微板杂交乙肝DNA定量及其临床意义探讨

目的应用微板杂交定量检测乙肝DNA及其临床意义.方法应用微板杂交-核酸定量检测技术和血清ELISA法同时检测218例乙肝和32例对照组血清,以探讨乙肝血清标志物与乙肝DNA含量的关系.结果采用PCR技术对47例乙肝"大三阳"的血清检出结果发现,HBVDNA的检出率最高,阳性率95.5%,定量检测结果均值达61.5±21.2fg/ml,80例乙肝小三阳患者血清中的47例检出HB-VDNA,检出率达58.8%,定量检测结果均值18.1±12.8fg/ml;结论微板杂交-核酸定量检测技术可以直接检测到fg水平的HBVDNA可为临床提供HBV感染、复制及传染性判断实验室数据并指导治疗.     

血清HBeAg阴性HBV感染者病毒含量与基因突变的临床关系

目的 :了解HBV感染者血清HBeAg阴转后HBVDNA含量与C基因启动子 (basalcorepromoter,BCP)和C基因 (pre-core/core ,preC/C)变异的关系。方法 :采用PCR微板核酸杂交方法检测 342例血清HBeAg阴性HBV感染者血清HBVDNA含量及BCP与preC/C基因变异。结果 :在HBsAg/HbcAb/HbeAb和HBsAg/HbcAb感染模式中检测到HBVDNA阳性率为 2 2 8% (36 / 15 8)及 31 6 % (31/ 98)。两者无显著差异 (P >0 0 5 ) ;两种模式中HBVDNA阳性血清的BCP变异检出率分别为 ;6 3 9% (2 3/ 36 )、 5 1 6 % (16 / 31) ;preC/C变异检出率 77 8% (2 8/36 )、 5 8 1% (18/ 31) ;HBVDNA血清浓度平均为 4 9 2± 36 7pg/ml、 5 1 7± 31 5pg/ml,均无显著差异 (P >0 0 5 )。两种基因变异间无相关关系 (P >0 0 5 )。但BCP变异组HBVDNA (6 1 8± 34 1pg/ml)显著高于非变异组 (34 4±2 9 7pg/ml) ;preC/C变异组HBVDNA (5 5 7± 31 5pg/ml)显著高于非变异组 (38 7± 2 4 1pg/ml)。结论 :BCP基因变异与preC/C变异是随机存在于HBeAg转换中 ,突变后血清HBVDNA浓度显著升高     

HBV-DNA定量与乙肝病毒感染免疫学检测结果对比分析及意义

本文采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)和ELISA两种方法同时检测了 310份血清 ,并对结果进行了对比分析 ,结果显示 :80例HBsAg (+)、HBeAg (+)、HBcAg (+)组的血清HBVDNA检出率为 92 5 % (74例 ) ,平均拷贝数为 4 10× 10 10 /ml,6 8例HBsAg (+)、HBeAb (+)、HBcAb (+)组血清HBVDNA检出率为32 35 % (2 2例 ) ,平均拷贝数为 1 31× 10 9/ml,70例HBsAg (+)、HBeAb (+)组血清HBVDNA检出率为45 71% (32例 ) ,平均拷贝数为 4 0 8× 10 8/ml;32例HBV M全阴性组血清HBVDNA检出率为 6 .6 7% (2例 ) ,平均拷贝数为 1 5 4× 10 8/ml。结果表明 :HBV -M阴性的病人也可能有HBVDNA阳性 ,因此为临床提供HBV感染、复制及传染性的判断以及指导治疗 ,应选择乙肝两对半标志物检测的同时做PCRHBVDNA定量检测     

血清中游离乙型肝炎病毒DNA检测分析

目的了解乙型肝炎患者血清中游离乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)的情况。方法血清加DNA提取液处理后检测的DNA作为总的HBVDNA,血清加蒸馏水直接检测的DNA作为游离的HBVDNA,用实时荧光定量PCR法检测DNA,用生化自动分析仪测定标本的ALT和AST。结果30例标本中,有27例标本检出有游离HBV DNA,检出率为70.0%,总HBVDNA在105数量级以上(包括105数量级),均检出有游离HBV DNA。总HBV DNA平均载量为(1.6±3.1)×108copies/ml,游离HBVDNA平均载量为(4.8±8.2)×106copies/ml,游离HBV DNA与总HBV DNA含量呈正相关关系(r=0.545,P0.05)。在30例中,有20例肝功能正常,有10例肝功能不正常。在肝功能正常组中有14例检出有游离HBVDNA,检出率为70.0%(14/20);在肝功能不正常组中有7例检出有游离HBV DNA,检出率为70.0%(7/10);两组检出的游离HBV DNA平均含量比较无统计差异(P0.05)。结论在乙型肝炎患者血清中,当总HBVDNA在105数量级以上(包括105数量级),血清中就含有游离HBV DNA,与总HBV DNA含量呈正相关关系;游离的HBVDNA的释放与肝细胞是否受损没有关系。     

东莞地区乙型肝炎患者HBV基因分型研究

目的检测分析东莞地区乙型肝炎(下称乙肝)患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布及其与性别、HBV血清标志物和HBV DNA定量值的关系。方法用聚合酶链反应(PCR)-微板核酸杂交-酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测6种HBV基因型,ELISA法检测血清HBV标志物(两对半),荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测血清HBV DNA定量值,并对结果进行分析。结果东莞地区206例乙肝患者HBV基因型分布:C型为主69.42%(143/206)、B型11.17%(23/206)、D型7.28%(15/206)、B+C混合型5.83%(12/206)、C+D混合型5.34%(11/206)、B+D混合型0.97%(2/206)。基因型男、女性别检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。基因型C与其它各基因型检出率比较差异有统计学意义(P<0.01)。各基因型阳性组血清平均HBV DNA定量值大于1×106(copy/ml),各基因型阳性组与基因型阴性组血清平均HBV DNA定量值比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论东莞地区乙肝患者HBV基因型分布以C型为主。基因型阳性检出率从高到低依次为C、B、D、混合型(B+C型、C+D型、B+D型)。HBV基因型检出率与性别关系不明显,与HBV血清标志物和HBV DNA定量值有一定关系。东莞地区HBV基因型分布状况可能与本地区外来人群相关。     

二种分子杂交技术定量检测临床标本中HBV DNA的比较

目的　第 2代核酸杂交捕获系统 (HCⅡ )与分枝链DNA信号放大系统 (bDNA)定量检测HBVDNA的临床应用比较。方法　 4 0例乙型肝炎病毒表面抗原阳性的慢性乙型肝炎患者临床血清标本共 79份 ,采用 2种杂交方法定量检测HBVDNA。结果　HCⅡ与bDNA定量检测HBVDNA的阴阳性符合率为 85 .9% ,相关系数r =0 .96 ,P <0 .0 0 1;经敏感性比较 ,HCⅡ灵敏度较bDNA提高 10 1拷贝 /ml～ 10 2 拷贝 /ml。HCⅡ与bDNA定量检测HBVDNA结果的换算方程为 :HCⅡ (HBVDNA拷贝 /ml) =1.0 14×〔bDNA (HBVDNAEq/ml)〕0 .963 2 ;或bDNA (HBVDNAEq/ml) =4 .0 34×〔HCⅡ (HBVDNA拷贝 /ml)〕0 .9574。在操作上HCⅡ比bDNA更为简便、快速。结论　HCⅡ与bDNA法检测HBVDNA具有较好的相关性 ,可用于临床HBVDNA水平的定量检测、监控及抗病毒药物的筛选、考核。     

HBV-DNA与HBV-TRFIA检测结果比较分析

目的　探讨乙肝患者血清 HBV DNA的表达水平及其与乙肝标志物的相互关系 ,了解用 TRFIA法检测 HBV- M,其对应的 HBV- DNA拷贝数。方法　用荧光聚合酶链反应 ( FQ- PCR)对患者进行 HBV-DNA检测 ,同时用 TRFIA法定量测定乙肝表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体和核心抗体指标。结果　在 39例患者血清中检测出 HBV- DNA病毒基因拷贝值范围为 2 .1× 1 0 3～ 3.8× 1 0 8copies/ ml,平均含量为 2 .95× 1 0 6copies/ ml,总阳性检出率为 43.3% ;2 0例 HBs Ag( + )、HBe Ag( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV-DNA阳性为 1 6例 ,阳性检出率为 80 % ;42例 HBs Ag( + )、抗 - HBe( + )、抗 HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 1 7例 ,阳性检出率为 40 .5 % ;9例 HBs Ag( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 3例 ,阳性检出率为33.3% ;1 0例抗 - HBs( + )、抗 - HBe( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 1例 ,阳性检出率为 1 0 % ;3例 HBs Ag( + )、HBe Ag( + )、抗 - HBe( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 2例 ,阳性检出率为66.7% ;而 2例 HBV- M全 ( - )的 HBV- DNA也全 ( - )。结论　 FQ- PCR是测定乙肝病人血清中 HBVDNA含量较特异、灵敏的方法 ,能反映乙肝病毒的复制水平和活跃程度 ;乙肝血清学标志物定量     

核酸定量和免疫标志物检测在乙型病毒性肝炎诊断中的评价

目的 探讨血清中乙型肝炎病毒核酸(HBV -DNA)含量和其免疫标志物的关系 ,其在乙型病毒性肝炎(乙肝)临床诊治和预后中的应用评价。方法 用荧光实时定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验对318例诊断或怀疑为乙肝患者的血清标本分别进行HBV -DNA、乙肝免疫标志物(HBsAg、抗 -HBs、HBeAg、抗 -HBe和抗 -HBc)的检测 ,结果HBV的s抗原、e抗原、c抗体(HBsAg、HBeAg、抗 -HBc)都阳性的标本 ,其血清HBV -DNA阳性率为96.95 % (127/131) ,平均含量为106.36±1.46拷贝/ml;HBsAg、抗 -HBe、抗 -HBc都阳性的标本 ,其血清HBV -DNA阳性率为43.86 %(25/57) ,平均含量为104.08±0.92 拷贝/ml;12.12%(4/33)乙肝免疫标志检测阴性标本仍可检出HBV -DNA。结论 血清乙肝病毒核酸的定量与乙肝免疫标志检测相比 ,有较高的敏感度 ,但难以检出非病毒复制状态的感染 ,尚不能替代血清标志物的检测 ,在乙肝患者诊治过程中 ,应联合乙肝免疫标志、HBV -DNA的检测 ,以助于疾病的诊断、疗效观察以及预后判断。     

实时定量检测乙肝患者HBV DNA及其与抗原抗体模式的关系

目的　探讨乙肝患者血清HBVDNA定量检测的临床意义及与乙肝抗原抗体模式的关系。方法　用Light CyclerTM对 315例乙肝初诊患者进行HBVDNA定量检测 ,同时定量测定乙肝表面抗原、表面抗体 ,e抗原、e抗体和核心抗体等指标 ,观察患者血清中乙肝病毒基因组含量与抗原抗体表型组合的关系。结果　在 16 9例患者血清中检测出HBVDNA ,病毒基因组拷贝值范围为 3 77× 10 2 ～ 3 12× 10 8copies ml,平均拷贝值为 3 6 7× 10 6 copies ml,阳性检出率为 5 3 6 % ;在大多数e抗原阳性的患者血清中均能检测到较高拷贝水平的病毒基因组含量 ;而在e抗原阴性患者中仍有 35 4 %可检测出HBVDNA。结论　LightCyclerTM是测定乙肝病人血清中HBVDNA含量较精确的方法之一 ,能够正确反映乙肝病毒的复制水平和活跃程度 ;乙肝特异性血清学检测结合HBVDNA定量检测分别从蛋白水平和DNA水平反映患者体内病毒的存在状态及机体的反应性 ,对临床诊断、估计病情及用药方案的选择有重要的指导意义。     

HBV DNA定量检测方法的评价

目的　协助临床检验工作者及科研人员选择适合本单位实际条件的HBV DNA定量检测方法。方法　采用核酸分子杂交、荧光定量PCR、微板核酸杂交三种方法对89 例乙型肝炎大三阳患者进行HBV DNA测定。结果　三种方法测定结果依次为荧光定量PCR法阳性89 例,微板核酸杂交法阳性81例,斑点杂交法阳性62例,三种方法均阳性61 例。结论　斑点杂交法准确性和特异性较高,适合于流行病学调查和药物观察等研究。荧光定量PCR技术灵敏度较高,若能提高其检测结果的准确性,它应为临床及科研之首选方法。微板核酸杂交技术有较高的灵敏度和特异性,操作简便,可常规普及。     

HBV DNA定量检测方法的评价

目的协助临床检验工作者及科研人员选择适合本单位实际条件的HBV DNA定量检测方法。方法采用核酸分子杂交、荧光定量PCR、微板核酸杂交三种方法对89例乙型肝炎大三阳患者进行HBV DNA测定。结果三种方法测定结果依次为荧光定量PCR法阳性89例，微板核酸杂交法阳性8l例，斑点杂交法阳性62例，三种方法均阳性61例。结论斑点杂交法准确性和特异性较高，适合于流行病学调查和药物观察等研究。荧光定量PCR技术灵敏度较高，若能提高其检测结果的准确性，它应为临床及科研之首选方法。微板核酸杂交技术有较高的灵敏度和特异性，操作简便，可常规普及。     

乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR的建立与应用

目的　建立血浆 (血清 )HBVDNA荧光定量PCR检测方法 ,探讨其临床应用价值。方法　用PUCm T载体和PCR纯化产物连接 ,转染DH5α菌 ,筛选阳性菌落 ,提取质粒 ,制作外标准品 ;在HBV基因组S区设计一对引物和TaqMan探针 ,严格优化反应物的组成和扩增条件 ,并对该方法进行评价。结果　建立的HBVDNA荧光定量PCR最低可检出 80 0拷贝 /ml;批内误差为 1 8%～ 6 5% ,批间误差为 2 6 %～ 9 1 % ;在 1 0 4 ～ 1 0 11拷贝 /ml之间与Ct值具有很好的线性 (Ct =- 1 .391 1ln(X) 4 1 .6 5,r =- 0 .9958) ;外周血HBVDNA临床定量检测发现 ,HBeAg阳性的 1 30例中 ,HBVDNA阳性率为 1 0 0 % ,含量为1 0 6 89± 1.6 9拷贝 /ml,抗HBe阳性的 96例中HBVDNA阳性率为 55 2 % ( 53/ 96 ) ,含量为 1 0 4 .0 9± 1.19拷贝 /ml;6 2例献血员未检出HBVDNA。乙肝临床治疗监测发现 ,外周血中HBVDNA含量检测可有效反映治疗效果 ,指导临床用药。结论　荧光定量PCR检测方法是一种相对准确、灵敏度高、特异性较强和较简便的HBVDNA定量检测技术 ,对乙肝诊断、指导临床用药和治疗监测方面具有实用价值     

二种分子杂交技术定量检测临床标本中HBV DNA的比较

目的第2代核酸杂交捕获系统(HCⅡ)与分枝链DNA信号放大系统(bDNA)定量检测HBV DNA的临床应用比较.方法40例乙型肝炎病毒表面抗原阳性的慢性乙型肝炎患者临床血清标本共79份,采用2种杂交方法定量检测HBV DNA.结果HCⅡ与bDNA定量检测HBV DNA的阴阳性符合率为85.9%,相关系数r=0.96,P＜0.001;经敏感性比较,HCⅡ灵敏度较bDNA提高101拷贝/ml～102拷贝/ml.HCⅡ与bDNA定量检测HBV DNA结果的换算方程为HCⅡ(HBV DNA拷贝/ml)=1.014×[bDNA(HBV DNA Eq/ml)]0.9632;或bDNA(HBV DNA Eq/ml)=4.034×[HCⅡ(HBV DNA拷贝/ml)]0.9574.在操作上HCⅡ比bDNA更为简便、快速.结论HCⅡ与bDNA法检测HBV DNA具有较好的相关性,可用于临床HBV DNA水平的定量检测、监控及抗病毒药物的筛选、考核.     

串联重复信号放大系统检测HBV DNA与其他方法的比较研究

目的探讨TRSE液相杂交法检测HBVDNA的临床应用价值。方法先用TRSE法、斑点杂交法、定性PCR法及荧光定量TaqmanPCR法分别检测倍比稀释的标准HBVDNA质粒,比较其敏感性;再用355份血清标本对各个方法的敏感性、特异度、结果的符合率等做进一步的比较分析。结果荧光定量PCR法的敏感性最高,达到1.33×104copy/ml;普通PCR法的敏感性为5.15×104copy/ml;TRSE法的敏感性为8.33×104copy/ml较斑点杂交法的6.25×105copy/ml高。在HBsAg+HBeAg阳性组,TRES液相杂交法的阳性率与普通PCR法无差别;在HBsAg(+)/HBeAg(-)组,TRSE液相杂交法只与荧光定量TaqmanPCR法有差别。结论TRSE杂交法能够区分在HBeAg阳性和阴性组HBVDNA复制的差别;它具有敏感性、特异度高,实用性强等特点,是一种较好的HBVDNA检测方法。     

改良PCR-ELISA的建立及初步应用

目的　建立操作简单、灵敏、特异的PCR -ELISA。方法　采用短DNA片段扩增 ,其中上游引物 5′端标记有生物素 ,使PCR扩增产物的一条链上带有生物素 ,随着PCR反应的结束 ,PCR反应液中的地高辛标记的探针与PCR产物中的生物素标记的DNA链杂交 ,形成杂交产物 ,然后杂交产物通过生物素与微孔板上固定的链霉亲合素结合 ,被固定在微孔板上 ,最后用ELISA检测被固定的杂交产物。结果　该方法可以检测出 1× 10 1拷贝的HBVDNA模板 ,对 10 0例乙型肝炎患者的血清进行检测 ,HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清 10 0 %(30 /30 )检出HBVDNA ;HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清HBVDNA阳性为 78 6 %(2 2 /2 8) ;HBsAg(+)、抗HBc(+)的血清HBVDNA阳性为 6 6 7%(16 /2 4) ,其余为阴性。非乙型肝炎血清的结果均为阴性。结论　该PCR -ELISA操作简单 ,方法灵敏、特异。     

HBV DNA定量与乙肝标志物检测结果对比分析

目的 探讨血清中HBV DNA定量与乙肝标志物（HBV-M）之间的关系及临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和ELISA法分别检测535例门诊病人的血清HBV DNA含量和HBV-M,并对结果进行对比分析.结果 HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为88.8%（207/233）,平均拷贝数为1.0＊10^8/ml;HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为31.6%（50/158）,平均拷贝数为6.2＊106/ml;HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为21.7%（15/69）,平均拷贝数为1.8＊106/ml;HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为6.2%（1/16）,平均拷贝数3.2＊103/ml;全阴性组血清HBV DNA检出率为5.0%,平均拷贝数为2.0＊103/ml;其他组合,HBV DNA检出率为0.结论 对临床HBV感染、复制及传染性的判断,除乙肝标志物ELISA检测外,加做HBV DNA FQ-PCR检测具有重要意义.     

90例HBV基因型与拉米夫定疗效的研究

目的 :探讨乙肝病毒 (HBV)基因型与拉米夫定疗效的关系。方法 :选用 90例慢性乙肝病人 ,采用口服拉米夫定 10 0mg/d治疗 2 4个月。根据HBV前C区保守序列作为通用包被探针 ,HBV不同基因型的序列作为基因分型显色探针 ;另外拉米夫定YMDD及耐药突变的两种形式 (YIDD/YVDD)分别作为显色探针。采用PCR微板双探针杂交ELISA技术进行HBVDNA定量、HBV基因分型、YMDD及突变耐药株 (YIDD/YVDD)的检测。结果 :90例乙肝病人C基因型占 4 3% ,B基因型 30 % ,D基因型 16 % ,混合基因型为 10 %。其中有 1例出现YIDD耐药株(称为先天性耐药 )。口服拉米夫定 12个月后 ,5 14 6 /90 )的病人HBVDNA转阴 (<0 .1pg/ml血清 ) ;YMDD耐药株发生率为 16 % (14 /90 ) ,其中C基因型 6例 ,D基因型 6例 ,混合基因型 2例 ,先天性耐药株对拉米夫定无反应。口服拉米夫定 2 4个月后 ,HBVDNA转阴率为 5 2 % (47/90 ) ,YMDD耐药株的发生率为 2 7% (2 4 /90 ) ,其中D基因型 10例 ,C基因型 9例 ,B基因型 1例 ,混合基因型 4例。结论 :本研究中乙肝病人HBV基因型主要为C型 ,其次为B型及D型。口服拉米夫定后大多数病人可以明显降低DNA水平 ;其YMDD突变耐药株的发生与HBV基因型有关 ,以D型及C型YMDD突变耐药株发生率较高。PCR微板双探针杂交技术不但     

反应体系对荧光定量PCR检测乙肝核酸结果影响的分析

目的探讨荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸（HBV-DNA）时核酸提取体系中加入样本量的不同和不同反应体系对检测结果的影响。方法选取乙肝检测患者DNA定量结果为低拷贝数（10-103copies/ml）和高拷贝数（105-107copies/ml）样本各10例,分别按2种核酸提取体系及2种反应体系分为4组进行HBV-DNA荧光定量PCR检测。结果 10例低拷贝数样本减少反应体系后只有3例检出有反应,由于反应体系的减小造成结果存在明显差异,P〈0.01;即使增加提取核酸时加入的样本量,结果仍然存在差异,P〈0.01。10例高拷贝数的样本改变提取核酸时加入的样本量及最终的反应体系,各组的算术平均值在0.43-2.31倍之间,数量级变化〈1。结论反应体系过小会造成低拷贝数样本出现假阴性,所以要保证反应体系中加入足够的提取出的核酸以确保样本HBV-DNA的检出率。     

用套式基因扩增技术检测乙型肝炎病毒P基因区YMDD变异

目的　了解套式基因扩增 (nestedPCR)技术在检测HBVP基因区酪氨酸 -蛋氨酸 -天冬氨酸 -天冬氨酸 (YMDD)变异中的敏感性和特异性。方法　用套式基因扩增技术对 3组共 85例慢性乙型肝炎患者血清进行YMDD变异检测 ,检测结果经琼脂糖凝胶电泳判断。第 1组 :4 0例未经拉米夫定治疗 ,HBVDNA >5× 10 5拷贝 /ml;第 2组 :2 4例经拉米夫定治疗 6～ 18个月 ,HBVDNA≤ 5× 10 5拷贝 /ml;第 3组 :2 1例经拉米夫定治疗 6～ 18个月 ,HBVDNA >5× 10 5拷贝 /ml。结果　第 1组检出YVDD 2例、YVDD YIDD 1例 ,检出率为 7.5 % ;第 2组检出YVDD、YIDD各 1例 ,检出率为 8.3% ;第 3组检出YVDD 4例、YIDD 2例、YVDD YIDD 3例 ,检出率为 4 2 .9%。结论　套式基因扩增技术检测YMDD变异具有较高的敏感性和特异性 ,适合变异株快速检测 ,尤其适合检测处于弱势的YMDD变异株     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA检测乙肝两对半700例样本分析

【摘要】目的：分析乙肝病毒核酸（HBV—DNA）含量检测的结果及其与乙肝血清标志物检测结果的一致性。方法：用荧光定量PCIK和ELISA两种方法检测700份乙肝患者血清,并对其结果进行分析。结果：700例HBV-DNA定量检测阳性355例。阴性345例;大三阳检出共254例,阳性检出率98％,平均拷贝数4．38E＋06／ml;小三阳检出共333例,阳性检出率19．5％,平均拷贝数3．98E＋04／ml;表面抗原（HBs一般）和核心抗体（HBc—Ab）阳性检出共100例,阳性检出率33％;平均拷贝数2．71E＋04／ml;表面抗原（HBs-Ag）和e抗原（HBe-Ag）检出共13例,阳性检出率61．6％,平均拷贝数6．21E＋06／ml。结论：乙肝患者两对半检出的各种类型中均有病毒复制和无复制现象,大三阳中以复制为主,但也有少许无复制患者,小三阳以无复制为主,但也有部分患者出现复制现象,一般处于低复制状态。纵观所有,HBe-Ag在阳性的情况下HBV-DNA检测出的阳性率也高,二者呈正相关嘲,鉴于这些情况运用PCIK技术定量检测HBV-DNA能准确反映HBV的真实感染和复制情况。两者联合检测在临床乙型肝炎诊断、治疗、顸后方面有重要意义。