瘦素对雄激素性脱发小鼠模型毛囊的影响

目的：确定瘦素对雄激素性脱发小鼠毛囊的影响。方法：40只雄性C57小鼠随机分组,空白组10只不予处理,余30只背部皮下注射丙酸睾酮5 mg/kg·d进行造模。造模成功后分为3组,继续给药4周：模型组（皮下注射丙酸睾酮）、米诺地尔组（注射丙酸睾酮+外用5%米诺地尔酊）、瘦素组（注射丙酸睾酮+重组小鼠瘦素）,比较生长期与休止期毛囊数量比值（A/T）,毛囊细胞增殖与凋亡情况及雄激素受体(AR)蛋白含量。结果：(1)米诺地尔组及瘦素组较模型组脱发面积缩小;(2)米诺地尔组与瘦素组较模型组的生长期/休止期毛囊数比值、Ki67表达均明显增加（均P＜0.05）,两者在米诺地尔组与瘦素组之间比较均无明显统计学差异（均P＞0.05）;(3)毛囊凋亡数量及AR水平在米诺地尔组与瘦素组间比较均无明显统计学差异（均P＞0.05）。结论：皮下注射瘦素对雄激素性脱发模型小鼠有明确治疗作用,且效果与外用5%米诺地尔溶液作用相当。     

米诺地尔外用对化疗后小鼠ICAM-1和ELAM-1的影响

目的: 评价米诺地尔对小鼠血清和毛囊ICAM-1和ELAM-1水平的影响.方法: 环磷酰胺静脉注射建立C57BL/6小鼠化疗后脱发模型.米诺地尔酊涂抹小鼠背部皮肤后,切取皮肤标本观察毛囊组织学变化;应用ELISA法和免疫组化法检测小鼠血清及毛囊内ICAM-1和ELAM-1水平.结果: 小鼠于注射环磷酰胺后4天出现明显的弥漫性脱毛,组织学上毛囊多为退行期,米诺地尔组多为生长期毛囊.造模后小鼠血清ICAM-1和ELAM-1的水平分别为(46.57±10.25)ng/mL和(28.57±6.03)ng/mL,高于对照组(P<0.05);米诺地尔涂抹后血清ICAM-1和ELAM-1水平分别为(27.21±5.62)ng/mL和(17.21±4.80)ng/mL,明显低于模型组(P<0.05).结论: 米诺地尔可减缓环磷酰胺导致的生长期毛囊细胞凋亡和退行性变,并降低血清和毛囊局部ICAM-1和ELAM-1水平,对环磷酰胺所致的脱发有一定的防治作用.     

中药黄芪、女贞子、人参促毛发生长的在体研究

目的:以C57BL/6小鼠为动物模型,探讨中药黄芪、女贞子、人参混合煎剂促进C57BL/6小鼠毛发生长的可能机制。方法:中药组小鼠给予中药混合煎剂口饲,对照组给予等量生理盐水,观察小鼠背部皮肤颜色变化和毛发生长情况。同时在光镜下观察小鼠毛囊组织学变化及毛囊内细胞的凋亡的状况。结果:中药组小鼠饲饮中药煎剂后背部皮肤颜色由粉红色变为黑色比对照组提前了1d,背部皮肤颜色由黑色变为灰黑色比对照组延长了1.5d。组织学上,拔毛后第18天对照组小鼠毛囊处于退行中晚期,而中药组仍为生长Ⅵ期和退行早期毛囊。中药组小鼠毛囊内凋亡细胞数量比对照组减少(P<0.001)。结论:黄芪、女贞子、人参混合煎剂促毛发生长作用可能与抑制退行期毛囊内细胞凋亡,诱导和延长C57BL小鼠毛发的生长期有关。     

三七总皂苷对雄激素性脱发小鼠的改善作用及机制研究

目的：明确三七总皂苷（PNS）对雄激素性脱发（AGA）小鼠的治疗效果及其作用机理。方法：40只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、三七总皂苷组,每组10只。除空白组外其余各组小鼠皮下注射丙酸睾酮溶液建立雄激素性脱发模型后,每组给予相应试剂或蒸馏水处理。对每组脱发区的毛囊数目、终毛毛囊、毳毛毛囊进行计数并计算终毛/毳毛的比值。测定小鼠血清睾酮、血管内皮生长因子（VEGF）的含量以及小鼠皮肤组织VEGF、转化生长因子-β1 （TGF-β1）表达量。结果：与空白组比较,模型组小鼠背部毛发明显稀疏,总毛囊数目、终毛毛囊数目、终毛/毳毛比值、血清和皮肤组织中VEGF表达量明显下降,皮肤组织中TGF-β1表达量显著上升（均P<0.01）;与模型组比较,三七总皂苷组小鼠毛发增多可见大量新生绒毛;小鼠皮肤总毛囊数目、终毛毛囊数目明显增加,终毛/毳毛比值升高;小鼠血清和皮肤组织VEGF表达量明显升高;TGF-β1表达量降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：三七总皂苷对C57BL/6AGA小鼠模型有改善作用,其作用机制可能与上调血清和皮肤组织中VEGF表达以及下调皮肤组织中TGF-β1表达有关。     

环孢素对毛囊细胞凋亡和部分生长因子mRNA表达的影响

目的：探讨环孢素A(CsA)促毛发生长的作用机制。方法：应用小鼠触须毛囊体外培养模型，通过观察毛囊生长速度、细胞增殖、细胞凋亡和部分生长因子mRNA的表达，对CsA促毛发生长的机制进行研究。结果：CsA明显促进毛囊生长和抑制毛囊进入退行期。CsA促毛发生长的作用可以完全被抗血管内皮生长因子(VEGF)和抗肝细胞生长因子(HGF)受体中和抗体所阻断。CsA可促进Ki67抗原表达，抑制毛囊细胞的凋亡。逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测发现，培养的第4和（或)第6天，CsA处理组VEGF、HCF和神经生长因子(NGF)mRNA表达高于阴性对照组，而follistatin mRNA表达则明显低于阴性对照组。结论：小鼠触须毛囊体外培养为研究CsA促毛发生长机制的研究提供了一个较好的模型。CsA通过刺激毛囊细胞增殖和抑制细胞凋亡而刺激小鼠触须毛囊生长。该作用可能是通过影响VEGF、HGF、NGF以及follistatin的表达而发挥作用的。     

复方红花酊对白癜风豚鼠模型TNF-α和IL-10表达的影响

目的探讨复方红花酊对TNF-α和IL-10的影响及促进黑色素形成作用。方法实验动物随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(复方卡力孜然酊)、复方红花酊高剂量组、中剂量组、低剂量组。建立白癜风皮损模型,并应用相对应药物涂擦治疗,测量其TNF-α和IL-10平均光密度及黑色素颗粒细胞数目,比较其作用。结果复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组对皮损有复色作用;与正常对照组比较,模型组TNF-α的表达显著增高,IL-10的表达明显减少,黑色素含量明显降低,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组中TNF-α的表达明显降低,IL-10的表达明显增高,各组黑色素含量均明显增加,差异有统计学意义(P0.05);复方红花酊高、中剂量组及阳性对照组中的TNF-α表达水平与黑色素含量呈显著负相关(P0.05),IL-10表达水平与黑色素含量呈显著正相关(P0.05)。结论复方红花酊通过调节TNF-α和IL-10的表达水平可影响黑色素的生成,进而对白癜风产生一定的治疗作用。     

中波紫外线诱导小鼠皮肤光损伤中miRNA141表达的研究

【摘要】 目的 探讨小室移植法重建小鼠毛囊,观察细胞成分对毛囊再生的影响。 方法 取0 ～ 2 d的C57BL/6乳鼠背部皮肤,胰酶消化后分离表真皮,再分离出毛囊上皮细胞。实验分表皮细胞混合毛囊胚芽组、真皮细胞组、表皮细胞混合毛囊胚芽 + 真皮细胞组、毛囊上皮细胞 + 真皮细胞组。用小室移植法接种于裸鼠背部,并于移植后1、2、4、8周观察变化,HE染色观察毛囊组织学形态。 结果 小鼠毛囊细胞移植1周时,背部小室开始脱落,伤口结痂;2周时除表皮细胞组外,另3组均长出了短小的毛发,镜下可见毛囊样结构;4周及8周时除表皮细胞组外,均长出了正常的毛发,表皮细胞与真皮细胞混合组及毛囊上皮细胞与真皮细胞混合组毛发生长情况良好,优于单独的真皮细胞组。 结论 毛囊细胞小室移植后可形成新的毛囊,上皮细胞及真皮细胞在毛囊重建中具有重要的作用。 【关键词】 毛囊; 毛囊重建; 鼠科     

氧化苦参碱对银屑病模型雌激素周期小鼠阴道上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨氧化苦参碱对银屑病模型雌激素周期小鼠阴道上皮细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用注射雌激素刺激小鼠阴道上皮组织增生的方法复制银屑病小鼠动物模型,同时给予不同剂量的氧化苦参碱干预,实验10 d 后,应用免疫组化法和末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术分别检测各组小鼠阴道上皮细胞细胞增殖性核抗原(PCNA)表达水平和凋亡情况.结果:与正常组相比,模型组PCNA 表达显著增加(P < 0.01),细胞凋亡指数明显增加(P < 0.01),氧化苦参碱80、40 和20mg/kg 组PCNA表达显著减少(P < 0.01),凋亡指数显著增加(P < 0.01).结论:氧化苦参碱对实验性银屑病具有保护作用,该作用可能与其降低表皮细胞PCNA 表达水平,促进表皮细胞凋亡有关.     

不同缓冲液对离体毛囊活性影响的比较研究

目的：研究不同缓冲液对离体毛囊活性的影响,尝试为毛囊的体外保存提供新的方法。方法：将毛囊放置于林格氏液组（A组）,林格氏液加肝素组（B组）,林格氏液加转铁蛋白组（C组）,Wil-liamsE液组（D组）,Williams E液加肝素组（E组）,Williams E液加转铁蛋白组（F组）各缓冲液5h后,再于孵箱中培养5d,测量毛囊生长长度（hair shaft elongation,HSE）以及毛囊中凋亡细胞。结果：D组HSE明显大于A组（P=0.01）。而A、B、C组之间无显著差异,D、E、F组之间也无显著差异。A组毛囊的毛母质、外毛根鞘中凋亡细胞明显增多,D组中仅可见散在凋亡细胞。结论：WilliamsE液作为毛囊存放的缓冲液,有利于保持毛囊的活性。     

自体浓缩生长因子联合毫火针激活 Wnt/β-catenin信号促进小鼠毛发生长

目的 探讨自体浓缩生长因子(concentrated growth factor, CGF)联合毫火针对雄激素性脱发(androgenetic alopecia, AGA)小鼠毛发生长的作用及机制。方法 将36只C57BL/6雄性小鼠随机分成6组(n=6),分别为CGF联合毫火针组、毫火针组、CGF组、米诺地尔阳性对照组、空白组与模型组，除空白组外，其余各组均给与睾酮涂抹建立雄激素性脱发小鼠模型，然后各组分别给予相应的治疗。肉眼评估小鼠背部皮肤毛发生长情况，HE染色后观察毛囊的形态变化及数量，Western blot及免疫组织化学检测Wnt10b、GSK-3β、β-catenin蛋白表达情况。结果 肉眼观察CGF联合毫火针可以促进小鼠毛发生长；HE染色显示毛囊数量增多，以终毛毛囊增多为著；免疫组织化学、Western blot证实Wnt10b、GSK-3β、β-catenin蛋白在上述所有组别毛囊中均有表达，且CGF联合毫火针组中Wnt10b、GSK-3β、β-catenin蛋白的表达与模型组、毫火针组、CGF组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CGF联合毫火针可通过激活β...     

中药益发复方含药血清对毛囊干细胞增殖及K19、β1整合素mRNA表达的调控作用

目的本研究主要观察中药益发复方含药血清对大鼠毛囊干细胞增殖及K19、β1整合素mRNA表达水平的调控作用。方法自制益发复方含药血清;取7～8日龄Wistar大鼠,分离隆突区毛囊,用二步消化酶法获取毛囊外根鞘细胞,再用Ⅳ型胶原黏附法分离毛囊干细胞。将分离得到的毛囊干细胞分为实验组a1-β3（培养液中分别加入10％高、中、低剂量的益发含药血清）、对照组b（培养液中加入10％空白对照血清）及对照组c只加无血清角质细胞培养液（KSFM）。用MTY法制作生长曲线,观察各组培养细胞生长规律和特性;运用K19、β1整合素单克隆抗体免疫组化鉴定培养细胞;RT—PCR检测各组培养细胞K19、β1整合素mRNA表达水平。结果免疫组化鉴定结果显示Ⅳ型胶原黏附细胞符合毛囊干细胞特征。实验组毛囊干细胞克隆形成较早、较多,MTY法检测显示益发血清组毛囊干细胞增生速度明显优于对照组;实验组毛囊干细胞K19、β1整合素基因表达水平较对照组显著提高（P〈0．05）,中剂量的益发含药血清（1．65g／mL）作用最为明显。结论中药益发复方能促进毛囊干细胞增生及特异性标记物K19、β1整合素基因表达,这可能是其治疗脱发病及促进毛发生长的药理机制之一。     

Klhl24基因起始密码子突变小鼠毛囊异常生理表型分析

【摘要】 目的 探究Klhl24基因起始密码子突变小鼠毛囊异常的生理表型，为阐明Klhl24调控毛囊发育的机制提供基础。方法 将通过CRISPER/Cas9技术构建的Klhl24基因起始密码子突变Klhl24c.3G>T杂合（Klhl24c.3G/T）雄性小鼠与野生型雌性小鼠杂交，对同窝小鼠进行基因型鉴定， Klhl24c.3G/T雄性小鼠和野生型（WT）雄性小鼠分别作为实验组与对照组，每组小鼠 ≥ 3只。在小鼠出生后第21天（第1个毛发静止期）及45天（第2个毛发静止期）进行胶带贴毛实验，对小鼠背部皮肤组织进行Ki67免疫组化检测，并用扫描电镜、透射电镜观察，用脱氧核糖核苷酸介导的dUTP末端标记（TUNEL）试剂盒检测毛囊内凋亡细胞。实验组与对照组检测结果比较采用Dunnett-t检验。结果 第1个静止期与第2个静止期Klhl24c.3G/T小鼠每0.25 cm2胶带脱落毛干数量分别为1 224 ± 51.08与1 514 ± 72.15，WT小鼠分别为320 ± 55.68和125 ± 2.86，第1、2个静止期Klhl24c.3G/T小鼠脱落毛干数量均明显多于WT小鼠（t = 11.96、19.24，均P < 0.001）。对第1个静止期脱落毛干进行扫描电镜观测，显示脱落毛干底部呈杵状。出生后第59天时，WT小鼠背部无新毛干长出，毛囊处于静止期，而Klhl24c.3G/T小鼠背部已有新毛干长出，毛囊进入下一个生长期。透射电镜观察显示，在第1个毛囊静止期（P21）Klhl24c.3G/T小鼠背部皮肤毛囊细胞中线粒体内嵴结构混乱，单个毛囊结构中凋亡细胞数量为12 ± 1.15，高于WT小鼠（3 ± 0.63，n = 8，t = 6.874，P < 0.001）。结论 Klhl24c.3G/T小鼠毛发异常表型主要为毛囊静止期锚定毛干能力降低，毛囊生长期提前，毛囊细胞中线粒体结构异常，并且凋亡细胞数量增加。     

复方木尼孜其颗粒对变应性接触性皮炎小鼠模型的影响

目的研究复方木尼孜其颗粒对变应性接触性皮炎(ACD)小鼠模型的影响。方法建立小鼠变应性接触性皮炎反应模型,观察使用不同浓度复方木尼孜其颗粒后的效果。结果复方木尼孜其颗粒高剂量组能明显抑制ACD小鼠的耳厚度、耳肿胀度,真皮中多形核细胞及单一核细胞数,以及ACD小鼠外周血γ干扰素(IFN)含量。结论复方木尼孜其颗粒能明显抑制二硝基氟苯(DNFB)诱导的变应性接触性皮炎。     

不同黑素细胞群在有色毛囊重建中作用的研究

目的观察不同种属小鼠的毛囊细胞能否嵌合重建有色毛囊, 探讨不同黑素细胞群在小鼠有色毛囊重建中的作用。方法选取C57BL/6J、BALB/C胎鼠或乳鼠皮肤, 分离出表皮细胞群、毛囊上皮细胞群和真皮细胞群, 培养、纯化从表皮细胞群获得的表皮黑素细胞。实验包含三部分, ①乳鼠C57BL/6J毛囊重建实验:分为表皮细胞+毛囊上皮细胞组、真皮细胞组;②嵌合毛囊重建实验:分为乳鼠C57BL/6J真皮细胞组、乳鼠BALB/C真皮细胞组、乳鼠BALB/C真皮+乳鼠C57BL/6J真皮细胞组、胎鼠BALB/C真皮细胞+胎鼠C57BL/6J真皮细胞组;③有色毛囊重建实验:分为乳鼠BALB/C真皮细胞+乳鼠C57BL/6J表皮细胞组、乳鼠BALB/C真皮细胞+乳鼠C57BL/6J毛囊上皮细胞组、乳鼠BALB/C真皮细胞+培养的C57BL/6J表皮黑素细胞组。采用小室移植法将不同细胞接种于裸鼠的背部, 每组4只。于移植后4周和8周, 通过大体观察、组织学及免疫荧光评估毛囊重建情况。结果移植后4周和8周, 乳鼠C57BL/6J毛囊重建实验中(本部分实验2组共8只BALB/C裸鼠, 7只存活, 1只因创面感染死亡...     

寻常痤疮发病机理和治疗的现代概念

发病机理痤疮是一种多因素性疾病,其表现取决于一些发病机理。皮脂的作用、毛囊微生物、毛囊壁和机体反应等均甚重要。有痤疮组患者的平均皮脂分泌量明显地高于无痤疮组。皮脂腺的发育和皮脂分泌直接受雄激素的制约,睾酮的作用最强,但肾上腺和卵巢分泌的雄激素也可有作用。新近研究知睾酮在皮肤中经5α还原酶的作用转变为组织活性更高的双氢睾酮,能促进皮肤细胞内核蛋白的合成及可供合成脂类所需能量     

复方氟米松软膏对慢性变应性接触性皮炎模型鼠的治疗作用

目的探讨复方氟米松软膏治疗小鼠慢性变应性接触性皮炎的疗效及机制。方法用0.5%2,4二硝基氯苯(DNCB)制备小鼠慢性变应性接触性皮炎模型40只,随机分为治疗组(复方氟米松软膏)、治对照组(地塞米松)、空白对照组(模型组)和对照组(冷霜)。除空白对照组外,余三组在小鼠背部均匀涂抹实验药物,2次/d,连续2周。观察各组干预后皮肤组织病理及组织IL-4水平。结果复方氟米松治疗组小鼠较对照组皮损处角质层明显变薄,表皮厚度恢复正常;炎症细胞明显减少,IL-4含量显著降低(P<0.05)。结论复方氟米松软膏治疗慢性变应性接触性皮炎,具有一定的效果,其机制可能与下调局部皮损炎性因子有关。     

疗癣卡西甫丸与银屑胶囊对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损的影响

目的探讨疗癣卡西甫丸和银屑胶囊对咪喹莫特诱导银屑病小鼠模型皮损的影响。方法雄性BALB/c小鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、阴性对照组、疗癣卡西甫丸组、银屑胶囊组以及阳性对照药物复方甘草酸苷组与地塞米松组,造模成功后予不同药物治疗2周,光镜下观察各组皮损组织形态学变化,计数炎症细胞浸润数、测量纵向表皮面积值;实时定量PCR方法检测皮损中TNF-α,IFN-γ,IL-17,IL-22细胞因子表达水平的变化。结果 HE染色显示:与阴性对照组比较,疗癣卡西甫丸组、银屑胶囊组、复方甘草酸苷组、地塞米松组皮损厚度明显减小,表皮层较为平整,分别比较炎症细胞浸润数与纵向表皮面积值,差异有统计学意义(P0.05)。实时定量PCR检测结果显示,与阴性对照组相比,疗癣卡西甫丸组IFN-γ,IL-22表达水平,银屑胶囊组IL-17,IL-22表达水平,复方甘草酸苷组TNF-α,IFN-γ,IL-17,IL-22表达水平,以及地塞米松组IL-17,IL-22表达水平均明显降低。结论疗癣卡西甫丸与银屑胶囊对咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型有明确疗效,可抑制在银屑病发病过程中起主要作用的Th1,Th17细胞通路。     

何首乌、女贞子等中药煎剂对体外培养的猪毛囊毛发生长的影响

目的 探讨何首乌、女贞子等中药混合煎剂对体外培养的猪毛囊毛发生长的影响。方法 将离体培养的猪毛囊分为对照组(Williams E培养基)和中药组(Williams E培养基+中药煎剂),显微镜下观察各组毛囊毛发生长和毛球部形态变化,并用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测各组毛囊中的凋亡细胞。结果 培养第7天,对照组毛囊毛发生长长度低于中药组(P<0.001);对照组毛囊TUNEL阳性细胞数明显高于中药组(P<0.001);毛球形态观察,对照组毛囊出现退行性变化,而中药组毛囊仍维持生长期毛囊形态。结论 何首乌、女贞子等中药煎剂能在一定程度上抑制猪毛囊细胞内凋亡,延缓生长期毛囊进入退行期。     

毛乳头细胞与雄激素性秃发的关系

雄激素性秃发是最常见的脱发类型,目前已知是多基因遗传性疾病,与雄激素尤其是二氢睾酮水平及精神因素有关,具体发病机制不明确.毛乳头细胞来源于成纤维细胞,是构成毛乳头的间充质细胞.可表达雄激素受体和分泌多种细胞因子,诱导毛囊再生,在调控毛囊的周期性生长中起重要作用.且毛乳头细胞参与雄激素的代谢,雄激素通过诱导易感毛囊毛乳头细胞分泌细胞因子引起脱发.可见毛乳头细胞与雄激素性秃发关系密切.     

重复吊尾应激对小鼠体重、肾上腺和睾酮水平的影响

目的研究重复吊尾应激小鼠的体重、脏器指数、血浆睾酮水平以及睾丸和肾上腺的组织形态学改变。方法昆明种小鼠．20只,随机分为2组,即对照组和应激组。采用悬吊应激模型,重复悬吊应激11d,1次／d,并循序增加应激强度,并于末次应激结束30min后眼眶取血,用RIA法测定血清中睾酮含量。摘取脾脏、胸腺、肾上腺和睾丸,称重并计算脏器指数。取肾上腺和睾丸用4％多聚甲醛固定并制作组织切片,HE染色,于显微镜下观察形态学变化。结果与对照组相比,应激后小鼠体重增长程度明显受抑,肾上腺指数增加（P〈0．01）,脾脏指数下降（P〈0．01）;应激组小鼠的而睾丸指数和胸腺指数无变化。组织形态学研究显示,应激组小鼠生精小管的形态结构,精原细胞、精母细胞及精子细胞数无明显变化。肾上腺皮质肥厚,髓质萎缩甚至消失。应激组小鼠血浆睾酮水平显著低于对照组。结论重复应激小鼠体重增加减缓,脾脏重量减轻,血浆睾酮水平降低,肾上腺指数升高,肾上腺发生形态学改变。