表没食子儿茶素没食子酸酯抗流感病毒作用的研究

目的：研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在体内外抗甲型流感病毒的作用。方法：在体外用MTT法检测EGCG对狗肾传代MDCK细胞的毒性浓度，用CPE法观察EGCG抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用；在体内建立流感病毒感染小鼠模型，通过观察小鼠病死率、生命延长率及肺病变程度指标判定其对小鼠肺炎的抑制作用和染毒小鼠的死亡保护作用。结果：EGCG在体外能有效抑制甲型流感病毒CPE的产生；口服EGCG能减少流感病毒A H1N1病毒株感染小鼠的病死率，延长存活时间，减轻小鼠肺组织病变程度。结论：EGCG具有很好的抗甲型流感病毒的作用，呈剂量效应关系。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对裸鼠肝癌移植瘤细胞凋亡作用的研究

目的 了解表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对裸鼠肝癌移植瘤细胞凋亡的影响.方法 建立BEL-7404/ADR细胞裸鼠移植瘤模型,分为control组、ADM组、EGCG组、ADM联合低剂量EGCG组(AE low组)、ADM联合中剂量EGCG组(AE mid组)和ADM联合高剂量EGCG组(AE high组),给药20 d,处死裸鼠去瘤块.用免疫组织化学法(TUNEL法)检测瘤组织内原位细胞凋亡和流式细胞仪(FACS)检测肿瘤组织细胞周期.结果 ADM与低、中、高剂量的EGCG合用,其细胞凋亡率分别为16.7％,20.3％和25.9％,高于单用ADM组的9.3％(P＜0.01),使肿瘤细胞增殖阻滞在S/G2期.结论 EGCG可协同增强ADM促肝癌MDR细胞BEL-7404/ADR的凋亡,使肿瘤细胞增殖周期阻滞在S/G2期.     

表没食子儿茶素没食子酸酯测定及其对胃癌细胞增殖的抑制作用研究

目的 分析表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在绿茶提取物中的含量,探讨EGCG对人胃癌细胞BGC823增殖和凋亡的影响,为阐明EGCG抗肿瘤作用机制提供实验基础.方法 反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定绿茶提取物中EGCG的含量.MTT法检测EGCG对体外培养的人胃癌细胞BGC823增殖的影响;DNA ladder法检测EGCG处理各组DNA梯度的变化.所有数据均采用SPSS12.0进行统计分析,均数比较采用t-test.结果 通过绘制标准曲线确定绿茶提取物中EGCG 的含量为9%.MTT法检测结果显示EGCG能够呈现剂量(5×10~(-3),1×10~(-2),2×10~(-2),4×10~(-2))g/L依赖性地抑制人胃癌细胞BGC823的增殖;DNA ladder法显示EGCG处理组细胞DNA呈现梯状条带,而对照组则没有这种带纹.结论 绿茶提取物中EGCG的含量为9%;EGCG能够通过诱导细胞凋亡而抑制人胃癌细胞BGC823的生长和增殖.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对缺血再灌注损伤大鼠心肌脂质过氧化及细胞凋亡的影响

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对缺血再灌注损伤大鼠心肌脂质过氧化及细胞凋亡的影响。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支30min后，松开结扎恢复灌流613min。实验结束后，取一部分左室心肌制成10％匀浆，测定SOD水平及MDA含量；另一部分心肌用4％多聚甲醛固定后切片，用TUNEL法测定凋亡细胞指数(AI)，用SABC法检测Bax和Bcl-2基因的阳性蛋白表达指数(PEI)。实验分假手术组、缺血再灌注损伤组(IRI)、EGCG治疗组(10mg/kg与20mg/kg)和丹参对照治疗组(1．0g/kg)。结果：(1)IRI组心肌组织SOD水平较假手术组明显降低，而MDA含量则明显升高。与IRI组比，EGCG和丹参能显著提高SOD水平，并显著降低MDA含量，且EGCG 20mg/kg的作用强于EGCG 10mg/kg，与丹参相当。(2)与假手术组比，IRI组的AI值显著增加，Bcl-2及Bax的PEI值亦显著增加，但Bcl-2／Bax值却显著降低。与IRI组比，EGCG组的AI值明显降低。并显著降低Bax的唧值，明显提高Bcl-2的PEI值及Bcl-2／Bax值。结论：EGCG通过抑制脂质过氧化反应及细胞凋亡。对缺血再灌注损伤心肌产生保护作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯的药理研究进展

从绿茶中提取得到的多酚化合物称为茶多酚（green tea polyphenol），后又提取出茶多酚的有效活性成分儿茶素（catechin），它占绿茶干重的30％～42％。儿茶素中的主要活性成分为表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG），另外还有表儿茶素（epicatechin，EC），表儿茶素酸酯（epicatechin gallate，ECG），表没食子儿茶素（epigallocatechin，EGC）等^[1]。其中以EGCG含量最高，超过50％，其生物活性也是儿茶素中最强的。对EGCG及其它绿茶提取物的研究足近年来国内外研究的热点之一，文献多达数千篇。本文主要对EGCG的药理研究作一综述。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人膀胱癌5637细胞株作用的研究

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人膀胱癌5637细胞株的作用及其作用机制。方法实验分为EGCG 10 mg/L组、EGCG 20 mg/L组、EGCG 40 mg/L组和空白对照组。采用CCK-8法检测各组人膀胱癌5637细胞活性抑制情况,采用吖啶橙(AO)荧光染色观察各组人膀胱癌5637细胞形态,免疫组化法检测各组人膀胱癌5637细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果 EGCG 10 mg/L组、EGCG 20 mg/L组、EGCG 40 mg/L组培养24 h、48 h和EGCG各组培养72 h的细胞存活率均明显低于空白对照组(P均0.05),且呈浓度依赖性明显降低(P0.05)。AO荧光染色显示空白对照组呈均匀绿色荧光,EGCG各组随着药物浓度的增加,呈绿色荧光凋亡细胞逐渐增多。与空白对照组比较,EGCG 10 mg/L组、EGCG 20 mg/L组、EGCG 40 mg/L组人膀胱癌5637细胞中Bcl-2蛋白阳性表达细胞数明显减少而Bax蛋白阳性表达细胞数明显增多。结论 EGCG能抑制人膀胱癌5637细胞活力,其机制可能与调控Bcl-2、Bax蛋白表达有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对裸鼠MGC-803细胞移植瘤抑制作用及机制研究

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胃癌MGC-803细胞异种接种的裸鼠肿瘤的抑制作用及其可能的机制。方法:对人胃癌MGC-803细胞异种接种成功的裸鼠腹腔注射不同剂量的EGCG,每天观察裸鼠的一般状态,处死后称重法测定肿瘤抑制率;HE染色观察肿瘤组织内细胞变化;RT-PCR测定Caspase-3 mRNA表达水平;免疫组化法测定Bcl-2、Bax表达;Western blot检测Smo、Gli-1蛋白表达。结果:与模型组相比EGCG(5、10、20mg/kg)对裸鼠肿瘤的抑制率分别为20.4%、21.2%和48.7%;与模型组相比,不同剂量的EGCG不同程度上调Caspase-3 mRNA表达和Bax表达,下调Bcl-2表达,抑制Smo、Gli-1蛋白表达。结论:EGCG可能通过Hedgehog信号抑制人胃癌MGC-803细胞接种的裸鼠移植瘤生长,诱导其凋亡。     

表没食子儿茶素没食子酸酯通过Hedgehog信号诱导结肠癌HCT-116细胞凋亡的机制研究

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人结肠癌HCT-116细胞的抑制作用和机制。方法:MTT实验检测细胞活力,并计算表没食子儿茶素没食子酸酯的IC_(50)值,确定有效给药剂量。采用5-氟尿嘧啶(5-FU)为阳性对照药;EdU掺入法测定细胞增殖情况;JC-1染色测定线粒体膜电位;流式细胞术测定肿瘤细胞凋亡;RT-PCR法测定凋亡相关基因B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)mRNA表达;Western blot测定Smo、Gli-1、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和核凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达情况。结果:与模型对照组比较,32μmol/L和64μmol/L的表没食子儿茶素没食子酸酯显著抑制结肠癌HCT-116细胞的增殖(P<0.01),诱导线粒体膜电位显著降低(P<0.01),显著诱导细胞凋亡(P<0.01)。与模型对照组比较,表没食子儿茶素没食子酸酯的应用在mRNA水平下调Bcl-2表达,上调Bax表达(P<0.01),在蛋白水平上调Caspase-3和AIF表达(P<0.01),下调Smo和Gli-1表达(P<0.01)。结论:表没食子儿茶素没食子酸酯抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能通过抑制Smo/Gli-1信号通路的表达实现。     

表没食子儿茶素没食子酸酯的研究进展

茶多酚的抗肿瘤作用已经得到国内外相关研究人员的公认,研究表明其主体成分儿茶素(占茶多酚总量70%~80%)发挥着主要功效。近年来科学工作者已经越来越多将注意力集中于儿茶素上,尤其是其中的单体之一表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)最引人注目。现就近年来对EGCG的药理作用研究,特别是对它优于其他儿茶素单体的药理作用比较研究进行综述;同时综述了EGCG的分离纯化方法的研究进展。为全面评价EGCG的药用价值及探索工业化生产EGCG的途径提供参考。     

表没食子儿茶素没食子酸酯药理作用研究进展

表没食子儿茶素没食子酸酯是从绿茶中提取分离的一种多酚类单体化合物,是绿茶中儿茶素类化合物的主要组成部分。近年研究发现,其在体内外具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、降血脂、防辐射等多种重要的生物活性。综述了近5年来对表没食子儿茶素没食子酸酯药理作用及作用机制的研究进展。     

洋葱提取物对人结肠癌细胞凋亡及周期的影响

目的研究洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株凋亡及细胞周期的影响。方法采用水提取和乙醇提取洋葱后,用紫外可见分光光度仪检测提取物中黄酮类化合物含量。体外培养结肠癌细胞株(LoVo cells、SW480 cells、HT-29 cells、HCT-8 cells),采用含黄酮类化合物浓度40 mg/L和60 mg/L的提取物对其进行干预,流式细胞仪检测洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株凋亡影响,检测含黄酮类化合物浓度为40 mg/L的水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞周期的影响。结果洋葱水提取物和乙醇提取物对结肠癌细胞株的凋亡具有剂量依赖性,其中水提取物引起SW480、HCT-8细胞株凋亡率较乙醇提取物高。而乙醇提取物引起HT-29细胞株凋亡率较水提取物高。洋葱提取物能将结肠癌细胞株的细胞周期阻滞在G1期,阻碍其向S期转换,以抑制细胞增殖。结论洋葱水提取物和乙醇提取物能够诱导结肠癌细胞株的凋亡,并能够对结肠癌细胞周期产生影响,其具体机制需进一步探讨。     

不同浓度蜜炙紫菀水煎剂对大肠癌LOVO细胞增殖和周期的影响

目的：探讨不同浓度蜜炙紫菀水煎剂对大肠癌LOVO细胞增殖、周期的影响。方法：光学显微镜下观察蜜炙紫菀水煎剂对LOVO细胞形态的影响;利用MTT观察药物处理后对LOVO细胞的生长增殖情况的影响;采用流式细胞术检测蜜炙紫菀水煎剂对大肠癌LOVO细胞增殖周期的影响。结果：光学显微镜和MTT结果发现,低浓度的蜜炙紫菀水煎剂（≤20 mg·mL-1）对大肠癌LOVO细胞的增殖具有明显的促进作用,增殖率可达到99.7%;光学显微镜下可见细胞生长状态良好,细胞死亡少。高浓度的蜜炙紫菀水煎剂（＞20 mg·mL-1）对大肠癌LOVO细胞的增殖具有明显的抑制作用,抑制率达到80.34%以上;光学显微镜下可见细胞的形态改变,细胞大量死亡。流式细胞术结果显示,蜜炙紫菀水煎剂可以使大肠癌LOVO细胞周期各个时相（G1期、S期和G2期）的细胞所占百分数发生改变。10 mg·mL-1和20 mg·mL-1的蜜炙紫菀水煎剂使S期中细胞所占的百分数增加;30 mg·mL-1蜜炙紫菀水煎剂使S期细胞所占的百分数明显减少,G2期细胞百分数明显增加。结论：蜜炙紫菀水煎剂对大肠癌LOVO细胞增殖的作用是双向的,低浓度（≤20 mg·mL-1）的蜜炙紫菀水煎剂具有明显的促进LOVO细胞增殖作用;高浓度（＞20 mg·mL-1）的蜜炙紫菀水煎剂对大肠癌LOVO细胞的增殖具有明显的抑制作用,且可能是通过G2期阻滞来抑制大肠癌LOVO细胞增殖的,这为大肠癌的临床治疗提供了新的思路。     

理冲生髓饮对卵巢癌SKOV3细胞周期和凋亡影响

目的:探讨理冲生髓饮对卵巢癌SKOV3细胞周期和凋亡影响。方法:以卵巢癌SKOV3细胞为研究对象,采用CCK-8法检测不同浓度顺铂对SKOV3细胞抑制作用,Annexin V-FITC法检测SKOV3细胞凋亡情况,细胞周期与细胞凋亡检测试剂测定SKOV3细胞周期变化,流式细胞术检测SKOV3细胞中CD44~+CD117~+细胞比例。结果:与空白组比较,24 h和48 h顺铂组SKOV3细胞凋亡率明显增加,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高,CD44~+CD117~+细胞比例明显增加,与顺铂组比较,24 h和48 h理冲生髓饮联合顺铂组SKOV3细胞凋亡率明显增加,G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高,CD44~+CD117~+细胞比例明显降低,其中理冲生髓饮中剂量组联合顺铂组作用效果最强。结论:理冲生髓饮具有抗肿瘤作用,其机制可能是增加顺铂对卵巢癌SKOV3细胞凋亡,调控细胞周期阻滞,降低卵巢癌SKOV3细胞中干细胞数量。     

The Synergistic Apoptotic Interaction of Panaxadiol and Epigallocatechin Gallate in Human Colorectal Cancer Cells

Panaxadiol (PD) is a purified sapogenin of ginseng saponins, which exhibits anticancer activity. Epigallocatechin gallate (EGCG), a major catechin in green tea, is a strong botanical antioxidant. In this study, we investigated the possible synergistic anticancer effects of PD and EGCG on human colorectal cancer cells and explored the potential role of apoptosis in the synergistic activities. Effects of selected compounds on HCT‐116 and SW‐480 human colorectal cancer cells were evaluated by a modified trichrome stain cell proliferation analysis. Cell cycle distribution and apoptotic effects were analyzed by flow cytometry after staining with PI/RNase or annexin V/PI. Cell growth was suppressed after treatment with PD (10 and 20 µm ) for 48 h. When PD (10 and 20 µm ) was combined with EGCG (10, 20, and 30 µm ), significantly enhanced antiproliferative effects were observed in both cell lines. Combining 20 µm of PD with 20 and 30 µm of EGCG significantly decreased S‐phase fractions of cells. In the apoptotic assay, the combination of PD and EGCG significantly increased the percentage of apoptotic cells compared with PD alone (p < 0.01). The synergistic apoptotic effects were also supported by docking analysis, which demonstrated that PD and EGCG bound in two different sites of the annexin V protein. Data from this study suggested that apoptosis might play an important role in the EGCG‐enhanced antiproliferative effects of PD on human colorectal cancer cells. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

中药长必安对人大肠癌细胞体外作用的研究

目的:探讨中药长必安(简称长必安)抗人大肠癌细胞的作用机制。方法:采用血清药理学方法,设长必安低、中、高浓度组,氟脲嘧啶(5-FU)作为阳性对照组和联合用药(长必安加5-FU)组,与我所自建的两株人大肠癌细胞系,观察了中药长必安的抗肠癌作用。结果:长必安对肠癌细胞有抑制生长和杀伤作用,其程度随长必安浓度的增高而增强。当长必安与5-FU 联合用药时对大肠癌细胞的杀伤作用更强,显示了长必安协同并增强了5-FU 的抗肿瘤作用,长必安主要对G_2+M 期细胞有阻滞作用,并能诱导细胞凋亡。结论:长必安对肠癌细胞有抑制生长和杀伤作用,长必安能协同并增强5-FU 的抗肿瘤作用。     

紫草素通过激活活性氧自由基诱导大肠癌细胞的凋亡

目的:研究紫草素通过激活活性氧(ROS)自由基诱导大肠癌细胞凋亡的作用机制.方法:通过MTT测定法检测紫草素对人结肠癌细胞系HCT116和SW480细胞活力的影响,结合Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Caspase 3/9活性测定试剂盒检测半胱天冬酶活性,使用ROS检测...     

复方中药紫龙金对前列腺癌细胞系LNCaP的体外作用

目的 探讨复方中药紫龙金(简称紫龙金)对雄激素依赖型人前列腺癌细胞系LNcaP的体外作用机制。方法 应用MTT法、流式细胞术和显微荧光术测定紫龙金对LNCaP的增殖、细胞周期分布和诱导凋亡的影响,应用RT-PCR方法检测前列腺特异性抗原基因(PSA)和雄激素受体(AR),凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白表达的影响;应用western blot方法测定对bcl-2和bax蛋白表达的影响。结果紫龙金对LNCaP细胞具有时间和剂量依赖性增殖抑制、G1/G1期阻滞和诱导凋亡作用,作用72h时IC50为0．79mg／ml;紫龙金可以下调前列腺特异性标志基因PSA、AR和凋亡相关基因bcl-2的表达,降低bcl～2蛋白表达,对bax蛋白表达无明显作用。结论紫龙金可以通过抑制LNCaP细胞增殖、G0／G1期阻滞、诱导凋亡、下调PSA、AR和bcl-2基因表达,降低bcl-2蛋白表达等作用机制发挥抗肿瘤作用。     

基于网络药理学预测抗癌精方干预结直肠癌的作用及实验验证＊

目的 基于网络药理学采用数据挖掘的方法分析抗癌精方治疗结直肠癌的作用及其作用机制。方法 通过TCMSP数据库检索获得抗癌精方的化学成分，然后根据药代动力学参数筛选出其活性成分，通过Swiss Target Prediction Database对活性成分进行靶点预测；检索TCMNPAS、OMIM、TTD和DrugBank数据库获得结直肠癌的作用基因，二者映射获得抗癌精方治疗结直肠癌的关键活性成分和核心靶点；进一步分析核心靶点对应的生物学功能及相关的信号通路，选取前10条通路所包含的基因与核心靶点进行映射获得与抗癌精方治疗结直肠癌关联程度较高的信号通路；最后通过CCK8实验、流式细胞术测细胞凋亡和Western blot验证抗癌精方对结直肠癌细胞HCT116的抑制作用及其作用机制。结果 研究共筛选出抗癌精方的关键活性成分26个，对应核心靶点145个，取GO分析前10条生物信息，获得信号通路前10条与抗癌精方治疗结直肠癌的关联度排序。细胞水平验证了抗癌精方可以抑制结直肠癌HCT116细胞增殖，升高细胞凋亡率，且呈浓度依赖性；Western blot实验显示抗癌精方可降低p-PI3K、p-AKT、Bcl-2的蛋白表达，升高cleaved caspase3和Bax的蛋白表达，表明抗癌精方具有诱导结直肠癌HCT116细胞凋亡的作用，可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路的调控实现，这与网络药理学的分析结果相互印证。结论 本研究创新性的采用网络药理学方法结合实验验证初步探索抗癌精方治疗结直肠癌的作用及其机制，为后续深入的基础研究奠基，为临床应用提供客观支持。     

姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用的实验研究

目的研究姜黄素对Raji细胞体外抗癌作用及其机制,对比研究其对RaIi细胞和人单个核细胞的细胞毒性。方法用MTT法检测姜黄素对Raji细胞及人单个核细胞增殖的影响,Annexin—V／PI双标流式术、缺口末端标记法检测姜黄素对Raji细胞及人单个核细胞凋亡的影响,PI单标流式细胞术测定姜黄素对Raji细胞DNA含量分布的影响。结果(1)姜黄素对Raji细胞具有明显的增殖抑制作用。(2)姜黄素可以时间和剂量依赖性方式诱导Raji细胞凋亡。(3)姜黄素组Raji细胞周期发生变化,细胞周期被阻滞于G0／G1和G2／M期,S期比例减少。(4)姜黄素对人单个核细胞无明显抑制增殖和诱导凋亡作用。结论姜黄素能够调控Raji细胞的细胞周期并诱导其凋亡,从而抑制Raji细胞增殖;姜黄素对人单个核细胞无明显细胞毒作用,而选择性作用于肿瘤细胞。