195例急性白血病免疫表型分析

应用流式细胞技术可快速确定白血病细胞胞膜或胞质内的抗原,通过分析自血病细胞的抗原表达,来了解白血病细胞所属细胞系列及其分化程度,这就是白血病免疫分型。本文通过流式细胞术对195例急性白血病（AL）的免疫表型进行了分析。     

T细胞受体γδ表型淋巴细胞与肿瘤免疫

Ｔ细胞受体γδ表型细胞是一个新发现的Ｔ淋巴细胞亚群，约占人外周血淋巴细胞总数的３－１０％。实验证明，此类细胞具有多种细胞因子的分泌能力且可表现出对多种自体及建纱肿瘤细胞较强的细胞毒活性。因其具有特殊的ＭＨＣ非限制性的抗原识别方式，在某些肿瘤浸润淋巴细胞中的存在以及经过继免疫实验可获得明显的抗肿瘤效应而引起了免疫学工作者们的兴趣。本文仅就γδＴ细胞在肿瘤免疫研究的近年进展作一综述。     

25例急性T淋巴细胞白血病的亚型和表型异质性

应用一组单克隆抗体(McAb)对25例急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞表面标记深入研究,依其表面标记的不同将25例患者分成三个亚型。发现T-ALL细胞表型十分异质,与Reinherz理论不完全一致。CD_7和CD_5 McAb联合使用可提高T-ALL的检出率。     

人胎儿胸腺淋巴细胞的免疫表型分析

用免疫组织化学ＡＢＣ法观察了１４例人胎胸腺中六种Ｔ细胞和细胞表面抗原的表达。结果表明，ＣＤ４和性和ＣＤ８阳性的细胞主要见于皮质深化深层，髓质中较少。ＣＤ３阳性细胞多分布在髓质，皮质深层有少量阳性细胞。ＣＤｌａ阳性细胞见于皮质。ＣＤ２５阳性细胞多分布于髓质。该阳性细胞在胎儿胸腺中的分布反映了Ｔ细胞的分化。Ｂ细胞表面抗原阳性细胞主要分布在髓质，皮质中很少，在髓质及被膜下亦见少数较大并有突起的阳性细胞。     

免疫表型与急性白血病的分型诊断

对426例急性白血病采用APAAP法23种单抗进行免疫分型研究.结果发现:(1)426例中,71.6%可确定为淋巴系或髓系或髓/淋混合型,28.4%不能确定细胞系列.FAB结果仅62.75%得到免疫表型证实,29.5%不能判断细胞起源,7.75%两者分型结果不一致;(2)ANLL140例中,44.29%免疫表型证实为髓细胞型,17.14%仅表达淋巴系标志,38.57%不能判断细胞起源,各髓系标志无明显FAB亚型特异性;(3)ALL260例中,72.67%进一步证实为淋巴细胞型,2. 69%单纯表达髓系标志或混合表达髓系和淋巴系抗原,另外24.62%不能确定细胞起源;(4)FAB不能分型26例中,23例可确定为ALL或ANLL,另外3例仍不能诊断.研究认为,免疫分型是FAB分型的必要补充.     

多参数流式细胞术分析急性白血病免疫表型

为了探讨急性白血病免疫表型特征,利用流式细胞术三色荧光直接标记技术CD45/SSC多参数散点图设门方法,对162例急性白血病患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析.结果提示:急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者主要表达CD117(94.9%)、CD13(88.5%)和CD33(70.5%);急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中B-ALL主要表达cCD79a(100%)、CD19(92.1%),T-ALL表达cCD3(100%)、CD2(83.3%);ANLL伴淋系抗原表达(Ly ANLL),以CD7(56.2%)、CD19(31.2%)多见;ALL伴髓系抗原表达(My ALL),以CD13(88.9%)、CD33(27.8%)多见.为此用多参数流式细胞术三色荧光直接标记法进行免疫分型,对急性白血病的确诊、治疗和预后有重要的临床意义.     

T细胞受体γδ表型淋巴细胞与肿瘤免疫

T细胞受体γδ表型细胞是一个新发现的T淋巴细胞亚群，约占人外周血淋巴细胞总数的3％～10％。实验证明，此类细胞具有多种细胞因子的分泌能力且可表现出对多种自体及建系肿瘤细胞较强的细胞毒活性。因其具有特殊的MHC非限制性的抗原识别方式，在某些肿瘤浸润淋巴细胞中的存在以及经过继免疫实验可获明显的抗肿瘤效应而引起了免疫学工作者们的兴趣。本文仅就γδT细胞在肿瘤免疫研究的近年进展作一综述。     

白血病相关免疫表型与难治性急性髓细胞白血病的关系

分析白血病相关免疫表型（LAIP）与难治性急性髓细胞白血病（AML）的关系。回顾性分析45例经两个疗程化疗未缓解的难治性白血病患者在发病时经多色流式细胞术检测的免疫表型结果,分析其抗原跨阶段表达（CD34/CD11b、CD34/CD14、CD34/CD15）和抗原跨系列表达（CD7/CD13、CD19/CD13、CD56/CD13）,以54例经两个疗程化疗达到完全缓解（CR）的患者为对照。结果显示,白血病细胞CD34与CD11b共表达在难治组AML表达率为37.8%,而非难治组为13.0%（P=0.004）,其它抗原跨阶段表达（CD34/CD14、CD34/CD15）及抗原跨系列表达（CD7/CD13、CD19/CD13、CD56/CD13）在两组病例中无显著差异（P〉0.05）。结论：CD34/CD11b共表达与难治性AML相关。对这类患者可加大化疗剂量或考虑骨髓移植,以提高患者的长期生存率。     

自身免疫病患者T淋巴细胞表型分析

本文报告利用流式细胞仪检测了１０例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者、１８例干燥综合症（ＳＳ）患者、３７例风湿性关节炎（ＲＡ）患者和１６例人外周血Ｔ淋巴细胞表型，发现ＳＬＥ患者ＣＤ３＾＋Ｔ细胞明显降低，ＳＳ和ＲＡ患者正常；ＳＬＥ患者ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋Ｔ细胞比值倒置，ＳＳ和ＲＡ正常，但ＳＳ和ＲＡ ＣＤ８＾＋Ｔ细胞明显减少。文中对这三种疾病发病机理进行了初步讨论。     

47例急性白血病患者T细胞及其亚群免疫应答能力测析

本文报道了对47例急性白血病患者(急淋18例、急粒29例)外周血T细胞对PHA刺激反应及OKT单克隆抗体玫瑰花试验T细胞亚群的检测。其结果为急淋、急粒患者的细胞免疫功能均低于健康人,其中急淋患者的T细胞对PHA刺激反应(用SI表示)及T细胞亚群降低的程度均大于急粒患者。急性白血病缓解期患者诸项检测均与健康成人接近,而未经治疗者,治疗中期及预后极差:临床表现上则有出不同程度的免疫抑制。     

小儿急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的研究

本文用单克隆抗体SACI-Ig花环法测定了小儿急性白血病及再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果显示,在急性淋巴细胞性白血病及再生障碍性贫血患儿OKT8~ 细胞均明显高于正常,OKT4~ /OKT8~ 比值显著降低,但在急性粒细胞性白血病患儿淋巴细胞亚群变化不明显。这提示,抑制性T细胞(OKT8~ )的增多可能与小儿急性淋巴细胞性白血病及再生障碍性贫血的发生或发展有关。     

浆膜腔积液淋巴母细胞淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病的细胞学诊断分析

目的探讨浆膜腔积液淋巴母细胞淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病(LBL/ALL)的细胞病理学诊断线索及意义。方法收集郑州大学第一附属医院2011年8月至2019年12月确诊为LBL/ALL的浆膜腔积液标本45例,观察并总结其临床特点及细胞形态学特征,其中22例标本被制成细胞块并行免疫细胞化学检测,3例行流式细胞术检测,5例行T细胞受体(TCR)和免疫球蛋白(Ig)基因重排分析。结果45例病例中男性35例,女性10例,男女比为3.5∶1.0,中位年龄15岁。39例(86.7%)患者有纵隔肿块,34例(75.6%)患者伴有血清乳酸脱氢酶(LDH)的增高;显微镜下,细胞量较为丰富,弥漫散在分布;细胞成分相对单一,小至中等大小;细胞核形不规则或曲核,可见核裂或乳头状突起,染色质细,核仁不明显;核分裂象易见;胞质少或无,背景均可见到核碎裂及凋亡小体。22例细胞块免疫表型为19例(86.4%)表达末端脱氧核苷酸转移酶(TdT),20例(90.9%)表达CD99,Ki-67阳性指数65%~95%。行流式细胞术检测的3例标本均显示TdT、CD2、CD3和CD7高表达的异常T细胞,行基因重排检测的5例标本中,4例呈TCR单克隆重排,1例同时发现TCR和Igκ单克隆重排。结论结合临床特征(青少年男性伴有纵隔肿块)和细胞形态特点(大量散在分布的形态单一的中小淋巴细胞,明显的核形不规则,染色质细腻,易见核分裂象、核碎裂及凋亡小体),可以对浆膜腔积液LBL/ALL进行初步诊断,辅以免疫细胞化学结果及其他辅助检测技术可进一步提高LBL/ALL诊断的准确性和可靠性。     

利用T细胞受体变异β基因谱系分析T细胞急性淋巴细胞白血病病人T细胞克隆性

目的:分析T细胞-急性淋巴细胞白血病(T-ALL)病人的T细胞克隆性。方法:利用RT-PCR方法分析6例T-ALL和10例正常人外周血单个核细胞中24个T细胞受体变异β(TCR Vβ)基因的CDR3长度,PCR产物再进一步进行基因扫描和序列分析。结果:3例病人的某些TCR Vβ亚家族T细胞呈单克隆或寡克隆性增殖,主要为Vβ2、3、6、9、21和24。其它3例及正常人均表现为多克隆性增殖T细胞。结论:部分T-ALL来自于TCR Vβ亚家族克隆性增殖T细胞。该方法有助于临床上检测微小残留病变。     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓基质细胞的粘附行为

目的和方法:用MTT方法检测了急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿骨髓基质细胞(BMSC)对正常骨髓造血细胞和淋巴瘤Raji细胞的粘附行为,用流式细胞仪检测了BMSC表面的粘附分子ICAM-1和VCAM-1的表达。结果:急性期组ALLBMSC对骨髓造血细胞的粘附能力明显下降。长期缓解组ALLBMSC对肿瘤细胞的粘附能力明显增高。急性期组ALLBMSC表面ICAM-1表达明显降低。结论:ALL患儿BMSC对骨髓造血细胞和肿瘤细胞的粘附行为的异常,BMSC粘附行为的变化与细胞表面粘附分子的表达异常有关。     

Lineage switch at relapse of childhood acute leukemia: a report of four cases

Lineage switch in acute leukemia is an uncommon event at relapse, and therefore rarely reported in the literature. Here, we have described the clinical laboratory features of four cases in which the cell lineage switched from acute lymphoblastic leukemia (ALL) to acute myeloid leukemia (AML). One patient was initially diagnosed with B-ALL, switched to T-ALL at the first relapse, and eventually, AML at the second relapse. A lineage switch represented either relapse of the original clone with heterogeneity at the morphologic level or emergence of a new leukemic clone. Further sequential phenotypic and cytogenetic studies may yield valuable insights into the mechanisms of leukemic recurrence, with possible implications for treatment selection.     

Chemotherapy alters the increased numbers of myeloid-derived suppressor and regulatory T cells in children with acute lymphoblastic leukemia

Introduction: Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most common cancer diagnosed in children. The precise mechanism behind the relapse in this disease is not clearly known. One possible mechanism could be the accumulation of immunosuppressive cells, including myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) and T regulatory cells (T_regs) which we and others have reported to mediate suppression of anti-tumor immune responses.

Aim: In this study, we aimed to analyze the numbers of these cells in a population of B-ALL pediatric patients.

Methods: Peripheral blood samples withdrawn from B-ALL pediatric patients (n?=?45 before, during and after the induction phase of chemotherapy. Using multi parametric flow cytometric analysis. MDSCs were identified as Lin^–HLA-DR^–CD33⁺CD11b⁺; and T_reg cells were defined as CD4⁺CD25⁺CD127^–/low.

Results: Early diagnosed B-ALL patients showed significant increases in the numbers of MDSCs and T_regs as compared to healthy volunteers. During induction of chemotherapy, however, the patients showed higher and lower numbers of MDSCs and T_reg cells, respectively as compared to early diagnosed patients (i.e., before chemotherapy). After induction of chemotherapy, the numbers of MDSCs and T_reg cells showed higher increases and decreases, respectively as compared to the numbers in patients during chemotherapy.

Conclusion: Our results indicate that B-ALL patients harbor high numbers of both MDSCs and T_regs cells. This pilot study opens a new avenue to investigate the mechanism mediating the emergence of these cells on larger number of B-ALL patients at different treatment stages.     

老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达

背景：研究证实,很多恶性肿瘤患者体内CD4⁺CD25⁺调节性T细胞存在高表达,近期也有研究发现,急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞同样表现出高比例表达。 目的：分析老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的表达特点。 方法：纳入初诊急性髓细胞白血病患者92例,将年龄在60岁以下者设为中青年组(n=22),年龄在60岁以上者设为老年观察组(n=70)。在老年观察组中,32例经规范化疗后完全缓解,设为完全缓解组;将余下38例设为老年组,依据FAB分型标准,分为M2 6例、M3 19例、M4 7例、M5 6例。另选择同期体检健康人群42名作为正常对照组。抽取受试者外周静脉血,检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞表达情况。 结果与结论：老年组、完全缓解组CD4⁺CD25^highFOXP3⁺调节性T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组、完全缓解组CD4⁺FOXP3⁺T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞与CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于中青年组(P < 0.01)。老年组不同分型间CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例比较差异均无显著性意义(P > 0.05)。Pearson相关性检验结果显示,老年初诊急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例呈正相关(r=0.87,P=0.019)。表明老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞比例高于健康人群和中青年急性髓细胞白血病患者。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

儿童急性淋巴细胞白血病患者HLA-A,B,DRB1等位基因多态性研究

目的　研究北方汉族人群儿童急性淋巴细胞性白血病 (ALL)患者与HLA A ,B ,DRB1等位基因多态性的遗传关联。方法　采用聚合酶链反应 序列特异性寡核苷酸探针 (PCR SSO)方法 ,对 197例北方汉族儿童ALL患者和 5 84 1例健康脐带血样本HLA A ,B ,DRB1等位基因多态性进行研究。结果　在HLA A ,B ,DRB1等位基因中 ,儿童ALL患者的A11(18.5 3% ,χ2 =8.5 9,P <0 .0 1,RR =1.4 7,EF =0 .0 6 35 )和A2 4 (19.2 9% ,χ2 =11.6 5 ,P <0 .0 1,RR =1.5 6 ,EF =0 .0 738) ;B4 0(18% ,χ2 =1199.6 2 ,P <0 .0 0 1,RR =5 3.2 3,EF =0 .18) ,B15 (30 % ,χ2 =15 9.17,P <0 .0 0 1,RR =9.6 89,EF =0 .0 14 ) ,B5 6 (1.5 % ,χ2 =16 .17,P <0 .0 0 1,RR =5 .92 ,EF =0 .0 774 ) ,B6 7(2 .5 % ,χ2 =5 .93,P <0 .0 1,RR =2 .74 ,EF =0 .0 774 ) ,和B2 7(3.75 % ,χ2 =4 .96 ,P <0 .0 1,RR =1.81,EF =0 .0 774 ) ;DR9(18.2 1% ,χ2 =16 .0 7,P <0 .0 0 1,RR =1.74 ,EF =0 .0 774 ) ,DR12(14 .13% ,χ2 =7.12 ,P <0 .0 1,RR =1.5 2 3,EF =0 .0 4 9) ,DR14 (7.88% ,χ2 =5 .194 ,P <0 .0 5 ,RR =1.5 74 ,EF =0 .0 2 87) ,和DR16 (4.89% ,χ2 =8.5 2 7,P <0 .0 1,RR =2 .0 6 5 ,EF =0 .0 2 5 )等基因的基因频率都显著高于正常人群     

178例儿童急性淋巴细胞白血病细胞与分子遗传学特征研究

目的研究儿童急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic 1eukemia,ALL）细胞与分子遗传学特征及临床意义。方法应用常规细胞遗传学、实时定量PCR、荧光原位杂交等技术,对178例儿童ALL细胞与分子遗传学特征进行分析,并探讨其临床意义。结果178例儿童ALL遗传学异常者92例占51.69％,其中融合基因TEL-AMLl／t（12;21）（pl3：q22）阳性35例（38.04％）,BCR-ABL／t（9;22）（q34;q11）阳性9例（9.78％）;E2A／PBXl／t（1;19）（q23;p13）阳性9例（9.78％）;MLL-AF4／t（4;11）（q21：q23）阳性3例（3.26％;）,HOXllL2／t（5;14）（q35;q32）阳性7例（7.61％）;SIL-TALl（1p32-）阳性5例（5.43％）、E2A-HLF／t（17;19）（q22;pl3）阳性1例（1.09％）。复杂核型异常4例（4.35％）,包括：t（8;14）（q24;q32）,der（15）t（1;15）（p11;q11）;t（6;10）（p25;p11）,11p＋;t（2;14）（p11;q32）,9p-;t（9;11）（q21;p15）。高超二倍体（48-65）17例（18.48％）,近三倍体（65～78）2例（2.17％）,其它有2p-／5p-／6p＋／9p-／9q-／10p-／1lp＋／17p＋／＋5／＋8等。结论儿童ALL具有其特有的细胞与分子遗传学特征,临床上将常规细胞遗传学、分子生物学、荧光原位杂交等技术等相结合,将对白血病的诊断、治疗选择和预后判断及微小残留病检测等具有十分重要的意义。