p53基因对人胚肺成纤维细胞周期影响的研究

背景与目的:研究野生型和179位残基突变型p53基因在HELF细胞周期调控中的作用.探讨p53基因的179位残基突变对细胞生长的影响.材料与方法:用野生型p53(pcDNA3-wtp53)和179位残基突变的突变型p53(pcDNA3-mtp53)转染HELF细胞,观察细胞生长情况,绘制细胞生长曲线;用流式细胞仪分析细胞周期;用RT-PCR和Western blotting方法检测p53基因转染后HELF细胞周期相关基因mRNA和蛋白的表达.结果:野生型p53表达的上调使HELF细胞周期阻滞于G1期,细胞体积减小,并下调cyclin D3、cyclin E、Cdk2和Cdk4的表达,同时上调p21的表达.而179位残基突变的突变型p53表达的上调则促进细胞周期从G1期到S期的转换,同时细胞体积增大,上调cyclin A和Cdk4的表达.结论:p53的179位残基突变对于HELF细胞cyclin A和Cdk4的表达有诱导作用,并可能借此促进细胞周期进程.     

肺癌组织中抗氧化酶及氧化代谢物变化的定量分析

背景与目的 抗氧化酶与肿瘤的关系逐渐受到重视.通过对113例原发性肺癌患者手术切除肿瘤组织和肿瘤远端正常肺组织的抗氧化酶和氧化代谢物及SOD mRNA及其蛋白表达量的测定,观察肺癌组织氧化/抗氧化状态的特点,为补充或完善肺癌发生和发展机制提供一定的依据.方法 应用比色法测定肺癌组织抗氧化酶活性和氧化代谢物[包括:总超氧化物歧化酶(TSOD) (包括MnSOD和CuZnSOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)]的含量,采用半定量PCR和Western Blot法测定患者组织中MnSOD和CuZnSOD的mRNA和蛋白表达量.结果 ①与肿瘤远端正常肺组织相比,肺癌组织中的TSOD、CuZnSOD、GPx活性增高,H2O2、MDA降低(P＜0.05或P＜0.01);②肺腺癌组织中的氧化代谢物H2O2、MDA高于肺鳞癌组织(P＜0.05或P＜0.01);③与肿瘤远端正常肺组织相比,肺癌组织中MnSOD mRNA和蛋白表达量降低,CuZnSOD mRNA和蛋白表达量增高(P＜0.01).结论 肺癌组织存在着氧化/抗氧化失衡.SOD的异常表达水平均出现细胞异常生长,提示氧化/抗氧化失衡与肺癌的发生和发展存在一定的关系.     

人肺腺癌细胞SPC-A1与人胚肺细胞WI-38对纳米颗粒吞噬作用的研究

目的探讨人肺癌细胞及胚肺细胞对氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒的吞噬行为的生物学特性及二者之间吞噬特性的差异.方法分别培养肺腺癌细胞株SPC-A1及人胚肺细胞株WI-38至对数生长期,更换为分散有氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒的培养液,经培养1、3、6 h,分别取所培养的细胞进行超微结构观察.另取培养6 h的部分SPC-A1细胞传代培养,并对每一代细胞作超微结构观察.结果培养1 h氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒即已能进入癌细胞SPC-A1的细胞质,培养至6 h已见有大量颗粒成簇进入细胞质内.然而,在同一的条件下,培养6 h后仍未观察到氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒进入WI-38细胞.经吞噬了氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒的SPC-A1肺癌细胞传至10代后仍生长良好,且在第7代仍然能观察到细胞内存在纳米颗粒并且未出现团聚现象.结论在同一细胞培养的条件下,肺癌细胞SPC-A1明显地比胚肺细胞WI-38更易吞噬氨基硅烷纳米Fe3O4颗粒,且前6h内未观察到纳米颗粒进入WI-38细胞.凡进入癌细胞内的纳米Fe3O4颗粒具有良好的生物相容性并在细胞中停留数代之久且保持良好的分散状态.根据本实验研究的结果进一步提示采用Fe3O4纳米颗粒将开拓一条颇有潜在性价值的纳米颗粒对肿瘤治疗的临床应用途径.     

晚期人肝癌和癌旁组织中抗氧化酶及相关指标的测定及其意义

目的：研究肝癌晚期切除样品及其癌旁正常组织抗氧化酶及相关指标，探讨氧化应激反应水平在肝癌发展中的作用，方法：测定癌组织和癌旁正常组织中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、谷胱甘肽硫转移酶（GST）活性及谷胱甘肽（GSH）、蛋白总巯基、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）和总抗氧化能力（T—AOC）的含量（P〈0．05）结果：肝癌组织CAT和GSH—Px的活性显著高于相应的周围正常肝组织。癌旁组织的T—AOC含量则高于肝癌组织结论：晚期肝癌组织中，体内抗氧化系统有显著改变。     

人胚脊髓提取液对胚鼠脊髓运动神经元存活与生长的影响

目的 :研究人胚胎脊髓提取液对鼠胚脊髓前角运动神经元的营养作用。方法 :用人胚胎制备脊髓提取液 ,其蛋白浓度为 2 5 0 μg/ml。脊髓运动神经元来源于E12～E15d的SD鼠胚。实验组加入提取液 ,不加提取液的为对照组。培养后进行各项活性指标的鉴定 ,用IBASRel2 0图像分析仪测量AgNORs染色的银染蛋白颗粒面积。结果 :实验组多角神经元数较对照组明显增多 (P <0 0 5 ) ;突起较粗且长形成致密网络 ,其突起平均长度和生长指数与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;实验组嗜银蛋白颗粒成团块状或为散在于细胞核内的小银染颗粒 ,银染色面积明显比对照组增大 (P <0 0 5 ) ;实验组AchE含量明显比对照组增加 (P <0 0 1)。结论 :人胚脊髓中存在有促进胚鼠脊髓前角运动神经元突起生长、存活的内源性物质 ,且此种物质具有促进脊髓前角运动神经元rRNA的转录功能。提示脊髓内源性物质具有运动性神经营养因子活性。     

氟化钠对人胚肺成纤维细胞p16基因改变的研究

目的与方法：为研究氟化物的遗传毒性,我们采用ＰＸＣＲ－ＳＳＣＰ和免疫组桦方法从基因和蛋白水平研究氟化钠对人胚肺成纤维细胞抑癌基因Ｐ１６改变的影响。结果与结论：结果未发现氟化钠能引起Ｐ１６基因的改变。     

培养的人胚胸腺和脾组织移植术对肿瘤患者免疫功能的影响

本文应用培养的人胚胸腺和脾组织移植术治疗３６例肿瘤患者并设立２０例对照组两组患 均用常规疗法，观察组加用移植术，于移植前和移植后检测免疫功能。结果发现，观察组移植后较移植前细胞名显增高（Ｅ－ＲＦＣ，ａ－ＲＦＣ，ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ＾４／ＣＤ８，均Ｐ〈０．０１），体液免疫指标亦相应增高。组移植后对照组相比其免疫功能亦明显升高。表明有胸和脾组织移植术可以改善肿瘤患者的免疫功能并间拉证明移植物能存活。本     

培养的人胚胸腺和脾组织移植术对肿瘤患者免疫功能的影响

本文应用培养的人胚胸腺和脾组织移植术治疗３６例肿瘤患者并设立２０例对照组两组患者均用常规疗法，观察组加用移植术，于移植前和移植后检测免疫功能。结果发现，观察组移植后较移植前细胞免疫明显增高（Ｅ－ＲＦＣ，ａ－ＲＦＣ，ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ４／ＣＤ８，均Ｐ＜０．０１），体液免疫指标亦相应增高。观察组移植后与对照组相比其免疫功能亦明显升高。表明人胚胸腺和脾组织移植术可以改善肿瘤患者的免疫功能并间接证明移植物能存活。本组病例移植后无明显宿主抗移植物反应和移植物抗宿主反应。     

硫酸铍对人胚肺成纤维细胞的细胞毒性和遗传毒性

背景与目的： 探讨硫酸铍对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HEL-I)的细胞毒性和遗传毒性。 材料与方法： 用不同浓度的硫酸铍(0.2、2.0、20.0、100.0、200.0 μmol/L)作用HEL-I细胞24 h,采用MTT法测定细胞存活情况,用单细胞凝胶电泳(SCGE)和微核实验测定硫酸铍对HEL-I细胞遗传损伤的情况。结果： 随着硫酸铍浓度的增加,HEL-I细胞的存活率呈下降趋势,硫酸铍浓度为100.0 μmol/L和200.0 μmol/L时,存活细胞数低于空白对照组(P<0.05);在2.0～100.0 μmol/L浓度范围内,硫酸铍均可诱发HEL-I细胞出现DNA损伤和微核率升高(P<0.05)。 结论： 硫酸铍对HEL-I细胞具有明显细胞毒性和遗传毒性。     

山楂提取物对人胚肺2BS细胞及有关癌细胞的抑制作用

本实验结果表明：山楂提取物剂量为４～８μｇ／ｍｌ的条件下，癌细胞的存活率显著下降，在剂量为８～１０μｇ／ｍｌ的条件下，癌细胞的集落形成率受到显著抑制，而对正常人体细胞未见明显影响。     

用cDNA阵列研究人肺癌与正常肺及胚肺组织基因表达谱

研究人肺癌,成人肺及胚肺组织基因表达谱差异,观察肺癌发生中多个基因的作用。方法用鳞状细胞肺癌,胎儿胚肺胸外伤部分肺切除肺组织,提取部怕逆转录标记ｃＤＮＡ探针,与代表５８８个基因的Ａｔｌａｓ＾ＴＭｃＤＮＡ阵列杂交,灰度扫描杂交信号强弱及统计分析差异。结果：肺癌组织中ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ相关基因等多个较正常肺组织表达增加的基因,其中有些有达变化与胚胎肺组织相似。结论：多个基因的表达变化在肺癌发生中起     

人乳腺癌组织中核糖核酸酶抑制因子基因的表达分析

背景与目的:核糖核酸酶抑制因子(ribonucleaseinhibitor,RI)是一种多功能的酸性糖蛋白,人胎盘中富含RI。我们的前期研究表明,从人胎盘中提纯的RI能明显抑制小鼠某些实体瘤(S180肉瘤、Ca761乳腺癌和H22肝癌)的生长。本研究的目的是观察人乳腺癌组织中RI基因的表达水平。方法:采用RT-PCR及毛细管电泳(capillaryelectrophoresis,CE)法检测人乳腺癌组织中RImRNA的表达水平,采用Westernblot方法检测人乳腺癌组织中RI的含量。结果:与对照乳腺组织相比,乳腺癌组织RT-PCR产物的电泳条带较窄;乳腺癌组织Westernblot的斑点较小。乳腺癌组织RT-PCR产物毛细管电泳吸收曲线峰高及峰宽明显小于对照乳腺组织;乳腺癌组织和对照乳腺组织RT-PCR产物毛细管电泳吸收峰面积积分值分别是(3.320±0.365)×106和(4.385±0.880)×106,两组间比较有显著性差异(P<0.01)。结论:与正常乳腺组织相比,人乳腺癌组织中RImRNA表达水平明显降低,RI蛋白含量也明显减少,表明人乳腺癌组织中RI基因表达明显下调。     

人肺鳞癌组织中Caveolin-1的表达及预后意义

  目的   研究Caveolin-1在人肺鳞癌中的表达, 探讨Caveolin-1的表达与人肺鳞癌临床病理特征以及预后的关系。   方法   运用免疫组织化学法检测人肺鳞癌组织中Caveolin-1、PCNA的表达, 并结合患者的临床病理特征和生存情况进行分析。   结果   Caveolin-1在人肺鳞癌中阳性率显著低于正常肺组织(P < 0.001);Caveolin-1的表达与肺鳞癌的TNM分期(P=0.018) 及淋巴结状态(P=0.006) 有关。在人肺鳞癌组织中Caveolin-1与PCNA表达呈正相关(r=0.360, P=0.018)。生存分析显示肺鳞癌中Caveolin-1阳性组的生存时间显著低于阴性组(P=0.007), 在24例淋巴结未转移组中Caveolin-1阳性组的生存时间显著低于阴性组(P=0.002)。多因素Cox分析显示Caveolin-1阳性表达、高临床分期、支气管残端有癌残留的肺鳞癌患者术后生存时间较短。   结论   Caveolin-1的表达与肺鳞癌的恶性演进呈正相关; 其可促进肺癌细胞的增殖。Caveolin-1可作为评估肺鳞癌患者的不良预后指标。      

人肺鳞癌组织的比较蛋白质组学研究

目的利用蛋白质组学方法建立人肺鳞癌组织及其癌旁正常支气管上皮组织的差异蛋白质表达谱。方法对20例人肺鳞癌组织和配对的癌旁正常支气管上皮组织进行比较蛋白质组学研究,即利用双向凝胶电泳（2-DE）分离二者总蛋白质后,经图像分析识别差异表达的蛋白,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）鉴定差异蛋白质。结果（1）比较分析20例肺鳞癌及正常配对组织的2-DE图谱,找到差异蛋白质点76个;（2）对68个差异蛋白质点进行了肽质量指纹图分析,鉴定出一些与瘤基因、细胞周期调控、信号转导等有关的肺鳞癌相关蛋白;（3）肺鳞癌相关蛋白mdm2、c-Jun和表皮生长因子受体（EGFR）在人肺鳞癌组织中高表达,而在正常对照中均表达下调,与蛋白质组的分析鉴定结果是一致的。结论成功鉴定了68个肺鳞癌相关蛋白,为进一步筛选用于肺鳞癌诊断、治疗和预后评估的肺鳞癌分子标志物奠定了坚实的基础。     

TPA对EB病毒体外转化人胚鼻咽上皮细胞的影响

ＴＰＡ对ＥＢ病毒体外转化人胚鼻咽上皮细胞的影响贺智敏，陈主初，邵细芸，何春梅（湖南医科大学肿瘤研究所长沙４１００７８）流行病学资料显示：鼻咽癌（ＮＰＣ）地理区域分布与含ＴＰＡ植物分布明显相关。ＴＰＡ属佛波醇二酯（ＰｈｏｒｂｏｌＥｓｔｅｒ）类，是肿瘤高...     

儿茶素对顺铂所致人胚肾细胞氧化损伤的影响

目的：研究儿茶素对顺铂（DDP）所致人胚肾细胞（HEK293）氧化损伤的影响并探讨其作用机制。方法：体外培养HEK293细胞,分为对照组、DDP组、儿茶素组、儿茶素（5、10、20 mg/L）+DDP组。MTT法检测儿茶素和DDP分别作用后的HEK293细胞存活率,以及儿茶素预处理对DDP所致细胞存活率下降的影响。黄嘌呤氧化酶法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）活力,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛（MDA）含量,二硫代二硝基苯甲酸法测定还原型谷胱甘肽（GSH）的含量。结果：与对照组比较,随着浓度的增加,DDP导致HEK293细胞存活率逐渐降低,儿茶素导致细胞存活率先增加后降低。儿茶素预处理后,对DDP（20 mg/L）所致细胞存活率的抑制作用未见明显减弱（P > 0.05）,但与DDP组相比,能显著抑制DDP所致细胞内MDA含量的升高以及SOD活力和GSH含量的下降（P < 0.05）。结论：体外培养条件下,儿茶素预处理虽不能改变DDP对HEK293细胞存活率的影响,但可在一定程度上缓解DDP所致HEK293细胞的氧化损伤。     

胃癌高发区粮食提取液对人胚胃影响的实验研究

为了调查研究高发区胃癌的病因学，作者收集了赞皇县的玉米面样品作实验研究。将玉米面提取液加入器官培养的人胚胃粘膜进行形态学观察和流式细胞测定，结果表明，在培养２天和１０天后Ｓ期细胞数和细胞增殖指数（ＰＩ）明显增加，４２天后有些细胞发生形态学变化，具有某些恶性特征。采用高效液相色谱分析发现，在玉米面提取液中有杂色曲霉毒素和黄曲霉素Ｂ２。曲霉毒素的检出率和平均含量在胃癌高发区和相对低发区之间有显著差异。     

应用Alderson Rando人形体模探讨肺肿瘤位置和体积对正常肺组织剂量学参数影响

目的 探讨肺肿瘤位置、体积对正常肺组织剂量体积参数的影响.方法 将采用组织等效材料制作的模拟球形病灶分别嵌入Alderson Rando人形体模右肺3个叶和左肺下、上叶,采用6MV X线对上述各种情况进行5个野简化调强放疗计划设计,处方剂量为60 Gy(2 Gy/次共30次).所有计划都使99%靶区体积达到处方剂量要求.分析正常肺组织接受不同剂量照射的体积百分比(V_5、V_(10)、V_(20)、V_(30)、V_50)和平均肺剂量.结果 就正常肺组织的各个剂量体积参数而言,不同病灶位置和直径的差异多数是不同的,两种因素对各个参数的变化有不同程度的影响.各个参数随球形病灶直径的增大而增大(P<0.05).当病灶直径从2 cm增至3 cm、病灶位于不同位置时,各参数增幅在3.83%～125.38%范围内;当病灶直径从3 cm增至4 cm、病灶位于不同位置时,各参数增幅在10.46%～51.46%范围内.结论 肺肿瘤位置和直径变化对正常肺组织剂量体积参数多数有不同程度影响,但如何提高预测准确性尚待基础和临床实验的进一步研究.     

肺岩宁冲剂对肺癌细胞移植瘤组织基因差异表达的影响

 目的 应用基因芯片技术研究肺岩宁冲剂对裸鼠人肺癌细胞移植瘤组织的基因表达谱的影响,初步探讨肺岩宁冲剂抗肺癌的分子机制。 方法 将人肺癌细胞H460皮下移植瘤裸鼠24只随机分为三组：空白对照组：0.9%氯化钠溶液0.4ml灌胃×14天;化疗组：第1、3、5天DDP溶液1ml(含DDP0.1mg)腹腔注射,0.9%氯化钠溶液0.4ml灌胃×14天;肺岩宁冲剂组：肺岩宁冲剂药液0.4ml（含生药0.6g）灌胃×14天。治疗后第15天提取各组移植瘤组织的总RNA并与人全基因组芯片杂交,经激光共聚焦扫描仪扫描及Lux Scan3.0 软件分析后比较各组中的差异表达基因。 结果 与对照组比较,化疗组共筛查出差异表达基因2187条,其中上调基因997条,下调基因1190条,功能未知基因326条。肺岩宁冲剂组共筛查出差异表达基因2093条,其中上调基因968条,下调基因1025条以及未知功能基因145条。按照基因功能可分为细胞周期相关基因、代谢相关基因、细胞信号转导分子、转录调控因子等。 结论 为明确肺岩宁冲剂抗肺癌的分子机制提供重要参考。