恶性肿瘤化疗后CD+4T细胞及Th1细胞、Th2细胞对免疫因子治疗的反应

目的探讨白细胞介素-2(IL-2)+力尔凡对恶性肿瘤患者CD+4T细胞及Th1细胞、Th2细胞的调控作用。方法采用抗体标记流式细胞仪检测CD+4T细胞、双抗体夹心法(ELISA)检测Th1细胞和Th2细胞。38例恶性肿瘤患者使用IL-250万U皮下注射,1次/d×5d,力尔凡10mg肌肉注射,1次/d,15～21d。测定治疗前及治疗后2周、治疗后1个月的CD+4T细胞及Th1细胞、Th2细胞,用SPSS软件包行方差分析。结果治疗后CD+4T细胞有上升趋势,治疗后Th1细胞、Th2细胞和Th1/Th2同治疗前比较差异无显著性。结论该治疗剂量对提升CD+4T细胞有作用,对调控Th1+细胞和Th2细胞无明显作用,因此二者治疗的靶点应在CD+4T细胞的其他亚群。     

卡介苗提取物对小鼠脾细胞免疫调节作用的体外实验研究

目的:分离活卡介苗(bacille calmette guérin,BCG)的有效组分,分析其组分的免疫调节活性。方法:采用酶裂解法和超声波破碎法对活BCG进行裂解,通过Sephadex G100凝胶层析对其有效组分进行分离及相对分子质量的测定,用SDS-PAGE凝胶电泳进行鉴定纯度;采用四氮唑蓝(MTT)方法检测小鼠脾细胞的增殖反应,用ELISA方法检测细胞培养上清液中细胞因子的产生。结果:BCG提取液经Sephadex G100层析和SDS-PAGE凝胶电泳分离后得到3个组分BCGE1、BCGE2和BCGE3,相对分子质量分别为42.5×103、36.3×103和28.6×103;BCGE2和BCGE3均能诱导小鼠脾细胞的增殖反应和IL-12、TNF-α等细胞因子的产生,P值分别为0.0001、0.0001和0.0027,并且有剂量效应关系;但BCGE1对小鼠脾细胞的增殖反应无促进作用,P=0.497;BCGE1、BCGE2和BCGE3对小鼠脾细胞产生IL-4无诱导作用,P值分别为0.988、0.889和0.841。结论:BCGE2和BCGE3可能是BCG免疫调节作用的有效组分,对该成分的进一步分离纯化和机制研究,可为BCG的免疫治疗奠定基础。     

化疗对晚期非小细胞肺癌外周血Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的探讨化疗对非小细胞肺癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达的影响。方法应用ELISA方法,检测患者化疗前、化疗3个周期后和化疗6个周期后Th1/Th2细胞因子的表达水平。结果晚期非小细胞肺癌患者外周血Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ表达水平低于正常组(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-6和IL-10表达水平显著高于正常组(P<0.05)。化疗3个周期后血IL-2、IFN-γ水平明显高于化疗前,差异有统计学意义(P<0.05),IL-6和IL-10水平明显低于化疗前(P<0.05)。化疗6个周期后血IL-2、IFN-γ表达水平明显低于化疗3个周期,差异有统计学意义(P<0.05),而化疗6个周期后血IL-6和IL-10水平稍低于化疗3个周期,差异无统计学意义(P>0.05)。结论晚期非小细胞肺癌患者存在免疫相关因子紊乱,3个周期的化疗对改善机体的免疫平衡有效;6个周期的化疗未能进一步改善机体免疫功能,甚至出现免疫功能恶化。     

食管癌及其区域淋巴结组织树突状突细胞与Th1/Th2细胞因子表达的研究

目的:检测食管癌组织及其区域淋巴结中树突状淋细胞(DC)及Th1/Th2细胞因子的表达,探讨食管癌发生及与免疫逃逸的关系.方法:采用流式细胞术检测57例食管癌组织、癌旁组织,16例食管炎性组织,62枚区域淋巴结中DC CD1a、CD83及共刺激因子CD80、CD86的表达,ELISA法检测组织匀浆中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ,Th2型细胞因子IL-4、IL-10的水平.结果:57例食管癌组织中CD1A、CD83、CD80及CD86的表达分别为7.34±1.59、2.87±0.55、5.75±1.06和27.34±7.21,显著低于炎性、正常和癌旁组织;癌组织中IL-2、IFN-γ表达水平分别为8.94±1.72、9.34±2.16,低于炎性、正常和癌旁组织;IL-4、IL-10的水平分别为5.24±0.35、5.3±1.02,高于炎性、正常和癌旁组织(P<0.05,P<0.01).区域淋巴结组织中CD1A、CD83、CD80及CD86的表达在有转移癌者明显低于无转移癌者;IL-2、IFN-γ表达水平降低;IL-4、IL-10的水平增高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论:食管肿瘤组织和区域淋巴结内DC的减少及Th1/Th2失调,可能是食管肿瘤发生免疫逃逸的原因.     

CIN宫颈组织中Treg细胞和Th1/Th2细胞因子的表达及意义

目的探讨宫颈上皮内瘤变（CIN）宫颈组织中Treg细胞和Th1/Th2细胞因子的表达及其临床意义。方法对189例妇女行HPV检测、宫颈TCT检查及宫颈活检后行CIN病变分级,应用Q-PCR、流式细胞术,检测各组患者宫颈组织中IL-2、IL-4、IFN-γ、IL-10、IL-12的含量和Treg细胞表达。结果 81例良性病变、60例CINⅠ、27例CINⅡ和21例CINⅢ患者中高危型HPV感染例数分别为17（21%）、25（42%）、24（89%）和20（95%）例。良性病变、CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ宫颈组织中,Treg细胞占CD4＋T细胞的比例随病变程度增加而增加、IL-10表达水平逐渐上升、IFN-γ表达水平逐渐下降（P〈0.05）,IL-2、IL-12及IL-4的表达水平在4组患者中无明显差别。结论 CIN患者宫颈黏膜中Th1/Th2平衡向Th2方向漂移,Treg细胞表达增强,下调机体抗HPV感染和抗肿瘤免疫反应,促进CIN病变的进行性发展。     

流式细胞术下ARH对比LRH对早期宫颈癌患者外周血及腹腔液中Th1/Th2细胞因子的影响

目的 探讨腹腔镜宫颈癌根治术(laparoscopic radical hysterectomy,LRH)以及开腹宫颈癌根治术(abdominal radical hysterectomy,ARH)对早期宫颈癌患者机体的局部以及免疫系统的影响.方法 选取早期(Ⅰa2～Ⅱa1)宫颈癌患者210例,分LRH组(行腔镜手术)118例,ARH组(行腹式手术)92例.分别在术前1天、术后1天、术后3天抽取观察组和对照组患者肘部静脉血10 ml,在术中(在开腹后或者腹腔镜进入腹部后立刻抽取腹腔冲洗液)、术后1天、术后3天抽取患者腹腔液5 ml,利用流式细胞术检测腹腔液中和外周血TH1/TH2细胞因子,比较LRH组和ARH组术前术后免疫状态的变化.结果 术后第1天ARH组TNF-α水平上升,然而LRH组变化不明显;术后第3天ARH组表达水平继续上升,LRH组变化不大,两组间差异具有统计学意义(P<0.05).术后1天2组的TH1/TH2比值均下降,与术前1天相比相对降低,组间差异具有统计学意义(P<0.05);术后1月,2组患者TH1/TH2比值恢复术前水平.ARH组术后1天至术后3天IL-6水平比术中升高(P<0.05),而LRH组升高程度较小(P<0.05).结论 腔镜下宫颈癌根治术与开腹宫颈癌根治术相比对于全身的免疫系统干扰更小,并且创伤更小,恢复更迅速,可以广泛应用于宫颈癌的临床治疗.     

食管癌患者外周血γδT细胞对Th1/Th2细胞因子的影响

目的 探讨食管癌患者外周血γδT细胞水平及对Th／Th2细胞因子的影响。方法 用流式细胞仪测定46例食管癌患者、28例本院健康职工外周血γδT细胞在淋巴细胞中的百分率和血浆中Th1／Th2细胞因子的含量。结果 两组比较γδT细胞有显著性意义，Th类因子有显著性意义，Th2类细胞因子无显著性意义。结论 食管癌患者γδT细胞水平显著低于常人群，γδT细胞可以通过分泌细胞因子调节和维护机体Th1／Th2的免疫平衡。     

OK-432对荷瘤小鼠脾细胞IL-12及Th1细胞因子分泌的诱导作用

目的：探讨溶血链球菌冻干制剂OK－432的抗肿瘤机理。方法：B16黑色素瘤细胞接种于C57BL／6小鼠皮下,3d后腹腔注射1KU的OK－432,每周1次,连续3周。观察肿瘤生长体积及荷瘤小鼠的生存期,并测定了OK－432在体内、体外对荷瘤脾细胞IL－2、IL－4,IL－6,IL－10,IL－12,IFN-γ分泌的结果。结果：OK－432能显著抑制B16黑色素瘤的生长,延长荷瘤小鼠的生存期（P＜0．05）;在体外OK－432可刺激荷瘤小鼠脾细胞IL－6,IL－10,IL－12,IFN-γ的分泌（P＜0．01）;腹腔注射OK－432后荷瘤小鼠脾细胞IL－2,IL－12,IFN-γ的分泌显著增加,而IL－10显著减少（P＜0．05）。提示OK－432治疗后荷瘤小鼠脾细胞Th1增加,Th2相对减少。结论：OK－432在体内可通过诱导荷瘤小鼠脾细胞IL－12的分泌,促进Th0向Th1分化,使宿主的免疫功能处于Th1优势状态,从而增强宿主的抗肿瘤作用。     

半枝莲多糖对C26荷瘤小鼠血清Th1/Th2亚群细胞因子的影响

目的观察半枝莲多糖(scutellaria barbata polysaccharides,SPS)对C26荷瘤小鼠血清Th1/Th2亚群细胞因子的影响。方法建立C26结肠癌小鼠移植瘤模型,SPS作用10天后,通过眼眶静脉采血,分离血清,ELISA法测定Th1亚群细胞因子IFN-γ、IL-2和Th2亚群细胞因子IL-4、IL-10的含量。结果 SPS 100 mg·kg~(-1)·d~(-1)、200mg·kg~(-1)·d~(-1)剂量组治疗组与模型组比较,IL-4和IL-10水平明显下降,IFN-γ和IL-2水平明显上升,差异有统计学意义。结论 SPS可以调节荷瘤小鼠Th1/Th2平衡。     

肺癌患者Th1/Th2细胞的变化

[目的]观察肺癌患者血浆及外周血单个核细胞(PBMC)诱生IL 2、IL 4水平 ,进而反映患者Th1和Th2细胞功能。[方法]运用细胞因子诱生及ELISA技术 ,测定48例肺癌术前患者和24例术后患者血清及外周血单个核细胞诱生的IL 2、IL 4水平。以IL 2水平反映Th1细胞功能 ,以IL 4水平代表Th2细胞功能。[结果]肺癌患者血清及PBMC诱生产生IL 2水平减低 ,而IL 4水平升高。PBMC诱生及血清IL 2、IL 4水平在不同分期、不同病理类型肺癌病人间比较无差别 ,行肺癌根治术后的患者血清及PBMC诱生IL 2水平高于未手术肺癌患者水平。[结论]肺癌患者体内Th1/Th2细胞亚群功能失调 ,这可能是肺癌组织在患者体内进行性生长及免疫逃避的机制之一 ;肺癌患者Th1/Th2亚群失调在肺癌不同分期、不同病理类型患者间无差别 ,而手术可改善肺癌病人Th1/Th2亚群功能失调状态。     

柞蚕雄蛾提取液逆转大鼠放射性免疫抑制的作用机制研究

目的探讨柞蚕雄蛾提取液对放疗引起的免疫抑制的调节作用及其机制。方法50只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、单纯照射组和柞蚕雄蛾提取液大、中、小剂量治疗组,于治疗后第14天观察各组胸腺、脾脏指数变化,流式细胞术检测大鼠外周血细胞中淋巴细胞亚型改变,免疫组化检测大鼠脾脏中Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4、IL-10表达变化。结果单纯照射组与对照组相比,胸腺、脾脏指数下降,外周血细胞中CD3~ 、CD4~ 淋巴细胞明显减少,脾脏中IL-4、IL-10表达增加,差异有极显著意义(P＜0．01),IL-2、IFN-γ表达元明显改变。大剂量治疗组与单纯照射组相比胸腺、脾脏指数增加,外周血细胞中CD3~ 、CD4~ 淋巴细胞升高,差异有极显著意义(P＜0．01),脾脏中IL-2、IFN-γ表达增加,IL-4、IL-10表达下降(P＜0．01)。结论柞蚕雄蛾提取液可以有效降低放疗引起的免疫抑制,促进T细胞增殖,诱导Th1类细胞因子的表达,促进Th2类细胞因子向Th1类细胞因子漂移。     

柞蚕雄蛾提取液逆转大鼠放射性免疫抑制的作用机制研究

目的探讨柞蚕雄蛾提取液对放疗引起的免疫抑制的调节作用及其机制。方法50只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、单纯照射组和柞蚕雄蛾提取液大、中、小剂量治疗组,于治疗后第14天观察各组胸腺、脾脏指数变化,流式细胞术检测大鼠外周血细胞中淋巴细胞亚型改变,免疫组化检测大鼠脾脏中Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4、IL-10表达变化。结果单纯照射组与对照组相比,胸腺、脾脏指数下降,外周血细胞中CD3~ 、CD4~ 淋巴细胞明显减少,脾脏中IL-4、IL-10表达增加,差异有极显著意义(P＜0．01),IL-2、IFN-γ表达元明显改变。大剂量治疗组与单纯照射组相比胸腺、脾脏指数增加,外周血细胞中CD3~ 、CD4~ 淋巴细胞升高,差异有极显著意义(P＜0．01),脾脏中IL-2、IFN-γ表达增加,IL-4、IL-10表达下降(P＜0．01)。结论柞蚕雄蛾提取液可以有效降低放疗引起的免疫抑制,促进T细胞增殖,诱导Th1类细胞因子的表达,促进Th2类细胞因子向Th1类细胞因子漂移。     

柞蚕雄蛾浓缩液影响小鼠免疫功能的实验研究

目的 :研究柞蚕雄蛾浓缩液对小鼠细胞免疫 ,体液免疫及小鼠单核吞噬系统功能的影响。方法 :每项实验均40只小鼠随机分为生理盐水组和高、中、低 3个剂量的柞蚕雄蛾浓缩液给药组 ,经口灌胃给药连续 15d。分别测定计算代表细胞免疫的足垫肿胀反应值FSR(mm) ,代表体液免疫反应的半数溶血值 (HC50 )值 ,反映小鼠单核吞噬系统对异物胶体炭粒清除功能的吞噬指数K及校正吞噬指数α。结果 :2 4h及 48h足垫肿胀反应值在给药各组均较对照组增高 ,经方差分析差异有统计学意义 ( 2 4hP <0 0 1,48hP <0 0 0 1) ;HC50 值 ,高剂量组与对照组相比有统计学意义 ,P <0 0 1,且高剂量组分别与低剂量组和中剂量组相比有统计学意义 ,P <0 0 1;吞噬指数K及校正吞噬指数α虽有一定增高趋势 ,但经方差分析各组之间差异无统计学意义 ,P >0 0 5。结论 :柞蚕雄蛾浓缩液可显著增强小鼠细胞免疫功能 ,对小鼠体液免疫反应有一定增强作用 ,对小鼠单核吞噬系统功能无显著影响     

Enhanced CD3+/CD4+ T cell activities and modulation of Th1/Th2 lineage development in irradiated rats due to treatment with the male zooid of antheraea pernyi extracts

Objective  Cancer patients undergoing large dose radiotherapy exhibit multifaceted defects in their immune capacity that are likely to contribute to an increased susceptibility to infections and disease progression. The immune impairment may also constitute a barrier to effective immunotherapeutic interventions. Here, we evaluate whether supplementation with the male zooid of Antheraea pernyi extracts could enhance immune function in irradiated rats. Methods  Fifty male Wistar rats were randomly divided into a control group, a simple radiation group and a treatment group. The mice in the simple irradiation and treatment groups were given whole-chest irradiation with 6Gy. In the treatment group, the male zooid of Antheraea pernyi extracts was gavaged at the doses of 16.53mg/kg (large dose group), 2.62mg/kg (medium dose group), and 0.564mg/kg (small dose group) once a day for 14 days. The thymus and spleen indices were calculated. T cell subsets in peripheral blood were determined by flow cytometry and the expressions of IL-2, IFN-γ, IL-4 and IL-10 in sera were determined by ELISA on the 15th day. Results  The thymus index and spleen index of the high dose treatment group were statistically lower than that of the control group and higher than that of the radiation group (P<0.01). CD3+ and CD4+ T cells in the peripheral blood were increased in the high dose treatment group and decreased in the radiation group (P<0.01). Expression of IL-2 and INF-γ in the radiation group was lower than that in control, and significantly increased during therapy. The production of IL-4 and IL-10 could be induced by radiation and was inhibited in the high dose treatment group (P<0.01). Conclusion  Our data indicate that the male zooid of Antheraea pernyi extracts may be administrated to improve immune function in irradiated rats and reverse the radial immune inhibition of rats by stimulating the proliferation of Th cells and inducing the differentiation of Th2 to Th1. This work was supported by the grants from the National Natural Science foundation of China (No. 30472260), the Administration of Traditional Chinese Medicine of Shandong Province, China(No. 2005-109),, and the Health Protection Committee of Shandong Province, China(No. 2006059).     

食管鳞癌患者Th1/Th2漂移与临床病理因素之间关系的研究

目的：探讨食管鳞癌患者Th1/Th2转录因子和细胞因子的表达与临床病理因素之间的关系,为肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法：实时荧光定量PCR（RQ-PCR）检测食管癌患者及正常组外周血单个核细胞（PBMC）中转录因子T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的表达。结果：与正常对照比较,食管鳞癌患者PBMC中Th1型转录因子T-bet和血浆中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平显著降低（P〈0.01）;Th2型转录因子GATA-3和细胞因子IL-4、IL-10的表达水平显著升高（P〈0.01）,并且Th1/Th2漂移程度与肿瘤的CT分期和病灶长度相关（P〈0.05）,而与病变的部位、病理分型及分化程度无明显相关性（P〉0.05）。结论：食管鳞癌患者体内存在Th1/Th2漂移,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一。     

食管鳞癌患者Th1/Th2漂移与临床病理因素之间关系的研究

目的:探讨食管鳞癌患者Th1/Th2转录因子和细胞因子的表达与临床病理因素之间的关系,为肿瘤免疫治疗提供实验依据.方法: 实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测食管癌患者及正常组外周血单个核细胞(PBMC)中转录因子T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的表达.结果: 与正常对照比较,食管鳞癌患者PBMC中Th1型转录因子T-bet和血浆中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平显著降低(P<0.01);Th2型转录因子GATA-3和细胞因子IL-4、IL-10的表达水平显著升高(P<0.01),并且Th1/Th2漂移程度与肿瘤的CT分期和病灶长度相关(P<0.05),而与病变的部位、病理分型及分化程度无明显相关性(P>0.05).结论: 食管鳞癌患者体内存在Th1/Th2漂移,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一.     

Caveolin-1对内皮细胞增殖的抑制作用研究

目的：研究Caveolin-1蛋白在内皮细胞增殖中的作用,其与Ras-p42/44MAPK细胞信号通路的关系.方法：以腺病毒介导在内皮细胞中表达外源Caveolin-1蛋白,分析其对内皮细胞增殖和p42/44MAPK分子磷酸化水平的影响.结果：感染腺病毒表达外源Caveolin-1蛋白的内皮细胞中,血管内皮生长因子（VEGF）诱导的3H-胸腺嘧啶掺入量降低了35%（n=3,P=0.009）,p42/44MAPK分子磷酸化水平降低了47.6%.结论：Caveolin-1蛋白抑制p42/44MAPK分子磷酸化水平,抑制内皮细胞增殖.     

Th1/Th2偏移与肿瘤免疫研究进展

Th1/Th2平衡是维持机体正常免疫状态的重要因素,其失衡参与许多疾病。近年来关于Th1/Th2漂移与恶性肿瘤的关系已成为研究的重点。设法逆转Th1/Th2漂移方向,增强Th1免疫,将成为肿瘤免疫治疗的新方法。