钛合金微粒通过smad通路下调成骨细胞Runx2表达

目的探讨钛合金微粒(Ti-6Al-4V)对smad4、smad5、smad8影响,了解微粒对促骨形成信号通路影响。方法根据Ti-6Al-4V微粒浓度高低,将成骨细胞分为正常对照组(0μg/mL)、Ti-6Al-4V组(5、10、15μg/mL),采用RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测培养72h成骨细胞smad4、smad5、smad8 mRNA和蛋白表达。结果培养72h后,与对照组比较,smad 4、smad5、smad8 mRNA水平下降,差异有统计学意义(P0.05),smad4 mRNA水平随Ti-6Al-4V微粒浓度增加呈抑制作用,差异有统计学意义(P0.05),smad4、smad5、smad8蛋白水平分别与其mRNA表达变化趋势一致。结论 Ti-6Al-4V微粒下调受体调节蛋白smad5、smad8和公用型蛋白Smad4表达,是Ti-6Al-4V微粒抑制核转录因子runx2表达关联因素之一。     

多发性骨髓瘤患者骨髓间充值干细胞向OB分化中的Runx2表达及体外造血机制

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞(OB)分化中的Runx2表达及MSCs体外造血机制。方法采用流式细胞术与Von-cosa染色分别检测OB的增殖与形成能力,RT-PCR方法检测MSCs向OB分化中的Runx2表达与MSCs造血因子表达,应用甲基纤维素与MSCs进行常规培养检测MSCs体外造血的能力。结果 OB的增殖能力显著低于对照组,观察组IOD sum/Area sum值与平均钙结节数均显著低于对照组(均P<0.05);MM患者在MSCs诱导前Runx2表达显著低于MSCs诱导后,观察组Runx2平均光密度显著低于对照组(均P<0.05);RT-PCR法可检测白细胞介素(IL)-6、单核细胞集落刺激因子(M-CSF)与肝细胞生长因子(SCF)在MSCs中的表达,而血小板生长因子(TPO)与粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)未见表达;MM患者与正常体检者细胞集落产量之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Runx2的表达减弱可能导致MM患者OB的增殖与形成能力的减弱,MM患者与正常MSCs体外造血的能力无显著差别,联合自体MSCs造血干细胞移植在MM诊治中具有临床应用价值。     

维持性血液透析患者全血Runx2甲基化水平与血管钙化的关系

目的 探讨Runx2甲基化水平与维持性血液透析(MHD)患者血管钙化的关系。方法 选取在河北医科大学第四医院行MHD的患者58例为研究对象,收集患者的临床资料,根据冠状动脉钙化(CAC)评分结果将患者分为无钙化组、轻中度钙化组、重度钙化组。应用Methprimer进行Runx2甲基化引物设计,采用甲基化特异性PCR检测患者的全血Runx2甲基化水平,Spearman相关性分析探究其与血管钙化的关系。受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估Runx2甲基化水平对MHD患者血管钙化的诊断价值。结果 差异性检验发现三组间全血Runx2甲基化水平差异有统计学意义,且随着血管钙化程度的增加,Runx2甲基化的表达水平降低。Spearman相关性分析显示Runx2甲基化水平与血管钙化呈负相关(r=-0.51,P<0.01),年龄、血磷与血管钙化呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,Runx2甲基化水平诊断血管钙化的ROC曲线下面积(AUC)为0.761(P<0.001),Runx2甲基化水平与年龄、血磷三者联合诊断血管钙化的AUC及灵敏度均显著提高(P<0.05)。结论...     

Cbf与骨代谢

核结合因子(Cbf)是一个与runt基因高度同源的转录因子家族,Cbfα1促进成骨细胞分化并影响分化后成熟成骨细胞的功能,促进软骨细胞成熟和破骨细胞的生成。Cbfβ对维持正常骨骼发育也有作用。Cbfα1调节多种成骨基因的表达,同时本身也受多种因素的调控。对Cbfα1调节的基因及调节Cbfα1的基因的进一步研究,将会为探讨骨代谢疾病的发生机制及相关治疗带来新的方向。     

地塞米松对骨髓间充质干细胞Runx2表达的影响

目的 观察地塞米松对骨髓间充质干细胞（BMSC）成脂分化的影响。方法 采用离心贴壁法培养SD大鼠BMSC，分别加入0、10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol／L地塞米松，培养4、8、12、16d时碱性磷酸酶和SundanⅢ复染，2ld时检测培养细胞的碱性磷酸酶活性和细胞增殖活力；透射电镜观察0和10^-7mol／L地塞米松培养21d时细胞内的细胞器；实时定量RT-PCR检测不同浓度地塞米松培养7d及0和10^-7moVL地塞米松培养3、5、7d时细胞的Runx2 mRNA；Westernblot测定0、10^-7 mol／L地塞米松培养7d时BMSC的Runx2蛋白。结果随地塞米松浓度增加、培养时间延长，BMSC碱性磷酸酶染色减弱，细胞SundanⅢ着色明显增加。10^-6、10^-7mol/L地塞米松培养后BMSC碱性磷酸磷酸酶活性和增殖活力降低明显，P均〈0．05。10^-7mol／L地塞米松培养后BMSC胞核缩小，染色质固缩，电子密度增强，胞质稀疏，细胞器萎缩。10^-9～10^-6mol／L地塞米松培养7d后BMSC的Runx2mRNA表达减少88％-45％，Runx2蛋白表达同样减少。结论大剂量地塞米松下调BMSC的Runx2mRNA和蛋白表达，促进其成脂分化。     

氟对软骨细胞与成骨细胞凋亡及H2O2、SOD、NO的影响

目的：研究氟对体外培养的软骨细胞、成骨细胞凋亡及H2O2、SOD、NO的影响。方法：采用流式细胞仪对细胞周期进行分析及测定凋亡细胞的百分比；化学方法检测细胞培养液中的H2O2、SOD、NO；透射电镜观察软骨细胞超微结构。结果：软骨细胞：(1)不同剂量的氟均诱导细胞凋亡，培养基中的H2O2、NO均水平高于对照组，加SOD可使H2O2、细胞凋亡百分率明显下降，NaF2O、160μmol／L可使G2／M期细胞升高。(2)NaF320μmol／L．可使细胞超微结构损伤，加SOD可拮抗氟的损伤作用。成骨细胞：与对照组相比(1)加入不同剂量NaF，培养基中的SOD活性降低。但仅在加入160、240μmol/L，培养基中H2O2升高，NO亦同时升高。(2)NaF400μmol／L可诱导成骨细胞凋亡，同时使G0／G1期细胞增多，240、400μmol／L可使G2/M期细胞减少。结论:(1)低、中剂量的氟可促进软骨细胞、成骨细胞凋亡，损害细胞超微结构。与此同时培养物中H2O2升高，SOD活性降低，表明细胞凋亡及损伤与氧化应激有关。此外，NO也升高，可能也起一定作用。氟对细胞周期的影响：对软骨细胞主要作用于G2／M期，对成骨细胞可同时作用于G0／G1及G2／M期；(2)一定量的SOD可明显拮抗氟促进的H2O2释放及细胞凋亡，对细胞有保护作用。(3)一定剂量的氟促使软骨细胞、成骨细胞凋亡，同时也促进成骨细胞增殖。可能细胞凋亡产物刺激细胞增殖过程，是氟骨症增殖病变发生机制之一，NO可能也在其中起一定作用。     

Runx3与胃癌的研究进展

Runt相关转录因子3（Runx3）基因，曾被命名为PEBP2αC／CBFA3／AML2基因．是新近发现的一种抑癌基因，属runt结构域（Runt domain，RD）转录因子家族成员，参与对细胞生长和凋亡的调控。近年研究发现Runx3与多种恶性肿瘤．尤其是胃癌的关系非常密切，Runx3基因表达沉默与胃癌的发生和发展有着高度的相关性，而且也影响着胃癌的治疗效果和预后，因而Runx3有望成为胃癌诊断的特异性标志物和基因治疗的靶点。本文就近年来国内外对Runx3的结构、功能、抑癌机制以及Runx3基因与胃癌的关系等方面的研究作一综述。     

Runx3与胃癌的关系

Runx3基因是近年来发现的一个新的肿瘤抑制基因,其在小鼠胚胎发育过程及人类多种恶性肿瘤尤其是在胃癌的发生过程中起重要作用,现就Runx3基因与胃癌的发生发展过程中的关系及研究现状作一综述。     

骨形态发生蛋白与骨代谢

骨形态发生蛋白(BMPs)是多功能细胞因子,其家庭成员参与骨骼形成、分化、吸收等过程,对成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞均有不同程度的影响。本文就BMPs对成骨细胞、破骨细胞及软骨细胞作用的研究进展进行综述。     

Runx3基因与胃癌的关系

哺乳动物Runt domain家族包括Runx1、Runx2和Runx3三个基因,均与人类疾病的发生密切相关。其中Runx3基因被认为是一个新的抑癌基因,在胃黏膜上皮细胞调控中发挥重要作用。研究发现在人类胃癌细胞系和胃癌组织中普遍存在Runx3基因表达的缺失或下调,45%～60%的胃癌细胞由于甲基化及杂合缺失而出现Runx3基因表达的缺失或下调。此文对Runx3基因的序列结构、功能及其在胃癌发生进展过程中的作用机制等方面的研究现状作一综述。     

MicroRNA与骨代谢相关疾病

MicroRNA （miRNA）是一种非编码的小分子RNA,在基因表达调控过程起重要作用,其在疾病发生发展中的作用已成为研究热点之一.部分miRNA能够调节成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞的分其代谢,进而影响骨代谢,导致骨代谢相关疾病的发生.提示miRNA与骨代谢相关疾病之间存在关联,改变相关miRNA表达水平可能对骨代谢疾病有治疗作用.本文对miRNA的生物活性及其在骨质疏松症和骨关节炎中的作用和调节机制予以综述.     

Cbf与骨代谢

核结合因子（cbf）是一个与runt基因高度同源的转录因子家族，Cbfα1促进成骨细胞分化并影响分化后成熟成骨细胞的功能，促进软骨细胞成熟和破骨细胞的生成。Cbfβ对维持正常骨骼发育也有作用。Cbfα1调节多种成骨基因的表达，同时本身也受多种因素的调控。对Cbfα1调节的基因及调节Cbfα1的基因的进一步研究，将会为探讨骨代谢疾病的发生机制及相关治疗带来新的方向。     

miRNA通过靶基因Runx2调控成骨细胞分化的分子机制

骨质疏松症(osteoporosis)是由于多种原因导致的骨密度下降,以骨量减少、骨微结构破坏为特征的全身性骨病.其发病机制并未完全阐明,目前研究聚焦在微小RNA(microRNA,miRNA)通过调控靶基因表达而影响骨质疏松症的发生和发展,这也成为该领域的研究热点.miRNA作为一类单链非编码小分子,参与细胞的生长、...     

Runx3、Sp1、Bcl-2在胃腺癌中的表达及对预后的影响

目的探讨Runx3、Sp1、Bcl-2在胃腺癌中的表达,为评估患者预后提供实验依据。方法采用免疫组织化学SP法检测Runx3、Sp1、Bcl-2蛋白在63例胃腺癌、19例低级别上皮内瘤变及10例正常胃黏膜组织中的表达。结果胃腺癌组织中Runx3表达降低,Sp1和Bcl-2蛋白表达增高。Runx3低表达与肿瘤细胞的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）;Sp1高表达与肿瘤细胞浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关（P〈0.05）;Bcl-2高表达与肿瘤细胞分化程度有关（P〈0.05）。胃腺癌组织中Runx3与Bcl-2阳性表达呈负相关（P〈0.01）;Sp1与Bcl-2阳性表达呈正相关（P〈0.01）;Runx3与Sp1的表达无明显相关性。Runx3及Sp1阳性表达率与患者总生存率关系密切。结论 Runx3蛋白低表达及Sp1蛋白高表达与胃腺癌的发生、发展及预后密切相关。     

过表达Runx2基因对牙髓细胞分化相关基因的影响

目的探讨Runt相关转录因子(Runx)2基因在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化过程中的作用。方法通过矿化诱导培养基(1μmolβ-磷酸甘油钠、10~(-6)μmol地塞米松和5 mg抗坏血酸)建立牙髓细胞向成牙本质细胞分化模型,通过检测碱性磷酸酶(ALP)的活性鉴定模型。将过表达载体pc DNA3.1-Runx2和空载体pc DNA3.1(阴性对照组)转染牙髓细胞,蛋白质免疫印迹法检测转染后细胞中Runx2蛋白的表达量;实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中成牙本质细胞分化相关基因牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨涎蛋白(BSP)mRNA的表达。结果在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化的过程中,ALP的活性含量逐渐增加,第14天的水平显著大于第7天(P<0.05)。与阴性对照组相比,pc DNA3.1-Runx2组细胞中Runx2蛋白的表达量显著升高(P<0.05);在分化诱导的第7和14天,细胞中DSPP mRNA(P<0.05)、BSP mRNA(P<0.05)均显著高于阴性对照组。结论 Runx2通过增加成牙本质细胞分化相关基因的表达,从而促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化。     

多发性骨髓瘤成骨细胞活性和Runx2的表达

目的 研究多发性骨髓瘤(MM)患者间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞(OB)分化过程中Runx2的表达,探讨MM骨形成障碍的机制.方法 以4例有明显骨质破坏的MM患者为研究对象,2例缺铁性贫血和1例特发性血小板减少性紫癜为对照,体外诱导MSCs向OB分化,采用CCK-8试剂盒检测MSCs向OB分化过程中的增殖能力,以平均光密度值(AOD)表示;碱性磷酸酶(ALP)染色和钙结节(Von-Kossa)染色检测MSCs的OB形成能力,分别以IOD sum/Area sum值和平均钙结节个数表示;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测MSCs向OB分化过程中Runx2的表达,以Runx2/GAPDH平均光密度值表示.结果 在MSCs向OB分化过程中,MM患者MSCs的增殖能力、ALP表达、钙结节形成能力、Runx2表达均明显低于对照组(P＜0.01).结论 MM患者骨髓MSCs向OB分化过程中的增殖能力和OB形成能力均下降,可能与Runx2的表达减低有关.     

骨髓瘤细胞抑制成骨细胞活性和Runx2表达

目的 建立MM细胞系(U266细胞株)和MSCs共培养体系,研究骨髓瘤细胞对MSCs增殖能力、OB形成能力和Runx2表达的影响.方法 研究对象为2例缺铁性贫血和1例特发性血小板减少性紫癜.采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化骨髓MSCs,培养3-5代后,诱导MSCs向OB分化,待细胞融合至60％～70％时,分两组,一组加U266细胞株共同培养(共培养组),另一组不加U266细胞株(对照组).采用CCK-8试剂盒检测MSCs向OB分化过程中的增殖能力,以平均光密度值(AOD)表示;碱性磷酸酶(ALP)染色和钙结节(Von-Kcssa)染色检测MSCs的OB形成能力,分别以IOD sum/Area sum值和平均钙结节个数表示;RT-PCR技术检测MSCs向OB分化过程中Runx2的表达,以Runx2/GAPDH平均光密度值表示.结果 在共培养体系中,U266细胞株和MSCs共培养的前3d,MSCs增殖能力无明显变化,两组AOD值分别为0.731±0.020和0.805±0.152(P ＞0.05),至第6天,共培养组的MSCs增殖能力明显低于对照组,AOD分别为0.560±0.034和2.283±0.145(P ＜0.05).与对照组相比,共培养组MSCs向OB分化过程中ALP的表达显著降低,IOD sum/Area sum值分别为0.138±0.038和0.376±0.044(P ＜0.01),钙结节的形成减少,平均钙结节个数分别为(6.7±2.75)个和(15.3±8.99)个(P＜0.01)和Runx2的表达显著降低,Runx2/GAPDH平均光密度值分别为0.238±0.168和0.653 ±0.343(P ＜0.01).结论 骨髓瘤细胞可抑制骨髓MSCs向OB分化的增殖能力和OB形成能力,也抑制其Runx2表达.     

Cbfα1基因与骨代谢的关系

核结合因子α1(Cbfα1)编码成骨细胞的特异性转录因子.Cbfα1不仅促进成骨细胞的分化及骨形成,而且参与了软骨细胞的发育与分化过程.此外,Cbfα1还可调节骨保护素的表达,从而抑制破骨样细胞的形成和骨吸收.多种细胞因子可影响Cbfα1的活性和表达.由于Cbfα1既可抑制骨吸收,又可促进骨形成,因此将骨吸收和骨形成两个不同的过程连接起来.研究Cbfα1基因表达的调节并确定增加其表达的因子,为治疗骨质疏松和骨畸形提供了新的手段.     

骨代谢与TGF-β、BMP-2的关系

正常骨代谢周期中，破骨细胞(OC)的骨吸收与成骨细胞(OB)的骨形成相互偶联，维持一种动态平衡，不断进行骨重建。当OC的骨吸收相对增强或OB的骨形成相对减弱，骨吸收大于骨形成导致骨质丢失时，将导致骨质疏松。近年来，随着细胞生物学和分子生物学研究的不断深入，细胞因子在骨代谢过程中的作用越来越受到人们的重视。细胞因子调控骨     

软骨下骨成骨细胞在骨性关节炎中的作用与机制

骨性关节炎是一种骨组织代谢疾病,软骨下骨成骨细胞直接参与骨性关节炎的病理过程。成骨细胞表达异常的生物学表型与软骨下骨结构和功能改变密切相关,其可使软骨承受更高的应力;软骨下骨成骨细胞产生的代谢调节因子通过骨和软骨间微结构直接促进软骨细胞退变。免疫和脂类代谢通过成骨细胞调节骨组织代谢,参与骨性关节炎病变过程。进一步阐明软骨下骨成骨细胞在骨性关节炎病变过程中的作用和机制,可为骨性关节炎研究和治疗提供新方法和思路。