血管内皮生长因子及其受体在肝癌细胞中的表达及意义

目的：探讨人肝癌细胞株血管内皮生长因子（VEGF）及其受体的表达,进一步认识VEGF在肝癌血管形成中的作用机制。方法：以人脐静脉血管内皮细胞系ECV304和小鼠成纤维细胞系L929作为对照,采用免疫组化染色及RT-PCR,检测体外培养的人肝细胞肝癌细胞系SMMC7721、HHCC和HepG2中VEGF及其受体的表达。结果：SMMC7721、HHCC和HepG2细胞均有VEGF的表达,同时VEGF受体1（Flt-1)在SMMC7721细胞中也有表达;而HHCC和HepG2细胞则表达VEGF受体2（KDR）。     

正常人外周血单个核细胞TRAIL受体的表达及意义

目的:检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的受体在正常人外周血单个核细胞上的表达,并探讨其意义。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术,对TRAIL受体的表达分别进行RNA水平和蛋白水平的检测。结果:各受体经RT-PCR和流式细胞术检出的阳性率分别为DR4(50%、60%)、DR5(100%、100%)、DcR1(100%、100%)、DcR2(60%、70%),其中死亡受体DR5和诱骗受体DcR1的表达阳性率最高,均为100%。RT-PCR和流式细胞术均显示:能够诱导凋亡反应的死亡受体中,DR5表达显著高于死亡受体DR4P<0.05;能够竞争性阻断TRAIL诱导的凋亡反应的诱骗受体中,DcR1表达显著高于诱骗受体DcR2P<0.05。结论:DR5和DcR1是外周血单个核细胞PBMC上TRAIL受体系统的主要成员,在TRAIL诱导的细胞凋亡中起关键作用。     

瘦素及其受体蛋白在肝癌细胞中的表达及意义

目的:研究瘦素及其受体在人肝细胞癌细胞株中的表达情况,探讨其在肝癌发生过程中的可能作用。方法:制备人正常肝细胞株L02及人肝细胞癌细胞株HepG2、SMMC7721的细胞爬片,采用免疫组织化学染色法检测上述细胞株中瘦素和瘦素受体蛋白的表达,以医学图文分析系统进行定量分析。结果:人正常肝细胞株L02及人肝细胞癌细胞株HepG2、SMMC7721中均存在瘦素及其受体蛋白的阳性表达,并且瘦素及其受体蛋白的表达水平均是人肝癌细胞株高于人正常肝细胞株,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:瘦素及其受体以双重表达方式存在于人肝细胞癌细胞中,可能在肝癌的发生中起到一定作用。     

瘤坏死因子相关调亡诱导配体及其受体在喉鳞状细胞癌中的表达

目的 探讨肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体(TRAIL)及其4个受体DR4、DR5、DcR1、DcK2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义.方法 应用RT-PCK方法,检测68例喉鳞状细胞癌和30例正常喉黏膜组织中TRAIL及其受体的表达分布情况,并探讨其与喉鳞癌临床各指标之间的关系.结果 在喉鳞癌组织及正常喉黏膜中均检测到TRAIL及其4个受体的表达,其中TRAIL及诱骗受体DcR1、DcR2在喉鳞癌组织中表达低,而在正常喉黏膜组织中表达较高,差异具有显著性(P均<0.01);而死亡受体DR4、DR5在2种组织中表达均较高,差异不具有显著性(P均>0.05).在早期喉癌(Ⅰ+Ⅱ期),其表达TRAIL及DcR1、DcR2较高,而晚期喉癌(Ⅲ+Ⅳ期)中则表达较低,差异具有显著性(P均<0.05),死亡受体DR在2组间差异无显著性(P均>0.05);TRAIL及DcR在分化程度高的肿瘤组中表达也高,在分化程度中、低组的肿瘤表达低,差异具有显著性(P均<0.01).死亡受体DR在2组间差异无显著性(P均>0.05).结论 喉鳞癌中普遍存在着TRAIL及其受体的表达,并存在着表达类型的差异,这是TRAIL选择性诱导肿瘤细胞凋亡的原因.TRAIL及DcR1、DcR2的表达分布与喉鳞癌的病理分期以及分化程度相关.     

TRAIL受体在子痫前期患者胎盘的表达及意义

目的 检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的受体(DR4,DB5,DcR1,DcR2)在子痫前期患者胎盘的表达,初步探索其与子痫前期的关系.方法 选择子痫前期患者34饲作研究组,正常妊娠组31例作对照组,分别对两组的胎盘免疫组化染色,观察两组TRAIL受体(DR4,DR5,DcR1,DcR2)表达量的差异.结果 研究组胎盘组织中TRAIL受体DR4,DR5表达较强,而DcR1,DcR2表达较少(P＜0.05).结论 TRAIL受体表达失衡可能导致胎盘滋养细胞凋亡紊乱,可能是子痫前期发生的机制之一.     

TRAIL受体在子宫内膜癌细胞株的表达

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)受体在正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织和癌旁组织的表达特征。方法:采用RT-PCR技术,检测20例正常子宫内膜、20例子宫内膜癌及癌旁组织中TRAIL受体DR4、DR5和假受体DcR1、DcR2阳性表达情况。结果:TRAIL受体DR4、DR5的mRNA在人正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织和癌旁组织中均表达,诱骗受体DcR1的mRNA在子宫内膜各组织中的表达率不同,但差异无统计学意义(P>0.05),而诱骗受体DcR2的mRNA在子宫内膜癌组织中的表达率明显低于正常子宫内膜组织和癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.005),癌旁组织细胞中DcR2表达和正常子宫内膜组织相近(P>0.05)。结论:TRAIL诱骗受体DcR1、DcR2在子宫内膜癌中的低表达可能与其发病机制有关,可能对防止子宫内膜癌变具有一定作用。     

TRAIL及其受体DcR1和DR4在宫颈癌组织中的表达及意义

目的检测宫颈癌和正常宫颈组织中人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF related apoptosis inducing ligand, TRAIL）及其受体DcR1和DR4的表达,探讨TRAIL及其受体的表达与宫颈癌发生、发展的关系。方法免疫组织化学Envision法检测43例宫颈癌和30例正常宫颈组织中TRAIL及其受体DcR1、DR4的表达。结果TRAIL、DcR1、DR4免疫阳性产物为棕黄色,定位于胞浆或胞膜, TRAIL及DcR1在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织,DR4在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织(P＜0.05);TRAIL、DcR1、DR4在宫颈癌组织中的表达与患者的年龄、分期、淋巴结转移无关(P＞0.05)。结论TRAIL是肿瘤细胞分化差的标志之一;宫颈癌细胞由于DR4的高表达和DcR1的低表达而易被TRAIL诱导凋亡。     

STAT3基因在人肝癌细胞株HepG2、Bel7402、SMMC7721和肝癌组织中的表达及意义

目的：探讨STAT3基因异常活化在人原发性肝癌发生、发展中的作用及可能的机制。方法：应用免疫组化染色法、RT-PCR和Western blotting法检测人肝癌细胞株HepG2、Bel7402、SMMC7721和肝癌组织中STAT3基因的mRNA和蛋白水平表达。 结果：肝癌细胞株SMMC7721、Bel7402和HepG2中均有STAT3基因的高表达,3种肝癌细胞间表达量比较差异无显著性（P>0.05）。原发性肝癌组织和癌旁组织中均有STAT3的mRNA及蛋白水平的高表达,与正常肝组织比较差异有显著性（P<0.05）,而肝癌组织与癌旁组织比较差异无显著性（P>0.05）。肝癌组织中VEGF、survivin和c-myc 的mRNA表达上调,p53的mRNA表达下调。结论：STAT3
的异常活化可能发生在癌变的早期,在肝癌的形成和发展中可能起重要的促进作用。     

凋亡诱导基因TRAIL的受体在卵巢肿瘤中的表达

应用RT PCR方法检测 3例正常卵巢、6例良性卵巢肿瘤和 16例恶性卵巢肿瘤组织中TNF家族新成员TRAIL的受体DR5 ,DcR1和DcR2表达。结果显示 :正常人外周血淋巴细胞及 3例正常卵巢组织中TRAIL受体均为阳性表达。良性卵巢肿瘤中DR5阳性表达率为 83.3% (5 /6 ) ,DcR1为 83.3% (5 /6 ) ,DcR2为 10 0 % (6 /6 )。恶性卵巢肿瘤中DR5阳性表达率为 6 8.8% (11/16 ) ,DcR1为 6 8.8% (11/16 ) ,DcR2为 0 % (0 /16 )。提示不同TRAIL受体特别是DcR2表达可能参与了卵巢肿瘤发生过程中细胞凋亡的调控     

星形细胞瘤组织中TRAIL及其受体的表达

目的：研究不同级别星形细胞瘤组织中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体的表达。方法：应用原位杂交法检测45例星形细胞瘤和8例正常脑组织中TRAIL及其受体DR4、DR5、DcR1、DcR2的mRNA转录表达。结果：在45例星形细胞瘤组织中,TRAIL、DR4、DR5、DcR1、DcR2的mRNA的阳性例数分别为44例、38例、41例、40例、2例。有36例星形细胞瘤DR4、DR5、DcR1的mRNA协同转录,阳性率80％。TRAIL及其受体在低级别（Ⅰ～Ⅱ级)与高级别(Ⅲ～Ⅳ级)星形细胞瘤组织中的表达差异无统计学意义。结论：TRAIL及其受体在星形细胞瘤组织中表达,且与肿瘤的恶性程度无关。     

Expression of TRAIL and its receptors in primary hepatic carcinoma and apoptosis-inducing effect of HrsTRAIL on hepatoma cell line HepG2

Objective： To investigate the expression of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand（TRAIL） and its receptors in primary hepatic carcinoma （PHC） and the apoptosis-inducing effect on hepatoma cell line HepG2. Methods： TRAIL and its receptors were detected by semiquantitive RT-PCR in 30 PHC and para-carcinoma tissues and two hepatoma cell lines of HepG2 and SMMC-7721. HepG2 cells were treated with human recombinant soluble TRAIL protein （HrsTRAIL） and then the viability of HepG2 cells was measured by microculture tetrazolium dye（MTT） assay and apoptosis index was demonstrated by fluorescence-activated cell sorting （FACS）. Results：TRAIL and its receptors were detectable in all PHC and para-carcinoma tissues and hepatoma cell line HepG2. TRAIL, death receptor 4 （DR4）, DR5, and decoy receptor 2 （DcR2） but not DcR1 were detectable in hepatoma cell line SMMC-7721. The expression patterns of TRAIL receptors in HepG2 were quite similar to PHC specimens. The semiquantitive results showed that the expression level of TRAIL and DcR were lower but DR was higher in hepatoma tissues than in para-carcinoma tissues. In PHC tissues, the expressions of DR were higher than DcR, while there was no difference in para-carcinoma tissues. HrsTRAIL had potent antitumor activity in a time- and dose-dependent manner. After co-incubations of the HepG2 cells in the presence of HrsTRAIL at concentration 1 000 ng/ml for 24 hours, the viability of HepG2 cells decreased to 45% and the apoptosis index reached 51%. Conclusion ：TRAIL and its receptors were expressed in both PHC tissues and para-carcinoma tissues but the expression levels were different. The lower expression of TRAIL in PHC tissues suggested that insufficient apoptosis occured in the development of PHC. High expression of DR in PHC tissues may be a self-defense mech- anism and may afford a theory of HrsTRAIL therapy for PHC. HrsTRAIL may be a potential cytotoxic drug for PHC, and it can kill majority of HepG2 cells, but minority of HepG2 were resistant to TRAIL-inducing apoptosis.     

Antitumor Effects of Soluble TRAIL in Human Hepatocellular Carcinoma

TNF related apoptosis inducing ligand(TRAIL) is a promising cancer therapeutic agent,which appears to specifically kill transformed cells,and spare most normal cells[1, 2]. In the presentstudies, we investigated the expression of TRAILand TRAIL receptors in 60 HCC tissues, 20 nor mal liver samples and two HCC cell lines (HepG2and SMMC 7721). The effects of TRAIL on pro moting apoptosis in the HCC cell lines were ana lyzed after the cells exposed to the…     

TRAIL受体在胆管癌组织中的表达及意义

目的 :探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)的受体在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)的表达及其临床意义。 方法 :应用原位杂交组织化学法检测TRAIL受体mRNA在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)中的表达。 结果 :DR4mRNA、DR5mRNA在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)均呈阳性表达。只有 3例DcR1(3/5 2 )和 7例DcR2 (7/5 2 )在人胆管癌组织呈弱阳性表达。DcR1、DcR2 mRNA在癌旁胆管组织呈阳性表达 ,而在胆管癌细胞株 (QBC939)均不表达。 结论 :TRAIL死亡受体和诱捕受体在人胆管癌、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)的表达不同 ,这些受体表达的变化可能在调控人胆管癌凋亡中发挥重要作用。     

不同XAGE-1异构体在肝细胞癌中的表达

目的 探讨肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721以及肝癌患者肿瘤组织标本中的4种XAGE-1异构体的表达情况,同时研究其与肝癌患者临床病理之间的关系.方法 使用RT-PCR方法检测肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721以及80例肝癌患者肿瘤组织标本中的4种XAGE-1异构体的表达情况,同时收集患者临床资料,对XAGE-1b的表达与肝癌患者临床病理特征之间的关系进行研究.结果 XAGE-1b和XAGE-1d mRNA在肝癌细胞株和部分患者肿瘤组织标本中阳性表达[分别是35/80(43.75%)、6/80(7.50%)];而XAGE-1a和xAGE-1c mRNA在肝癌细胞株和肝癌患者标本中均为阴性表达;在对照组组织标本(4例肝血管瘤,8例肝破裂)中4种xAGE-1异构体均为阴性表达.XAGE-1bmRNA在肝癌组织中具有较高的表达率,并且其表达与肝癌TNM分期相关.结论 XAGE-1b在肝癌细胞中呈阳性表达,同时在肝癌组织中呈高度阳性表达,预示XAGE-1b的表达与肝癌预后相关,可作为其免疫治疗的潜在靶点之一.     

人肝癌细胞株VEGF/VEGFR的检测及意义探讨

目的：筛选血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）高表达肝癌细胞株，为进一步研究VEGF在肝癌治疗中的作用提供理论依据。并探讨VEGF受体在肝癌细胞株的表达及意义。方法：ELISA法及Western blot法分别检测人肝癌细胞株培养上清及细胞内VEGF蛋白的表达。免疫细胞化学方法检测VEGFR在人肝癌细胞中的表达。结果：5株肝癌细胞株均见VEGF蛋白表达，其中SMMC-7721的VEGF表达量最高，VEGF特异性受体Fit-1在HepG2、HHCC、SMMC-7721、Bcl-7402见阳性表达，KDR在HepG2、HHCC、Bel-7402、QGY-7701见阳性表达。结论：肝癌细胞株中VEGF表达量不尽一致，VEGF在肝癌发生发展中可能存在自分泌作用方式。     

顺铂对肝癌细胞株HepG2增殖和SATB1表达的影响

目的:观察特异AT序列结合蛋白1(special AT-rich sequence-binding protein 1,SATB1)在不同肝癌细胞株中的表达情况,并探讨顺铂对肝癌细胞株HepG2的细胞形态及SATB1表达的影响。方法:半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HepG2、BEL-7402、SMMC-7721三种肝癌细胞株中SATB1 mRNA的表达情况;HepG2细胞株中加入终浓度为2.5、5.0和10.0μg/ml顺铂培养24 h,倒置显微镜下观察细胞形态变化。结果:SATB1在肝癌细胞株BEL-7402、SMMC-7721、HepG2中均有表达,差异无统计学意义(P0.05)。HepG2细胞与顺铂共培养24 h后,倒置显微镜下可见细胞形态明显改变,细胞数减少,损伤、死亡的细胞增多。SATB1 mRNA的表达随着顺铂浓度的增加而减少,其中5.0、10.0μg/ml顺铂组SATB1 mRNA的表达量与对照组差异均有统计学意义(P0.05)。结论:SATB1在三种肝癌细胞株中均有表达,顺铂可抑制HepG2细胞增殖和SATB1的表达,从而达到抑制肝癌细胞生长的目的。     

TRAIL及其受体和Fas-L在卵巢癌组织中的表达

目的　探讨TRAIL 及其受体在正常卵巢和卵巢癌组织中的表达,以及其与Fas- L 表达的相互关系。方法　用免疫组化法检测37例卵巢癌在2 1例正常卵巢组织TRAIL、TRAIL 受体(DR4、Dc R1)和Fas- L 的表达,并进行两两之间直线相关分析。结果　卵巢癌中DR4和Dc R1的表达均低于正常卵巢组织;高中分化卵巢癌DR4阳性率为(92 .31% )明显高于低分化癌DR4 (5 4 .5 5 % ,P<0 .0 5 ) ,表明卵巢癌分化程度越低,DR4表达也降低;TRAIL与Fas- L 的表达呈明显正相关(r=0 .777)。结论　卵巢癌中DR4和Dc R1表达低于正常卵巢组织,DR4的表达可能与卵巢癌的预后有关,初步提示TRAIL 及其受体相互作用与卵巢癌细胞凋亡有关。