结直肠癌组织中p27基因甲基化与其临床病理的关系

目的 检测结直肠癌组织中p27基因启动子区CpG岛甲基化水平及其表达,并结合其临床病理参数进行分析,探讨其在结直肠癌发生发展中的作用.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应分析技术检测106例结直肠癌组织及其正常结直肠黏膜组织、22例结肠腺瘤组织中p27基因启动子甲基化,用免疫组织化学SP方法检测其蛋白表达.结果 本组结直肠癌组织中p27甲基化阳性率为59.4%(63/106),结肠腺瘤组织中为18.2%(4/22),而正常结直肠黏膜组织中为3.8%(4/106),前组与后两组之间相比差异有统计学意义(P＜0.05).低分化组结直肠癌组织中p27甲基化阳性率明显高于高中分化组(48.0%比24.7%,P＜0.05);Dukes-A+B期组与C+D期组之间相比差异有统计学意义(20.0%比41.2%,P＜0.05);有无淋巴结转移两组之间的阳性率相比差异有统计学意义(41.5%比23.1%,P＜0.05);浸润深达浆膜层的结直肠癌组织中的甲基化阳性率与未达浆膜层组相比差异无统计学意义(32.5%比24.1%,P＞0.05).结论 结直肠癌组织中存在p27基因启动子甲基化.p27基因的高甲基化与结直肠癌分化程度、浸润深度、Dukes分期及有无淋巴结转移有关.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between p27 gene methylation and pathology of colorectal carcinoma. Methods p27 gene methylation promotor region and p27 protein expression were detected respectively by methylation specificity polymerase chain reaction and immunohistochemical staining SP in 106 cases of colorectal carcinoma and each adjacent normal mucous membrane tissue and 22 cases of colorectal adenoma tissue. Results The positive expression rate of p27 gene methylation was statistically different in colorectal carcinoma tissue compared with normal mucous membrane and colorectal adenoma tissue (P＜0.05). Their positive expression rate were 59.4% (63/106), 18.2% (4/22) and 3.8%(4/106) respectively in colorectal carcinoma tissue,colorectal adenoma and normal mucous membrane tissue (P ＜ 0. 05). p27 gene methylation in poorly differentiated group was significantly higher than that in welldifferentiated group (48.0% vs. 24. 7%, P ＜0. 05), in Dukes-A + B stage group was significantly lower than that in Dukes C + D stage group(20. 0% vs. 41.2%, P ＜ 0. 05 ), and it was higher in lymph nodes metastases group than that in lymph nodes negative group(41.5% vs. 23. 1%, P ＜0. 05), that in positive serosa infiltration group was higher than negative serosa infiltration group(32. 5% vs. 24. 1%, P ＞ 0. 05 ).Conclusions Methylated p27 gene protein expression in colorectal carcinoma was significantly higher than normal mucous membrane and colorectal adenoma tissue. The methylation rate of p27 gene in colorectal carcinoma was significantly associated with tumor differentiation, invasive depth, Dukes stage, lymph node metastasis.     

结直肠癌组织中p27基因甲基化与其临床病理的关系

Objective To investigate the relationship between p27 gene methylation and pathology of colorectal carcinoma. Methods p27 gene methylation promotor region and p27 protein expression were detected respectively by methylation specificity polymerase chain reaction and immunohistochemical staining SP in 106 cases of colorectal carcinoma and each adjacent normal mucous membrane tissue and 22 cases of colorectal adenoma tissue. Results The positive expression rate of p27 gene methylation was statistically different in colorectal carcinoma tissue compared with normal mucous membrane and colorectal adenoma tissue (P＜0.05). Their positive expression rate were 59.4% (63/106), 18.2% (4/22) and 3.8%(4/106) respectively in colorectal carcinoma tissue,colorectal adenoma and normal mucous membrane tissue (P ＜ 0. 05). p27 gene methylation in poorly differentiated group was significantly higher than that in welldifferentiated group (48.0% vs. 24. 7%, P ＜0. 05), in Dukes-A + B stage group was significantly lower than that in Dukes C + D stage group(20. 0% vs. 41.2%, P ＜ 0. 05 ), and it was higher in lymph nodes metastases group than that in lymph nodes negative group(41.5% vs. 23. 1%, P ＜0. 05), that in positive serosa infiltration group was higher than negative serosa infiltration group(32. 5% vs. 24. 1%, P ＞ 0. 05 ).Conclusions Methylated p27 gene protein expression in colorectal carcinoma was significantly higher than normal mucous membrane and colorectal adenoma tissue. The methylation rate of p27 gene in colorectal carcinoma was significantly associated with tumor differentiation, invasive depth, Dukes stage, lymph node metastasis.     

p16基因启动子甲基化与结直肠癌发生发展的关系

目的　探讨p16基因启动子甲基化在结直肠癌发生、发展过程中的作用及其临床意义。方法　采用RT PCR、免疫组化方法检测p16基因表达 ,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测p16基因启动子甲基化。结果　 5 8例结直肠癌中 ,癌旁肠粘膜、原发灶、肝转移灶中p16表达阳性率分别为97% (5 6 /5 8)、31% (18/5 8)、7% (2 /2 8) ,原发灶、肝转移灶中p16表达明显降低 (P <0 0 1)。癌旁肠粘膜组织中未发现p16基因启动子甲基化 ,而癌原发灶、肝转移灶中p16甲基化阳性率分别为 5 0 %(2 9/5 8)、75 % (2 1/2 8) ,3种组织p16基因启动子甲基化率的差别有显著性意义 (P <0 0 1)。在 2 8例出现肝转移者外周静脉血、胆汁中可检测到p16甲基化启动子序列者分别为 2 3例 (82 % )、2 0例 (71% )。结论　p16基因启动子甲基化导致p16抑癌基因失活与结直肠癌的发生、转移有密切关系。     

BNIP3基因甲基化与早期结直肠癌患者临床病理特征的关系

目的分析早期结直肠癌组织中BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化与患者临床病理特征的关系,评价其在结直肠癌发生发展中的作用。方法用甲基化特异性PCR技术分析107例早期结直肠癌患者肿瘤组织中BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果本组结直肠癌组织标本中BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化阳性率为58.9%(63/107)。右半结肠组肿瘤组织中BNIP3基因甲基化明显高于左半结肠组(P<0.001);低分化组明显高于高中分化组(P=0.002)。BNIP3基因甲基化在患者性别、年龄、肿瘤大小和分期等分组间无明显差异。结论早期结直肠癌组织中存在BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化。BNIP3基因高甲基化与早期结直肠癌部位和分化程度密切相关。     

SFRP2基因超甲基化与结直肠癌临床病理关系的研究

目的 通过对SFRP2基因在结直肠癌和癌旁组织中的超甲基化水平的测定,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系.探讨SFRP2基因与结直肠癌浸润、转移等的关系.方法 用实时定量聚合酶链反应技术检测分析30例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织中SFRP2基因超甲基化水平,并统计学分析其与临床病理特征的关系.结果 在癌组织和癌旁组织中均有SFRP2基因超甲基化发生;TNM分期中结直肠癌Ⅲ、Ⅳ期(7.24±1.13)组织中甲基化水平明显高于结直肠癌Ⅰ、Ⅱ期(5.92 ±0.97)组织中甲基化水平(P＜0.05);在低分化结直肠癌组织中(7.31±1.11)甲基化水平明显高于中高分化结直肠癌癌组织(6.23±1.03),差异有统计学意义(P＜0.05);与性别、年龄、肿块位置及大小差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SFRP2基因超甲基化对结直肠癌恶性程度、浸润、转移和预后判定具有重要的意义.     

胃癌组织中p27基因甲基化改变及其与胃癌生物学特性的关系

目的 检测胃癌组织中p27基因的5'CpG岛甲基化状态,并探讨p27基因甲基化状态与胃癌生物学特性的关系。方法 利用甲基化特异性PCR测定49例胃癌组织,20例癌旁组织以及10例正常胃黏膜组织中p27基因的甲基化状态。结果 胃癌组p27基因甲基化率为49％,癌旁组p27基因甲基化率为25％,正常胃黏膜组p27基因甲基化率为0。胃癌组p27基因甲基化率明显高于正常胃黏膜组(P＜0.05);淋巴结转移组p27基因甲基化率为61％,显著高于无淋巴转移组的28％(P＜0.05)。P27基因甲基化率与患者年龄、性别、肿瘤组织大小、部位无关(P＞0.05)。结论 p27基因甲基化可能导致p27mRNA的失转录,并与胃癌的发生、转移相关。     

RUNX3基因甲基化在结直肠癌发生中的作用及与预后的关系

目的 探讨RUNX3基因甲基化在结直肠癌发生中作用及与预后的关系.方法 分别用免疫组化和甲基化特异性PCR(MSP)技术检测结直肠正常黏膜、腺瘤和癌组织中RUNX3蛋白表达和甲基化状态,分析甲基化状态与5年生存率的关系.统计分析采用秩和检验Kruskal-Wallis法、x2或Fisher's确切概率法检验、Log-rank检验及多因素COX回归分析.结果 28例腺瘤和65例癌组织中RUNX3蛋白表达率分别为86％( 24/28)、52％( 34/65),明显低于正常组织94％(61/65)(x2=4.328,P=0.037;x2=16.675,P=0.000),腺瘤与癌组织间差异无统计学意义(x2=3.266,P=0.071).正常组织RUNX3基因无甲基化,腺瘤和癌组织中RUNX3甲基化率分别为21％(6/28)、35％ (23/65),明显高于正常组织(P=0.000),腺瘤与癌组织间差异无统计学意义(x2=1.766,P=0.183);腺瘤组织RUNX3基因甲基化者蛋白表达率为67％ (4/6),非甲基化者为91％( 20/22),差异无统计学意义(P=0.191);癌组织RUNX3基因甲基化者蛋白表达率为26％ (6/23),非甲基化者为88％ (28/32),RUNX3基因甲基化与蛋白失表达有关(x2=9.810,P=0.002).甲基化者5年生存率明显低于未甲基化者(x2 =5.87,P=0.016).多因素分析显示,RUNX3基因甲基化是影响结直肠癌患者预后的独立因素(P=0.033).结论 RUNX3基因甲基化是结直肠癌发生中的重要基因事件和影响结直肠癌患者预后的独立因素,可能与蛋白失表达有关.     

脾酪氨酸激酶基因甲基化与结直肠癌临床病理特征之间的关系

目的探讨脾酪氨酸激酶（Syk）基因甲基化、表达水平与结直肠癌患者临床病理特征及预后之间的关系。方法收集2001年1～12月间经手术治疗的120例结直肠癌标本．采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分析Syk基因的甲基化状态和表达情况，并分析Syk基因甲基化失表达与结直肠癌临床病理特衙和生存预后之间的关系。结果（1）120例结直肠癌患者中，48例肿瘤组织未检测到Syk基因的表达，而正常组织Syk基凶均表达；差异有统计学意义（X^2=60，P=0．000）。（2）发生甲基化的37例肿瘤组织中，Syk基因均失去表达。未发生甲基化的83例中，仅11例失表达；而癌旁匹配的正常组织均有表达。（3）Syk基因的甲基化状态与结直肠癌的淋巴结转移状态、病理分期密切相关，而与其他临床参数无关。（4）术后随访资料表明，Syk基因甲基化组患者的3年生存率明显低于未甲基化组（73．5％比95．7％，P=0．007）；而术后复发转移率明显高于未甲基化组（32．4％比8．4％，P=0．02）。结论Syk基因过甲基化失表达参与了结直肠癌的发生，导致结直肠癌侵袭性增强，患者术后复发转移率升高，3年生存率降低。     

结直肠癌中DNA甲基化的研究进展

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，是我国近年来发病率增长最快的肿瘤，其发生率增长了100％，现为第5位恶性肿瘤。     

p15、syk基因启动子甲基化与直肠癌关系及预后的研究

目的:探讨直肠癌组织中p15、syk基因启动子甲基化状态与临床病理及预后之间的关系。方法:采用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)联合检测直肠癌组织及相应癌旁正常组织中p15及syk基因启动子甲基化状态,并分析两者间的关系、及其与临床病理资料之间和预后的关系。结果:在55例直肠癌组织中,p15、syk基因启动子甲基化发生率分别为56.4%(31/55)、36.4%(20/55),对应癌旁正常组织中发生率分别为16.4%(9/55)、0%(0/55),两者间均有统计学差异(χ2=19.01,P<0.05;χ2=24.44,P<0.05);在癌组织中检测到p15启动子甲基化的31例中10例术后癌复发转移,发生率为32.2%(10/31),在癌组织中检测到syk基因甲基化的20例中7例术后发生复发转移,发生率为35.0%(7/20)。p15基因启动子甲基化状态与直肠癌分化程度有关(P<0.05);syk基因启动子甲基化状态与区域淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。p15基因启动子甲基化的31例中,syk基因启动子甲基化17例,p15与syk之间的甲基化状态有关(χ2=10.48,P<0.05)。结论:直肠癌组织中p15、syk基因启动子高度甲基化,且两者具有协同性;p15、syk基因启动子高度甲基化与直肠癌的发生及术后复发转移密切相关,联合检测两者表达及基因启动子甲基化状态或有助于直肠癌的早期诊断及预后评估。     

MAL基因及其甲基化与大肠癌发生的研究进展

MAL基因在T细胞分化中晚期时表达,与肿瘤发病密切相关.大肠癌的发病机制除遗传因素外,后生机制起着重要作用.最主要的后生机制之一是DNA的甲基化、MAL基凶甲基化及表达异常与大肠癌发生、发展、侵袭联系密切.MAL基凶可作为大肠癌粪便筛查的标志物之一,为大肠癌的早期预测、分类分级、预后评估及预防提供了新的依据.     

MMP-3在结直肠腺瘤及结直肠癌中的表达与临床意义的相关性研究

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-3在结直肠腺瘤及结直肠癌中表达与临床病理参数间相关性。方法应用免疫组织化学方法检测MMP-3在20例结直肠腺瘤和60例结直肠癌中的表达。结果 MMP-3在20例结直肠腺瘤及60例结直肠癌中,阳性表达率分别为10%、41.7%(P=0.031)。MMP-3的阳性表达与淋巴结转移(P=0.017)呈正相关,与预后呈负相关。结论 MMP-3的上调表达可能参与了结直肠癌的发生、发展、浸润及转移,对临床上判断预后具有较大意义。     

乳腺癌组织中Skp2和p27Kip1表达与临床病理因素的关系

目的:探讨乳腺癌组织中Skp2与p27Kip1的表达及其意义。方法:采用免疫组化法两步检测法检测正常乳腺组织、导管上皮不典型增生组织(ADH)以及浸润性导管癌(IDC)组织中的Skp2与p27Kip1的表达,并分析两者表达与乳腺癌淋巴结转移及组织学分级的关系。结果:Skp2阳性表达率在正常乳腺组织、ADH组织、IDC组织依次升高,伴腋窝淋巴结转移的IDC组织中Skp2阳性表达率明显高于无淋巴结转移的IDC组织,而p27Kip1的表达则与Skp2的表达呈反向变化(均P0.05);不同组织学分级IDC组织间Skp2阳性率、p27Kip1阳性率差异均有统计学意义(均P0.05),且Skp2阳性表达与IDC组织学分级呈正相关(r=0.492,P0.05),而p27Kip1的阳性表达与IDC组织学分级呈负相关(r=-0.327,P0.05)。结论:乳腺癌组织中Skp2表达上调而p27Kip1表达下调,两者的变化程度与乳腺癌的恶性生物学特征密切相关。     

粪便多配体聚糖2基因甲基化在结直肠恶性肿瘤进展的相关性

目的:探讨粪便多配体聚糖2(SDC2)基因甲基化在结直肠恶性肿瘤(CRC)进展中的相关性。方法:收集2018年4月至2019年7月上海交通大学医学院附属松江医院经结肠镜检查(和/或)病理诊断的133例受试者,其中44例CRC、61例进展期腺瘤(AA)和28例对照者(CRC和AA均为阴性者)为研究对象。每例收集两份粪便标...     

外周血SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌筛查及术后随访中的意义分析

目的探讨外周血SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌筛查及随访中的应用。 方法回顾性分析2014年10月至2015年12月接受结直肠癌筛查人群共计783例,其中确诊结直肠癌患者72例,非结直肠癌患者711例。对所有纳入患者进行外周血SEPT9甲基化检测和病理检查。以病理诊断为金标准,采用ROC曲线分析SEPT9阳性对结直肠癌的诊断价值,术后随访1年,观察外周血SEPT9基因甲基化和患者生存情况的关系。应用SPSS 23.0软件进行统计学分析,性别、年龄段、病变位置、TNM分期等资料以[例(%)]表示,比较采用卡方检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果结直肠癌患者SEPT9基因甲基化(70.8%)显著高于非结直肠癌患者(13.5%);SEPT9基因甲基化在TNM分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期结直肠癌患者的阳性率依次为：47.4%、 69.2%、 88.9%、 88.9%。ROC曲线分析显示,SEPT9的AUC＝0.787,高于CA125和CA199(P<0.05),其诊断结直肠癌的灵敏度为86.5%,特异度为70.8%。术后随访1年发现,88.2%的SEPT9基因甲基化阳性患者在结直肠癌根治术后转为阴性,与SEPT9甲基化转阴性的患者相比较,SEPT9甲基化未转为阴性的患者预后较差。 结论SEPT9基因甲基化检测可能作为评估结直肠癌风险和预后的一项重要检测指标。     

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目的 研究遗传性非息肉病性大肠癌（ＨＮＰＣＣ）在大癌中的比例及临床病理特点。方法 收集和分析５５０例大肠癌的临床病理及随访资料，符合Ａｍｓｔｅｒｄａｍ标准或日本标准者诊断为ＨＮＰＣＣ。结果 ５５０例大肠癌中６例（１．１％）符合Ａｍｓｔｅｒｄａｍ标准，１９例（３．５％）符合日本标准。本组ＨＮＰＣＣ的临床病理特点是肿瘤发病年龄早，多位于右半结肠，粘液癌及多原发大肠癌多见，家族中肠外肿瘤增多，息肉伴随增     

大肠癌肝转移肿瘤中端粒酶活性和p16基因纯合缺失

目的 研究人大肠癌肝转移肿瘤中端粒酶活性和p16基因纯合缺失及其临床意义。方法 采用TRAP银染方法和半定量多重PCR检测24例大肠癌转移肿瘤组织中端粒酶活性及p16基因的纯合缺失情况,并结合临床病理参数,进行统计学分析。结果 本组24例大肠癌肝转移肿瘤组织中检测到19例端粒酶阳性,阳性率为79．2％。端粒酶活性与转移瘤大小、肝内转移灶数目、分化程度、HBsAg以及是否伴有纤维化无关。在24例转移瘤组织中有9例标本中检测到p16基因的缺失,阳性率为37．5％,p16基因的失与端粒酶活性相关。结论 大肠癌肝转移肿瘤中端粒酶活性和p16基因异常对阐明大肠癌转移的生物学行为有重要的意义。