SELDI技术筛选肺癌患者血清标志蛋白的临床价值

目的探讨表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术筛选肺癌患者血清标志蛋白的临床价值。方法用SELDI-TOF-MS技术、弱阳离子交换蛋白芯片,检测肺癌和肺良性病变患者的血清蛋白质质谱图;用Biomarker Pattern软件分析肺癌差异蛋白并初建其诊断模型,通过盲筛验证诊断模型。结果发现有统计学差异的蛋白峰20个,其中肺癌患者血清高表达蛋白质波峰14个,低表达蛋白质波峰6个;用质荷比2 090.77、2 503.31 Da的差异蛋白峰建立分类树模型,其诊断肺癌的灵敏度88%,特异度95%;盲筛验证灵敏度90%,特异度100%,粗符合率93.33%,Youden指数0.9。结论SELDI-TOF-MS技术筛选的肺癌血清差异性蛋白及分类树模型,诊断肺癌的灵敏度高、特异性好。     

表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术对周围型肺癌差异蛋白表达的研究

目的 筛选周围型肺癌患者血清、肺组织活检前后BALF中的差异蛋白,探讨其表达特点、影响因素及其临床意义.方法 选择2008年3月至2009年11月周围型肺癌及肺部良性病变患者各20例,应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分别检测患者血清、活检前后BALF中的蛋白质质谱并初步建立分类树诊断模型.结果 (1)两组患者血清中检出6个差异蛋白峰,以质荷比为6637的差异蛋白建模诊断周围型肺癌的敏感度为70%(14/20),特异度为90%(18/20),正确率为80%(32/40),阳性预测值为88%(14/16),阴性预测值为75%(18/24),受试者工作曲线(ROC曲线)下而积(AUC)为0.73;(2)两组活检前BALF中检出11个差异蛋白峰,以质荷比为7982的差异蛋白建模诊断周围型肺癌的敏感度为85%(17/20),特异度为90%(18/20),正确率为88%(35/40),阳性预测值为89%(17/19),阴性预测值为86%(18/21),AUC为0.94;(3)两组活检后BALF中检出14个差异蛋白峰,以质荷比为7671的差异蛋白建模诊断周围型肺癌的敏感度为85%(17/20),特异度为100%(20/20),正确率为93%(37/40),阳性预测值为100%(17/17),阴性预测值为87%(20/23),AUC为0.93.结论 周围型肺癌活检前后BALF中检出的差异蛋白较血清中多,活检后BALF中的差异蛋白较活检前多.活检前质荷比为7982的差异蛋白与活检后质荷比为7671的差异蛋白在周围型肺癌患者BALF中的AUC值均＞0.9,高于血清;这2种差异蛋白可作为较好的早期诊断周围型肺癌的标志蛋白.

Abstract：

Objective To scan the protein mass spectra in the sera and bronchoalvolar lavage fluid (BALF) from patients with peripheral lung cancer, screen out the differential proteins, and explore the clinical significance of the differential proteins. Methods SELDI-TOF-MS was used to detect the protein mass spectra and to screen out the differential proteins in the sera and BALF collected before and after lung biopsy in 20 patients with peripheral lung cancer and 20 patients with benign pulmonary diseases. The differential proteins were analyzed and the initial diagnostic models were set up. Results ( 1 ) There were 6 differential protein peaks in the sera of the 2 groups ( P ＜0. 05 ＝. The protein with a mass/charge ratio ( M/Z) of 6637 was selected to establish the diagnostic model. The sensitivity of diagnosing peripheral lung cancer was 70% (14/20) ,the specificity 90% ( 18/20), the accuracy 80% (32/40), the positive predictive value ( PV + ) 88% ( 14/16), the negative predictive value( PV - ) 75% ( 18/24), and the area under the ROC curve (AUC)was 0.73. (2) There were 11 differential protein peaks in the BALF collected before lung cancer biopsy of the 2 groups ( P ＜ 0. 05 ＝. The protein with a M/Z of 7982 was selected to establish the diagnostic model. The sensitivity of diagnosing peripheral lung cancer was 85% ( 17/20 ), the specificity 90% ( 18/20), the accuracy 88% (35/40), the PV + 89% ( 17/19), the PV - 86% ( 18/21 ), and the AUC was 0. 94. (3) There were 14 differential protein peaks in the BALF collected after lung cancer biopsy of the 2 groups ( P ＜0. 05 ＝. The protein with a M/Z of 7671 was selected to establish the diagnostic model.The sensitivity of diagnosing peripheral lung cancer was 85% (17/20) ,the specificity 100% (20/20), the accuracy 93% (37/40), the PV + 100% (17/17), the PV- 87% (20/23), and the AUC was 0. 93. Conclusions There were more differential proteins in BALF as compared with sera. There were more differential proteins in the BALF collected after lung biopsy as compared to that before lung biopsy. The AUC of the diagnostic models set up by proteins in BALF collected before and after lung biopsy were all above 0. 9 and showed higher efficiency for the diagnosis of peripheral lung cancer as compared to proteins in sera.These differential proteins may be better tumor markers for the diagnosis of peripheral lung cancer at the early stage.     

鳞癌与腺癌患者血清差异蛋白质组分析

目的为鉴定鳞癌与腺癌的血清标志物和病理分型提供依据。方法采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术及其配套的金芯片（Gold Chip）对254份血清（鳞癌120份、腺癌82份,健康人52份）进行蛋白质谱指纹图分析,筛选鳞癌与腺癌的差异蛋白。结果 254份血清共筛选出83个差异表达的蛋白,其中5个差异表达最明显的蛋白质峰的质荷比（m/z）分别为2953、3285、6625、6646、9257。对5个峰强度分别进行F检验,P均〈0.05。结论鳞癌、腺癌患者血清具有明显表达差异的特征蛋白,为癌症的诊断和病理分型研究提供了新思路。     

胰腺癌血清蛋白质波谱模型的构建及诊断价值研究

目的 建立胰腺癌诊断模型,寻找与胰腺癌分期相关的蛋白峰并鉴定出新型的肿瘤标志物.方法 应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,用SAX2蛋白芯片,检测胰腺癌患者、胰腺良性疾病患者和正常对照者的血清蛋白指纹谱,统计建立决策树诊断模型和Logistic回归模型并评估诊断价值,蛋白芯片免疫法鉴定差异蛋白峰,ELISA法测定其在血清中的浓度.结果 胰腺癌组和正常对照组指纹谱比较.26个蛋白峰差异有统计学意义(P＜0.01),胰腺癌组和胰腺良性疾病组指纹谱比较,16个蛋白峰差异有统计学意义(P＜0.05).建立的决策树诊断模型对胰腺癌的敏感性为83.3%,特异性为100.0%,经ROC曲线评估,该模型优于糖链抗原(CA)19-9.有6个差异蛋白峰在不同分期咦腺癌中差异有统计学意义(P＜0.01),建立Logistic回归模型诊断早期胰腺癌.敏感性为81.6%,特异性为80.6%.鉴定出差异蛋白峰质荷比(M/Z)28068为C140H166,其诊断胰腺癌的敏感性＞82%,特异性＞88%.结论 应用SELDI-TOF-MS技术建立的诊断模型对胰腺癌的诊断有较大价值,明显优于CA19-9.鉴定出的差异蛋白C140rf166有望在胰腺癌诊断中发挥作用.     

SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断和介入治疗评价中的价值

目的:建立肝癌血清学诊断模型,探讨评估SELDI-TOF-MS技术在肝癌诊断和介入治疗评价中的价值.方法:用弱阳离子交换芯片(CM10芯片)和表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪(surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术,测定60例肝癌患者和60例正常对照者的血清蛋白质指纹图谱,应用BiomarkerWizard统计软件比较肝癌组和正常对照组血清蛋白质表达的差异性,采用Biomarker Pattern软件分析数据建立肝癌诊断模型,比较介入治疗前后血清蛋白质指纹图谱的差异性.结果:在质荷比(M/Z)为2000-10000范围内,和正常血清比较,肝癌的差异峰有3个(M/Z为4182Da、5710Da、6992Da;P<0.01),4182Da和5710Da下调,6992Da上调.用这3个差异蛋白峰建立肝癌诊断模型,诊断肝癌的灵敏度为93.3%(28/30),特异度为90.0%(27/30),正确率为91.7%(55/60),约登指数为0.833.差异蛋白峰(M/Z4182Da)在介入术后1mo明显上调(P<0.05).结论:应用SELDI-TOF-MS技术进行肝癌血清蛋白质指纹图谱分析,建立肝癌诊断树模型,对肝癌的诊断有一定的价值;筛选出的差异蛋白峰对肝癌的介入治疗评估有一定的应用价值.     

甲状腺转录因子-1，细胞角蛋白8／18，P63和HMW联合检测对肺鳞癌和肺腺癌鉴别诊断价值

目的探讨甲状腺转录因子-1（TTF-1）、细胞角蛋白8／18（CK8／18）、P63细胞角蛋白HMW（CK—HMW）联合检测在鉴别肺鳞癌和肺腺癌中的价值。方法收集2010年1月至2012年12月入住华中科技大学武汉同济医院1028例肺鳞癌和肺腺癌患者的病理组织标本及相关临床资料。采用免疫组化EnVision两步法分别检测TTF-1、CK8／18、P63及HMW在肺鳞癌和肺腺癌中的表达并对结果进行分析。结果单个免疫组化标志物中,P63对于诊断肺鳞癌和肺腺癌有较高的灵敏性和准确度,TTF-1诊断肺腺癌的敏感性为86．3％,特异度为87．7％,准确度为86．8％;CK8／18诊断肺腺癌的敏感性为100％,特异度为16．0％,准确度为68．7％;P63诊断肺鳞癌的敏感性为97．2％,特异度为79．0％,准确度为90．5％;HMW诊断肺鳞癌的敏感性为100％,特异度为25．0％,准确度为80．3％。P63和HMW共同阳性表达对于诊断肺鳞癌的特异度和准确度均大大提高,为76．9％和92．2％,而TTF-1和CK8／18共同阳性表达对肺腺癌的特异度和准确度也大大提高,为100％和96．6％。结论TTF-1、CK8／18、P63和HMW的联合检测对鉴别肺鳞癌和肺腺癌有很高的价值,P63和HMW、TTF-1和CK8／18的联合检测可以显著提高肺鳞癌和肺腺癌诊断的准确度。     

早期肝纤维化外周血清标志物筛选的初步研究

目的探讨早期病毒性乙型肝炎（乙肝）肝纤维化的潜在血清标志物并建立相应的诊断模型。方法采用表面增强激光解吸/离子化时间飞行质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测20个健康人和31例早期乙肝肝纤维化患者的血清蛋白质谱,用biomarker Wizard软件筛选出早期肝纤维化的差异表达蛋白质谱峰,用Biomarker Pattern软件对差异蛋白峰值进行线性分析并建立诊断模型。结果在分子量为2000～20000Da的区间内检测出97个峰值,15个为差异蛋白峰,其中早期肝纤维化患者有3个上调,12个下调。用质荷比为M4799和M6125的差异蛋白联合建立的诊断模型最优,其特异度为80%（16/20）,灵敏度为87%（27/31）。结论 SELDI-TOF-MS在筛选早期肝纤维化血清学标志物方面具有较高的灵敏度和特异性,作为肝纤维化早期筛选的方法尚需大宗病例证实及临床后续验证。     

表面增强激光解析电离飞行时间质谱法筛选肺癌患者血清和肺泡灌洗液中标志蛋白的研究

目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选肺癌患者血清和BALF中的差异性表达蛋白,探讨是否可作为诊断肺癌的肿瘤标志物.方法 应用SELDI-TOF-MS技术通过弱阳离子交换蛋白芯片(WCX-2芯片)分别检测35例肺癌和18例肺部良性病变患者血清和BALF中的蛋白质质谱图,用Biomarker Pattern软件分析肺癌的差异蛋白并初步建立诊断模型,通过盲筛进一步验证诊断模型.结果 在肺癌患者血清中发现5个高表达的蛋白质波峰,选用其中质荷比为5639的差异蛋白波峰建立分类树模型,其诊断的敏感度为80%(28/35),特异度为78%(14/18).盲法验证的敏感度为85%(17/20),特异度为90%(9/10),粗符合率为87%(26/30),Youden指数为0.7.在肺癌患者BALF中发现8个高表达蛋白质波峰,选用其中质荷比为7976和11 809的差异蛋白波峰建立分类树模型,其诊断的敏感度为86%(30/35),特异度为72%(13/18).盲法验证的敏感度为90%(18/20),特异度为90%(9/1O),粗符合率为90%(27/30),Youden指数为0.8.平行试验结果显示两者联合应用时诊断肺癌的敏感度、准确率及特异度均为100%,具有互补作用.结论SELDI-TOF-MS技术可筛选出肺癌患者血清和BALF中差异性表达蛋白,作为一种肿瘤标志物,其诊断敏感度高,特异度好,尤其是BALF中差异性表达蛋白的测定可能具有较好的临床应用前景.

Abstract：

Objective To detect the protein markers in serum and bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of the patients with lung cancer by surface-enhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (SELDI-TOF-MS) technology, and to explore if they can be used as markers for the diagnosis of lung cancer.Methods SELDI-TOF-MS technology and protein chips weak cation exchange (WCX-2 chip) were used to detect the protein mass spectrum in serum and BALF of 35 patients with lung cancer and 18 cases of benign pulmonary diseases.The different protein markers were analyzed by Biomarker Pattern Software and the initial diagnosis models were set up.The diagnosis models were verified further by blind screen to confirm the efficacy of diagnosis.Results Five protein peaks in the sera of the patients with lung cancer were significantly higher (P ＜ 0.05 ).The protein peak with a mass/charge ratio (M/Z)of 5639 was selected to establish the classification tree model.The sensitivity of diagnosis was 80% (28/35) and the specificity was 78% (14/18).The results verified by blind screen showed a sensitivity of 85% (17/20),a specificity of 90% (9/10), a crude accuracy (CA) of 87% ( 26/30 ) and Youden' s index (γ) of 0.7.Eight protein peaks in the BALF of the patients with lung cancer were significantly higher ( P ＜ 0.05).The different protein peaks with M/Z of 7976 and 11 809 respectively were selected to establish the classification tree model.The sensitivity of diagnosis was 86% (30/35) and the specificity was 72% (13/18).The results verified by blind screen showed a sensitivity of 90% (18/20), a specificity of 90% (9/10), a CA of 90% (27/30) and γof 0.8.There was a complementary role in combination of differential proteins in serum and BALF and the sensitivity, specificity and accuracy of diagnosis for lung cancer were 100% by parallel test.Conclusions The SELDI-TOF-MS technology can screen out the differential protein markers in serum and BALF of the patients with lung cancer, which show high sensitivity and specificity as tumor markers.The differential proteins in the BALF may be more promising for clinical application.     

蛋白芯片联合SELDI-TOF-MS在卵巢癌诊断中的应用

目的用蛋白芯片联合表面增强激光解析离子化/飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）分析卵巢癌与对照血清中的差异表达蛋白来筛选与卵巢癌早期诊断和预后相关的肿瘤标志物。方法采用联合SELDI-TOF-MS及WXC2蛋白质芯片,对21例卵巢癌患者（实验组）及24例健康妇女（对照组）血清标本进行检测。结果在相对分子质量0~50 000 Da范围内,检测出69个差异蛋白峰。卵巢癌差异表达明显（P〈0.01）的蛋白峰8个,其中高表达的波峰3个,质荷比分别为5 927.6,8 719.3和11 729.8 Da,低表达的波峰5个,质荷比分别为4 073.8,4 158.4,4 186.7,4 290.2和8 162.5 Da。其中11 729.8 Da蛋白峰已经鉴定为血清淀粉样蛋白A1（SAA1）。结论SELDI-TOF-MS联合蛋白质芯片能够直接检测出卵巢癌患者血清中相对特异的蛋白峰,对于卵巢癌的诊断具有一定的临床意义。     

SELDI-TOF-MS联合蛋白质组学实验数据库对结直肠癌血清标志物的鉴定

目的:探讨表面增强激光解析离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)联合蛋白质组学实验数据库方法研究结直肠癌患者血清标志物的可行性.方法:应用SELDI-TOF-MS对169例结直肠癌患者与83例正常人血清进行了蛋白质谱检测.通过Biomarker WizardTM与BiomarkerPatternsTM软件分析发现差异蛋白,建立结直肠癌诊断模型;用蛋白质组学实验数据库检索鉴定出有意义的差异蛋白,并用ELISA法对结直肠癌患者及正常人血清样本中差异蛋白表达进行验证.结果:发现34种差异蛋白,以质荷比(m/z)为2873,3163,6121,7778的4种差异蛋白组成的分类树诊断模型.在学习模式下其诊断结直肠癌的灵敏度为91.57%,特异度为90.53%:在测试模式下分别为82.25%.80.72%.其中m/z为7778的蛋白峰强度在结直肠癌患者血清中明显高于正常人(p<0.01),数据库检索结果提示该蛋白为血小板因子4(PF4).ELISA法测定结直肠癌患者血清PF4水平显著高于正常人(p<0.01),其灵敏度及特异度分别为61.1%,76.9%.结论:SELDI-TOF-MS联合蛋白质组学实验数据库的方法简便可行.可为蛋白芯片研究提供新思路;PF4(m/z=7778)在结直肠癌患者血清中明显升高,是结直肠癌患者新的血清学标志物.     

缺氧诱导因子在肺发育及肺疾病中的研究进展

缺氧诱导因子是细胞在低氧条件下产生的具有转录活性的核蛋白,调节着低氧应激下上百种基因的表达.近年来,对于缺氧诱导因子在肺内作用的研究日趋完整.该文就缺氧诱导因子的生物学特点及其在肺发育和肺疾病,包括肺动脉高压、肺癌和肺损伤中作用的研究进展作一综述.     

无心跳供体肺移植的研究进展

综述了无心跳供体(non-heart-beating-donor,NHBD)肺移植方面的研究进展,包括NHBD供肺可耐受的缺血时间、针对NHBD供肺的抗凝和溶栓的研究、不同通气模式和吸入药物的影响、供肺保存期间所采取的干预措施如尸体内原位表面冷却以及在保存液中添加各种药物的效果和作用机制等.使用NHBD供肺有望成为缓解供肺短缺的主要解决途径.     

肺超声的临床应用进展

超声在肺部的应用远不如在心脏、腹部等领域.近年来经胸壁超声检查肺和胸膜病变的临床应用逐渐增多.由于床旁X线的低敏感性和重症患者搬运到CT室的高风险,且传统的X线和CT不能实时监测疾病的发展和转归,肺超声对危重患者的床旁评估显得特别有价值.床旁肺超声是一个对传统X线和CT检查的很好补充,可以常规应用并减少甚至替代传统放射学检查.     

干细胞治疗肺部疾病的研究进展

目前,干细胞治疗包括ARDS、矽肺、肺气肿和支气管哮喘在内的肺部疾病的实验方面已经取得了良好的疗效,而测试干细胞疗法安全性和有效性的临床试验亦正在进行中.本文着重阐述了干细胞对肺部疾病损伤的修复及其在肺疾病治疗中的应用前景和存在的问题.     

缺氧诱导因子在肺疾病中作用的研究进展

缺氧诱导因子(HIF)是调节机体氧稳态的主要转录因子.在缺氧环境下,HIF调节许多目的基冈的表达,这些基因表达的蛋白产物在血管再生、能量代谢、炎症反应和细胞存活方面起了重要作用.无论是在生理还是病理生理的情况下,肺部都可能出现局部或全肺的缺氧,此外,实验和临床数据均表明HIF与诸如肺损伤、肺动脉高压、肺肿瘤等肺疾病的发病机制有关.因此,研究HIF在肺疾病中的作用有非常重大的意义.     

CT引导下经皮肺活检的临床应用

目的:评价CT引导下经皮肺活检诊断肺周围性病变的价值。方法:回顾性分析北京安贞医院87例患者的临床资料。所有患者均采取CT引导下经皮肺活检检查,其中13例实施手术,进一步做病理组织检查。结果:CT引导下经皮肺穿刺活检诊断肺周围性病变的确诊率高达97.7%。在确诊的85例中肺癌41例,结核18例,非特异性炎症9例,坏死性炎症7例,淋巴瘤2例,非精原细胞性生殖细胞肿瘤1例,前列腺癌肺转移1例,血管内皮瘤1例,间皮瘤1例,结节病1例,肺吸虫病1例,皮肌炎1例,特发性肺纤维化1例。实施手术的13例患者术后病理确诊均为阳性,其中包括经皮肺活检未确诊的1例,其术后病理检查为腺癌。CT引导下经皮肺穿刺活检的患者中有16例出现并发症。结论:CT引导下经皮肺活检操作简便、准确率高、安全性好及并发症少,能为肺周围性病变的诊断和鉴别诊断提供可靠依据。     

水通道蛋白与肺腺癌

肺癌是人类高发的恶性肿瘤,病死率在恶性肿瘤中居首位.其中,肺腺癌易发生远处转移,而目前肿瘤转移的确切机制不十分明确.最近发现水通道蛋白(aquaporin,AQP)参与细胞迁移和增殖,提示其在肿瘤生物学中的重要作用.已有研究发现,多种AQP在不同来源的恶性肿瘤中高表达,并通过促进血管新生及快速转运水分,在肿瘤细胞的迁移侵袭中起重要作用.目前国内外已有研究发现AQP1、3、5在肺腺癌细胞中高表达.深入研究肺腺癌及肺腺癌转移灶中AQP的表达可能给肿瘤细胞转移机制带来新的视角,并为将来用AQP抑制剂治疗肺腺癌、降低它的侵袭能力和远处转移提供理论依据.     

二甲双胍与肺癌

二甲双胍是治疗2型糖尿病的常用药物.近年来多项流行病学研究显示,二甲双胍可降低肿瘤风险,可减慢肿瘤生长,有望成为一种新的抗肿瘤药物.肺癌是严重危害人类健康的疾病,发病率高,病死率高,预后差.有研究表明口服二甲双胍可延长肺癌患者生存期,改善预后.本文就近年二甲双胍对肺癌的作用及其机制进行综述.     

Malignancies following lung transplantation

Malignancy is an important complication of thoracic organ transplantation and is associated with significant morbidity and mortality. Lung transplant recipients are at greater risk for cancer than immunocompetent persons, with cancer-specific incidence rates up to 60-fold higher than the general population. The increased risk for cancer is attributed to neoplastic properties of immunosuppressive medications, oncogenic viruses, and cancer-specific risk factors. This article addresses the epidemiology, presentation, and treatment of the most common malignancies after lung transplantation, including skin cancer, posttransplant lymphoproliferative disorder, and bronchogenic carcinoma.     

间质性肺病合并肺癌研究进展

间质性肺病和肺癌是呼吸内科常见疾病.近年来2种疾病的发病率都有明显升高的趋势,而且预后不良,特别是间质性肺病合并肺癌的出现,在其诊断和治疗方面都存在一定的难度和挑战.一方面,2种疾病的发病机制在一定程度上有共同之处;另一方面,肺癌的治疗会诱发间质性肺病的发生和急性加重.本文通过搜集近年来有关间质性肺病合并肺癌的流行病学、发病机制、临床特征、治疗和预后等相关问题的研究进展,并进行总结,以提高临床医师对间质性肺病合并肺癌的诊治水平.