20(S)-原人参二醇氨基酸衍生物的合成

目的对20（S）-原人参二醇进行结构修饰,合成其氨基酸衍生物,从而提高药物的水溶性。方法以二环己基碳化二亚胺为催化剂、吡啶为溶剂进行反应,合成20（S）-原人参二醇的氨基酸衍生物。结果得到20（S）-原人参二醇的氨基酸衍生物14个,其结构通过1H-NMR、13C-NMR图谱进行确证,同时总结了20（S）-原人参二醇的氨基酸衍生物的合成规律。结论本方法合成工艺简单易行,操作简便,适合工业化生产,所得产物的水溶性较合成前有所提高,有利于提高生物利用度。     

20(s)-原人参二醇的抗肿瘤及免疫调节作用研究

目的:探讨20(s)-原人参二醇(Protopanaxdiol,Ppd)的抗肿瘤及免疫调节作用。方法:建立小鼠肝癌H_(22)、Lewis肺癌和黑色素瘤B_(16)三种移植瘤动物模型,小鼠每日灌胃给予Ppd(25,50,100mg·kg~(-1))1次,连续12d,末次药后称取小鼠体重及肿瘤重量,同时测定H_(22)荷瘤小鼠T淋巴细胞转化率、NK细胞杀伤活性及IL-2含量。结果:Ppd 25,50,100mg·kg~(-1)剂量对小鼠肝癌H_(22)的抑瘤率分别为28.85%,43.55%,49.11%;对小鼠Lewis肺癌的抑瘤率分别为23.07%,44.96%,49.61%;对小鼠黑色素瘤B_(16)的抑瘤率分别为30.21%,37.43%,43.20%。Ppd 50,100mg·kg~(-1)可明显提高肝癌H_(22)小鼠的T淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性和IL-2含量。结论:Ppd对小鼠三种移植瘤均具有明显的抗肿瘤活性并与免疫调节作用呈相关性,提示其抗肿瘤作用可能与激活体内免疫系统有关。     

20(S)-原人参二醇对SMMC-7721细胞体内外作用的研究

目的观察不同剂量的20(S)-原人参二醇(Protopanaxadiol,PPD)在体内外对人肝癌细胞株SMMC-7721抗肿瘤作用。方法建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,观察20(S)-原人参二醇的肿瘤抑制作用。MTT比色法检测20(S)-原人参二醇对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用,Ho-echst33342核染色观察细胞凋亡形态学改变,采用FITC-An-nexinⅤ/PI双染流式细胞术分析凋亡情况,同时检测Caspase-3活性。结果在体内,PPD可抑制SMMC-7721细胞裸鼠异种移植瘤生长;在体外,PPD对SMMC-7721细胞的增殖具有明显的抑制及诱导其凋亡作用,呈时间和剂量依赖性,Hoechst33342核染色可见凋亡小体,同时伴有Caspase-3活性的增加。结论20(S)-原人参二醇在体内外均可抑制SMMC-7721细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能通过活化Caspase-3诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中20(S)-原人参二醇的浓度

目的:建立测定人血浆中20(S)-原人参二醇(简称为PPD)浓度的方法.方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以非那雄胺为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定.色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3,流动相为5 mmol/L碳酸氢铵溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.4 mL/min,柱温为40℃...     

20(S)-原人参二醇复合微球的制备及体外释药初步研究

目的:考察20(S)-原人参二醇(20(S)-PPD)复合微球的体外长期和加速释药规律。方法:采用溶剂乳化挥发法制备药物复合微球,采用残余法测定药物在复合微球中的体外长期和加速释放度,评价两种体外释放之间的相关性,对体外长期释放模型进行拟合,研究微球体外长期释药机制。结果:复合微球的体外长期释放数据显示,药物无明显突释,释放至33d时,累积释放率达50.87%,具有明显缓释效果;体外长期释放曲线符合Higuchi方程,表明其体外长期释放以扩散机制为主;复合微球在37℃体外长期释放的累积释放率(Q37,%)与50℃下加速释放的累积释放率(Q50,%)的相关性拟合方程为ln(100-Q50)=2.1378ln(100-Q37)-5.1832,(r=0.9744),体外长期和加速释放的相关性良好。结论:20(S)-PPD复合微球的体外长期释放表明,微球具有良好的缓释效果,可用体外加速释放评价法来指导微球的后续处方与工艺优化,为研发20(S)-PPD微球制剂提供了参考依据。     

HPLC测定20(S)-原人参二醇原料药中有关物质

目的 建立一种用于分离和测定20（S）-原人参二醇原料药中的10种潜在相关杂质的高效液相色谱法。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱,以超纯水（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,流速为0.20~0.25 mL·min^–1,检测波长为203 nm,柱温为35℃,进样量5 μL。结果 20（S）-原人参二醇与各杂质均达到有效分离,在一定范围内线性关系良好;加样回收率（n=9）在94.8%~102.2%,RSD值均<2.0%;日内和日间精密度RSD值均<2.0%,精密度良好;杂质C、杂质F、杂质H、杂质I在室温下放置48 h内RSD值<2.0%,溶液稳定;杂质A、杂质B、杂质D、杂质E、杂质G、杂质J在室温下放置48 h内RSD值>2.0%,溶液不稳定。结论 此次建立的方法简便、灵敏、准确,可同时测定原料药20（S）-原人参二醇中10种有关物质,可有效地鉴定原料药中有关物质,为其生产工艺的提高和质量控制提供参考。     

20(S)-原人参二醇4种剂型在体透皮实验的初步研究

目的 研究20(S)-原人参二醇(PPD)4种剂型的制备及大鼠在体PPD透皮吸收情况.方法 用薄膜超声法制备PPD药质体和醇质体,用超声法制备环糊精包合物,用增溶法制备PPD溶液;建立在体透皮试验中PPD的HPLC测定方法;利用皮肤剩余量法计算PPD 4种剂型透皮18 h后残留在皮肤内的药量.色谱条件:COSMO-SIL 5 C18-MS-Ⅱ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-水(90:10);体积流量1.0 mL/min;检测波长203 nm;柱温25℃;进样量50μL.结果 豆磷脂、羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)空白皮肤洗液和试剂对药物的测定无干扰,PPD质量浓度在0.1～0.5 mg/mL与峰面积的线性关系良好(r=0.999 9),回收率均在96.93%～104.78%,日内及日间RSD均小于1.54%(n=3).PPD药质体、PPD醇质体、PPD β-环糊精包合物、PPD原药液的皮肤剩余量分别为69.6%、86.36%、100%、73.55%.结论 RP-HPLC法能很好地测定PPD的量,且回归方程线性均较好,表明建立的在体透皮试验方法准确、稳定,适用于PPD经皮给药系统制剂的在体透皮试验研究.     

RP-HPLC法同时测定人参提取物转化产物中20(S)、20(R)-人参皂苷Rg2和20(S)、20(R)-人参皂苷Rh1的含量

目的建立同时测定人参提取物转化产物中20(S)、20(R)-人参皂苷Rg2和20(S)、20(R)-人参皂苷Rh1含量的方法。方法采用RP-HPLC法。色谱柱为迪马C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,检测波长为203 nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃。结果人参提取物转化产物中20(S)、20(R)-人参皂苷Rg2和20(S)、20(R)-人参皂苷Rh1质量浓度分别在4.0~80 mg.L-1、2.8~56 mg.L-1、3.2~64 mg.L-1、2.4~48 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 8、0.999 8、0.999 1、0.999 7,回收率分别为100.3%、98.1%、98.0%、99.9%,回收率的RSD值分别为3.1%、2.7%、4.7%、4.0%。结论方法准确、可靠、重现性好,为人参提取物转化产物的质量控制提供参考依据。     

原人参二醇及其衍生物的化学与抗癌活性研究进展

大量实验研究表明,原人参二醇具有广泛的生理活性,原人参二醇在抗肿瘤方面作用尤为显著。该文参考国内外大量文献资料,综述了有关原人参二醇化学结构、性质、制备方法及其衍生物的制备和抗癌活性、构效关系的研究进展,以期为开发利用原人参二醇提供有用的参考。     

20(S)-7-烷(芳)酰基喜树碱的合成

20(S)-喜树碱(2)在过硫酸铵和硫酸亚铁作用下,以75%硫酸为溶剂,分别与戊醛和糠醛进行Minisci反应,制得20(S)-7-戊酰基喜树碱(1a)和20(S)-7-(2-糠酰基)喜树碱(1b),收率分别为81.3%和56.0%.对1a、1b和2用SRB法进行了人白血病(HL-60)、人胃癌细胞(BGC-823)、人肝癌细胞(Bel-7402)和人鼻咽癌细胞(KB)的体外抗肿瘤活性试验.结果显示,1a、1b对HL-60、BGC-823的抑制作用较2强;对Bel-7402和KB的抑制作用较2弱.     

人参叶中的微量新皂甙

前报,从人参Panax ginseng C.A.Meyer叶中得到十二种人参皂甙,其中两种微量新皂甙分别为20(R)-人参皂甙-Rh_2,人参皂甙-Rh_。本文继续报道两个微量成分的分离和鉴定。20(R)-原人参二醇(Ⅰ),甲醇重结晶得无色针晶,mp243～245℃。Liebermann—     

Ni(Ⅱ)螯合物诱导合成(S)-2,6-二甲基苯丙氨酸

目的合成非天然氨基酸(S)-2,6-二甲基苯丙氨酸。方法 2,6-二甲基苯甲酸经还原得到2,6-二甲基苯甲醇,再溴化生成2,6-二甲基溴苄,2,6-二甲基溴苄与(S)-BPB-Ni-Gly络合物缩合,经分离后得到(S)-Tmp-BPB-Ni络合物,经酸解后得到(S)-2,6-二甲基苯丙氨酸。结果以33.6%的总收率得到目标产物(S)-2,6-二甲基苯丙氨酸。结论该方法具有原料廉价、易得、反应条件温和等优点。     

20(S)-人参皂苷Rg_3对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的研究20(S)-人参皂苷Rg3对脑缺血所致大鼠脑线粒体损伤的保护作用,探讨20(S)-人参皂苷Rg3抗缺血性脑中风的机制。方法用栓线法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,测定线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂含量、呼吸功能、线粒体呼吸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca2+等。结果大鼠MCAO后24 h,脑线粒体损伤明显,表现为肿胀、膜流动性降低,膜磷脂降解、呼吸功能衰减,呼吸酶、SOD活性降低,Ca2+、MDA含量升高;静脉注射20(S)-人参皂苷Rg3(5,10 mg.kg-1)能明显抑制缺血脑线粒体膜流动性的降低,膜磷脂降解,减少脑缺血引起的线粒体肿胀,抑制NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性的降低,改善线粒体呼吸功能;同时20(S)-人参皂苷Rg3能明显降低脑缺血大鼠脑神经细胞线粒体MDA含量、升高SOD活性、抑制Ca2+过多摄入。结论20(S)-人参皂苷Rg3对缺血脑神经细胞线粒体的损伤有明显的保护作用,该作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、拮抗Ca2+有关。     

两个新的20（S）-原人参二醇油酸酯衍生物

由20（S）-原人参二醇制得两个未见文献报道的新的20（S）-原人参二醇油酸酯衍生物，命名为12-油酰基-20(S)-原人参二醇（1）和3，12-二油酰基-20(S)-原人参二醇（2）。     

中国红参化学成分的研究(Ⅱ)

从中国红参(Panax ginseng C.A.Meyer)中分离出十种单体(RG 1～10),用IR.MS(FD-MS.FAB-MS)、~(13)C-NMR以及化学方法等鉴定了化学结构,分别为20(R)-ginsenoside Rh,(RG-1),ginsenoside-Rg,(RG-2),20(R)-ginsenoside-Rg_2(RG-3),20(R)proto-panaxatriol(RG-4)以及人参皂甙Rg.(RG-5),—Re(RG-6)—Rd(RG-7),—RC(RG-8),—Rd_2(RG-9),—Rb,(RG-10);其中RG-1、RG-3、RG-4系首次从中国红参分离得到的人参皂甙成分。用薄层对照未炮制前的白参不含以上三种成分,这可能是红参与白参药理作用上差异的原因之一。     

人参叶微量新成分的研究

从人参(Panax ginseng C.A.Meyer)叶中分离出14种单体化合物。其中4种微量成分用IR、MS、~1HNMR、~(13)CNMR及化学方法等分别鉴定为20(R)-原人参三醇(Ⅰ)、胡萝卜甙(Ⅱ)、3β,12β-二羟基-20(22),24-达玛二烯—3—0—β—D—葡萄吡喃糖甙(Ⅲ)及20(R)-原人参二醇—3—0—β—D—葡萄吡喃糖甙(Ⅳ)。其中Ⅲ及Ⅳ系新化合物,分别命名为人参皂甙-Rh_3(ginsenoside-Rh_3)及20(R)-人参皂甙-Rh_3[20(R)-ginsenoside-Rh_2]。     

原人参二醇型皂苷活性代谢物Compound K药理活性的研究进展

人参皂苷Compound K〔20-O-β-D-葡萄糖基-20(S)-原人参二醇,CK〕是原人参二醇型人参皂苷在人体内主要吸收形式和药效实体。近年来,CK的药理活性研究又有了新进展:①CK可通过活化胱天蛋白酶8直接或通过线粒体途径间接地激活胱天蛋白酶3,诱导肿瘤细胞凋亡;下调基质金属蛋白酶9基因的表达,抑制肿瘤细胞的转移;②可通过下调多种炎症因子如白细胞介素-4(IL-4),IL-6,肿瘤坏死因子α等及环氧合酶2与一氧化氮合酶的表达而发挥抗炎、抗过敏和神经保护作用;③可阻断ATP敏感性K+离子通道,促进胰岛素分泌,增强组织胰岛素敏感性,抑制糖异生,促进糖酵解,对胰岛素依赖性糖尿病表现出良好的疗效;④可上调核苷切除修复相关蛋白基因的表达,减少紫外线引起的DNA损伤,防止皮肤老化等。本文重点对近几年有关CK的药理活性及其作用机制研究新进展进行综述。     

西司他丁中间体(+)-(S)-2,2-二甲基环丙羧酸的合成

目的:合成( )-(S)-2,2-二甲基环丙羧酸.方法:以2,2-二甲基环氧乙烷和三乙基膦醋酸酯为原料,经Witting环化生成三元环制备外消旋2,2-二甲基环丙羧酸,用L-(-)-薄荷醇为拆分试剂拆分得到光学活性目标化合物.结果:成功合成出( )-(S)-2,2-二甲基环丙羧酸,拆分收率提高到26.8%.结论:此方法操作简便,成本较低,收率较高,适于大量生产.     

精制原人参二醇皂苷对小鼠学习记忆的影响

目的研究精制原人参二醇皂苷(PDS)对亚硝酸钠、乙醇和东莨菪碱所致小鼠记忆障碍的改善作用。方法 连续给精制PDS组、阳性对照药石杉碱甲组小鼠ig相应药物2周,正常和模型对照组小鼠ig等量生理盐水,末次给药1h后,除空白组sc等量生理盐水外,其余各组均立即sc亚硝酸钠、或乙醇、或东莨菪碱,用被动回避实验观察PDS对小鼠学习记忆功能的影响,并比较精制PDS与粗品PDS、人参皂苷Rb1单体的改善学习记忆的作用。结果精制PDS各剂量均有良好的改善小鼠记忆障碍的作用;与精制PDS相比,同样剂量的粗品PDS和人参皂苷Rb1单体则均未显示改善记忆的作用。结论精制PDS是极有前途的益智药物或保健产品的原料。     

过表达HMGR催化结构域以优化酵母工程菌原人参二醇代谢途径的研究

目的 过表达3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)催化结构域提高酵母工程菌中原人参二醇的产量.方法 分别克隆酿酒酵母中编码3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶催化结构域的基因tHMG1、人参中达玛烯二醇-Ⅱ合酶基因ds和原人参二醇合酶基因cyp1、拟南芥中CYP450还原酶基因cyp-re,构建相应表达质粒,转化酿酒酵母INVSc1,并检测重组菌中原人参二醇产量.结果 重组菌INVSc1-DS-GFP/CYP1／CYP-Re和INVSc 1-DS-GFP/CYP1/CYP-Re/tHMG1中原人参二醇产量分别为3.04 mg·L-1和26.5 mg·L-1.结论 导入基因tHMG1,使原人参二醇产量提高了8.7倍,该结果为优化酵母工程菌中人参皂苷代谢途径奠定了基础.