Genistein对唾液腺腺样囊性癌细胞株SACC-83的体外抗增殖作用

目的:研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein(4',5,7-三羟基异黄酮)对人唾液腺腺样囊性癌细胞株SACC-83的体外抗增殖作用及其对细胞增殖周期的影响。方法:用Genistein处理体外培养的SACC-83细胞,采用MTT检测法计算细胞存活率,显微照相记录细胞生长状态及形态学的改变,流式细胞仪测定细胞周期,AnnexinⅤ/PI法定量检测细胞凋亡,采用SPSS11.5统计软件对结果进行统计方差分析。结果:Genistein对SACC-83细胞有一定的抗增殖作用,且当其作用到一定时间、达到一定的浓度后,该作用与浓度及时间呈依赖关系;细胞形态发生改变,体积缩小,悬浮细胞逐渐增多;SACC-83细胞经220μmol/LGenistein作用3d,其生长受到明显抑制,阻断细胞生长于G2/M期,并明显诱导细胞凋亡(P<0.01)。结论:Genistein可以显著抑制人唾液腺腺样囊性癌细胞株SACC-83的生长,阻断细胞周期于G2/M期,并诱导细胞凋亡;提示酪氨酸蛋白激酶在唾液腺腺样囊性癌的发生、发展中起着重要作用。     

姜黄素对涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83增殖和凋亡的影响

目的体外研究姜黄素对涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83增殖和凋亡的影响。方法用终浓度为2.5、5、10、15、20mg/L的姜黄素处理SACC-83。应用MTT比色试验,倒置显微镜,Giemsa染色,Annexin-V-FITC和PI双标记活细胞后流式细胞仪和透射电镜检测和观察SACC-83的生长抑制率和细胞凋亡情况。结果姜黄素对SACC-83的生长抑制率与药物浓度和作用时间具有明显的正相关性（P〈0.01）。用药组细胞明显凋亡,凋亡率随处理时间延长和药物浓度增加而上升,各组间有显著差异（P〈0.01）。结论姜黄素具有抑制涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83增殖和诱导其凋亡的作用,且具有浓度和时间依赖性。     

NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83生长抑制作用的研究

目的 探讨NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83体外生长的抑制作用.方法 应用电穿孔转染方法将NCAMcDNA转入人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83中,经G418筛选2～3周,用兔抗人NCAM抗体进行免疫组化染色鉴定,然后绘制细胞生长曲线,进行软琼脂培养.结果 应用电穿孔方法可成功将NCAM基因转染入人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83中,免疫组化染色鉴定显示转染NCAM的SACC-83细胞有NCAM蛋白的表达.与对照组相比,经NCAM基因转染后的SACC-83细胞增殖明显受到抑制.转染了NCAM基因的SACC-83细胞克隆形成率明显降低.结论 NCAM基因对人涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83的生长有一定的抑制作用.     

Genistein对腺样囊性癌细胞SACC-83中细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的：研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein诱导人唾液腺腺样囊性癌细胞株SACC-83细胞凋亡的分子机制。方法：用Genistein处理体外培养的SACC-83细胞,采用Western印迹技术检测bax、bcl-2和survivin蛋白的表达,并利用电泳凝胶成像分析软件,对其结果进行量化分析,采用SPSS11.5软件包对结果进行方差分析。结果：随着Genistein作用时间的延长和浓度的增加,bax蛋白的表达明显增加,bcl-2和survivin蛋白的表达明显减少。SACC-83细胞经220μmol/LGenistein作用3d,其bax蛋白的表达量是对照组的3.43倍（P〈0.01）,而bcl-2和survivin蛋白的表达量分别是对照组的85%（P〈0.05）和35%（P〈0.01）。结论：Genistein诱导SACC-83细胞凋亡,与其上调bax蛋白的表达,以及下调bcl-2和survivin蛋白的表达有关。     

YAP2蛋白在涎腺腺样囊性癌组织及细胞中的表达

目的:观察YAP2蛋白在涎腺腺样囊性癌组织及细胞中的表达。方法:通过免疫组织化学法检测YAP2蛋白在涎腺腺样囊性癌组织及细胞中的表达,用Western印迹法检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)对涎腺腺样囊性癌(salivary gland adenoid cystic carcinoma,SACC)SACC-83细胞YAP2蛋白的抑制。结果 :SACC组织中YAP2蛋白在肿瘤细胞胞质中阳性表达,正常腺体中YAP2蛋白主要表达在部分导管上皮中,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学染色结果显示SACC-83中YAP2蛋白阳性表达,加入EGFR蛋白后,SACC-83中YAP2蛋白表达有所降低。Western印迹法结果显示,不同质量浓度的EGFR蛋白(5、10、20、40μg/L)对SACC-83细胞YAP2蛋白的表达都有一定抑制作用,其中40μg/L质量浓度组抑制作用最明显。结论:YAP2蛋白在涎腺腺样囊性癌组织及细胞中高表达,EGFR蛋白对YAP2蛋白在SACC-83中表达有抑制作用。     

Genistein对腺样囊性癌细胞SACC-83中细胞周期蛋白表达的影响

目的:研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein诱导人唾液腺腺样囊性癌细胞株SACC-83细胞周期阻滞的分子机制。方法:用Genistein处理体外培养的SACC-83细胞,采用Western印迹技术检测CyclinB1、Cdk1和CyclinD1、Cdk4蛋白的表达,并利用电泳凝胶成像分析软件,对其结果进行量化分析,采用SPSS11.5统计软件对结果进行方差分析。结果:随着Genistein作用时间的延长和浓度的增加,CyclinB1、Cdk1和CyclinD1、Cdk4蛋白的表达明显减少。SACC-83细胞经220μmol/LGenistein作用3d,其CyclinB1、Cdk1和CyclinD1、Cdk4蛋白的表达量分别是对照组的58%、64%和46%、43%,差异非常显著(P<0.01)。结论:Genistein诱导SACC-83细胞周期阻滞于G2/M期,与其下调CyclinB1、Cdk1和CyclinD1、Cdk4蛋白的表达有关。     

涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞C-erbB2、PTEN基因表达的研究

目的 检测涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞中C-erbB2基因和PTEN基因的表达,并探讨其相关性。方法 培养SACC-83细胞,采用RT-PCR、免疫组化技术分别检测C-erbB2基因和PTEN基因的mRNA、蛋白产物在涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞和正常腺体细胞中的表达情况。结果 C-erbB2基因mRNA及蛋白水平在SACC-83细胞中的表达明显高于正常腺体细胞,差异有显著性;PTEN基因在SACC-83细胞及正常腺体细胞中的表达无明显差异。结论 C-erbB2基因在涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞中过表达,可能与涎腺腺样囊性癌的发生有关。     

涎腺疾病

20051965 紫杉醇及β榄香烯对人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83细胞毒作用的研究；20051966 涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的诱导与P53基因的修复；20051967 腮腺癌术后放疗的评价；20051968 涎腺腺样囊性癌中p53、PCNA评分和Bcl-2表达与病理分型和复发的关系；20051969 自体下颌下腺移植治疗重症干眼症的供体制备；20051970KAT性腮腺炎8例报告……     

紫杉醇及β-榄香烯对人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83细胞毒作用的研究

目的研究紫杉醇及β-榄香烯联合应用对体外培养人涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83的细胞毒作用。方法应用药物敏感性MTT测定法、流式细胞术(FCM)和透射电子显微镜观察等方法，初步探讨紫杉醇与β-榄香烯(浓度比1：1)联合应用诱导SACC-83细胞凋亡及其与G期阻滞关系。结果①应用MTT比色法，紫杉醇与β-榄香烯联合(浓度比1：1)作用SACC-83细胞24小时后，其抑制率呈现出明显协同效应，并具有浓度依赖性。②流式细胞仪分析，25ug／ml紫杉醇与25ug／m β-榄香烯协同作用SACC-83细胞24小时后诱导SACC-83细胞发生凋亡，并将细胞周期阻滞在G1期。③电镜观察，协同用药对SACC-83细胞作用24小时后，染色质沿皱缩的核膜下凝聚，具有典型的凋亡细胞特征。结论紫杉醇与β-榄香烯(浓度比1：1)对SACC-83细胞的抑制有协同作用，并诱导其产生凋亡，G1期阻滞能诱导SACC-83细胞凋亡。     

涎腺疾病

Genistein对唾液腺腺样囊性癌细胞株SACC-83的体外抗增殖作用；HSV-tk与p53基因对涎腺多形性腺瘤细胞的杀伤作用；腮腺良性肿瘤切除的改良术式；抑癌基因PTEN在腮腺肿瘤中的突变与缺失；基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在涎腺多形性腺瘤生物学行为中的意义；涎腺透明细胞癌10例临床病理分析；……[编者按]     

NS398��SACC-83ϸ����������ʵ���о�

目的    研究环氧合酶抑制剂NS398对唾液腺腺样囊性癌（SACC）-83细胞的抑制作用。方法    2008年6—12月于中国医科大学中心实验室,用含0、50、100、150、200 μmol／L NS398的培养液体外培养SACC-83细胞24、48、72、96 h后,应用噻唑蓝（MTT）快速比色法,检测NS398对SACC-83细胞的抑制作用;用上述实验确定的最大抑制浓度培养液培养细胞,采用倒置相差显微镜和透射电镜观察细胞形态。结果    随着作用时间延长和药物浓度增加,NS398对SACC-83细胞的抑制率逐渐增加。NS398在浓度150 μmol／L作用72h后,抑制作用最明显。倒置相差显微镜观察,随着培养时间的增加,试验组（150 μmol／L NS398）贴壁细胞数量明显减少,胞浆开始脱水产生空泡,并与胞膜融合,出现胞膜空泡化,胞核深染,胞质浓缩;透射电镜观察,试验组（150 μmol／L NS398）细胞出现凋亡现象。结论    NS398可抑制SACC-83细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性,NS398可能在唾液腺腺样囊性癌治疗中发挥重要作用。     

EGFR及C-erbB-2蛋白表达与腺样囊性癌细胞系转移力之间的关系

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)和C-erbB-2在涎腺腺样囊性癌2个细胞系中的表达,探讨其与腺样囊性癌肺转移的关系。方法:培养人涎腺腺样囊性癌SACC-83和肺高转移性腺样囊性癌SACC-LM细胞系,分别提取它们的胞质和胞膜样品并采用Western Blot技术检测EGFR和C-erbB-2在其中的表达差异,利用电泳凝胶成像分析软件对结果进行量化分析。结果:EGFR在SACC-83细胞的细胞膜中呈现高表达(P<0.01),而在SACC-LM细胞的胞质中呈现高表达(P<0.01)。SACC-83与SACC-LM细胞比较,前者胞膜中EGFR的表达明显高于后者,而胞质中的表达却明显低于后者(均为P<0.01)。C-erbB-2无论在SACC-LM细胞的胞质和胞膜中的表达都明显高于SACC-83细胞系,经灰度值分析,差异非常显著(P<0.01)。结论:EGFR基因在胞质中的高水平积累以及C-erbB-2基因的高水平表达可能在腺样囊性癌肺转移中发挥重要作用。     

嘌呤受体P2Y_2在涎腺腺样囊性癌的表达及ATP对其细胞生长的抑制

目的研究嘌呤受体P2Y2在涎腺腺样囊性癌非高转移细胞株（SACC-83）和高转移细胞株（SACC-LM）的表达,及其激动剂ATP对二者细胞生长的抑制作用。方法采用免疫细胞化学法检测P2Y2受体在SACC-83和SACC-LM细胞株中的表达;采用MTT法检测不同浓度ATP（0.1mM/L、0.2mM/L、0.4mM/L、0.8mM/L和1.6mM/L）在不同作用时间点（24h、48h和72h）对SACC-83和SACC-LM细胞生长的抑制作用。结果 SACC-83和SACC-LM细胞中P2Y2均呈阳性表达,在细胞膜的染色较胞浆深,其表达在两细胞株中无明显差异。ATP对SACC-83和SACC-LM细胞的生长均有明显的抑制作用（P〈0.05）,并且对SACC-LM细胞的抑制作用强于对SACC-83细胞的抑制作用,其抑制作用与药物浓度和作用时间呈正相关。结论不同转移能力的涎腺腺样囊性癌细胞SACC-83和SACC-LM的胞膜和胞浆中均有嘌呤受体P2Y2表达,ATP对二者细胞生长有显著抑制作用。     

M期促进因子在唾液腺腺样囊性癌中的表达

目的：研究M期促进因子（MPF）的表达与唾液腺腺样囊性癌（SACC）临床病理特点之间的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测40例SACC组织及40例正常唾液腺组织中MPF的表达。应用Westem印迹测定SACC细胞系SACC-83和SACC肺高转移细胞系SACC-LM中MPF的表达。采用SPSS11．5统计软件包,分别应用χ^2检验、配对t检验和线性相关分析进行统计学处理。结果：SACC组织中MPF的表达明显升高,与正常唾液腺组织之间存在显著差异（P〈0．05）。MPF的表达与SACC的病理类型有关（P〈0．05）。体外培养的SACC细胞系SACC-LM中MPF的表达显著高于SACC-83中MPF的表达（P〈0．05）。结论：MPF在SACC组织中呈高表达,其表达与SACC的发生密切相关,MPF的异常激活是SACC恶性增殖的原因之一,MPF与SACC的转移能力有关。