嗅球电刺激对成年大鼠室管膜下区神经发生的影响

目的 探讨嗅球电刺激对成年大鼠室管膜下区(SVZ)神经前体细胞(NPC)增殖及其向嗅球迁移的影响,并对其相关机制进行初步探讨. 方法 SD大鼠80只按随机数字表法分为正常对照组、假刺激组、电刺激ld组、电刺激3d组、电刺激1周组、电刺激2周组、电刺激3周组、电刺激4周组,每组10只,后6组大鼠制备嗅球电刺激模型,以5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记新生细胞,免疫组化染色观察大鼠SVZ区内源性NPC的增殖,RT-PCR检测嗅球内Prokineticin 2 (prk2)mRNA的表达；另取大鼠15只,按随机数字表法分为正常对照组、假刺激组和电刺激4周组,每组5只,免疫组化染色观察嗅球内Brdu阳性细胞的表达. 结果 8组大鼠SVZ区Brdu阳性细胞数不同,差异有统计学意义(F=51.475,P=0.000).与正常对照组和假刺激组比较,电刺激ld、3d、l周、2周组大鼠刺激侧Brdu阳性细胞增高,差异有统计学意义(P＜0.05)；8组大鼠嗅球内prk2 mRNA的表达不同,差异有统计学意义(F=154.067,P=0.000).与正常对照组和假刺激组比较,电刺激ld、3d、l周、2周、3周、4周组prk2 mRNA增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；3组大鼠嗅球内Brdu阳性细胞数不同,差异有统计学意义(F=36.472,P=0.000).电刺激4周组嗅球内Brdu阳性细胞数较正常对照组和假刺激组明显增多,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 电刺激嗅球可促进SVZ区NPC的增殖并向嗅球迁移,这可能与电刺激提高嗅球内Prk 2的表达水平有关.     

电刺激治疗对脑梗死大鼠运动功能和脑组织微管相关蛋白-2及存活素表达的影响

目的探讨电刺激对脑梗死大鼠运动功能和脑组织微管相关蛋白-2(MAP-2)及存活素表达的影响。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑梗死模型。制模后24h起,分别给予大鼠瘫痪侧(单侧)或双侧肢体电刺激治疗3d、7d、14d和21d。电刺激前、后各时间点用平衡木试验(BWT)检测大鼠的肢体运动功能,用免疫组化染色检测梗死灶周围大脑皮质MAP-2和存活素的表达水平,并与脑梗死对照组和假手术组大鼠比较。结果治疗第7d起电刺激组大鼠瘫痪肢体的BWT评分明显高于对照组(均P<0.05),治疗14d起双侧电刺激组BWT评分明显高于单侧电刺激组(均P<0.05)。治疗第7d起,电刺激组梗死灶周围脑组织MAP-2表达水平明显高于对照组(均P<0.05);治疗14d起,双侧电刺激组MAP-2的表达水平明显高于单侧电刺激组(均P<0.05);治疗21d时与假手术组MAP-2表达水平比较差异无统计学意义。电刺激组治疗后各时间点梗死灶周围脑组织存活素表达水平明显高于假手术组(均P<0.05),治疗7d、14d存活素表达水平明显高于对照组(均P<0.05),达到高峰;而双侧电刺激组明显高于单侧电刺激组(均P<0.05);治疗21d时,电刺激组和...     

高压氧治疗对家兔实验性大脑中动脉闭塞后梗死灶周围巢蛋白表达的影响

目的 探讨高压氧(HBO)治疗对兔大脑中动脉闭塞(MCAO)模型梗死灶周围巢蛋白(nestin)表达的影响.方法 制备兔右侧MCAO模型.将动物分为3组,即MCAO+HBO治疗组(30只):MCAO后立即行HBO治疗,每天1次,连续20 d;MCAO对照组(30只):MCAO后不行HBO治疗;假手术组(10只):仅开颅不闭塞血管.分别于MCAO后10d、20 d观察其行为学、梗死体积变化.并用免疫组化法检测距梗死灶中心3 mm内皮层脑组织内nestin的表达.结果 MCAO后.MCAO+HBO治疗组行为学评分高于MCAO对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MCAO+HBO治疗组脑梗死体积小于MCAO对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MACO后10 d、20 dMCAO+HBO治疗组nestin免疫阳性细胞数05.88±1.2、20.03±1.6)高于MCAO对照组(6.63±1.6、6.82±0.8),差异有统计学意义(P<0.05).结论 早期、连续20 d HBO治疗对兔MCAO后的神经行为学、梗死体积有明显的治疗效果,并促进兔MCAO后梗死灶周围脑组织内nestin的表达.     

功能性电刺激促进急性脑梗死大鼠脑部内源性神经干细胞增殖的研究

目的 研究功能性电刺激(FES)对急性脑梗死大鼠行为学和内源性神经干细胞(NSC)增殖的影响.探讨FES治疗改善脑梗死后神经功能的机制. 方法 54只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为FES治疗组、安慰刺激组和假手术组(每组各18只).行大脑中动脉阻断(MCAO)制作局灶性脑梗死模型后第3天,FES治疗组开始接受FES治疗(10 min/d,每天1次),安慰刺激组阻断动脉但不予电刺激.在FES治疗后3、7、14d评价大鼠行为学功能(平衡木行走测评、转棒上行走测评、网屏试验),免疫组织化学法观察大鼠海马齿状回和室管膜下区NSCs巢蛋白(nestin)的表达水平.Western blot法检测梗死侧脑组织nestin总蛋白表达量. 结果 FES治疗组网屏试验评分在治疗后14 d时低于安慰刺激组,比较差异有统计学意义(P<0.05).FES治疗组大鼠海马齿状回和室管膜下区nestin阳性细胞数和梗死侧脑组织nestin总蛋白表达量在治疗后7d、14d时均高于安慰刺激组和假手术组,比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 FES能促进急性脑梗死大鼠脑部内源性NSCs的增殖并改善大鼠行为学功能,这可能是FES治疗改善脑梗死后神经功能的机制之一.     

缺血性卒中大鼠海马的Notch信号通路功能的动态变化

目的 研究Notch通路在局灶性缺血性脑卒中大鼠海马的动态变化,探讨该通路对缺血性卒中后内源性神经前体细胞再生的调控作用.方法 以大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立大鼠局灶性脑缺血模型,通过Western blotting法以及Real-time RT-PCR法,于术后19 d、28 d检测海马Notch通路下游靶基因Hes 1、Hes 5的蛋白和mRNA表达.结果 术后19 d,MCAO组Hes 1、Hes 5蛋白及mRNA表达均分别高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05),28 d时MCAO组Hes 1、Hes 5的蛋白及mRNA表达下降,较之对照组差异有统计学意义(均P＜0.05),而且低于19 d时Hes 1、Hes 5的表达,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 卒中后的内源性神经再生机制中可能有Notch通路活性动态变化的机制参与,卒中后期Notch通路活性的显著下调可能是促进增殖的神经前体细胞向神经元方向分化的重要分子机制.     

脑缺血后内源性激活神经干细胞的机制研究

1 脑缺血后内源性神经干细胞的自身激活 近年来研究表明,脑缺血后自身的神经干细胞有大量的增殖分化[1,2],说明神经干细胞可能参与脑缺血的病理生理过程.Zhang等通过建立沙鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,观察缺血再灌注后不同时期的室管膜下层(SVZ)、海马颗粒细胞层(DG)、嗅球以及梗死灶周边皮质的神经干细胞增殖、分化情况,发现7 d后在梗死同侧脑SVZ出现神经干细胞增殖高峰,14 d达最高,而DG区则无增殖,且14 d后远离梗死区的嗅球有大量的神经干细胞增殖,但28 d后,标记Brdu阳性细胞大量减少,说明脑缺血只引起短暂的神经干细胞的增殖,Zhang认为是脑缺血损伤的应急保护反应[3].     

电刺激嗅球对脑缺血再灌注大鼠内源性神经干细胞增殖、迁移及分化的影响

目的：探讨嗅球电刺激对脑缺血再灌注大鼠脑内神经发生的影响。方法将健康雌性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、电刺激组、假刺激组,其中脑缺血再灌注组、电刺激组,以线栓法建立大鼠右侧大脑中动脉缺血（middle cerebral artery occlusion ,MCAO）/再灌注模型,假手术组仅分离出颈内动脉;电刺激组在右侧嗅球内埋置双极电极,于MCAO再灌注后对嗅球进行电刺激,假刺激组只埋置电极,不进行电刺激;以5－溴脱氧尿嘧啶（Brdu）标记内源性神经干细胞（NSC ）。假手术组于术后48 h、1周,脑缺血再灌注组于缺血再灌注后48 h、1周,电刺激组及假刺激组于刺激后48 h、1周分别行Brdu免疫组化染色,观察各组脑室下区（SVZ）区NSC增殖情况;假手术组、缺血再灌注组、电刺激组、假刺激组4组大鼠在电刺激组行电刺激后腹腔注射Brdu 50 mg/kg ,2次/d ,连续2 d ,4周后处死,分别取脑切片,进行免疫组化和免疫荧光双标染色,观察各组NSC迁移和分化情况。结果缺血再灌注组（37.67±1.97）、假刺激组（36.5±2.35）和电刺激组（43.67±1.63）大鼠48 h后SVZ区Brdu阳性NSC细胞数较假手术组（15.5±1.52）明显增多（F＝57.21,P＜0.05）,缺血再灌注组（41.17±2.94）、假刺激组（41.83±2.14）和电刺激组（47.67±2.34）1周后Brdu阳性细胞数较假手术组（15.5±1.52）增多（F＝73.62,P＜0.01）,电刺激组在各时间点均较其他组Brdu阳性 NSC细胞数增多（P＜0.01）。缺血并注射Brdu 4周后缺血侧皮质区电刺激组Brdu阳性NSC细胞数（57.17±2.4）较缺血再灌注组（46.83±2.48）和假刺激组（45.83±2.14）增多（F＝161.50,P＜0.01）;免疫荧光双标染色示电刺激组Brdu阳性NSC细胞中Brdu/神经元核抗原（Neun ）双阳性细胞比例约为（74.67±3.61）％,Brdu/胶质纤维酸性蛋白（GFAP）双阳性细胞比例约为（38.83±3.36）％,与缺血再灌注组和假刺激组比较差异均无统计学意义（均 P＞0.05）。结论电刺激嗅球可能促进脑缺血大鼠SVZ区NSC增殖,并可能促进新生NSC向缺血皮质区迁移,增加缺血皮质新生神经元数量,但SVZ区新生NSC的分化不受影响。     

经颅磁刺激对局灶性脑梗死大鼠梗死周边区BDNF表达及神经功能的影响

目的观察经颅磁刺激(transcranial magnetic stimulation,TMS)对局灶性脑梗死大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)及梗死后神经功能的影响。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。在不同缺血时间点观察大鼠神经行为评分和脑梗死体积,用免疫组化法检测BDNF阳性细胞数。结果在经颅磁刺激1 d,7 d,14 d,21 d组神经行为评分和脑梗死体积均低于对应时程的MCAO组(P<0.05),二者的2 h组之间的神经行为评分及脑梗死体积无统计学差异(P>0.05);各组缺血半暗带BDNF阳性细胞数均增高,经颅磁刺激组的BDNF阳性细胞数高于对应时程的MCAO组(P<0.05)。结论经颅磁刺激能提高大鼠局灶脑缺血半暗带BDNF的表达水平,促进神经元的修复和神经功能的恢复。     

移植神经干细胞的存活与迁移：电刺激小脑顶核可提高移植效率吗？**

背景：缺血早期半暗带中神经元和内皮细胞的坏死和凋亡无法得到缓解,加之移植后的存活率低,向功能细胞的分化率低,是单纯神经干细胞移植的缺陷。课题组提出整体干预理念,期望给移植细胞提供优化的整体环境。 目的：观察神经干细胞移植与电刺激小脑顶核相结合整体干预对移植神经干细胞存活与迁移的影响。 方法：体外分离、培养新生Wistar大鼠海马表皮生长因子反应性神经干细胞,Brdu标记,并用胎牛血清诱导,观察其多向分化潜能;80只Wistar大鼠分为4组：顶核刺激+神经干细胞移植组(n=32)：左侧小脑顶核刺激24 h后行右侧大脑中动脉梗死,再24 h后将神经干细胞立体定向注入右侧侧脑室内;顶核刺激组(n=8)：PBS代替神经干细胞,其余同顶核刺激+神经干细胞移植组;单纯神经干细胞移植组(n=32)：同心圆电极插入小脑顶核,不通电其余同顶核刺激+神经干细胞移植组;对照组(n=8)：同心圆电极插入小脑顶核后不通电,其余同顶核刺激组。记录梗死后6,24 h,3,7,14,28 d大鼠的神经功能;分别在移植后3,7,14,28 d处死大鼠,以梗死灶为中心切片,Brdu免疫组织化学染色,观察移植神经干细胞的存活与迁移。 结果与结论：分离培养的表皮生长因子反应性细胞表达nestin抗原,并有自我更新及多向分化潜能,在胎牛血清诱导下可分化为神经胶质细胞和神经元。经Brdu标记后,85%以上神经干细胞表达Brdu抗原。移植28 d内顶核刺激+神经干细胞移植组功能评分明显优于与其他3组(P < 0.05~0.01)。顶核刺激+神经干细胞移植组在移植14,28 d存活细胞数明显多于单纯神经干细胞移植组;提示电刺激小脑顶核可显著提高移植神经干细胞的存活率及大脑中动脉梗死大鼠的神经功能评分;优化的整体环境可提高移植神经干细胞对局灶性脑缺血损伤细胞的替代作用。     

TLR9信号通路在大鼠脑梗死灶周围组织中的双向转导

目的 观察Toll样受体9(TLR9)信号通路在大鼠脑梗死灶周围皮质组织中的转导变化. 方法 采用线栓法成功制备48只SD大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,并设置假手术组(24只)作为对照.在脑缺血90 min再灌注6h、3d、7d、14d时分别对大鼠进行神经功能缺损评分,取脑组织行TTC染色以测定梗死体积,取梗死灶周围皮质和对侧相应皮质行Western blotting,测定TLR9、核因子NFκB(P65)、肿瘤坏死因子-α(TNFα)、干扰素调节因子-7(IRF7)、干扰素-3(IFNβ)的蛋白表达水平. 结果 再灌注6h、3d、7d、14d时,模型组大鼠的神经功能缺损评分和梗死体积随时间的延长逐渐减小;梗死侧TLR9、IRF7、IFNβ蛋白的表达逐渐增加,而NFκB(P65)、TNFα蛋白的表达呈先上升后下降的趋势,表达高峰在7d.同一蛋白的表达量在不同时间点间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);同一观察时间点比较,梗死侧各蛋白的表达量高于对侧相应皮质,差异有统计学意义(P＜0.05).再灌注6h、3d和7d时NFKB(P65)、TNF-α蛋白表达分别高于IRF7、IFNβ,而再灌注14d时NFκB(P65)、TNFα蛋白表达分别低于IRF7、IFNβ,差异均有统计学意义(P＜0.05).在假手术组各时间点均未检测到上述蛋白的表达. 结论 大鼠短暂性脑缺血再灌注后,TLR9的炎症通路和细胞保护通路相继被激活,可能参与了脑梗死后炎症损伤和组织修复过程.     

法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注后Rho激酶、Nogo-A表达的影响

目的观察法舒地尔对大鼠缺血再灌注后Rho激酶、Nogo-A表达的影响,探讨其可能的机制。方法将72只成年健康雄性SD大鼠随机分为3组:A假手术组、B缺血再灌注组、C法舒地尔治疗组,每组24只,再分为1 d、3 d、7 d、14 d 4个时间点,每个时间点6只。采用Zea-Longa线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,应用免疫组化法观察缺血侧海马CA1区Rho激酶、Nogo-A的表达。结果 (1)B组、C组各时间点Rho激酶表达均高于A组(P<0.05),术后7d最为明显,C组Rho各时间点表达较B组减少(P<0.05)。(2)B组、C组Nogo-A蛋白表达较A组明显增多(P<0.05),C组各时间点的表达较B组减少(P<0.05)。结论法舒地尔可有效抑制缺血再灌注后Rho激酶及Nogo-A的激活从而达到促使轴突再生的作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后LPA1的表达对神经元凋亡的影响

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后溶血磷脂酸受体1(LPA1)的表达对神经元凋亡的影响及其可能机制。方法 将24只SPF级SD雄性大鼠随机分为4组,每组各6只,分别为假手术组(A组)、大脑中动脉栓塞(MCAO)组(B组)、MCAO+溶剂组(C组)、MCAO+LPA1拮抗剂(Ki16425)组(D组); 4组均于手术后48 h取标本; 利用HE染色观察大鼠脑组织细胞形态的变化; 四氮唑红(TTC)染色观察大鼠脑梗死面积; 免疫荧光技术检测LPA1在大鼠皮层半暗带神经元表达水平; 免疫印迹、免疫组化技术检测大鼠脑组织中Caspase-3蛋白及p-Akt蛋白表达水平。结果 与A组比较,B组有明显的缺血再灌注损伤,表现为细胞肿胀,细胞溶解坏死,大鼠皮层半暗带神经元的LPA1表达水平较高; 与C组比较,D组大鼠脑梗死面积显著增大(P<0.05),缺血半暗带细胞肿胀更加明显,胞浆空泡区增大,细胞核固缩更加严重,细胞间隙增宽更明显; D组较C组缺血半暗带Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论 抑制大鼠局灶性脑缺血再灌后LPA1的表达可使大鼠脑梗死面积增大,细胞凋亡增加,同时p-Akt蛋白表达减少,这说明在大鼠局灶性缺血再灌注过程中LPA1对神经元具有保护作用,其机制可能是通过Akt途径来发挥保护作用的。     

Netrin-1对大鼠实验性脑梗死后同侧丘脑血脑屏障保护作用

目的观察脑梗死后同侧丘脑是否出现血脑屏障破坏,Netrin-1对血脑屏障破坏是否具有保护作用及其能否促进神经功能恢复。方法 Sprague-Dawley大鼠36只,建立右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,假手术(sham)组仅暴露右侧大脑中动脉,分为sham组、MCAO+PBS组及MCAO+netrin-1组,每组6只。通过改良大鼠神经功能缺损评分(modified neurological severity scores,m NSS)评价神经功能,造模后第8天及第14天取材,HE染色观察梗死灶,免疫荧光检测occludin及albumin表达与分布,Western blot检测occludin及ZO-1表达水平。结果m NSS评分见予以Netrin-1后于梗死后第8天及第14天评分降低(P0.05)。HE染色见右侧皮层梗死灶。Western blot见梗死后第8天开始出现occludin减少(P0.05),第14天occludin及ZO-1均明显减少(P0.05),免疫荧光见梗死后第8天及第14天occludin减少伴albumin血管外渗出;予以Netrin-1后,western blot及免疫荧光见梗死后第14天occludin增多(P0.05),伴albumin渗出增多,ZO-1无明显变化。结论Netrin-1对大鼠实验性脑梗死后同侧丘脑血脑屏障破坏具有保护作用,并可促进梗死后神经功能恢复。     

依达拉奉对脑缺血大鼠重组组织型纤溶酶原激活剂溶栓后金属蛋白酶9表达的影响

目的 观察依达拉奉对脑缺血大鼠重组组织型纤溶酶原激活剂（rt-PA）溶栓后基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达的影响,探讨依达拉奉对溶栓后脑组织的保护作用。方法 采用大鼠自体血栓栓塞大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,112只入选的SD大鼠分为假手术组（A组）、模型对照组（B组）、rt-PA溶栓组（C组）及依达拉奉联合rt-PA组（D组）,每组大鼠28只。应用红四氮唑染色观察各组大鼠脑梗死的体积百分比,同时进行神经功能缺损程度评分（SSS）,免疫组织化学方法检测各组大鼠脑MMP-9的表达及相应病理学检查。结果 与模型对照组比较,rt-PA溶栓组比较,脑梗死体积百分比及SSS评分降低,MMP-9表达明显降低（P＜0.05～0.01）。与rt-PA溶栓组比较,依达拉奉联合rt-PA组脑梗死体积百分比及SSS评分降低,MMP-9表达明显降低（P＜0.05～0.01）。结论 依达拉奉可有效的抑制rt-PA溶栓后的大鼠脑梗死范围增大,抑制MMP-9的过度表达,从而减轻对血脑屏障的破坏,进而可能延长溶栓治疗的时间窗,进一步阻止脑梗死体积扩大和改善神经功能。     

经鼻导入rhG-CSF对脑梗死大鼠皮层FasL和HO-1表达的影响

目的 探讨经鼻靶向中枢导入重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对脑梗死大鼠皮层Fas配体(FasL)和血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响. 方法将60只大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、脑梗死组、脑梗死+皮下注射rhG-CSF组、脑梗死+经鼻导入生理盐水组、脑梗死+经鼻导入rhG-CSF组.线栓法制作大鼠可逆性大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,2 h后再灌注.于MCAO模型制作成功后1 d、3 d制备脑组织冠状冰冻切片,用免疫荧光染色检测FasL和HO-1在缺血半暗带皮层的表达,激光共聚焦显微镜采集图像并计数阳性细胞数. 结果正常组和假手术组大鼠脑组织中见极少量FasL和HO-1阳性细胞,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).脑梗死组大鼠FasL和HO-1阳性细胞数明显增加(1 d时较3 d时高),表达区域主要为缺血半暗带皮层,与脑梗死+经鼻导入生理盐水组比较差异无统计学意义(P>0.05).经鼻给予rhG-CSF治疗后脑梗死大鼠脑组织内FasL阳性细胞表达下降,HO-1阳性细胞表达进一步上调,与脑梗死+皮下注射rhG-CSF组大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论经鼻靶向中枢导入rhG-CSF可以通过降低FasL、上调HO-1表达抑制脑梗死大鼠缺血半暗带皮层神经元凋亡,参与脑保护机制.     

高压氧预处理可对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究短期高压氧预处理后是否可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。方法选取成年雄性Wister大鼠,采用连续5d,每天1次,3.0ATA,100%O2高压氧(HBO)预处理,每次60min,末次预处理后24h,运用改良的经典线栓法制作MCAO模型,再灌注2h。将实验大鼠分为假手术组、MCAO组、HBO+MCAO组(n=5)。造模后24h观察各组动物的一般精神状态及体重变化情况、用Rogers DC and Hunter AJ描述的神经功能7分评分法对神经功能损伤进行评估,TTC染色测梗死面积,并对脑组织进行石蜡切片,行Nissl、TUNEL染色,利用显微镜对神经细胞进行计数。结果假手术组无神经功能缺失,TTC染色未见梗死灶,镜下观察未见坏死细胞。MCAO组和HBO+MCAO组均有不同程度的神经功能缺损,且HBO+MCAO组神经功能缺失较MCAO组轻;TTC染色MCAO组的梗死面积明显大于HBO+MCAO组;镜下观察,MCAO组梗死区内尼氏小体明显少于HBO+MCAO组。结论短期高压氧预处理后可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。     

症状性大脑中动脉不同部位闭塞的临床和影像特征

目的 分析单侧大脑中动脉闭塞(MCAO)的脑梗死患者的临床和影像学特征,并探讨不同部位MCAO的脑梗死发病机制及出血转化的相关因素.方法 选取MCAO急性脑梗死患者159例,根据闭塞部位分为近端MCAO组和远端MCAO组,比较两组临床和影像学特征,采用多因素Logistics回归分析不同部位MCAO出血转化的独立危险因...     

N-甲基-D-天冬氨酸受体1反义抑制剂治疗局灶性脑缺血作用机制的实验研究

目的 探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体1（NMDAR1）反义抑制剂（ASODN）治疗急性脑梗死的作用机制。方法 采用Koizumi‘s线栓法制作可复流MCAO大鼠模型。40只8-12月龄健康，雄性Wistar大鼠随机分为4组；（1）MCAO组；（2）MCAO PBS组；（3）MCAO MSODN组；（4）MCAO ASODN组。实验各组分别于MCAO后2h,24h经侧脑室注射给药，MCAO后第5天处死动物。取脑组织进行NMDAR1免疫组织化学及NMDAR1mRNA原位杂交检测。检测结果经CMIAS图像分析系统进行定量分析。结果 （1）ASODN治疗组NMDAR1阳性细胞在海马CA1区，CA3区及DG区的数密度，光密度显著低于MCAO组；（2）ASODN治疗组NMDAR1mRNA阳性细胞在海马各区及大脑皮层的数密度，光密度与MCAO组无显著差异。结论 NMDAR1反义抑制剂可能主要作用于NMDAR1基因的蛋白翻译过程（胞浆机制），抑制缺血后神经元NMDAR1的产生。下调NMDAR1的数量及功能，减轻缺血后迟发性神经元坏死。达到脑保护作用。     

局部亚低温对脑缺血再灌注治疗时间的影响

目的观察有效再灌注时间窗内实施局部亚低温对不同时间点血管再通(再灌注)的影响,并探讨其机制。方法将150只雄性大鼠随机分为大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)24h组10只;常温再灌注组50只;MCAO 2h进行亚低温再灌注组50只;MCAO 3h进行亚低温再灌注组40只。动物均于再灌注24h后处死,但MCAO 24h组大脑中动脉闭塞24h后直接处死。采用TTC染色观察梗死体积,用干-湿质量法测定脑含水量,用原位末端标记(TUNEL)观察神经细胞凋亡的变化,采用免疫组化法检测大鼠模型的Bcl-2、Bax及水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)的表达。结果 MCAO 24h组的梗死体积、脑含水量、TUNEL阳性细胞数、及Bcl-2、Bax、AQP4的表达相比较,常温组2～3h有统计学差异(P<0.01),4～6h没有统计学差异(P>0.05);MCAO 2h亚低温再灌注组2～5h有统计学差异(P<0.01),6h没有统计学差异(P>0.05);MCAO 3h亚低温再灌注组3～4h有统计学差异(P<0.01),5～6h没有统计学差异(P>0.05)。亚低温再灌注组各时相点的梗死体积、脑含水量、TUNEL阳性细胞数、Bax、AQP4的表达均显著低于相应常温组,Bcl-2的表达显著高于常温组(P<0.01,P<0.05)。结论实施局部亚低温可延长再灌注治疗时间窗,而且亚低温开始时间越早,其延长时间窗的效果就越显著。这为解决在时间窗内就诊的患者因检查等错过再灌注治疗这一临床难题的解决提供了重要的实验室依据。其机制可能与抑制半暗带细胞的凋亡和改善微循环有关。     

Effectiveness of a new modified intraluminal suture for temporary middle cerebral artery occlusion in rats of various weight

Intraluminal temporary middle cerebral artery occlusion (MCAO) is a common model of ischemic stroke in the rat with significant, suture and weight-dependent variability along with increased risk of subarachnoid haemorrhage (SAH). Our purpose was to increase reproducibility and decrease SAH using a modification of the Koizumi suture. We compared a Koizumi 5/0 Ethilon poly-l-lysine-coated suture (s-2, group B) to an identical, uncoated one (s-1, group A) and the Belayev's 3/0 suture (s-3, group C), in the 2-h MCAO model in Wistar rats of varying weight (310-527 g). Assessment included successful infarction rates, the modified neurological stroke scale (mNSS), a modified Bederson's scale (mBS), the grid-walking test (GWT), infarction volume (with rostrocaudal subanalysis and analysis of cortical/striatal involvement) and hemispheric edema. The s-2 suture increased the successful MCAO from 61.1% and 66.6% (groups A and C) to 97.5% in group B and induced a more severe clinical stroke (P<0.05) irrespective of animal's weight, with no incidence of SAH. Infarction volume and ipsilateral hemispheric edema significantly (P<0.05) increased and well correlated with the mNSS (P相似文献