方式下的MRM扫描.24例健康男性受试者随机等分为3组,分别每日空腹口服瑞舒伐他汀5,10和20 mg,连续7 d,测定药后不同时间段的尿药浓度.结果 瑞舒伐他汀的线性范围为2～500 μg·L-1(r=0.999 8),最低检测质量浓度为2 μg·L-1,提取回收率＞75%,日内和日间RSD均≤11.4%.受试者服药后的最大排泄速率均出现在药后5 h左右,消除半衰期t1/2为11.2～15.8 h,累积排泄率为10%,比白种人高约2倍.结论 在本研究剂量范围内,瑞舒伐他汀呈线性动力学特征,中国人与白种人的药动学特征存在明显的种族差异.     

HPLC-MS/MS测定人血浆阿奇霉素浓度及生物等效性研究

目的 建立人血浆中阿奇霉素的高效液相色谱/质谱/质谱(HPLC-MS/MS)测定法,测定受试者口服阿奇霉素颗粒后的血药浓度,并对受试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法 19名健康受试者采用随机双交叉试验设计,单剂量口服阿奇霉素颗粒受试制剂和参比药物各500 mg,用HPLC-MS/MS测定用药后不同时间血药浓度。血药浓度-时间数据经DAS 2.0统计软件处理,计算主要药动学参数,并进行两种制剂的生物等效性评价。结果 受试制剂和参比制剂的T_max分别为(2.5±1.1)h和(2.6±1.7)h,C_max分别为(574.6±209.2) ng·mL^-1和(594.5±229.9) ng·mL^-1,t_1/2分别为(44.7±15.2) h和(42.0±13.0) h,AUC_0-144分别为(5 319.6±2 507.8) h·ng·mL^-1和(5 710.7±2 710.1)h·ng·mL^-1,AUC^_0-∞分别为(5 704.2±2 858.7) h·ng·mL^-1和(6 010.0±2 808.1) h·ng·mL^-1, 以AUC_0-144计算,相对生物利用度为(94.2±15.7)%。两制剂的主要药动学参数无显著性差异。结论 受试制剂与参比药物生物等效。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中阿霉素的药物浓度及应用

目的：建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中阿霉素的血药浓度,并用于阿霉素载药纳米粒的体内药动学研究。方法色谱柱采用Shim-pack XR-ODS柱（2.0 mm＆#215;100 mm,2.2μm）,仪器采用API 4000三重四极杆串联质谱仪,采用多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）定量离子对为m/z544.2→m/z396.9（阿霉素）和m/z357.3→m/z133.8（吡格列酮,内标）;甲醇沉淀蛋白法处理样品。结果阿霉素在2.0-2000μg/L范围内线性关系良好,定量下限为2.0μg/L,血浆中的内源性物质不干扰阿霉素的测定;日内和日间精密度RSD均小于±15.0%;阿霉素低、中、高3个QC浓度的提取回收率分别为（92.1±5.9）%、（82.8±2.9）%和（80.1±9.7）%,基质效应分别为（91.1±2.4）%、（82.1±1.7）%和（81.2±2.5）%。结论该方法适用于阿霉素纳米粒在大鼠体内的药物动力学研究。     

LC-MS法测定人血浆中盐酸氨溴索颗粒浓度及生物等效性研究

目的建立人血浆中盐酸氨溴索浓度的HPLC-MS方法,用以测定健康志愿者口服盐酸氨溴索颗粒后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药代动力学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度。方法血浆中加入内标红霉素后,乙醚提取,HPLC-MS分离-分析。色谱系统:Phenomenex Luna CN柱150 mm×2.0 mmI.D.3μm,甲醇∶水(含0.1%甲酸)=46∶54为流动相,流速0.2 mL/min,柱温30℃。质谱检测方式:SIM。结果盐酸氨溴索线性范围为3.125~800 ng/mL,最低检测浓度为3.125 ng/mL,提取回收率78.374%~93.130%。测定22名健康志愿者单剂量交叉口服盐酸氨溴索颗粒(受试制剂)及盐酸氨溴索片(参比制剂)90 mg后的血药浓度经时过程,受试制剂和参比制剂的主要药代动力学参数:Cmax294.075 ng/mL和297.870 ng/mL;Tmax 1.705 ng/mL和1.523 ng/mL;t1/28.646 h和9.495 h,无显著差异;受试制剂的相对生物利用度为(103.2±38.4)%。结论本法专属、准确、灵敏。统计学结果表明受试制剂和参比制剂生物等效。     

LC-ESI-MS/MS快速测定人血浆中匹伐他汀浓度

目的 建立一种快速灵敏测定人体血浆中匹伐他汀浓度的高效液相色谱串联质谱检测方法。方法 以Agilent C18柱(4.6 mm×150 mm,3.5 μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.005 mol·L^-1甲酸铵水溶液-乙腈-1%甲酸水溶液(7.5∶2.5∶70∶20);流速：0.5 mL·min^-1,柱温：40 ℃。采用选择反应监测(SRM)对匹伐他汀(m/z 422.2→290.2)和内标瑞舒伐他汀(m/z 482.2→258.2)进行测定。结果 匹伐他汀高(80 μg·L^-1)、中(50 μg·L^-1)、低(0.25 μg·L^-1)3个浓度的平均回收率RSD均小于15%;线性范围为：0.1~100 μg·L^-1,回归方程为Y=1.222 6X-1.056 1×10^-4,r=0.996 0。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于匹伐他汀临床血药浓度监测和药动学研究。     

液质联用法测定人血浆中罗红霉素及其生物等效性研究

目的：建立人血浆中罗红霉素高效液相色谱-质谱联用测定法（HPLC-MS）,研究罗红霉素胶囊的生物等效性。方法：采用双交叉试验设计,血样用乙酸乙酯-异丙醇（95：5）混合液提取,HPLC-MS分离测定,根据血药浓度-时间数据估算主要药动学参数和相对生物利用度,评价生物等效性。结果：罗红霉素两制剂的t1/2分别为（9.2±3.7）和（9.3±4.0）h,Tmax分别为（2.1±0.6）和（2.1±0.8）h,Cmax分别为（11823.0±3157.0）和（11856.0±2970.0）ng/ml,AUC0-t分别为（148800.0±42312.0）和（136443.0±39653.0）ng·h/ml。AUC0-∞分别为（162808.0±48977.0）和（149650.0±48077.0）ng·h/ml。受试制剂的相对生物利用度为（111.2±22.9）%。受试制剂AUC0-t和Cmax的90%置信区间为参比制剂相应参数的100.9%～117.8%和91.3%～107.4%,符合生物等效性指导原则。结论：本法简便,灵敏准确。罗红霉素两制剂生物等效。     

HPLC-FLU法测定血浆中替米沙坦浓度及其人体生物等效性研究

目的建立替米沙坦血药浓度的HPLC-FLU测定法,用于人体生物等效性研究。方法采用单剂量双交叉实验设计,用HPLC-FLU法测定20名健康受试者口服两种替米沙坦片剂40mg后的血药浓度。结果受试制剂和参比制剂药-时曲线均符合一房室模型,cmax为(225.70±99.20)和(238.11±102.17)μg/L,tmax为(1.8±0.7)和(1.7±0.8)h,t1/2为(24.5±4.7)和(24.9±3.9)h,AUC为(1938.22±557.12)和(1998.26±593.34)μg/(h·L),受试制剂的相对生物利用度为96.6(5.3%。结论经统计学分析,两种片剂具有生物等效性。     

用HPLC-ESI-MS法研究盐酸氟桂利嗪生物等效性

目的评价两种国产氟桂利嗪胶囊剂人体生物等效性。方法采用单剂量双交叉实验设计,用HPLC-MS法测定20名健康受试者口服两种氟桂利嗪胶囊20mg后的血药浓度。结果受试制剂和参比制剂药-时曲线均符合一房室模型,t1/2分别为(2.43±0.56)和(2.38±0.43)h,tmax为(2.67±0.82)和(2.74±0.80)h,cmax为(63.37±15.36)和(64.07±14.43)ng/mL,AUC为(130.36±15.20)和(128.47±20.87)ng/(h·mL),受试制剂的相对生物利用度为(101.5±6.3)%。结论经统计学分析,两种国产胶囊具有生物等效性。     

马来酸依那普利片的人体生物等效性研究

目的 用HPLC-MS测定健康受试者口服马来酸依那普利制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药动学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度.方法 采用随机二交叉设计试验,20例男性健康志愿受试者,单剂量口服受试制剂和参比制剂的马来酸依那普利片.以高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中依那普利和依那普利拉的浓度.采用SPSS及BAPP2.2软件处理计算主要药动学参数.结果 受试制剂和参比制剂血浆中马来酸依那普利的t1/2分别为(1.33±0.22)和(1.25±0.37)h;ρmax分别为(238.59±55.40)和(230.61±78.29) μg·L-1,tmax分别为(0.70±0.20)和(0.80±0.20)h,AUC0-8h分别为(339.03±70.66)和(373.23±108.83) μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(343.51±71.15)和(378.36±107.35)μg·h·L-1.依那普利拉的t1/2分别为(6.26±0.63)和(5.72±0.54)h;ρmax分别为(83.75±25.91)和(99.13±29.61)μg·L-1,tmax分别为(3.80±0.60)和(3.40±0.70)h,AUC0-36h分别为(812.02±181.88)和(803.35±199.50)μg·h·L-1,AUC0-∞分别为(832.99±180.85)和(817.36±201.78)μg·h·L-1,以依那普利和依那普利拉计算的人体相对生物利用度分别为(90.84±39.6)%和(102.8±31.3)%.结论 两种制剂在健康人体内具有生物等效性.     

UPLC-MS/MS测定人血浆中咪达那新的浓度及其生物等效性研究

用UPLC-MS/MS测定人血浆中咪达那新的浓度,并应用于咪达那新片在中国健康受试者中的药代动力学及生物等效性研究。采用Acquity UPLC BEH C₈(2.1 mm×50 mm,1.7 μm)色谱柱,流动相A为2 mmol/L乙酸铵溶液(含0.2%乙酸),B为乙腈,梯度洗脱。采用液液萃取的前处理方法减小血浆样品的基质效应。质谱条件为正离子模式,咪达那新和咪达那新-d10 的检测离子分别为m/z 320.2→238.1和m/z 330.2→248.2。临床试验采用单剂量双周期自身交叉试验设计,24例健康受试者空腹条件下口服咪达那新片参比制剂或受试制剂。使用上述检测方法检测生物样品中咪达那新的含量,后用DAS3.2.8软件进行药代动力学及生物等效研究。咪达那新在10.0~1 000 pg/mL范围内线性良好,低、中、高浓度的样品提取回收率分别为84.0%、88.0%、90.0%,基质效应分别为105%、100%、101%。参比及受试制剂的药代动力学参数c_max分别为524.8和612.6 pg/mL,t_max分别为1.250和1.063 h,AUC_0-∞分别为2 229和2 466 pg/mL·h,参比制剂及受试制剂生物等效。     

LC-MS法鉴定利伐沙班有关物质

采用LC-MS法对利伐沙班有关物质进行结构鉴定。采用Inert Sustain C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以含0.2%甲酸的乙腈-水为流动相线性梯度洗脱,对利伐沙班及其强制降解产生的有关物质进行分离;电喷雾正离子化高分辨TOF/MS检测,结合MS/MS法和对照品对照鉴定各有关物质的结构。在所建立的条件下,利伐沙班及其有关物质分离良好,检测到15个有关物质,分别为利伐沙班合成起始原料或由起始原料引入的有关物质(3个)、合成副产物(4个)和降解产物(10个)。建立的LC-MS法能有效鉴定利伐沙班有关物质,为其工艺过程控制和质量保障提供参考依据。     

HPLC-MS/MS法研究苯磺酸氨氯地平在健康志愿者体内药代动力学及生物等效性

采用高效液相色谱-质谱/质谱(HDLC-MS/MS)法研究苯磺酸氨氯地平片在健康人体内的药代动力学及生物等效性。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中阿戈美拉汀的浓度

目的采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中阿戈美拉汀血药浓度,并将该方法应用于药动学研究中。方法血浆样品经碱化后,采用乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比4∶1)萃取,以托莫西汀为内标,采用HPLC-MS/MS法测定。色谱柱为Agilent Eclipse plus C18(4.6 mm×150 mm,3.5μm),流动相为甲醇-水(体积比95∶5,含0.005 mol.L-1甲酸铵和质量分数0.1%甲酸),流速为0.5 mL.min-1,柱温为40℃;质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,选择性离子检测(MRM),阿戈美拉汀m/z为244.2→185.2,托莫西汀m/z为256.1→44.1。结果阿戈美拉汀质量浓度在0.025～10μg.L-1范围内线性关系良好,提取回收率在84.45%～86.94%之间,批内、批间精密度分别小于3.76%、12.23%。结论本文建立的用于测定人血浆中阿戈美拉汀的HPLC-MS/MS方法快速、准确、灵敏,可用于药动学研究及治疗药物监测。     

LC-MS/MS法测定人尿液中布南色林及其代谢物的浓度

目的 建立测定人尿液中布南色林及其代谢产物N-去乙基布南色林(布南色林C)的药物质量浓度方法.方法 尿液样品0.5 mL经饱和H2CO3水溶液0.2 mL碱化后用乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比4∶1)萃取,布南色林与布南色林C分别以布南色林B和布南色林D为内标,采用LC-MS/MS法测定.色谱柱为Agilent Eclipse plus C18(4.6mmx150mm,3.5 μm),以乙腈-水(体积比87∶13,含0.005 mol·L-1甲酸铵和质量分数0.1％甲酸)为流动相,流速为0.5 mL·min-1,柱温为40℃;质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,选择性离子监测(SRM),用于定量分析的离子反应分别为m/z 368.2→297.2(布南色林),m/z396.3→297.2(布南色林B),m/z 340.2→297.1(布南色林C),m/z 356.2→313.3(布南色林D).结果 布南色林和布南色林C在10 ～2000ng· L-1(r2 =0.997)范围内线性良好,其平均回收率分别为93.54％和74.50％以上,日内、日间精密度RSD值分别小于8.6％与16.4％.结论 本试验建立的布南色林及布南色林C尿药质量浓度的测定方法简便、快速、准确、灵敏,可用于临床研究中布南色林及其代谢物的药动学研究与治疗药物监测.     

HPLC-MS/ESI测定人血浆中阿立哌唑的浓度

目的 建立测定人血浆中阿立哌唑的HPLC-MS,并用于研究阿立哌唑在精神分裂症患者体内的药动学.方法 血浆样品中加入内标艾司唑仑,用叔丁基甲醚萃取.色谱柱为Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈-30 mmol·L-1醋酸铵缓冲液-甲酸(42∶58∶0.1),流速0.35 mL·min-1.采用电喷雾电离源正源(ESI+),选择离子检测方式,用于定量分析的检测离子为m/z 448,450(阿立哌唑)和m/z 295(内标).结果 阿立哌唑在19.90～1 119.60 μg·L-1内线性关系良好(r=0.999 9),最低定量质量浓度为1.00 μg·L-1(S/N=10),方法回收率在97.2%～103.5%之间,日内与日间RSD均小于8.0%(n=5).结论 该方法灵敏度高,结果准确,适用于治疗剂量阿立哌唑体内药动学的研究.     

LC-MS/MS同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸及其生物等效性研究

建立了同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸浓度的LC-MS/MS方法。采用50%乙酸水溶液作为稳定剂,采用冰浴条件下蛋白沉淀后取上清液吹干复溶的方法进行血浆样品前处理。采用Hedera ODS-2(2.1 mm×150 mm)色谱柱进行梯度洗脱,水相为含0.2%乙酸的水溶液,有机相为甲醇。选择三重四极杆串联质谱仪(Triple Quad TM 6500⁺),采用电喷雾离子化方式(ESI),在多反应监测(MRM)模式下进行负离子检测,同时对阿莫西林(364.1→223.1)和克拉维酸(198.1→135.9)进行定量分析。结果表明,阿莫西林在20.0~5 000 ng/mL范围内线性关系良好,克拉维酸在10.0~2 500 ng/mL范围内线性关系良好,批内和批间准确度偏差均在±15.0%内,批内和批间精密度均小于15.0%,基质效应、回收率均满足接受标准,阿莫西林和克拉维酸在试验条件下稳定性良好。采用该方法对健康受试者服用受试制剂阿莫西林克拉维酸钾颗粒1袋(每袋颗粒中含有125 mg的阿莫西林和31.25 mg的克拉维酸钾)和参比制剂阿莫西林克拉维酸钾干混悬剂Augmentin^® 5 mL(每5毫升干混悬剂中含有125 mg的阿莫西林和31.25 mg的克拉维酸钾)进行阿莫西林和克拉维酸的血药浓度测定,进行非房室模型药代动力学参数的估算分析,计算阿莫西林和克拉维酸的药代动力学参数,评价受试制剂与参比制剂是否等效,评估饮食对阿莫西林和克拉维酸的药代动力学的影响。实验结果表明,该方法经考察符合生物样品的分析要求,可以应用于阿莫西林克拉维酸临床血药浓度的测定和生物等效性研究。     

新型抗凝药物利伐沙班的治疗新进展

<正>血栓栓塞性疾病是人类致残和导致死亡的重要原因之一[1]。血栓的形成是深静脉血栓、肺栓塞、房颤时心房血栓、脑梗死、心肌梗死等心脑血管疾病的重要致病因素[2]。抗栓治疗则是这些疾病预防策略和抢救治疗的核心,其中抗凝治疗则是抗栓治疗的关键之一[3-5]。目前传统的抗凝药物有普通肝素、低分子肝素和     

LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布含量及其药动学研究

目的 建立测定人血浆中依折麦布和总的依折麦布浓度的LC-MS/MS方法,进行依折麦布片po给药的药动学研究.方法 22名志愿者血样经叔丁基甲醚萃取吹干重组后进样测定依折麦布浓度,另取血样经β-葡萄糖苷酸酶水解后叔丁基醚萃取吹干重组后进样测定总的依折麦布浓度.分析柱:Capcell C18柱(2 mm&#215;50 mm,5μm),内标(IS)13 C6-依折麦布.流动相:5mmol&#183;L-1醋酸铵水溶液(A泵)和乙腈(B泵)组成,梯度洗脱.采用电喷雾去质子化三重四极杆二级串联质谱,多反应监测方式(MRM)测定样品浓度,依折麦布的监测离子对为m/z 408.5→m/z 270.8,内标为m/z 414.5→m/z 276.8.结果 依折麦布在0.020～20μg&#183;L-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 4(n=9).总的依折麦布在0.25～250μg&#183;L-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 8(n=9).最低定量线(LLOQ)、低、中、高浓度的依折麦布和总的依折麦布质控样品的日内、日间精密度均小于12%,方法回收率在97%～104%内.志愿者口服10 mg依折麦布后采血72 h,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数分别为AUC0-inf(121.9&#177;41.7)和(536.8&#177;182.7)μg&#183;h&#183;L-1;AUC0-t(102.1&#177;31.4)和(478.8 4&#177;170.0)μg&#183;h&#183;L-1;ρmax (4.9&#177;1.6)和(48.46&#177;17.3)μg&#183;L-1;tmax(5.2&#177;6.4)和(1.5&#177;0.9)h;t1/2(26.4&#177;28.8)和(22.5&#177;11.0)h;MRT(23.6&#177;3.8)和(19.7&#177;3.8)h.结论 该方法符合生物样品分析要求,可用于依折麦布血浆浓度的测定,依折麦布和总的依折麦布的药动学参数与文献相近.