食管上皮癌变过程中CDK4、p18、p19的表达及意义

Objective To investigate the role of cell cycle regulatory protein CDK4,p18,p19 in the genesis and development of esophageal squamous cell carcinoma (SCC).Methods Tissue microarray and immunohistochemical method (Envision) were used to detect the protein expression of CDK4,p18,p19 in 120 cases of esophageal tissues.The results were statistically analyzed.Results The positive rate of CDK4 protein expression in normal esophageal epithelium was low [28.3 % (34/120)],it increased in esophageal intraepithelial neoplasia [32.5 % (39/120)],and it was high in esophageal SCC [84.2 % (101/120)],which increased with the degree of SCC differentiation decreasing gradually.There was significant differences between the SCC and normal esophageal epithelium or esophageal intraepithelial neoplasia (x2= 76.004,P ＜0.05; x 2= 65.897,P ＜ 0.05).The expression of CDK4 in group with lymphatic metastasis [93.88 % (46/49)]was higher than without it [71.43 % (55/71)] (x2= 5.860,P ＜ 0.05).The positive rates of p18,p19 protein expression in normal esophageal epithelium were high [34.2 % (41/120),29.2 % (35/120)],it decreased in esophageal intraepithelial neoplasia [19.2 % (23/120),15.0 % (1 8/120)] (x 2= 134.481,P ＜ 0.05; x 2 = 141.376,P ＜ 0.05),but it were high in esophageal SCC [63.3 % (76/120) and 61.7 % (74/120)] which decreased with the degree of SCC differentiation gradually increased.There were significant differences between the normal esophageal epithelium and esophageal intraepithelial neoplasia,esophegeal intraepithelial neoplasia and SCC,normal esophageal epithelium and SCC (p 18:x 2 = 6.903,48.296,20.429,P ＜ 0.05; p1 9:x2 = 6.998,55.276,25.565,P＜ 0.05).CDK4 protein expression was correlated with both p18 and p19 (r =0.696,0.630,P ＜0.05),and there was significant positive correlation between the protein expression of p18 and p19 (r =0.833,P ＜0.05).Conclusion Cell cycle regulatory gene CDK4,p18,p19 get involved in the genesis and development of esophageal squamous cell carcinoma.Their protein expressions are closely related to canceration of esophageal epithelium.     

食管上皮癌变过程中CDK4、p18、p19的表达及意义

 【摘要】　目的　探讨细胞周期调控蛋白CDK4、p18、p19在食管鳞状细胞癌（SCC）发生、发展中的作用。方法　制作组织芯片,用免疫组织化学EnVision二步法对120例食管癌患者手术标本中CDK4、p18、p19的表达进行检测,并对其结果进行统计分析。结果　CDK4蛋白在正常食管上皮的表达低[28.3 %（34／120）],瘤变上皮中有所增高[32.5 %（39／120）],食管SCC中表达高[84.2 %（101／120）],且随SCC分化程度的降低而逐渐增高,SCC与正常上皮及瘤变上皮中CDK4表达阳性率差异有统计学意义（χ2＝76.004,P＜0.05;χ2＝65.897,P＜0.05）。淋巴结转移组CDK4表达率[93.88 %（46／49）]高于无淋巴结转移组[71.43 %（55／71）]（χ2＝5.860,P＜0.05）。p18、p19 蛋白在正常食管上皮组织阳性表达率分别为34.2 %（41／120）、29.2 %（35／120）,在食管瘤变上皮中表达率分别为19.2 %（23／120）、15.0 %（18／120）,在SCC中表达率分别为63.3 %（76／120）、61.7 %（74／120）,两指标在正常上皮及瘤变上皮间、瘤变上皮与SCC间、正常上皮与SCC间差异均有统计学意义（p18：χ2＝6.903、48.296、20.429,均P＜0.05;p19：χ2＝6.998、55.276、25.565,均P＜0.05）;在食管SCC中随分化程度的降低而逐渐增高。p18、p19分别与CDK4基因表达呈正相关（r＝0.696、0.630,均P＜0.05）。p18与p19二者呈正相关（r＝0.833,P＜0.05）。结论　细胞周期调控基因CDK4 、p18、p19参与食管SCC的发生、发展,其蛋白表达与食管上皮癌变密切相关。     

Cyclin E、CDK2和p21WAF1在食管上皮癌变过程中的表达及意义

目的探讨食管上皮癌变过程中细胞周期调控因子cyclin E、CDK2和p21WAF1的表达状况及其意义.方法应用免疫组化SP法和原位杂交方法分别检测48例食管癌组织、31例非典型增生组织和17例正常食管粘膜中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA表达.应用半定量RT-PCR和Western blot检测22例新鲜食管癌及相应癌旁组织的mRNA和蛋白表达.结果从食管正常粘膜、非典型增生组织到癌组织,cyclin E和CDK2蛋白和mRNA阳性表达率逐渐上升,差异具有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).食管癌组织中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA高表达,与癌旁组织或切缘正常食管粘膜有显著性差异(P＜0.01).cyclin E、CDK2和p21WAF1基因表达显著正相关(P＜0.01或P＜0.05).结论食管上皮癌变过程中,细胞周期相关基因cyclin E和CDK2表达逐渐增强.cyclin E基因表达异常是食管癌变过程中的早期事件.p21WAF1基因在食管癌中高表达,可能与细胞周期调控的反馈机制有关.     

食管鳞癌p27的表达及其临床意义

目的　p2 7可抑制细胞周期的向前推进 ,作用于细胞周期的分子更能较精确地反映肿瘤的生物学行为。即可为临床提供更为有价值的信息。本研究的目的是观察p2 7在食管癌的表达特性及阐明该分子标志物与临床病理因素之间的关系。方法　 89例 (5 6例男性、33例女性 )食管鳞癌行外科手术切除。其标本用p2 7抗体行免疫组织化学染色。p2 7表达程度以标记指数表示。结果　p2 7免疫染色在瘤与非瘤组织均固定于细胞核。p2 7的阳性免疫染色在高分化鳞癌 (4 7 3% ,14 /32 )多于其它类型 (35 5 % ,11/31;2 3 1% ,6 /2 6 ) ,有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　食管鳞癌细胞的增殖状况信息可由p2 7的表达程度提示 ,p2 7表达缺失提示食管鳞癌分化差     

细胞周期蛋白D1和E在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的　探讨细胞周期蛋白 D1 和 E( cyclin D1 and cyclin E)在食管鳞状上皮癌中的表达及意义。方法　采用 S- P免疫组化方法 ,检测了周期蛋白 D1 和 E在正常食管上皮 ( 2 0例 )、增生上皮 ( 2 1例 )和鳞癌 ( 6 2例 )中的阳性率。结果　正常鳞状上皮中 cyclin E无阳性表达 ,在增生上皮中 cyclin E阳性率为 33.3% ,在鳞癌中阳性率为5 3.2 % ;cyclin D1 在正常鳞状上皮阳性率为 5 .0 % ,在增生和鳞癌中阳性率分别为 4 2 .9%和 4 6 .8% ;cyclin E在低分化鳞癌组阳性率 ( 80 .0 % )明显高于高分化组 ( 2 9.0 % ) ( P<0 .0 5 )。 cyclin D1 和 cyclin E在鳞癌中的阳性表达呈正相关 ( r=0 .782 )。结论　 cyclin D1 和 cyclin E过表达与食管鳞状细胞癌的发生和分化程度有关。     

食管上皮癌变过程中cyclin E和p21WAF1的表达及其意义

目的研究细胞周期调控因子cyclinE和p21^WAF1基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法应用免疫组化S—P方法和原位杂交方法分别检测48例食管癌组织和相应癌旁组织(正常黏膜17例，非典型增生组织31例)中cyclinE和p21^WAF1蛋白及mRNA表达。结果从食管正常黏膜到非典型增生组织和癌组织，cyclinE蛋白和mRNA阳性表达率皆呈逐渐升高的趋势，食管癌组织和癌旁组织之间差异有显著性。高分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于其它各组，mRNA阳性表达率显著高于正常黏膜和非典型增生Ⅰ级。p21^WAF1蛋白及mRNA在癌旁组织和癌组织中表达皆较高，两者差异无显著性。cyclinE和p21^WAF1基因表达无显著相关性。结论食管癌变过程中，细胞周期蛋白cyclinE表达水平增高，和组织分化程度显著相关，其异常是食管癌变过程中的早期事件，可能作为食管高分化鳞癌的诊断标志物之一。p21^WAF1基因在食管癌组织中高表达，可能与细胞周期调控的反馈机制有关。     

食管鳞癌中CDK4表达及意义的研究

目的　研究CDK4在食管鳞癌中的表达、发生过程中的影响以及在其增殖、侵袭、转移中的作用。方法　运用免疫组织化学方法 (SABC法 )研究CDK4蛋白表达情况 ,显微镜下计数阳性细胞指数 (LI) ,并进行统计分析。结果　 1)CDK4表达情况 :正常食管黏膜组织阳性率与食管鳞癌组织比较差异有显著性 ,后者高于前者 ( χ2 =5 .42 99,P =0 .0 2 0 ) ,LI后者高于前者 (t =2 .42 3 ,P =0 .0 19) ,1例正常食管黏膜阳性者为弱阳性 (LI <2 5 %)。 2 )CDK4在食管鳞癌组织中的表达与年龄、性别无明显关系 (P >0 .0 5 ) ,不同分化级别中两者表达亦无差异 (P >0 .0 5 )。有淋巴结转移组CKD4水平分别高于无淋巴结转移组 ,差异有显著性 (P =0 .0 0 1)。食管外膜浸润组CDK4显著高于未受浸润组 ,(P =0 .0 0 0 ) ,临床分期Ⅰ～Ⅱ与Ⅲ～Ⅳ期CDK4表达水平差异有显著性 ,(P =0 .0 0 0 )。结论　CDK4在食管鳞癌中高表达 ,促进了细胞生长和肿瘤发展 (G1 →S过渡 ) ,反应了肿瘤的生物学特性 ,促进侵袭转移 ,是食管癌发生发展中的重要事件。     

细胞周期调节蛋白在食管癌前病变组织的表达及意义

目的探讨食管癌高发区河南林州市和辉县市内镜活检组织p53、p21、Rb、p16、E2F1和cyclin E的表达变化特征及其与各级病变的关系.方法采用免疫组化卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)方法,分析食管癌高发区食管内镜活检组织p53、p21、Rb、p16、E2F1和cyclin E的表达.结果林州市医院食管内镜活检组织共134例,其中21例食管上皮正常(NOR),45例基底细胞过度增生(BCH),23例间变(DYS),45例原位癌组织(CIS).从NOR→BCH→DYS→CIS,p53和cyclin E的免疫阳性率逐渐增高(P<0.05),分别为23.8%(5/21)、 33.3%(15/45)、56.5%(13/23)和71.1%(32/45);28.6%(6/21)、33.3%(15/45)、56.5%(13/23)和75.6%(34/45);而p21的表达逐渐降低(P<0.05),免疫阳性率分别为71.4%(13/21)、57.8%(26/45)、56.5%(13/23)和 37.8%(17/45).辉县市医院食管内镜活检组织132例,其中NOR 12例,BCH 71例,DYS 27例,CIS 22例.从NOR→BCH→DYS→CIS,Rb和E2F1的免疫阳性率逐渐增高(P<0.05),分别为41.7%(5/12)、62.0%(44/71)、 77.8%(21/27)和90.9%(20/22);50.0%(6/12)、45.0%(32/71)、66.7%(18/27)和68.2%(15/22).而p16的表达逐渐降低(P<0.05),免疫阳性率分别为75.0%(9/12)、73.2%(52/71)、59.3%(16/27)和22.7%(5/22).结论 p53、p21、Rb、p16、E2F1和cyclin E是食管癌变早期重要分子改变,p53、Rb、E2F1和cyclin E的高表达和p21、p16的低表达可能是导致病变持续向癌变方向发生和发展的机制之一.     

食管鳞状细胞癌p53蛋白的免疫组化研究

应用ｐ５３单克隆抗体对６４例食管鳞癌病例进行了ＡＢＣ免疫组化染色，结果发现阳性染色物质核浆中均存在。６４例鳞癌标本在肿瘤区，癌旁组织以及“正常区”组织中的ｐ５３蛋白阳性率分别为６４．１％（４１／６４），２０．３％（１３／６４）和４．７％（３／６４），按病理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分级分类，其阳性率分别为４１．７％，６１．１％和９０．９％，三级标本比较，ｐ５３蛋白表达有显著差异（Ｐ〈０．０１）。按淋巴结转移和未转     

食管鳞状细胞癌中p16和cyclinD1的表达及其临床意义

 目的　探讨p16、cyclinD1蛋白在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与临床病理之间的关系。方法　应用免疫组织化学法,对55例手术切除的原发ESCC患者的肿瘤组织蜡块进行p16和cyclinD1蛋白的检测。结果　55例ESCC患者中p16蛋白表达率为49.1 %（27／55）。p16蛋白缺失与淋巴结转移有一定的相关性（P＜0.05）;p16表达阳性者5年生存率为71.4 %（10／14）。55例ESCC中cyclinD1蛋白表达率为74.5 % （41／55）,cyclinD1阳性表达患者的5年生存率低于阴性表达患者。结论　ESCC患者的p16蛋白表达缺失较常见, p16蛋白的失表达与cyclinD1基因蛋白过表达在食管癌发生及转移过程中可能有协同作用,可作为判断预后的参考指标之一。     

食管鳞状细胞癌HPV 16/18型感染与p53表达的相关性研究

目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16/18型在食管鳞状细胞癌中的感染情况及其与p53的关系。方法 采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测56例食管鳞状细胞癌手术切除组织（鳞癌组）和24名健康者正常食管组织（对照组）中HPV l6/18 E6、E7基因的表达,并根据其判断HPV感染情况;采用免疫组化SP法检测p53蛋白的表达水平。 结果 鳞癌组HPV感染率和p53蛋白阳性表达率均高于对照组（44.6% vs 12.5%,χ²=7.630,P=0.006;41.1% vs 4.2%,χ²=10.896,P<0.001）。在食管鳞癌组织中,HPV 16/18感染与病理分级、TNM分期和淋巴结转移有关（P<0.05）;且HPV16/18感染与p53蛋白表达呈正相关（r=0.565,P<0.001）。Kaplan-Meier生存分析结果显示,HPV感染阳性、p53表达阳性患者中位OS均小于HPV感染阴性、p53表达阴性者（21个月 vs 39个月,χ²=4.306,P=0.038;17个月 vs 41个月,^χ2=5.868, P=0.015）。控制相关的潜在混杂因素后,Cox回归模型显示HPV感染（HR=1.834,95%CI：1.010~3.330,P=0.046）和p53阳性表达（HR=2.189,95%CI：1.182~4.054, P=0.013）均可增加食管鳞状细胞癌患者的死亡风险。结论 食管鳞状细胞癌中HPV感染和p53阳性表达均较高,可能共同促进食管鳞状细胞癌的发生、发展并影响其预后。     

bcl-2和p16蛋白在食管鳞癌组织中的表达及其意义

 目的　研究凋亡相关基因bcl 2和抑癌基因 p16在食管鳞癌及癌旁组织中的表达及意义。 方法应用SP法 ,检测 4 0例食管鳞癌及癌旁组织中bcl 2和p16蛋白的表达。结果　bcl 2在正常食管粘膜、单纯增生、不典型增生及鳞癌组织中表达率分别为 6 %、6 3.3%、4 6 .5 %和 4 2 .5 % ,正常粘膜组与其余各组之间有显著性差异 (P <0 .0 1) ;bcl 2表达与病理分级、浸润深度及淋巴结转移无相关性。p16蛋白在正常食管粘膜上皮、单纯增生、不典型增生、鳞癌组织中的表达呈递减的趋势 (P <0 .0 1)。p16表达与病理分级、浸润深度及淋巴结转移相关。结论　bcl 2与 p16在食管鳞癌发生的不同时期起作用 ,bcl 2可作为食管癌发生的早期判断指标。p16蛋白的缺失与食管鳞癌的发生及恶性进展有关 ,检测 p16蛋白可能成为判断食管鳞癌预后的一个指标。     

INK4系列抑癌基因在白血病中纯合子缺失的实验研究

目的：探讨p16基因家族失活与白血病发生、发展及预后的关系。方法：PCR检测p16、p15、p18、p19基因在白血病中纯合子缺失。结果：p16、p15基因外显子1在AL组纯合子缺失率分别为22．37％、17．05％,在ALL组为45．95％、32．43％,在ANLL组均为5．88％;在CML的慢性期均为0。p16、p15基因外显子2在AL组纯合子缺失率分别为12．5％、5．68％;在ALL组为24．32％、10．81％;在ANLL组为3．92％、1．96％;在CML和对照组二者均无缺失。p18、p19基因外显子1在AL组纯合子缺失率分别为1．14％、0;在ALL组分别为2．70％、0;在ANLL和对照组均无缺失。结论：p16、p15基因纯合子缺失在AL的发生频率较高,ALL缺失率明显高于ANLL,复发一LLL组基因失活率最高。p16、p15基因纯合子缺失是AL,尤其是ALL的发病重要因素之一。p18、p19基因在AL组中几乎未见纯合子缺失。在ALL中,p16纯合子缺失率高于p15纯合子缺失率。两个基因的纯合子缺失常伴随存在。在ANLL中,p16、p15基因的纯合子缺失均少见。     

细胞周期蛋白cyclin D1、CDK4在食管癌中的表达及其意义

目的：获得食管癌发生过程中调节Ｇ１细胞周期各种因子的作用。方法：采用抗ｃｙｃｌｉｎＤ１和ＣＤＫ４的单克隆抗体对１０例下沉食管和５０例食管鳞状上皮癌标本进行免疫组织化学染色。结果：ｃｙｃｌｉｎＤ１和ＣＤＫ４在正常食管上皮呈现较低水平的表达,在食管鳞状上皮癌中则过表达。２７／５０食管鳞状上皮癌ｙｃｙｃｌｉｎＤ１染色阳性,其中８例强阳性,１２例只表达ＣＤＫ４,１１例只表达ｃｙｃｌｉｎＤ１,１４例既表达ｃ     

P16和CyclinE蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨P16和cyclinE蛋白在食管鳞状上皮、增生上皮和癌变上皮中表达状况及其与鳞状细胞癌发生、发展和转移的相关性。方法采用SP免疫组织化学方法,检测食管鳞癌72例,粘膜上皮增生21例,正常对照13例和淋巴结转移癌15例中P16和cyclinE基因蛋白的表达。结果P16在正常上皮组无阳性表达,增生组为23.81%,鳞癌组为38.89%;高分化鳞癌组阳性表达率(41.67%)显著高于低分化鳞癌组(27.27%)(P<0.05);有淋巴结转移组(16.67%)和无淋巴结转移组(42.85%)比较具有显著性差异(P<0.05);原发癌组阳性率显著高于淋巴结转移癌组(P<0.05)。cyclinE在正常上皮组无阳性表达,增生上皮组为33.3%,鳞癌组为51.4%;高分化鳞癌组阳性表达率(44.44%)显著低于低分化鳞癌组(81.81%)(P<0.05);淋巴结转移组cyclinE阳性表达率(79.17%)和淋巴结无转移组(48.57%)比较有显著性差异(P<0.05)。P16和cyclinE表达与肿瘤部位和浸润深度相关性不明显。结论在食管癌中P16和cyclinE基因蛋白的表达与病理分化程度有关;检测P16和cyclinE对食管癌早期诊断有指导作用。     

血清肿瘤标志物在晚期食管鳞状细胞癌疗效评价和预后判定中的作用

目的 探讨血清肿瘤标志物在晚期食管鳞状细胞癌(简称:鳞癌)中的表达及其在化疗疗效评价和预后判断中的意义.方法 测定50例晚期食管鳞癌患者一线化疗前后血清标志物的水平.按照实体瘤的疗效评价标准(RECIST标准)评效.通过建立受试者工作特性曲线(ROC曲线)求最佳临界值.用Kaplan-Meier法行生存分析.结果 50例患者治疗前的血清肿瘤标志物阳性率以细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)最高(44.0%,22/50);癌胚抗原(CEA)最低(22.0%,11/50).配对样本Wilcoxon秩和检验示部分缓解(PR)组化疗后CYFRA21-1、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)下降,差异有统计学意义(Z=3.181、2.389,P=0.001、0.017),进展(PD)组化疗后CYFRA21-1、SCC-Ag升高,差异有统计学意义(Z=2.701、2.250,P=0.007、0.024),稳定(SD)组化疗前后SCC-Ag、CYFRA21-1差异无统计学意义(Z=0.414、1.114,P=0.679、0.265).提示SCC-Ag、CYFRA21-1与影像学疗效评价具有一致性.ROC曲线显示化疗后CYFRA21-1较化疗前升高32%,SCC-Ag升高38%,可作为预测化疗疗效的最佳临界值,并与影像学评效具有较好的一致性.化疗后CYFRA21-1较化疗前升高＞32%和SCC-Ag较化疗前升高＞38%为晚期食管鳞癌预后不良因素.结论 CYFRA21-1和SCC-Ag对晚期食管鳞癌的诊断、预测化疗疗效和预后有重要意义.     

血清肿瘤标志物在晚期食管鳞状细胞癌疗效评价和预后判定中的作用

目的 探讨血清肿瘤标志物在晚期食管鳞状细胞癌(简称:鳞癌)中的表达及其在化疗疗效评价和预后判断中的意义.方法 测定50例晚期食管鳞癌患者一线化疗前后血清标志物的水平.按照实体瘤的疗效评价标准(RECIST标准)评效.通过建立受试者工作特性曲线(ROC曲线)求最佳临界值.用Kaplan-Meier法行生存分析.结果 50例患者治疗前的血清肿瘤标志物阳性率以细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)最高(44.0%,22/50);癌胚抗原(CEA)最低(22.0%,11/50).配对样本Wilcoxon秩和检验示部分缓解(PR)组化疗后CYFRA21-1、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)下降,差异有统计学意义(Z=3.181、2.389,P=0.001、0.017),进展(PD)组化疗后CYFRA21-1、SCC-Ag升高,差异有统计学意义(Z=2.701、2.250,P=0.007、0.024),稳定(SD)组化疗前后SCC-Ag、CYFRA21-1差异无统计学意义(Z=0.414、1.114,P=0.679、0.265).提示SCC-Ag、CYFRA21-1与影像学疗效评价具有一致性.ROC曲线显示化疗后CYFRA21-1较化疗前升高32%,SCC-Ag升高38%,可作为预测化疗疗效的最佳临界值,并与影像学评效具有较好的一致性.化疗后CYFRA21-1较化疗前升高＞32%和SCC-Ag较化疗前升高＞38%为晚期食管鳞癌预后不良因素.结论 CYFRA21-1和SCC-Ag对晚期食管鳞癌的诊断、预测化疗疗效和预后有重要意义.