ASD患儿肠道菌群失衡、免疫指标紊乱调查及关系分析

目的:调查孤独症谱系障碍ASD患儿肠道菌群失衡、免疫指标紊乱情况,并分析其相关性,为临床解释ASD病因机制提供可靠依据.方法:选取2017年6月至2020年6月期间于我院门诊确诊的82例ASD患儿为观察组,并随机选取同期接受健康体检57例儿童作为健康对照组,采集两组儿童粪便,通过荧光定量PCR法测定其肠道菌群多样性,定...     

早产儿喂养不耐受肠道菌群多样性研究

目的：采用变性梯度凝胶电泳聚合酶链反应（ PCR－DGGE）技术从微生物生态学的角度分析比较喂养不耐受（ FI）与健康早产儿肠道细菌群落结构的多样性及相似性。方法以2013年11月至2014年9月在第四军医大学附属唐都医院儿科新生儿病房诊断为FI的早产儿为FI组。选择与FI组胎龄、日龄、出生体重相匹配的非FI早产儿作为对照组。采集出现FI时和同时间段对照组的粪便标本,进行16SrDNAV3区扩增和变性梯度凝胶电泳（DGGE）,从而分析比较两组间肠道菌群多样性指数及相似性。结果细菌多样性检测显示FI组的肠道菌群多样性指数香农－维纳指数（H）、丰度（S）、均衡度指数（E）和辛普森多样性指数（D）均低于对照组（均P＜0．05）;相似性矩阵图及聚类分析结果显示组内菌群相似性较组间高（P＜0．05）;PCA结果同聚类分析一致。结论肠道微生物群落多样性的改变及群落结构紊乱可能是引起早产儿FI的重要因素。     

儿童炎症性肠病病原菌分析

摘要:目的　分析某院炎症性肠病（Inflammatory Bbowel Disease,IBD）儿童患者粪便中的菌群分布,并与正常对照进行比较,探讨儿童IBD的发生与肠道菌群的关系。方法　选取2011年5月-2014年8月在该院确诊的IBD患儿共101例作为调查对象;同时选取该院同一时间段进行健康体检的健康儿童50例作为对照。收集调查样本新鲜粪便,通过荧光定量PCR检测肠道优势菌群的数量情况,比较溃疡性结肠炎（UC）患儿、克罗恩病（CD）患儿与正常对照组各优势菌种的数量差异。结果　根据菌群定量检测结果发现,拟杆菌属在3组人群中数量差异无统计学意义（F＝3.148,P＞0.05）,UC组及CD组双歧杆菌、缠绕杆菌、乳酸菌、脆弱杆菌、梭状芽胞杆菌比对照组显著减少（F值分别为15.331、17.453、21.479、18.521,27.658,P值均＜0.05）,UC组及CD组肠球菌比正常对照组明显增多（F＝23.457,P＜0.05）。结论　儿童肠道优势菌群与IBD的发生具有关联性,但优势菌群分布与IBD发生的因果关系还需要今后进行进一步的研究证实。     

蒙古族儿童肠道菌群结构特征分析

比较不同体质量指数(body mass index,BMI)蒙古族儿童肠道菌群结构特征,为蒙古族儿童消化代谢研究提供基础数据.方法 采用整群抽样方法,调查包头市某地区712岁蒙古族儿童410名,严格按照纳入标准并进行同年龄和同性别1∶1匹配,筛选出肥胖、超重和正常体重儿童各30名为研究对象,采用试剂盒法提取研究对象粪便基因组DNA,通过聚合酶链式反应变性梯度凝胶电泳(poclymerase chain reaction denaturing gradient gel electrophoresis,PCRDGGE)分析不同BMI分组蒙古族儿童肠道菌群的多样性,进而通过实时荧光定量PCR(real-time PCR)对肠道内优势菌群脆弱拟杆菌属、梭菌属、双歧杆菌属和乳杆菌属进行定量检测.结果 PCR-DGGE电泳图谱显示,不同BMI分组的蒙古族儿童肠道菌群构成差异有统计学意义.肥胖组细菌群落丰富度(7.40±0.55)低于正常体重组(11.00±1.22)和超重组(12.40±2.51)(F=14.71,P<0.05);肥胖组香农多样性指数(1.92±0.07)低于正常体重组(2.29±0.10)和超重组(2.33±0.21)(F=15.08,P<0.05).real-time PCR结果显示,随着BMI增大,蒙古族儿童肠道内脆弱拟杆菌属、双歧杆菌属的数量呈递减趋势,而梭菌属的数量呈递增趋势(F值分别为3.99,6.84,6.82,P值均<0.05);乳杆菌属的数量在蒙古族肥胖组、超重组和正常体重组儿童之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 不同BMI分组的蒙古族儿童肠道菌群构成存在差异.肠道菌群可能参与了蒙古族儿童肥胖的发生发展过程.     

学龄儿童肥胖与肠道菌群多样性及菌属丰度的关联研究

目的分析学龄肥胖儿童和正常体重儿童肠道菌群多样性差异, 识别肥胖儿童肠道特征菌属, 为后续相关机制研究和学龄儿童肥胖的防治提供依据。方法基于2016年在上海市嘉定区某小学建立的研究队列人群, 将2016-2018年3年均处肥胖状态的儿童共63名纳入肥胖组, 其中男生43名, 女生20名。在3年均为正常体重的儿童中, 根据年龄、性别和所在班级, 将其与肥胖组儿童进行1∶1匹配, 共选择63名纳入对照组。采用问卷收集儿童基本信息、饮食状况、母乳喂养等情况, 收集两组儿童的粪便样本并进行16S rDNA测序。对质量优化后的测序序列按照97%相似性进行可操作分类单元聚类及物种注释。分析肥胖组和对照组儿童肠道菌群多样性及菌属丰度差异。计算肠道菌群的Ace、Chao1、Shannon、Simpson 4种α多样性指数, 并利用主坐标分析, 在非加权Unifrac距离和加权Unifrac距离的基础上表示β多样性。使用相似性分析(ANOSIM)比较两组β多样性的差异。利用STAMP软件挑选出两组儿童共有菌属中的差异细菌, 并利用广义线性模型(GLM)分析肥胖与α多样性以及显著差异菌属的关联。结果肥胖组...     

哈尔滨市香坊区学龄儿童牛乳蛋白过敏状况调查

目的了解儿童牛乳蛋白过敏(cowmilk protein allergy,CMPA)现状,为CMPA的防治和致敏食物的监管提供科学依据。方法以自编问卷、皮肤点刺试验、德国敏筛试纸实验作为初步诊断依据,对哈尔滨市5840名6～10岁学龄儿童进行筛查,分析牛乳蛋白过敏的影响因素。结果在有效答卷5720份中,自诉牛乳蛋白过敏的学生196例,其中47例皮肤点刺实验、德国敏筛试纸均呈阳性,CMPA发生率为0.82%。牛乳蛋白过敏多为皮疹,其次为胃肠过敏。除对牛乳蛋白过敏外,同时也对其他食物过敏。喂养方式、其他食物过敏情况、父母过敏情况是CMPA发生的影响因素。结论应采取母乳喂养、推荐食用低致敏婴儿配方粉等综合措施预防和治疗CMPA。     

1型糖尿病儿童肠道菌群谱分析研究

目的 通过16SrRNA基因测序方法探索1型糖尿病(T1DM)儿童肠道菌群结构变化的特征,并比较T1DM儿童与健康儿童间肠道菌群的差异,为临床应用益生菌进行TIDM早期干预提供理论基础和实验依据。方法 选取2018年10月-2019年10月在昆明市儿童医院内分泌遗传代谢科住院并初诊为T1DM的5~14岁儿童18例,同时选取19例性别、年龄相近的健康儿童为研究对象,收集两组儿童粪便标本后进行16SrRNA基因测序实验,并采用QIIME 2分析流程进行生物信息学分析,比较两组间肠道菌群的差异。结果 1)利用QIIME2软件将相似度100%的序列聚类分析后共获得3 248个Feature数;2)经物种鉴定及注释,绝大部分菌群都分类到属级和种级;3)Alpha多样性分析说明本次研究测序深度充分,并且T1DM儿童肠道菌群的丰富度及多样性较健康儿童降低 (P<0.05);4)Beta多样性分析中,PCoA图说明T1DM儿童和健康儿童间肠道菌群结构存在明显差异;5)肠道菌群组成差异分析中,在门水平上,T1DM儿童放线菌门、拟杆菌门和蓝细菌门丰度显著增高,而变形菌门、杆菌门的丰度降低(P<0.05);在属水平上,T1DM儿童粪杆菌属、双歧杆菌属和拟杆菌属的丰度较健康儿童增高,而埃希氏杆菌属-志贺氏杆菌、肠球菌属、Blautia菌属丰度降低(P<0.05)。结论 T1DM儿童存在肠道菌群生态失衡,并且菌群物种的丰富度及多样性降低。此外,T1DM儿童与健康儿童肠道菌群结构分布存在明显差异。     

1型糖尿病儿童肠道菌群谱分析研究

目的 通过16SrRNA基因测序方法探索1型糖尿病(T1DM)儿童肠道菌群结构变化的特征,并比较T1DM儿童与健康儿童间肠道菌群的差异,为临床应用益生菌进行TIDM早期干预提供理论基础和实验依据。方法 选取2018年10月-2019年10月在昆明市儿童医院内分泌遗传代谢科住院并初诊为T1DM的5~14岁儿童18例,同时选取19例性别、年龄相近的健康儿童为研究对象,收集两组儿童粪便标本后进行16SrRNA基因测序实验,并采用QIIME 2分析流程进行生物信息学分析,比较两组间肠道菌群的差异。结果 1)利用QIIME2软件将相似度100%的序列聚类分析后共获得3 248个Feature数;2)经物种鉴定及注释,绝大部分菌群都分类到属级和种级;3)Alpha多样性分析说明本次研究测序深度充分,并且T1DM儿童肠道菌群的丰富度及多样性较健康儿童降低 (P<0.05);4)Beta多样性分析中,PCoA图说明T1DM儿童和健康儿童间肠道菌群结构存在明显差异;5)肠道菌群组成差异分析中,在门水平上,T1DM儿童放线菌门、拟杆菌门和蓝细菌门丰度显著增高,而变形菌门、杆菌门的丰度降低(P<0.05);在属水平上,T1DM儿童粪杆菌属、双歧杆菌属和拟杆菌属的丰度较健康儿童增高,而埃希氏杆菌属-志贺氏杆菌、肠球菌属、Blautia菌属丰度降低(P<0.05)。结论 T1DM儿童存在肠道菌群生态失衡,并且菌群物种的丰富度及多样性降低。此外,T1DM儿童与健康儿童肠道菌群结构分布存在明显差异。     

青海地区轮状病毒性肠炎患儿肠道菌群流行病学分析

目的 分析青海地区轮状病毒性肠炎(RVE)患儿肠道菌群流行病分析.方法 64例RVE患儿作为RVE组,同期在医院儿保科体检的62例健康儿童作为健康对照组.收集粪便标本,采用荧光定量PCR技术检测粪便标本双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌和肠球菌16S rRNA,并测定含量.比较两组常见肠道菌群含量,分析不同性别、年龄、民族和...     

孤独症谱系障碍儿童肠道菌群多样性的研究

目的 分析孤独症谱系障碍(ASD)儿童肠道菌群多样性,为减轻胃肠道症状提供科学依据。方法 选取2018年1-6月在广西壮族自治区妇幼保健院确诊为ASD的儿童20例和健康儿童20例作为研究对象。采集两组儿童粪便提取总DNA,扩增16S rDNA中V4/V5区进行高通量测序,分析ASD儿童肠道菌群多样性。结果 两组在样品文库的覆盖率(Z=242.500,P=0.256)、丰度指标Chao1(Z=250.000,P=0.181)、 ACE(Z=234.000,P=0.365)、Shannon(Z=259.000,P=0.114)和Simpson(Z=146.000,P=0.145)指数上差异均无统计学意义(P>0.05),多样性无差异。门水平上,两组儿童在8种菌群上差异无统计学意义(P>0.05),属水平上,两组儿童在20个属上差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论 ASD儿童和健康儿童在肠道菌群属水平上具有差异;临床上可根据不同菌属特点对ASD儿童肠道菌群进行精准调整,保持肠道微生态平衡,减轻ASD儿童胃肠道症状。     

上海地区IgE 相关牛奶过敏的儿童中大豆过敏发生情况

目的 研究上海地区IgE 相关牛奶过敏的儿童中大豆过敏的发生情况,以了解牛奶过敏与否和大豆过敏是否存在联系。方法 共有441名于2009年在复旦附属儿科医院就诊的儿童进入研究,该研究分为实验组与对照组,实验组共有224名,因IgE 相关牛奶过敏就诊,其牛奶IgE结果均为阳性,年龄最小4个月,最大4岁;对照组为217名同期因非过敏疾病于该院就诊的患儿,且既往无牛奶过敏史,其牛奶IgE结果为阴性,其中年龄最小3个月,最大4岁。检测所有对象的血清特异性大豆蛋白IgE水平,进而分析大豆与牛奶的特异性IgE水平有无相关性;各年龄组大豆过敏情况,有无性别差异;以及实验组与对照组的大豆过敏率有无统计学差异。结果 在实验组所有牛奶过敏的患儿中,33例(14.7%)检测出了大豆过敏,其中仅1例IgE水平>100 kU/L(极强阳性),其他阳性结果的平均值为1.74 kU/L,平均水平较低。大豆与牛奶的特异性IgE水平无相关性(P=-0.01)。对照组中大豆过敏为13例,占6%。两组大豆过敏的发生率均随着年龄增长明显下降,两组大豆过敏率均无性别差异。实验组与对照组的大豆过敏率在1岁内有统计学差异,随年龄增长,1岁后无统计学差异,即说明1岁后牛奶与大豆无交叉过敏现象。 结论 上海地区的IgE 相关牛奶过敏的儿童中大豆过敏占很小一部分(尤其是>1岁的儿童),对大部分牛奶过敏的患儿来说,大豆配方奶及其他大豆制品是可以选择的。但是小于1岁婴儿,牛奶与大豆仍存在一定的交叉过敏,所以该年龄阶段牛奶过敏的患儿喂养大豆配方奶粉时应严密监测有无过敏反应发生。     

深度水解蛋白奶粉对过敏性紫癜儿童营养状况的应用研究

目的 探讨深度水解蛋白奶粉对过敏性紫癜儿童营养状况的作用和效果,为患儿寻找营养均衡的饮食治疗方法。方法 选取2014年1月-2015年6月在西安交通大学第二附属医院儿科住院治疗的过敏性紫癜患儿60例,随机将患儿分为限制饮食组30例,进食传统限制饮食;深度水解组30例,进食深度水解蛋白奶粉。同期选取在本科治疗的上呼吸道感染患儿30例作为正常对照组,进食正常饮食。于饮食治疗满1、2、3个月时分别给三组患儿进行膳食调查分析及血液生化检验。分析对比三组患儿营养素摄入水平和机体营养状况。结果 饮食治疗3个月后,限制饮食组大部分营养素摄入的实际/推荐百分比仍然低于60%,深度水解组全部营养素摄入的实际/推荐百分比达90%~110%之间,明显高于限制饮食组(P<0.05),与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。深度水解组患儿的血清甘油三脂、胆固醇、前白蛋白、总蛋白和白蛋白水平与限制饮食组相比均明显升高(P<0.05),与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 深度水解蛋白奶粉应用于儿童过敏性紫癜饮食治疗中,提高患儿营养素及蛋白质的摄入水平,改善机体营养状况,利于患儿的健康成长。     

Increased IgE-type antibody response to food allergens in irritable bowel syndrome and inflammatory bowel diseases

BACKGROUND: The irritable bowel syndrome (IBS) is a functional bowel disorder characterized by symptoms of abdominal pain that is associated with disturbed defecation. Crohn's disease (CD) and Ulcerative colitis (UC) are collectively referred to as inflammatory bowel diseases (IBD). IBD appears to result from dysregulated immune response with contributions from genetic predisposition and environmental factors. Among environmental factors the enteric microflora and the components of food (eg. antigens) may play important role in the pathogenesis of IBD. The aim of the authors' study was to detect IgE type antibodies against the most frequent food allergens in patients with IBD and IBS. METHODS: Antibodies against food allergens (IgE type) with ELISA method in patients with CD, UC and IBS were quantitatively measured. The figures were compared to the result of a healthy control group contains the same number of participants, and the frequency of food allergy in these patient groups were determined. RESULTS: On the basis of the study the presence of increased IgE type immune response against any food allergens was 34.5% (p = 0.01) in the group of IBS. In patients with CD or UC the immune response against food allergens was also more frequent than in the control group. The order of frequency of food allergens in IBS was the following: milk protein, soybean, tomato, peanut, egg white. CONCLUSION: As the occurrence of food allergens was significantly higher in IBS group than in the control group, the role of food allergy in the symptoms of IBS can be come up. The frequency of food allergy in patients with diagnosis of IBS, and the similarity of symptoms of this two diseases give an obvious opportunity for the patients with IBS to use a diet avoiding the most frequent food allergens, or take e.g. Na-cromoglycate which is useful therapy in food allergy.     

CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性 T细胞在牛奶蛋白过敏发生及耐受中的作用

目的：探讨CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞在牛奶蛋白过敏患儿发病及耐受过程中的作用。方法选取2013年1月至2015年1月东南大学医学院附属江阴市人民医院儿科明确诊断牛奶蛋白过敏的患儿20例,健康对照组20例,牛奶蛋白过敏患儿予深度水解或完全水解蛋白配方粉喂养6个月,6个月后行食物激发试验,过敏耐受者15例,耐受失败者3例。治疗前后测定外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞的水平,分析比较牛奶蛋白过敏患儿治疗前、治疗后及与对照组之间CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞的差异,并比较治疗后过敏耐受患儿和耐受失败患儿CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞的差异。结果牛奶蛋白过敏患儿CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞水平明显低于对照组患儿（3．73±0．42％ vs 6．90±0．35％,t＝2．22,P＜0．05）;治疗后CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞水平较治疗前明显升高（5．18±0．81％ vs 3．73±0．42％,t＝2．10, P＜0．05）;治疗后牛奶蛋白耐受患儿CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞水平明显高于耐受失败患儿（5．36±0．76％ vs 4．28±0．36％,t＝2．31,P＜0．05）。结论 CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞有助于减少牛奶蛋白过敏的发生,并帮助诱导免疫耐受。     

Gut Microbiota as Potential Therapeutic Target for the Treatment of Cow’s Milk Allergy

Cow’s milk allergy (CMA) continues to be a growing health concern for infants living in Western countries. The long-term prognosis for the majority of affected infants is good, with about 80% naturally acquiring tolerance by the age of four years. However, recent studies suggest that the natural history of CMA is changing, with an increasing persistence until later ages. The pathogenesis of CMA, as well as oral tolerance, is complex and not completely known, although numerous studies implicate gut-associated immunity and enteric microflora, and it has been suggested that an altered composition of intestinal microflora results in an unbalanced local and systemic immune response to food allergens. In addition, there are qualitative and quantitative differences in the composition of gut microbiota between patients affected by CMA and healthy infants. These findings prompt the concept that specific beneficial bacteria from the human intestinal microflora, designated probiotics, could restore intestinal homeostasis and prevent or alleviate allergy, at least in part by interacting with the intestinal immune cells. The aim of this paper is to review what is currently known about the use of probiotics as dietary supplements in CMA.     

黄豆苷元对仔猪肠道微生物区系的影响

目的:研究黄豆苷元对仔猪肠道微生物区系的影响。方法:选取江苏某猪场产期相近、胎次相似数目相当的杜/长/大三元杂交仔猪6窝,随机分为2组,每组三窝。一组为对照组,按常规饲养,另一组为处理组,在7、9、11d每头猪强饲大豆黄酮(10mg/L)1ml、2ml、3ml。两组均于21d断奶。于14、21、24、35d每窝各屠宰一头,无菌采集十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠食糜。食糜细菌16S rDNA的V6-V8可变区经PCR扩增,扩增产物经变性梯度凝胶电泳(DGGE)电泳后再进行多样性分析,并对特殊条带进一步克隆测序。结果:饲喂大豆黄酮后,处理组仔猪各肠段的DGGE条带数均高于对照组,盲肠、结肠和直肠中细菌的多样性指数增加;与对照组相比,在35d时处理组大肠中出现3条优势条带,经克隆测序后与GenBank登录序列比较,发现它们分别与butyrate-producing bacterium SL7/1,Clostridium butyricum(NCIMB8082),Ruminococcus obeum clone 1-4最相似,相似性分别为95%,95%和96%。结论:黄豆苷元可使仔猪大肠的微生物区系多样性增加,并且可选择性地促进某些菌群的富集。     

Cow's milk allergy in infants: new insights

Symptoms of cow's milk allergy are non-specific; as a result, suspected cow's milk allergy is far more common than proven allergy to cow's milk. Cow's milk allergy in infants is therefore most probably a fairly uncommon clinical picture; cow's milk allergy is estimated to occur in less than one per cent of infants. The only valuable additional diagnostic tool is food challenge, preferably double blind. Therapy consists of a formula free of cow's milk (preferably containing extensively hydrolysed whey protein) from the moment the mother ceases nursing her child until the age of 6-12 months. Solids can be introduced in the usual fashion; there is no scientific basis for introducing them in a step by step fashion. Prevention of cow's milk allergy by using hypoallergenic formula (partially hydrolysed cow milk protein) in the first year of life has been shown to be unsuccessful, and can no longer be recommended. In the future, oral immunotherapy may be a promising new treatment for cow's milk allergy.     

婴幼儿牛奶蛋白过敏症68例诊治分析

目的研究分析婴幼儿牛奶蛋白过敏症的临床诊断与治疗方法。方法随机抽取本院2014年3月-2015年3月确诊为牛奶蛋白过敏症患儿68例,分析其临床症状、回避试验及治疗情况。结果 68例牛奶蛋白过敏症患儿的主要临床症状表现为呕吐、肠痉挛、腹泻腹胀、喷嚏、面部水肿、特应性湿疹等。采取食物回避的方法后患儿症状有所缓解或消失,取得家长同意后进行激发试验阳性者,采取氨基酸配方粉喂养方式后症状再一次好转或消失,体重逐渐恢复,营养状态明显改善。结论临床上可采用食物激发试验和食物回避方法诊断牛奶蛋白过敏症;确诊牛奶蛋白过敏症后可采用母乳喂养或游离氨基酸配方奶喂养,效果理想,值得临床应用推广。     

Persistent forms of cow's milk allergy. Report of 6 cases

BACKGROUND: Cow's milk allergy is defined as reproducible adverse reaction to a food protein antigen which is immune medieted. About 80 to 90 % become clinically tolerated within the first three year of live. The aim of this study is to evaluate the clinical, immunological and evolutive characteristics of the 10 % to 20 % of persistent form of cow's milk allergy. METHODS: This study included six persistent form of cow's milk allergy (2 boys and 4 girls). The provocation challenge test according to Rance recommendation, have been made from 6 months to one year. RESULTS: 4/6 infants with persistent cow's milk allergy have an atopic familial disease. Clinical presentation changed over time at once symptoms were preventely gastrointestinal, at the end there was an increased frequency of atopic disease (asthma: 4/6 infants) CONCLUSION: Persistent form of cow's milk allergy are characterized by considerable importance of familial atopic disease; change in cow's milk allergy manifestations over time and more prolonged delay between cow's milk persistent consumption and manifestations of symptoms.