曲古菌素A对K562细胞周期蛋白的影响

目的探讨曲古菌素A(TrichostatinA,TSA)对K562细胞增殖和细胞周期的影响。方法50～400nmol/L的TSA分别处理K562细胞12～60h后,MTT法检测K562细胞的生长活性;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;免疫组化检测24h不同浓度(100～300nmol/L)细胞周期素(cyclinE)、Rb(retinoblastoma,Rb)基因在K562细胞中的表达。结果TSA可呈时间及剂量依赖性抑制K562细胞的增殖,抑制率为37.83%～78.57%(P<0.01)。流式细胞仪检测K562细胞,凋亡率为14.38%～61.18%。免疫组化结果显示cyclinE的吸光度值分别为0.2154±0.2015、0.1501±0.1978、0.1183±0.0521与对照组0.3274±0.1093比较,差异有显著性(P<0.05);Rb蛋白的吸光度值分别为0.3017±0.1356、0.2134±0.1283、0.1527±0.0216与对照组0.4186±0.1870比较,差异也有显著性(P<0.05);随着TSA浓度增高而表达下调,呈剂量依赖性下调。结论TSA能干扰细胞周期进程,其作用机制诱导K562细胞的凋亡,下调cyclinE的表达,从而抑制其相应基因Rb的表达,调控G1/S期检测点有关。     

曲古菌素A联合全反式维甲酸诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的协同作用

目的:探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的协同作用及其相关机制。方法:TSA与ATRA联合或者单独作用于SiHa细胞,采用CellTiter 96Aqueous法检测细胞增殖情况,7AAD荧光染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V/7AAD法流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot法检测P53、BCL-2和Caspase-3蛋白的表达变化。结果:细胞增殖实验结果显示TSA联合ATRA对SiHa细胞有显著的增殖抑制作用;7AAD荧光染色结果显示联合用药组细胞凋亡明显增加,出现核碎裂等典型凋亡改变;流式细胞术检测结果显示联合用药组凋亡率显著增高;Western Blot结果显示:与对照组比较,联合用药组中P53和活化性Caspase-3蛋白的表达水平显著升高,而BCL-2蛋白表达水平显著下降。结论:TSA联合ATRA在体外对SiHa细胞具有明显的协同抑制增殖和诱导凋亡作用,推测其机制可能与P53和活化性Caspase-3蛋白表达水平上调、BCL-2蛋白表达水平下调有关。     

曲古菌素A对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制的研究

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)对胃癌细胞SGC-7901增殖活性的抑制作用。方法:采用不同浓度的TSA处理胃癌细胞SGC-7901,MTT法检测药物作用前后的细胞增殖情况。流式细胞仪检测TSA处理前后细胞周期的变化。结果:75 ng/ml TSA在48 h时就出现明显抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖。抑制由12 h至72 h显著增加,细胞周期检测发现75 ng/ml TSA即可导致细胞G2期阻滞,抑制细胞增殖。结论:TSA可抑制体外胃癌细胞SGC-7901的生长,诱导SGC-7901细胞出现G2期阻滞。     

维生素A对移植鼠黑瘤生长和发展的抑制作用

前人曾证明维生素A具有辅助免疫作用。据此和一些其他关于免疫刺激剂的研究,提示维生素A可能有助于抑制肿瘤的生长。维生素A能降低由于某些病毒和化学致癌物质所导致的肿瘤发病率,但还没有能够证明维生素A能抑制移植瘤细胞的生长。本文作者发现这种维生素对一种有高度免疫性的鼠黑瘤的生长有显著的抑制作用。所有的实验均用S-91(Cloudman)黑瘤。这种瘤自发地产生于DBA小鼠,可移植于BALB/G小鼠,并制成单细胞悬液,用于移植实验。用10~5或5×10~5个细     

地塞米松诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡的实验研究

目的:探讨地塞米松对宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤生长及凋亡的作用。方法:BALB/C裸鼠皮下接种宫颈癌Hela细胞,腹腔内注射不同剂量地塞米松15~250mg/kg,测量肿瘤体积观察肿瘤生长情况,用透射电镜及原位细胞凋亡检测(TUNEL)的方法对肿瘤细胞的凋亡进行检测。结果:不同剂量地塞米松体内注射均可抑制宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的生长,并能诱导肿瘤细胞凋亡,与对照组相比肿瘤生长速度减慢,体积明显缩小(P<0·001),凋亡小体明显增多;不同剂量地塞米松对肿瘤生长的影响有差异,当剂量<62·5mg/kg时,疗效随剂量增加而增加,凋亡小体逐渐增多,肿瘤生长更加缓慢,各组间有明显差异(P<0·001);剂量为62·5~125mg/kg时,肿瘤生长及凋亡发生与剂量无明显的关系;当剂量>125mg/kg时,疗效随剂量增加而降低,凋亡小体逐渐减少,肿瘤生长速度加快,各组间有明显差异(P<0·001)。结论:地塞米松体内能诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡发生,显著抑制肿瘤生长,并存在一定程度的剂量依赖效应。     

EGCG对人前列腺癌裸鼠移植瘤生长和间隙连接蛋白43表达的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸脂（EGCG）对前列腺癌裸鼠移植瘤生长和间隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响,探讨EGCG防治前列腺癌的作用机制。方法分别采用四甲基偶氮唑蓝法、膜联蛋白／碘化丙锭双标流式细胞术和划痕标记荧光染料传输技术,体外观察不同浓度的EGCG（10、20、40mg/L）对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制率、凋亡率、细胞间间隙连接通讯功能（GJIC）的变化。采用PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤动物模型,随机分为对照组和不同剂量的EGCG组（10、20、40mg/kg）,14d后称量移植瘤体重并计算抑瘤率,DNA原位缺口末端标记法和免疫组织化学分别检测凋亡指数（AI）和肿瘤微血管密度（MVD）,半定量逆转录聚合酶链反应检测移植瘤组织cx43mRNA的表达水平。结果20mg/L和40mg／L的EGCG均能明显抑制PC-3细胞的生长[（22．33±4．62）％,（38．67±5．67）％VS（3．47±0．31）％,P〈0．01]和诱导细胞凋亡[（7．84±1．37）％,（24．53±2．28）％V8（2．17±0．70）％,P〈0．01],并增强细胞间的GJIC功能。不同剂量的EGCG均能抑制裸鼠前列腺癌移植瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤血管生成。（20、40mg/kg）EGCG能显著上调移植瘤组织Cx43mRNA的表达（0．58±0．08,0．80±0．07V80．42±0．04,P〈0．01）。EGCG对前列腺移植瘤的抑制作用、诱导细胞凋亡和上调Cx43表达的效应均随剂量的增加而增强,呈剂量依赖性（P〈0．05）。结论EGCG能上调Cx43在裸鼠前列腺癌组织中的表达和增强Cx43介导的间隙连接通讯功能,从而有效抑制前列腺癌移植瘤的生长。     

舒林酸对卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤生长的影响

目的:探讨非甾体类消炎镇痛药舒林酸对卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤生长的影响。方法:将卵巢癌细胞SKOV3注射于裸鼠腹腔建立卵巢癌移植瘤模型,在成瘤之前和成瘤之后两个时间段分别采用舒林酸灌胃,计算各组抑瘤率,采用RT-PCR、Western blot观察MMP-2、VEGF的表达变化。结果:舒林酸预防组对裸鼠卵巢癌生长有明显抑制作用。舒林酸预防组在mRNA和蛋白水平表达MMP-2和VEGF均显著降低。结论:早期应用舒林酸能够抑制裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤的生长,其机制可能与降低VEGF、MMP-2表达有关。     

人乳头瘤病毒感染与宫颈癌

<正> 一、宫颈癌问题 宫颈癌一直是影响妇女健康的重要问题,据世界范围调查,全球每年约有466000例宫颈癌的新发病例,其中80％的病例发生在发展中国家。其原因是发展中国家没有建立有效的宫颈癌筛查体系,它已成为发展中国家妇女死亡的主要原因,死亡率仅次于乳腺癌,居第二位。     

人乳头瘤病毒感染与宫颈癌

<正> 近年来,人乳头瘤病毒(human papiloma uirus,HPV)感染明显升高,在性行为活跃的年龄组,生殖道HPV的感染率高达20%～40%。迄今利用DNA同源分析技术已发现70余种HPV类型,其中30余种已从受感染的生殖道组织中分离出来。生殖道HPV感染不仅引起肉眼所见的尖锐湿疣,而且与子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neo     

共轭亚油酸对人胃腺癌细胞的抑制作用

采用体外细胞培养方法，研究共轭亚油酸（ＣＬＡ）对人胃腺癌细胞（ＳＧＣ－７９０１）生长的影响。ＣＬＡ的剂量分别为２５、５０、１００和２００μｍ ｏｌ／Ｌ，以乙醇为溶剂对照。结果表明：ＣＬＡ 能抑制ＳＧＣ－７９０１细胞的增殖、细胞核分裂、集落形成和细胞ＤＮＡ的合成，并诱导ＳＧＣ－７９０１细胞的分化     

莱菔硫烷抑制PMA诱导宫颈癌细胞迁移与侵袭

目的:观察莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)对宫颈癌细胞迁移和侵袭的抑制情况,并探讨其分子机制。方法:体外培养宫颈癌细胞系HeLa细胞,经100 nmol/L佛波脂PMA诱导24 h后,加入不同浓度的SFN继续孵育24 h。MTT法检测HeLa细胞的生长抑制情况;DCF染色法检测细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的产生,细胞伤口愈合试验和小室侵袭实验分析SFN对PMA诱导HeLa细胞的迁移与侵袭情况。提取细胞总RNA,逆转录PCR检测基质金属蛋白酶-9(matrix met-alloproteinase-9,MMP-9)的表达,明胶酶谱实验检检测其酶活性。萤光素酶报告基因法检测SFN对核因子κB(Nuclear Fac-tor kappa B,NF-κB)活性的影响。结果:0～30μmol/L SFN对HeLa细胞的生长增殖无明显毒性作用。DCF染色显示PMA处理能使HeLa细胞ROS的含量增高5倍,而30μmol/L SFN处理能使ROS的产生降低44%;SFN也能使HeLa细胞迁移和侵袭率分别降低60%和75.5%。RT-PCR结果显示SFN能以剂量依赖性方式抑制PMA诱导的MMP-9表达,明胶酶谱实验显示MMP-9酶活性也明显降低。报告基因实验显示SFN能以剂量依赖性方式抑制NF-κB的活性。结论:SFN抑制NF-κB介导的MMP-9表达,从而影响宫颈癌细胞的迁移和侵袭。     

Inhibitory effect of dietary arginine on growth of Ehrlich ascites tumor cells in mice.

The effect of dietary L-arginine on the growth and development of transplantable Ehrlich Ascites tumor cells was examined. Growth of tumor bearing mice was significantly inhibited by feeding a purified casein diet supplemented with 5% arginine. This diet significantly reduced the total number of free tumor cells growing in the peritoneal cavity of mice. Total free tumor cell RNA, DNA, and protein were also significantly reduced. Supplemental arginine approximately doubled the length of time for 50% death of tumor bearing mice. Arginine did not alter respiration as measured by glucose or citrate oxidation. Varying the concentration of supplemental dietary arginine revealed that 3% arginine also significantly retarded the growth of Ehrlich Ascites Tumor Cells. Tumor ornithine decarboxylase activities were significantly reduced by dietary arginine supplementation. Supplemental dietary arginine at 3 or 5% did not significantly affect the growth of non-tumor bearing mice. Dietary arginine may play a critical role in growth of normal as well as neoplastic tissue.     

5-氟尿嘧啶缓释剂对荷U14宫颈癌小鼠抑瘤效果的研究

目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)缓释剂对荷U14宫颈癌小鼠的抑瘤效果以及相关细胞凋亡机制。方法:清洁级小鼠ICR接种U14,随机分为对照组、化疗组、缓释组和联合组,观察小鼠生存周期;收集第7天、第13天腹水瘤,观察细胞凋亡、细胞周期以及Bcl-2/Bax蛋白和基因RNA水平表达的变化。结果:与对照组比较,化疗组、缓释组和联合组的平均生存期明显延长;第7天与第13天,化疗组、缓释组和联合组中晚期凋亡和总凋亡均显著高于对照组,其中联合组中晚期凋亡和总凋亡也显著高于缓释组;化疗组、缓释组、联合组的G1期细胞较对照组明显增加,增殖指数明显降低。第7天、第13天,化疗组、缓释组和联合组Bcl-2蛋白或RNA表达均低于对照组,Bax表达均高于对照组;其中联合组Bcl-2低于缓释组,Bax高于缓释组。结论:5-FU延长荷瘤小鼠的生存期,对宫颈癌腹水瘤有较好的抑瘤作用,作用机制很可能通过介导下调Bcl-2、上调Bax的表达。     

TRAIL对人乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人乳腺癌(MCF-7)、宫颈癌(Hela)、卵巢癌(SKOV-3)细胞体外抗肿瘤的杀伤作用。方法:通过MTT法、流式细胞术检测重组人TRAIL蛋白对3种肿瘤细胞和人胚肾(HEK-293)正常细胞系的作用和诱导凋亡情况。结果:一定浓度的TRAIL可有效抑制MCF-7、SKOV-3、Hela细胞,其生长抑制呈剂量依赖。TRAIL对SKOV-3细胞最敏感,用2.5 mg/L TRAIL作用SKOV-3,12h后发生凋亡,其细胞凋亡率呈时间依赖。结论:重组人TRAIL对人乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌细胞系具有生长抑制作用,并能够诱导SKOV-3细胞凋亡。     

跨膜型肿瘤坏死因子-α对宫颈癌细胞毒性效应的研究

目的 观察跨膜型肿瘤坏死因子-α （TM-TNF-α）对人宫颈癌HeLa细胞的效应,并探讨其与人宫颈癌HeLa细胞死亡结构域沉寂子（SODD）表达的关系.方法 应用免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原（PCNA）表达;应用反转录-聚合酶链反应技术检测未经处理的和经TM-TNF-α作用后的人宫颈癌HeLa细胞SODD的表达情况及TM-TNF-α对其影响.结果 未经处理的人宫颈癌HeLa细胞PCNA阳性率为80.3％（155/193）,经TM-TNF-α作用后的人宫颈癌HeLa细胞PCNA阻性率降为46.7％（85/182）,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）.人宫颈癌HeLa细胞的聚合酶链反应循环次数设定为28次,所获扩增产物经2％琼脂糖凝胶电泳,经TM-TNF-α作用后的人宫颈癌HeLa细胞和未经处理的人宫颈癌HeLa细胞灰度值分别为1.377±0.170和0.815±0.040,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 TM-TNF-α可通过上调SODD的表达来增强其对人宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤效应.     

Natural alkylglycerols restrain growth and metastasis of grafted tumors in mice

Alkylglycerols are natural etherlipids abundant in shark liver oil (SLO) in a diacylated form. SLO is known to have antitumor properties and was recently described as an inhibitor of tumor neovascularization. However, most studies did not discriminate between the respective activities of alkylglycerols and of fatty acids, which both have potent biological properties. In this work, a mouse model was used to investigate the antitumor effects of SLO and of alkylglycerols purified from the same source, both administered orally. We demonstrated that either pure alkylglycerols or SLO reduced the tumor growth in a similar manner, suggesting that alkylglycerols were involved in this effect. In alkylglycerol-treated mice, metastasis dissemination was reduced by 64 +/- 8%, whereas SLO effect was 30 +/- 9% below control. Purified alkylglycerols also decreased significantly plasmalogen content in tumors, whereas SLO had no such effect. Finally, we demonstrated that a 5-day treatment with alkylglycerols curtailed the presence in tumors of von Willebrand factor, a marker of endothelial cells. This result suggested an anti-angiogenic effect of alkylglycerols. In summary, alkylglycerols were shown to decrease the growth, vascularization, and dissemination of Lewis lung carcinoma tumors in mice. These findings suggest that the antitumor activity of SLO is likely mediated by the presence of alkylglycerols.     

重组人生长激素对荷人胃癌裸鼠移植瘤血管内皮生长因子表达的影响

目的研究重组人生长激素（rhGH）对生长激素受体（GHR）不同表达状态裸鼠人胃癌移植瘤生长及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法采用免疫细胞化学染色法筛选出GHR阳性和阴性表达的细胞株各1株，分别接种于24只裸鼠皮下。将两种细胞接种裸鼠均随机分为对照组（0．9％NaCl，0．2ml／d）、低剂量rhGH组（0．5U·kg^-1·d^-1，0．2ml／d）和高剂量rhGH组（2．5U·kg^-1·d^-1，0．2mL／d）3组，每组8只，各组均连续给药14d，观察并记录裸鼠体重和肿瘤体积变化；采用酶联免疫吸附法测定各组裸鼠血清VEGF含量，免疫组织化学方法检测胃癌组织中VEGF蛋白表达，RT-PCR方法检测胃癌组织VEGFmRNA水平变化。结果筛选出GHR阳性表达的人胃癌细胞株SGC-7901和阴性表达的MKN-45。对于GHR^＋SGC-7901接种裸鼠，rhGH给药组皮下移植瘤体积较对照组增大（P〈0．05），且高剂量rhGH组促增长效应最为显著（P〈0．05），3组间体重差异无统计学意义（P〉0．05）；高剂量rhGH组的血清VEGF浓度为（252．94±15．32）ng／L，明显高于对照组的（49．94±5．73）ng／L和低剂量rhGH组的（167．60±9．54）ng／L（P〈0．05）；对照组VEGF表达为中度阳性，rhGH给药组呈强阳性；高剂量rhGH组肿瘤组织中VEGFmRNA相对表达量为0．6470±0．0447，明显高于对照组的0．3230±0．0258和低剂量rhGH组的0．4120±0．0351（P〈0．05）。对于GHR—MKN-45接种裸鼠，rhGH给药组体重明显大于对照组（P〈0．05）；肿瘤体积大小、血清VEGF水平、肿瘤组织VEGF蛋白及mRNA表达，3组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论rhGH能促进GHR阳性表达的SGC-7901移植瘤生长，并促进VEGF表达增高；对于GHR阴性的MKN-45移植瘤，则没有表现出明显的促肿瘤生长及促VEGF表达效应。GHR存在可能是rhGH影响VEGF分泌的关键靶点。     

酒石酸锑钾对人结肠癌裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原的影响

目的 探讨酒石酸锑钾（potassium antimony tartrate,PAT）对人结肠癌移植瘤裸鼠模型抑瘤及凋亡诱导作用.方法 60只裸鼠皮下注射结肠癌细胞株SW480建立移植瘤模型,随机分为4组（n=15）.分别为生理盐水组、5-氟尿嘧啶（5-Fu）50 mg/（Kg·d）组、酒石酸锑钾组[（20 mg/（Kg·d）和40 mg/（Kg·d）],给药15 d,每3日测量肿瘤大小1次,绘制肿瘤生长曲线;末次给药24 h后,免疫组织化学法检测结肠癌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）的表达.结果 使用PAT后,肿瘤体积增长较慢,PAT处理组细胞PCNA表达[（63.63±8.88）%,（59.13±6.15）%,（33.38±12.76）%]较对照组[（69.88±8.81）%]明显下调（P〈0.05或P〈0.01）.结论 PAT能有效抑制结肠癌细胞生长和诱导结肠癌细胞凋亡.