诊断超声与细胞凋亡

目的 探讨诊断超声与细胞凋亡的关系。方法 应用ＨＰ８５００彩色多普勒超声诊断仪,持续照射４２只大鼠幼仔睾丸３０ｍｉｎ,依据照射后取标本时间不同,随机分为７组;对照组为空白照射组,Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ组分别为照射后即赢利ｈ,１２ｈ,２４ｈ,４８ｈ,９６ｈ取材组。     

脑缺血耐受与细胞凋亡的调控

目的：在探讨脑缺血后内源性神经保护机制、开发新的神经保护药物或方法的过程中，脑缺血耐受的形成机制的基础研究是非常必要的。现就脑缺血耐受的形成与细胞凋亡调控的相关基础研究进行综述。资料来源：应用计算机检索Medline 1980-01／2004-01关于脑缺血耐受和细胞凋亡的章，检索词“cerebral ischemic tolerance，cell apoptosis”，并限定语言种类为English。同时计算机检索万方数据资源系统与中国期刊全数据库1990-01／2004-01关于脑缺血耐受和细胞凋亡的章，限定章语言种类为中，检索词“脑缺血耐受，细胞凋亡”。资料选择：对资料进行初审，纳入标准为①随机对照实验，采用单盲，双盲或非盲法。②实验包含平行对照组。③无其他施加因素。排除标准：重复性实验研究和综述。选取实验包括实验组和对照组的献，筛除非随机实验的研究，对符合标准的献开始查找全，进一步判断为随机对照实验资料提炼：共收集到20篇关于脑缺血耐受形成与细胞凋亡的相关研究的随机和未随机实验章，14个实验纳入标准，因重复的同一研究或类似研究排除的6篇实验 资料综合：14个实验包括bcl-2，bax，p53，蛋白激酶B,低浓度的神经酰胺,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3和细胞色素C对脑缺血耐受的影响并对其给予评价。结论：目前尚无充分证据证明脑缺血耐受用于临床的实用的价值，但它仍然是研究脑缺血后内源性神经保护机制、开发新的神经保护药物或方法的有力工具。     

细胞凋亡与脑血管病

细胞凋亡(apoptosis)是细胞生命活动中固有的生物学现象,是一种特殊的可调控的细胞生理性死亡形式,具有维持细胞群体数量自身稳定的重要功能,也是机体维持稳态的重要机制之一。凋亡调节异常与很多疾病的发生发展有关,文章旨在探讨细胞凋亡在脑血管病发生发展中的相关性,尤其在缺血性及/或出血性损伤中的地位及脑血管病导致细胞凋亡的机制,从多角度多层次阻断细胞凋亡的发生发展,有可能成为防治脑血管病的新途径。     

超声诱导细胞凋亡的研究与进展

目的：回顾近年来B超诱导细胞凋亡的实验研究结果，介绍用凋亡作为超声安全性研究的生物学指标的研究进展。资料来源：应用计算机检索medline数据库1998-10／2004-10期间的相关章，检索词“Ultrasound；Apoptosis”，并限定语言种类为“English”。计算机检索中期刊全数据库1998-01／2004-10期间的相关章，检索词“超声；细胞凋亡”，并限定语言类型为中。资料选择：选择符合关键词的章，并查看每篇献后的引，纳入标准：B超诱导细胞凋亡的基础及临床研究方面的章，共查得相关献165篇，其中中35篇，英130篇。资料提炼：对检索到的B超诱导细胞凋亡的基础及临床研究方面献中相关信息进行综述，不排除非随机对照及非盲法的献。资料综合：实验研究表明，超声的不同生物学效应均可诱导细胞凋亡，但在不同超声条件下，其细胞水平的生物学效应表现有差异。根据资料对超声诱导细胞凋亡的生物学效应、作用机制及临床意义三方面进行综述。结论：B超可诱导细胞凋亡，其生物学效应取决于超声剂量；诊断剂量超声照射人体后是否引起凋亡及其是否对胚胎组织细胞构成损伤有待进一步研究。     

脑缺血耐受与细胞凋亡的调控

目的:在探讨脑缺血后内源性神经保护机制、开发新的神经保护药物或方法的过程中,脑缺血耐受的形成机制的基础研究是非常必要的。现就脑缺血耐受的形成与细胞凋亡调控的相关基础研究进行综述。资料来源:应用计算机检索Medline1980-01/2004-01关于脑缺血耐受和细胞凋亡的文章,检索词“cerebralischemictolerance,cellapopto-sis”,并限定语言种类为English。同时计算机检索万方数据资源系统与中国期刊全文数据库1990-01/2004-01关于脑缺血耐受和细胞凋亡的文章,限定文章语言种类为中文,检索词“脑缺血耐受,细胞凋亡”。资料选择:对资料进行初审,纳入标准为①随机对照实验,采用单盲,双盲或非盲法。②实验包含平行对照组。③无其他施加因素。排除标准:重复性实验研究和综述。选取实验包括实验组和对照组的文献,筛除非随机实验的研究,对符合标准的文献开始查找全文,进一步判断为随机对照实验。资料提炼:共收集到20篇关于脑缺血耐受形成与细胞凋亡的相关研究的随机和未随机实验文章,14个实验纳入标准,因重复的同一研究或类似研究排除的6篇实验。资料综合:14个实验包括bcl-2,bax,p53,蛋白激酶B,低浓度的神经酰胺,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3和细胞色素C对脑缺血耐受的影响并对其给予评价。结论:目前尚无充分证据证     

脑发育过程中细胞凋亡的分子机制

目的：综述脑发育过程中细胞凋亡的分子机制。资料来源：通过计算机检索了MEDLINE2000—01／2004-12英献，并对部分所选章的参考献进行了二次检索。MEDUNE检索的主胚词包括“apoptosis，progmmmedcell death，brdin development，neurodevelopment”。资料选择：纳入标准：有关脑发育过程中细胞凋亡分子机制的研究。排除标准：①有关成熟神经系统中细胞凋亡分子调节方面的研究。②献中重复研究、综述、Meta分析类章。资料提炼：在104篇检索出来的献中，63篇与主胚相关，再根据综述研究的目的选取了其中的26篇。资料综合：胚脑中细胞凋亡的发生被认识后，细胞凋亡对正常神经系统发育和功能的重要意义就成为神经科学研究的一个主要焦点，并在细胞凋亡调控方面的研究取得了显进展。调节华美新小杆线虫和哺乳动物细胞凋亡的分子具有广泛的同源性；并且，Bcl-2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族成员的靶基因断裂技术表明，bcl-x，bax，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在哺乳动物脑发育过程中起特别重要的作用。结论：细胞凋亡在正常和异常脑发育过程中均起着非常重要的作用。明确脑发育过程中有关细胞凋亡调节的分子通路可深入地了解脑形态发生学和脑畸形的发生机制。     

中药诱导白血病细胞凋亡的研究近况

<正>细胞凋亡又称细胞程序性死亡(Apoptosis APO),是1972年首先由英国学者Kerr等提出,用以描述一种在细胞形态学上有别于细胞坏死(Necrosis)的细胞死亡过程(Progammed cell death,PCD),是在某些生理或病理条件下,细胞接到某种信号的触发后主动参与并遵循一定程序的较慢的死亡过程,不仅在细胞的发育、分化、成熟、死亡中起着重要的作用,而且在抗肿瘤药物治疗以及白血病治疗中生长     

细胞凋亡与椎间盘退行性变的分子生物学特点

目的：分析软骨细胞凋亡的现象及机制，以期更深入地认识人类及其他动物终板软骨细胞在椎间盘退行性变过程中细胞凋亡的问题。 资料来源：应用计算机检索Medline 1995-01／2006—03相关原始生殖细胞凋亡的文献，检索词“apoptosis，endpalte，disc degeneration，eartilage”，限定文献语言种类为“English”。同时检索CNKI1995—01／2006—03相关软骨细胞凋亡的文献，检索词为“软骨细胞，终板，凋亡，椎间盘退行性变”，并限定语言种类为中文。 资料选择：对资料初审，选取包括原始生殖细胞凋亡方面的文献，开始查找文献。纳入标准：①终板软骨细胞凋亡。②椎间盘退行性变。排除标准：①综述文献。②重复研究类文章。 资料提炼：共收集到32篇关于终板软骨细胞凋亡的文献，纳入9篇符合标准的文献。 资料综合：终板软骨细胞是椎间盘的重要组成部分。软骨细胞在正常发育过程都会发生凋亡并具有一般细胞凋亡的特征，终板软骨细胞也会发生凋亡。随着年龄的增长及软骨终板的破坏加剧，软骨终板细胞的凋亡率会有明显的升高（TUNEL检测法）。应用椎间盘退行性变模型可以发现，终板软骨细胞凋亡率随着椎间盘退型性疾病的发展而逐渐升高。这些都说明凋亡在年龄相关的椎间盘退行性变或其他原因诱发的椎间盘退行性病变中均发挥着重要作用。 结论：在体内正常发育和椎间盘退行性变过程中终板软骨细胞都会发生凋亡，有关终板软骨细胞发生凋亡的机制尚需深入研究。     

脑发育过程中细胞凋亡的分子机制

目的:综述脑发育过程中细胞凋亡的分子机制。资料来源:通过计算机检索了MEDLINE2000-01/2004-12英文文献,并对部分所选文章的参考文献进行了二次检索。MEDLINE检索的主题词包括“apoptosis,programmedcelldeath,braindevelopment,neurode-velopment”。资料选择:纳入标准:有关脑发育过程中细胞凋亡分子机制的研究。排除标准:①有关成熟神经系统中细胞凋亡分子调节方面的研究。②文献中重复研究、综述、Meta分析类文章。资料提炼:在104篇检索出来的文献中,63篇与主题相关,再根据综述研究的目的选取了其中的26篇。资料综合:胚脑中细胞凋亡的发生被认识后,细胞凋亡对正常神经系统发育和功能的重要意义就成为神经科学研究的一个主要焦点,并在细胞凋亡调控方面的研究取得了显著进展。调节华美新小杆线虫和哺乳动物细胞凋亡的分子具有广泛的同源性;并且,Bcl-2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族成员的靶基因断裂技术表明,bcl-x,bax,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在哺乳动物脑发育过程中起特别重要的作用。结论:细胞凋亡在正常和异常脑发育过程中均起着非常重要的作用。明确脑发育过程中有关细胞凋亡调节的分子通路可深入地了解脑形态发生学和脑畸形的发生机制。     

创伤弧菌溶细胞素诱导细胞凋亡的研究现状及展望

<正>创伤弧菌溶细胞素(Vvc)是创伤弧菌唯一分泌至细胞外,具备创伤弧菌种属特征性的细胞外蛋白质[1]。其由结构基因VvhA编码,相对分子质量为50 851×103,水溶性好,对热不稳定[2-3]。创伤弧菌溶细胞素的活性和毒素非常强,是创伤弧菌引发细胞、组织损伤的重要毒力因子之一。实验证明,每毫克纯化的Vvc活力可达81 000溶细胞单位(81 000HU/mg)。通过小鼠尾静脉注射毫克级以下水平的Vvc,结果可导致试验     

低频超声联合微泡辐照诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

低频超声(low-frequency ultrasound,LFUS)联合微泡(microbubbles,Mbs)辐照诱导肿瘤细胞凋亡是近年来超声医学研究的热点之一,其机制主要是微泡使低频超声空化效应明显增强,该效应从多个方面对肿瘤细胞产生影响而导致其凋亡[1]。本文对低频超声联合微泡辐照诱导肿瘤细胞凋亡的基础、机制和研究进展作一综述。一、肿瘤细胞凋亡凋亡是细胞最基本的生物学现象,在生物体的进化、     

Role of intracellular calcium ions and reactive oxygen species in apoptosis induced by ultrasound

Recently, we have reported that ultrasound (US)-induced apoptosis is due to inertial cavitation and that extracellular reactive oxygen species (ROS) generated by inertial cavitation are not directly correlated with the apoptosis (Honda et al. 2002). The molecular mechanism of apoptosis induced by US is not yet sufficiently clear. Here, we examine the role of intracellular calcium ions and the intracellular ROS on apoptosis induced by US. Human myelomonocytic lymphoma U937 cells were exposed to continuous 1-MHz US at an intensity of 4.9 W/cm(2) (I(SPTA)) in the presence of air, and changes of intracellular calcium ion concentration ([Ca(2+)]i) in individual cells by digital imaging, various flow cytometric analyses of endpoints of apoptosis (early apoptosis, secondary necrosis, loss of mitochondria membrane potential, superoxide formation, caspase-3 activation) and DNA fragmentation were explored. Furthermore, the effects of an intracellular calcium ion chelator (BAPTA-AM), an antioxidant (N-acetyl-L-cysteine, NAC), a calcium channel blocker (verapamil), Ca(2+)-free buffer and Levovist were also investigated. These results indicate that: 1. the mitochondria-caspase pathway and the Ca(2+)-dependent pathway play cardinal roles in apoptosis induced by US because BAPTA-AM partially inhibited DNA fragmentation, loss of mitochondria membrane potential and caspase-3 activation; 2. intracellular ROS generated from mitochondria, rather than extracellular ROS (which were directly produced by inertial cavitation in the medium), are involved in the regulation of apoptosis induced by US because addition of NAC after sonication showed effective suppression of the apoptosis; and 3. increase of [Ca(2+)]i appears to be due to nonspecific influx from outside the cells because verapamil is not effective and no increase of [Ca(2+)]i due to sonication could be observed in the Ca(2+)-free buffer.     

诊断超声对HEK-293细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨诊断超声照射对体外培养的HEK-293细胞凋亡的影响.方法 采用HEK-293细胞,构建超声照射模型,采用4个超声照射剂量浓度(0 min、10 min、20 min和30 min),每个浓度设3个平行瓶,重复三次.处理后行Annexin V-FITC/PI双染,流式细胞仪行凋亡细胞计数;免疫细胞化学检测Caspase-3凋亡蛋白表达水平的变化.结果 Annexin V-FITC/PI双染色显示,随着超声照射剂量的增加,流式计数的细胞凋亡率增加,20 min组具有统计学意义(P<0.05),30 min组具有显著统计学意义(P<0.01);同时可使凋亡蛋白酶Caspase-3表达水平增加.结论 特定剂量的超声聚焦照射可引起部分细胞凋亡改变,并具有一定量效关系.     

超声联合微泡诱导血管平滑肌细胞凋亡的机制研究

目的 探讨低频超声联合脂质微泡诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的可能机制.方法 以低频连续波超声(频率1 MHz、声强0.3 W/cm2)联合脂质微泡(1 μl/ml)辐照VSMCs 120 s.分别用流式细胞仪Annexin V/PI染色、免疫细胞化学技术、荧光探针Fura-4/Am负载后激光共聚焦法检测细胞凋亡、凋亡相关蛋白表达和细胞内游离Ca2 浓度的变化情况.结果 与对照组和血小板衍生生长因子-BB刺激组(PDGF)比较,两组超声辐照联合微泡[(US MB)组和(PDGF US MB)组]的VSMCs凋亡率显著增加、Bax蛋白表达明显上调、而Bcl-2蛋白表达则显著减少(P<0.01);而且PDGF US MB组的细胞凋亡率明显高于US MB组,Bax蛋白表达上调和Bcl-2蛋白表达下调的程度较US MB组更为显著(P<0.01).各实验干预组VSMCs内Ca2 浓度均较对照组显著增高(P<0.01);PDGF US MB组和US MB组细胞内Ca2 浓度均明显低于PDGF组(P<0.01).结论 超声联合微泡诱导VSMCs凋亡的机制可能与细胞内游离Ca2 浓度增加、Bax蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达降低有关.     

不同辐照模式聚焦超声诱导人胰腺癌细胞凋亡的量效关系

目的 探讨不同辐照模式聚焦超声诱导人胰腺癌细胞凋亡的最佳辐照方案。方法 对人胰腺癌细胞系PaTu 8988t细胞悬液进行聚焦超声辐照:第1组为空白对照组,第2、3组采用脉冲辐照模式,第4、5组采用连续辐照模式,各组辐照剂量通过改变辐照时间来改变。以流式细胞仪检测辐照后24 h肿瘤细胞凋亡率及细胞死亡率。结果 超声辐照后各组的细胞悬液最高温度分别为28.00℃、(42.20±2.17)℃、(50.80±0.84)℃、(55.80±2.17)℃、(65.20±3.11)℃,各组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。各辐照组的细胞凋亡率为(0.56±0.15)%、(1.28±0.16)%、(1.84±0.29)%、(5.74±1.15)%、(2.00±0.84)%,细胞死亡率为(3.28±0.59)%、(4.60±0.47)%、(8.64±2.69)%、(41.12±15.91)%、(49.70±8.02)%,各组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 聚焦超声辐照剂量在接近热凝固温度阈值时,采用连续辐照模式可获得较高的细胞凋亡率及细胞死亡率。     

超声介导肿瘤免疫治疗的研究进展

近年来,较多研究证实超声可介导肿瘤免疫治疗。高强度聚焦超声在破坏肿瘤组织的同时可导致机体在原位产生肿瘤碎片,该碎片可作为免疫系统的抗原,形成原位疫苗诱导机体产生全身的免疫反应。以微泡为载体的超声靶向微泡破坏技术介导免疫调节佐剂靶向传递到肿瘤细胞或免疫细胞,不仅可以增强机体的全身免疫应答,提高肿瘤免疫治疗的疗效,还可以减少免疫调节佐剂用量,减轻毒副作用。本文拟对超声介导肿瘤免疫治疗的研究进展进行综述,并讨论其应用潜力及面临的挑战。     

正交设计法优化超声联合微泡诱导人前列腺癌细胞凋亡的研究

目的采用正交实验设计,探讨超声联合微泡诱导人前列腺癌细胞的凋亡的最优参数组合。方法选定超声功率、辐照时间、微泡/细胞悬液体积比三个因素,又分别按超声功率15、20、25、30 mW/cm2,辐照时间30、60、90、120 s和微泡/细胞悬液体积比10%、20%、30%、40%,每因素四个水平设定正交设计表,按正交设计表进行超声辐照,辐照后细胞继续培养24 h,用流式细胞仪进行细胞凋亡检测。结果对细胞凋亡的影响因素,超声功率>微泡/细胞悬液体积>辐照时间;各因素水平影响:超声功率:15 mW/cm2>25 mW/cm2>20 mW/cm2>30 mW/cm2,辐照时间:30 s>60 s>120 s>90 s,微泡/细胞悬液体积:20%>10%>30%>40%。结论超声联合微泡诱导人前列腺癌细胞凋亡最佳组合为超声功率15 mW/cm2,辐照时间30 s,微泡/细胞悬液体积比20%。     

超声辐照联合微泡转染短发卡状重组质粒诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡的研究

目的探讨超声辐照联合微泡对靶向存活素的短发卡状重组质粒（survivin—shRNA）的转染增效作用及其安全性,分析其凋亡诱导效应和增殖抑制作用。方法将荷人宫颈癌（Hela）裸鼠18只随机分为3组,每组6只。1组：质粒＋超声辐照组,注入质粒溶液后予以超声辐照;2组：质粒＋微泡＋超声辐照组,注入质粒及微泡复合物后辐照;对照组：不予任何处理。对组织样本行冰冻切片、组织学检查、转染率检测。采用免疫组化SABC法检测移植瘤增殖细胞核抗原（PCNA）及survivin蛋白在各组肿瘤标本中的表达,测定凋亡指数（AI）和增殖指数（PI）。结果2组的移植瘤内荧光表达率显著高于对照组、1组（P〈0．01）;裸鼠其他器官组织中未观察到基因表达,且未观察到明显的组织损伤;PCNA及survivin蛋白表达下降,AI明显升高,PI明显减少,与对照组及1组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论超声辐照联合微泡能显著增强基因转染效率,无明显副作用,联合Survivin—shRNA能明显诱导裸鼠体内肿瘤凋亡,抑制细胞增殖。