神经干细胞移植数量对大鼠神经病理性痛的影响

目的 探讨神经干细胞(NSGs)移植数量对大鼠神经病理性痛的影响.方法 取出生1～3 d的SD大鼠,制备NSCs悬液.清洁级雄性SD大鼠84只,体重150～180 g,采用右侧坐骨神经半切断法制备大鼠神经病理性痛模型.采用随机数字表法,将大鼠随机分为7组(n=12),假手术组(S组):仅暴露坐骨神经,不切断,鞘内注射细胞培养液30 μl;神经病理性痛组(NP组):于模型制备后3d鞘内注射细胞培养液30 μl;NP+NSCs 103组(N1组)、NP+NSCs 104组(N2组)、NP+NSCs 105组(N3组)、NP+NSCs 106组(N4组)和NP+NSCs 107组(N5组):于模型制备后3 d,鞘内注射相应浓度的NSCs悬液.模型制备前1 d和制备后1、3.7、14和21 d时测右足机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL);于模型制备后7和21 d,痛阈测定结束后,取右侧腰膨大脊髓背角及L5背根神经节,测定脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA及其蛋白的表达水平.结果 与S组比较,NP组和N1～5组MWT降低,TWL缩短,脊髓背角和DRG BDNF mRNA表达上调(P<0.05),BDNF阳性细胞数增多,染色加深;与NP组比较,N2～5组MWT升高,TWL延长,脊髓背角和DRG BDNF mRNA表达上调(P<0.05),BDNF 阳性细胞数增多,染色加深;模型制备后7 d N1～5组MWT依次升高,TWL依次延长,脊髓背角和DRG BDNF mRNA表达依次上调(P<0.05),BDNF阳性细胞数依次增多,染色逐渐加深;模型制备后14、21d,N1～3组MWT依次升高,TWL依次延长(P<0.05),模型制备后21 d,N1～3组脊髓背角和DRG BDNF mRNA表达依次上调,BDNF阳性细胞数依次增多,染色逐渐加深;N3～5组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 NSCs移植减轻大鼠神经病理性痛的适宜移植数量为105个.

Abstract：

Objective To investigate the effect of intrathecal (IT) transplantation of different quantities of neural stem cells (NSCs) on neuropathic pain (NP) in rats.Methods Eighty-four adult pathogen-free male SD rats weighing 150-180 g were randomly divided into 7 groups ( n = 12 each) : group sham operation (S group) , NP group, NP+ NSCs 103 , 104 , 105 , 106 , 107 groups (N1-5 groups) . NP was induced by partial transection of right sciatic nerve. NSCs were transplanted into subarachnoid space in N1-5 groups. Paw withdrawal threshold to mechanical stimulation (MWT) and paw withdrawal latency to nociceptive thermal stimuli (TWL) were measured at 1 day before (baseline) and 1, 3, 7, 14 and 21 days after operation. Brain derived neurotrophic factor ( BDNF) expression in spinal dorsal horn and dorsal root ganglia (DRG) was detected by immuno-histochemistry and RT-PCR on the 7th and 21st day after operation. Results Partial transection of the sciatic nerve gradually reduced MWT and TWL after operation starting from day 1 until day 7 and 14 as compared with the baseline in group NP. IT NSC transplantation significantly increased MWT and TWL and expression of BDNF in spinal dorsal horn and DRG in a dese-dependent manner at day 7 after operation in N1-5 groups as compared with group NP. There were no significant differences in MWT and TWL and BDNF expression among N3, N4 and N5 groups at day 21 after operation.Conclusion The proper quantity of transplanted NSCs which are able to ameliorate NP induced by partial transection of sciatic nerve in rats is 105 .     

神经干细胞移植数量对大鼠神经病理性痛的影响

目的 探讨神经干细胞(NSGs)移植数量对大鼠神经病理性痛的影响.方法 取出生1～3 d的SD大鼠,制备NSCs悬液.清洁级雄性SD大鼠84只,体重150～180 g,采用右侧坐骨神经半切断法制备大鼠神经病理性痛模型.采用随机数字表法,将大鼠随机分为7组(n=12),假手术组(S组):仅暴露坐骨神经,不切断,鞘内注射细胞培养液30 μl;神经病理性痛组(NP组):于模型制备后3d鞘内注射细胞培养液30 μl;NP+NSCs 103组(N1组)、NP+NSCs 104组(N2组)、NP+NSCs 105组(N3组)、NP+NSCs 106组(N4组)和NP+NSCs 107组(N5组):于模型制备后3 d,鞘内注射相应浓度的NSCs悬液.模型制备前1 d和制备后1、3.7、14和21 d时测右足机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL);于模型制备后7和21 d,痛阈测定结束后,取右侧腰膨大脊髓背角及L5背根神经节,测定脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA及其蛋白的表达水平.结果 与S组比较,NP组和N1～5组MWT降低,TWL缩短,脊髓背角和DRG BDNF mRNA表达上调(P<0.05),BDNF阳性细胞数增多,染色加深;与NP组比较,N2～5组MWT升高,TWL延长,脊髓背角和DRG BDNF mRNA表达上调(P<0.05),BDNF 阳性细胞数增多,染色加深;模型制备后7 d N1～5组MWT依次升高,TWL依次延长,脊髓背角和DRG BDNF mRNA表达依次上调(P<0.05),BDNF阳性细胞数依次增多,染色逐渐加深;模型制备后14、21d,N1～3组MWT依次升高,TWL依次延长(P<0.05),模型制备后21 d,N1～3组脊髓背角和DRG BDNF mRNA表达依次上调,BDNF阳性细胞数依次增多,染色逐渐加深;N3～5组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 NSCs移植减轻大鼠神经病理性痛的适宜移植数量为105个.     

鞘内移植hPPE修饰INPC对大鼠慢性神经病理性疼痛的镇痛效应

目的评价人前脑啡肽原基因(hPPE)修饰永生化大鼠神经前体细胞(INPC)对大鼠慢性神经病理性疼痛的镇痛效应。方法成年雌性Wistar大鼠40只,随机分为5组,Naive组大鼠不进行任何处理;Sham组大鼠仅暴露右侧坐骨神经分支;SNI组大鼠右侧后肢行保留性神经损伤(SNI)手术; INPC组和INPC/hPPE组大鼠分别于SNI术后1周鞘内移植5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)标记的INPC或INPC/hPPE细胞。持续观察大鼠疼痛行为学,分别于SNI术前,SNI术后1周～细胞移植后8周内每周测定大鼠50%机械缩爪阈值(MWT)和热缩爪潜伏期(TWL)。于细胞移植后8周,取大鼠L_(4～6)脊髓组织,测定移植细胞5-BrdU、亮氨酸脑啡肽的表达,测定hPPE mRNA表达和亮氨酸脑啡肽的分泌。结果与Naive组比较,SNI组、INPC组SNI术后1周大鼠出现疼痛行为学改变,MWT和TWL降低,并持续到细胞移植后8周;细胞移植后1周,INPC/hPPE组大鼠痛觉异常症状明显减轻,MWT和TWL升高,到细胞移植后2周已基本恢复至正常水平。INPC组和INPC/hPPE组脊髓背角软脑膜和浅层中均可检测到5-BrdU免疫染色阳性细胞;INPC/hPPE组hPPE mRNA表达和亮氨酸脑啡肽的水平高于其它4组(P<0.05)。结论SNI诱导的慢性神经病理性疼痛大鼠鞘内移植hPPE修饰INPC后,可持续分泌高水平的亮氨酸脑啡肽,产生明显的镇痛效应。     

蛛网膜下腔移植骨髓间充质干细胞对大鼠慢性神经病理性痛的影响

目的 探讨蛛网膜下腔移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠慢性神经病理性痛的影响.方法 雌性SD大鼠140只,体重180～200 g,采用坐骨神经分支选择损伤(SNI)法制备慢性神-经病理性痛模型,术后2周,随机分为4组(n=35):模型组(NP组)、MSCs组、PBS组和骨髓未贴壁单核细胞组(BNMCs组).MSCs组、PBS组、BNMCs组蛛网膜下腔分别注射1×105/μl的第3代MSCs悬液10μl、PBS 10μl、1×105/μl的BNMCs悬液10μl.于术前、术后2周、移植后1、2、3、4、5周(T0-6)时测定机械痛阈.同时于T1～6时测定痛阈后随机选择5只大鼠取脊髓腰膨大组织,使用RT-PCR法测定脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达.结果 与T0时比较,T1时各组机械痛阈降低,T2～6时NP组、PBS组、BNMCs组机械痛阈降低(P＜0.05).与T1时比较,MSCs组T2～6时机械痛阈升高,T2-4时BDNF mRNA表达上调(P＜0.05),PBS组和BNMCs组其余时点各指标差异无统计学意义(P＞0.05).与NP组比较,MSCs组机械痛阈升高,BDNFmRNA表达上调(P＜0.05),PBS组和BNMCs组各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 蛛网膜下腔移植MSCs可减轻大鼠慢性神经病理性痛,其机制可能与上调脊髓BDNF mRNA表达有关.     

神经病理性痛大鼠鞘内注射人前脑啡肽原基因修饰骨髓间充质干细胞的镇痛效果

目的 探讨神经病理性痛大鼠鞘内注射人前脑啡肽原(PENK)基因修饰人骨髓间充质干细胞(hMSC)的镇痛效果.方法 取鞘内置管成功的健康雄性SD大鼠40只,周龄6～8周,体重160～180 g,随机分为4组(n=10),A组为正常对照组;B组、C组和D组采用坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)法建立神经病理性痛模型,于CCI术后3 d鞘内给药,A组和B组鞘内注射生理盐水10μl;C组鞘内注射转染空载体的hMSC细胞(hMSC-pBABE)悬液10μl(2×108～3×108/μl);D组鞘内注射hMSC-PENK细胞悬μl液10μl(2×108～3×108个/μl).于术前、术后3、5、7、9、14 d时测定热痛阈.术后14 d痛阈测定后取新鲜脊髓组织,采用RT-PCR法测定PENK mRNA表达.结果 与术前比较,B组、C组、D组术后各时点热痛阈降低(P＜0.05).与A组比较,B组、C组、D组热痛阈降低,B组和C组PENK mRNA表达下调,D组PENK mRNA表达上调(P＜0.05).与B组和C组比较,D组热痛阈升高,PENK mRNA表达上调(P＜0.05).B组和C组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大鼠鞘内注射PENK基因修饰的hMSC可减轻神经病理性痛.     

鞘内注射PSD-93反义寡核苷酸对大鼠神经病理性痛的疗效

目的 探讨鞘内注射PSD-93反义寡核苷酸对大鼠神经病理性痛的疗效.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为5组(n=12):假手术组(S组)、C7脊神经压迫组(N组)、C7脊神经压迫+鞘内注射PSD-93误义寡核苷酸10 μg组(M组)、C7脊神经压迫+鞘内注射PSD-93反义寡核苷酸5 μg组(AJ组)和C7脊神经压迫+鞘内注射PSD-93反义寡核苷酸10 μg组(A2 组).N组、M组、A1组和A2组用60 g无创微血管夹压迫大鼠右侧C7脊神经15 min,制备神经病理性痛模型,经枕骨大孔鞘内置管,术毕当日开始给药,每日1次,连续4 d.于术前2 d(T0)和术后1、3、5、7 d(T1-4)测定机械痛阈和、热痛阈;T2和T4时分别处死6只大鼠,取C7脊髓,免疫组化法测定脊髓背角PSD-93蛋白表达.结果 与S组比较,N组、M组和A1组T1-4时机械痛阈及热痛阈降低,N组和M组T2,4时脊髓背角PSD-93蛋白表达上调(P＜0.05);与N组和M组比较,A1组T1,2时、A2组T1～4时机械痛阈及热痛阈升高,A1组T2时、A2组T2,4时脊髓背角PSD-93蛋白表达下调(P＜0.05);与A1组比较,A2组T1-4时机械痛阈及热痛阈升高,T2,4时脊髓背角PSD-93蛋白表达下调(P＜0.05).结论 鞘内注射PSD-93反义寡核苷酸可减轻大鼠神经病理性痛.     

脊髓神经元型一氧化氮合酶在大鼠神经病理性痛中的作用

目的 探讨脊髓神经元型一氧化氮合酶(nNOS)在大鼠神经病理性痛中的作用.方法 健康雄性SD大鼠40只,体重220～280 g,采用结扎坐骨神经干的方法建立坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型.随机分为4组(n=10),Ⅰ组及Ⅱ组暴露坐骨神经干,分别于术后1 d开始鞘内注射选择性nNOS抑制剂7-NI 60 μg[溶于20%二甲基亚砜(DMSO)]10μl)、20%DMSO 10μl,1次/d,连续6d;Ⅲ组及Ⅳ组制备CCI模型,分别于术后1 d开始鞘内注射7-NI 60μg(溶于20%DMSO 10μl)、20%DMSO 10 μl,1次/d,连续6 d.分别于CCI前1 d、CCI后1、3、5、7 d时测定大鼠机械痛阈和热痛阈.于CCI后7 d,各组分别取5只大鼠,取术侧L_(4～6)背根神经节,分别采用实时定量PCR和Western blot法测定nNOS mRNA及蛋白的表达水平.结果 与Ⅰ组和Ⅱ组比较,T_(1～4)时Ⅲ组和Ⅳ组术侧后肢机械痛阈和热痛阈降低(P＜0.05),背根神经节nNOS蛋白及mRNA的表达上调(P＜0.05);与Ⅲ组比较,T_(1～4)时Ⅳ组机械痛阈和热痛阈降低,背根神经节nNOS蛋白及mRNA的表达上调(P＜0.05).结论 脊髓nNOS参与了大鼠神经病理性痛的形成.     

神经干细胞移植量对PST大鼠神经病理性疼痛的影响

目的 观察不同数量神经干细胞(NSCs)鞘内注射对坐骨神经半切断(PST)大鼠神经病理性疼痛及脊髓背角、背根神经节(DRG)胶质源性神经营养因子(GDNF)表达的影响.方法 84只成年雄性SD大鼠随机均分为七组:假手术组(Ⅰ组)、PST组(Ⅱ组)、PST+NSCs 1×10<'3>组(Ⅲ组)、PST+NSCs 1×10<'4>组(Ⅳ组)、PST+NSCs 1×10<'5>组(Ⅴ组)、PST+NSCs 1×10<'6>组(Ⅵ组)、PST+NSCs 1×10<'7>组(Ⅶ组).NSCs于术后3 d鞘内注射.记录术前1 d、术后1、3、7、14、21 d机械痛及热痛阈;术后7、21 d免疫组织化学与RT-PCR检测同侧脊髓背角及DRG GDNF表达.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ～Ⅶ组术后1 d痛阈下降,术后7、14 d最低(P<0.05);与Ⅱ组比较,术后7 d Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组随着NSCs量的增加,痛阈逐渐升高,脊髓背角及DRG GDNF表达逐渐上调(P<0.05);术后21d,Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组痛阈均与术前差异无统计学意义,但其GDNF表达Ⅴ组最高(P<0.05).结论 鞘内注射1×10<'5>NSCs能最有效缓解PST大鼠神经病理性疼痛.     

姜黄素对大鼠神经病理性痛的影响

目的 探讨姜黄素对大鼠神经病理性痛的影响.方法 健康雄性SD大鼠108只,体重220～250 g,随机分为6组(n=18):对照组(C组)、假手术组(S组)、慢性压迫性损伤组(CCI组)和不同剂量姜黄素组(Cur1组、Cur2组和Cur3组).C组腹腔注射二甲基亚砜4 ml·kg-1·d-1,持续14 d;S组只分离坐骨神经,然后腹腔注射二甲基亚砜4 ml·kg-1·d-1,持续至术后14 d;CCI组术后腹腔注射二甲基亚砜4 ml·kg-1·d-1,持续至术后14 d;Cur1组、Cur2组或Cur3组术后分别腹腔注射姜黄素30、100、300 mg·kg-1·d-1,持续至术后14 d,姜黄素以二甲基亚砜溶解.于术前2 d和术后1、3、5、7、10、14d时测定热缩足反应潜伏期(TWL)和机械缩足反应阚值(MWT).各组于术后3、7、14 d时各处死6只大鼠,免疫组化法测定脊髓背角和背根神经节中磷酸化c-jun氨基末端蛋白激酶(p-JNK)和c-jun的表达.结果 与CCI组比较,Cur1组和Cur2组术后MWT升高,背根神经节和脊髓背角p-JNK和c-jun表达下调,Cur2组术后TWL升高(P<0.05);与Cur1组比较,Cur2组术后TWL升高,背根神经节和脊髓背角p-JNK和c-jun表达均下调(P<0.05),MWT差异无统计学意义(P0.05).结论 姜黄素30、100mg/kg可减轻大鼠神经病理性痛,100 mg/kg效果更明显,其机制可能与抑制脊髓背角和背根神经节p-JNK和c-jun表达上调有关.     

川芎嗪对大鼠神经病理性痛的影响

目的 评价川芎嗪对大鼠神经病理性痛的影响.方法 成年健康雄性SD大鼠54只,体重180～ 220 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=18):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)和川芎嗪组(T组).S组仅分离坐骨神经但不结扎,NP组和T组采用坐骨神经慢性压迫损伤法建立神经病理性痛模型.T组于术毕开始腹腔注射川芎嗪100 mg/kg,1次/d,连续14 d;S组和NP组以等容量生理盐水替代.于术前1d、术后3、7、14 d时测定机械痛阈和热痛阈,并于术后3、7和14d时测定痛阈后各取6只大鼠处死,取L(4).5脊髓组织,用免疫组织化学法检测脊髓背角Bcl-2及caspase-3的表达,TUNEL法检测脊髓背角凋亡细胞,计算细胞凋亡率.结果 S组比较,NP组和T组热痛阈及机械痛阈降低,脊髓背角Bcl-2和caspase-3表达上调,细胞凋亡率升高(P＜0.05).与NP组比较,T组热痛阈及机械痛阈升高,脊髓背角Bcl-2表达上调,caspase-3表达下调,细胞凋亡率降低(P＜0.05).结论 川芎嗪可减轻大鼠神经病理性痛,其机制与抑制脊髓背角细胞凋亡有关.     

拉科酰胺对神经病理性痛大鼠背根神经节Nav1.8表达的影响

目的 探讨拉科酰胺对神经病理性痛大鼠背根神经节(DRG)Nav1.8表达的影响.方法 SPF级雌性SD大鼠36只,体重120～130 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=12):假手术组(S组)、模型组(M组)、拉科酰胺组(L组).M组和L组将钢棒插入椎间孔压迫L5DRG制备神经病理性痛模型.于术前2 d、术后2,4、6、7、8、9、10 d(T0-7)时测定机械痛阈.于T4时,S组和L组腹腔注射拉科酰胺20 mg/kg(生理盐水溶解至0.5 ml),M组注射生理盐水0.5 ml,2次/d,连续4 d.每天末次给药后测定痛阈.于T7时痛阈测定后取术侧L5DRG,采用RT-PCR法和免疫组织化学法测定Nav1.8mRNA和蛋白表达水平.结果 与S组比较,M组和L组T1～7时机械痛阚降低,Nav1.8 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05);与M组比较,L组T4～7时机械痛阈升高,Nav1.8 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05).结论 拉科酰胺减轻大鼠慢性神经病理性痛的机制与下调损伤DRG的Nav1.8表达有关.     

转染血管内皮生长因子基因神经干细胞移植对大鼠脑缺血损伤的修复作用

目的 探讨转染血管内皮生长因子（VEGF）基因神经干细胞移植对大鼠脑缺血损伤的修复作用。方法 建立大鼠大脑中动脉梗塞（tMCAO）模型，将tMCAO模型随机分为对照组、注射磷酸盐缓冲液（PBS液）的PBS液对照组、接受神经干细胞（NSCs）移植的NSCs组、接受转染VEGF基因的NSCs移植的NSCs-VEGF组，采用立体定向法将相应移植物注射到tMCAO模型的右侧纹状体缺血半暗区。各组移植后2、4、6、8、10、12周进行神经功能损害程度（NSS）评分；移植后7d，采用免疫荧光染色法观察NSCs-VEGF组移植细胞的VEGF基因表达情况；12周时，采用免疫荧光染色法追踪NSCs-VEGF组移植细胞向神经元方向分化情况，并同时行各组移植区周围血管内皮细胞半定量计数。结果 移植后2～12周，NSCs-VEG组的NSS评分均低于其它3组，第12周时的NSS评分与其它3组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；移植后7d，NSCs-VEGF组的移植细胞从移植点向周围迁徙，部分表达VEGF基因；移植后12周，NSCs-VEGF组部分移植细胞分化成神经元，其移植区血管内皮细胞数显著高于其它3组（P〈0．05）。结论 转染VEGF基因的神经干细胞移植对脑缺血所致的损伤具有一定的修复作用。     

拉科酰胺对神经病理性痛大鼠背根神经节Nav1.8表达的影响

目的 探讨拉科酰胺对神经病理性痛大鼠背根神经节(DRG)Nav1.8表达的影响.方法 SPF级雌性SD大鼠36只,体重120～130 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=12):假手术组(S组)、模型组(M组)、拉科酰胺组(L组).M组和L组将钢棒插入椎间孔压迫L5DRG制备神经病理性痛模型.于术前2 d、术后2,4、6、7、8、9、10 d(T0-7)时测定机械痛阈.于T4时,S组和L组腹腔注射拉科酰胺20 mg/kg(生理盐水溶解至0.5 ml),M组注射生理盐水0.5 ml,2次/d,连续4 d.每天末次给药后测定痛阈.于T7时痛阈测定后取术侧L5DRG,采用RT-PCR法和免疫组织化学法测定Nav1.8mRNA和蛋白表达水平.结果 与S组比较,M组和L组T1～7时机械痛阚降低,Nav1.8 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05);与M组比较,L组T4～7时机械痛阈升高,Nav1.8 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05).结论 拉科酰胺减轻大鼠慢性神经病理性痛的机制与下调损伤DRG的Nav1.8表达有关.     

鞘内注射KN93对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响

目的 观察鞘内注射钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)抑制剂KN93对腰背根神经节慢性压迫(chronic compression of dorsal root ganglion,CCD)大鼠神经病理性疼痛的影响. 方法 SD雄性大鼠48只,按随机数字表法分为3组:假手术组(S组,11只)、CCD模型组(C组,11只)、KN93组(K组,26只).C组、K组制备CCD模型,S组仅暴露L5-6椎间隙.术后14dS组和C组鞘内注射10％溶媒二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)25μl,K组鞘内注射溶于10％DMSO的KN93 50 μg/25μl.各组在造模前1 d(t1),造模后4(t2)、7(t3)、10(t4)、14 d(t5)随机取8只大鼠检测热缩足反射潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)和机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);并于鞘内注射DMSO或KN93后2(t6)、4(t7)、10(t8)、12(t9)、24 h(t10)时进行相同的行为学检测.各组于给药前以及K组的给药后各时间点(t6～t9)随机取3只大鼠处死并取脊髓腰膨大部分,采用Western blot方法检测CaMKⅡ蛋白表达水平.结果 鞘内给药后t6～t9时点,K组PWTL [(14.7±1.6)、(18.6±1.8)、(21.2±2.5)、(15.3±2.0)s],PWMT [(12.0±1.0)、(15.4±1.4)、(17.5±1.7)、(14.9±1.6)g]比C组PWTL[(11.6±1.8)、(10.7±1.7)、(11.7±2.4)、(9.9±1.7)s],PWMT[(8.4±0.9)、(9.6±1.6)、(10.6±1.7)、(8.9±1.3)g]升高,差异有统计学意义(P＜0.05).给药前及给药后t10时,K组PWTL、PWMT与C组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).和t5时CaMKⅡ值(1.55±0.12)比较,给药后t6～t9时间点CaMKⅡ蛋白[(1.37±0.11),(1.15±0.12)、(0.75±0.08)、(0.86±0.12)]表达下降(P＜0.05). 结论 鞘内注射KN93可有效缓解神经病理性疼痛大鼠的疼痛反应.     

移植于脑创伤大鼠脑内的神经干细胞的存活与分化

目的探讨大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)移植至脑损伤大鼠脑内的生存状态和分化情况。方法采取打击方法制备大鼠脑损伤模型,以立体定向技术将用增强绿色荧光蛋白(EGFP)标记的胚胎NSCs移植到损伤皮层和海马区。术后3～28 d,应用荧光标记示踪技术观察移植NSCs的存活情况,通过免疫组织化学及荧光技术检测移植细胞的分化情况。结果未移植NSCs的对照组显微镜下可见创伤区组织中含大量吞噬颗粒,细胞变性坏死,出现大量的无定形空泡,组织水肿,结构疏松,有细胞坏死溶解后形成的空泡,创腔内大量炎症细胞聚集,出现组织缺损,海马区锥体细胞减少,损伤后期水肿消失,出血灶吸收,缺损区域部分被纤维组织填充。移植NSCs的实验组,术后3 d即可观察到明显的EGFP阳性细胞,并随时间的推移而增多,细胞形态规则,填充于组织缺损区域,沿着创伤表面和移植针道分布,阳性细胞与周围组织界限逐渐变模糊,至14、28 d后,阳性细胞与周围组织无明显界限;免疫组化染色提示移植的NSCs在受者脑内可分化为神经元。结论胚胎NSCs移植后可在受者大脑中存活,并能分化为神经元。