磷酸化黏着斑激酶在结肠癌中表达及意义

目的:观察磷酸化黏着斑激酶(phosphorylatedfocaladhesionkinase,phospho-FAK)在结肠癌组织和对应癌旁组织中的表达,探讨其在结肠癌发病的可能机制.方法:采用Westernbloting方法检测20例新鲜结肠癌及相对应的癌旁组织FAK表达水平,并在调平每对组织FAK的含量后再进行FAKTyr397磷酸化蛋白的检测.结果:20例结肠癌组织FAK阳性表达率为95%,对应癌旁组织FAK阳性表达率为60%(c2=5.16,P<0.05);癌组织表达平均值为0.482±0.150,癌旁表达平均值为0.269±0.015(t=6.39,P<0.01).20例结肠癌组织18例有FAKTyr397磷酸化蛋白表达,表达率为90%,而对应癌旁组织仅有4例有FAKTyr397磷酸化蛋白表达,表达率为20%(c2=17.1,P<0.01);癌组织表达平均值为0.385±0.021,癌旁表达平均值为0.110±0.005(t=54.23,P<0.01).结论:FAK特别是FAKTyr397磷酸化蛋白的表达水平增加在结肠癌的发生、发展中可能起重要作用.     

粘着斑激酶及磷酸化粘着斑激酶在结肠癌中的表达及其临床意义

目的研究粘着斑激酶(FAK)和磷酸化粘着斑激酶(phospho-FAK,Tyr397)在结肠癌中的表达水平及其与侵袭和转移的关系.方法用免疫组织化学S-P法检测45例结肠癌和对应癌旁组织的FAK和磷酸化FAK(Tyr397)的表达.结果癌与癌旁组织FAK表达率分别为82.22%(37/45)和28.89%(13/45),磷酸化FAK(Tyr397)表达率分别为66.78%(30/45)和26.78%(12/45),两者比较差异有显著性(P值均＜0.01).癌组织中FAK表达率在分化程度(P＜0.05)、浸润深度(P＜0.01)和淋巴结转移(P＜0.05)中有显著性差异,磷酸化FAK(Tyr397)在分化程度(P＜0.01)、浸润深度(P＜0.05)和淋巴结转移(P＜0.01)中也有显著性差异,FAK和磷酸化FAK(Tyr397)在年龄(P>0.05)、性别(P>0.05)及远处转移(P>0.05)中差异无显著性.结论结肠癌中FAK和磷酸化FAK(Tyr397)的表达水平明显升高,与分化程度、浸润、淋巴结转移相关.     

蛋白激酶B在胃癌中的表达及其生物学意义

目的研究丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（Akt）在胃癌中的表达、活化情况及其与血管内皮生长因子C（VEGF—C）的关系，以初探Akt表达和活化的生物学意义及其可能的机制。方法采用RT—PCR法检测20例新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中Akt1、Akt2和Akt3 mRNA的表达；Western印迹法检测Akt和磷酸化Akt（pAkt）蛋白的表达；免疫组化检测pAkt蛋白和VEGF-C在55例胃癌配对组织中的原位表达。结果20例胃癌及相应癌旁正常组织中Akt1、2、3mRNA的表达阳性率皆为100％，且三者在癌和正常组织中的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。Western印迹显示Akt蛋白在胃癌组织中的表达水平为正常组织的2．7倍（P〈0．001），而pAkt蛋白的表达水平为癌旁正常组织的4．1倍（P％0．01）。免疫组化分析表明，pAkt表达于67．3％（37／55）的胃癌组织，且较高表达于组织分化较差（X^2=9．751，P％0．01）和TNM分期较晚（X^2=7．684，P〈0．05）者；VEGF—C在胃癌组织中的表达阳性率为61．8％（34／55），其表达与肿瘤的TNM分期（X^2=9．298，P〈0．01）及淋巴结转移（X^2=7．605，P〈0．05）密切相关，统计分析表明，pAkt与VEGF—C的表达呈显著性正相关（Pearson r=0．524，P〈0．05，Spearman，rho=0．747，P〈0．01）。结论Akt及pAkt蛋白特异性过表达于胃癌组织，可能是蛋白翻译水平和（或）代谢水平改变的结果。Akt蛋白的磷酸化可能促进胃癌细胞的恶性转化和淋巴结转移，VEGFC可能在其中发挥重要的介导作用。     

Ezrin蛋白在结肠癌组织中的表达及意义

目的进一步探讨结肠癌的发生、发展机制。方法应用免疫组织化学染色法检测69份结肠癌组织及其对应癌旁良性组织、23份转移淋巴结组织中Ezrin蛋白、Ki-67蛋白表达,分析Ezrin蛋白表达与结肠癌临床病理特征及Ki-67蛋白表达的关系。结果Ezrin、Ki-67蛋白在结肠癌组织及转移淋巴结组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织（P均〈0．01）,Ezrin蛋白在结肠癌组织中的表达与组织分化程度及有无淋巴结转移、浆膜侵犯有关（P均〈0．01）;Ezrin蛋白与Ki-67蛋白表达呈显著正相关,P〈0．05（r=0．317）。结论Ezrin蛋白在结肠癌发生、发展中起重要作用;此为结肠癌的分子靶向治疗提供了依据。     

抑癌基因在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

应用免疫组化SP法检测35例肝细胞肝癌（HCC）患者癌组织及癌旁组织中抑癌基因PTEN蛋白的表达水平。结果显示，HCC组织中PTEN蛋白阳性率和阳性强度均明显低于癌旁组织（P〈0．01）；PTEN蛋白表达与HCC的分化程度密切相关（P〈0．05）．与癌栓形成有关（P〈0．01）。提示PTEN异常表达在HCC发生、发展过程中可能起重要作用．其表达水平可作为反映HCC进展和预后的生物学指标。     

纤维连接蛋白对人结肠癌细胞侵袭力的影响

目的研究纤维连接蛋白（fibronectin，FN）对人结肠癌细胞侵袭力的影响，并探讨其中的信号传导机制。方法以递增浓度的FN刺激结肠癌细胞株Colo320，以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测结肠癌细胞内黏着斑激酶（focal adhesion kinase，FAK）第397位酪氨酸（tyr-397）磷酸化的状况．以改良Boyden小室法检测相应的细胞侵袭力变化。设计反义寡核苷酸阻断FAK蛋白质表达，再次观察接受FN刺激后．结肠癌细胞内FAK tyr-397磷酸化状况及细胞侵袭力的改变。结果FN能够促进Colo320 FAK tyr-397磷酸化，在一定范围内具有剂量依赖性。FN浓度达10nmol／L时．此作用最显著，继续增加FN浓度．FAK tyr-397磷酸化不再呈现继续增强趋势．当浓度达到100nmol／L时，磷酸化程度反而有所下降；FN可以增强细胞侵袭力，同样在一定范围内具有剂量依赖性；反义寡核苷酸干预后．结肠癌细胞内FAK tyr-397磷酸化及细胞侵袭力均有显著降低（P〈0.01）。结论FN可以有效增强结肠癌细胞的侵袭力，其作用是通过FN—FAK信号通路实现的，FAK的活性形式是其酪氨酸位点的磷酸化．阻断FAK的表达町以减弱FN促进细胞侵袭的作用。     

抑癌基因PTEN在胃癌中的表达及其临床意义

应用免疫组织化学SP法检测68例胃癌组织及33例癌旁正常组织中张力蛋白同源物基因（PTEN）蛋白的表达水平。结果癌旁正常组织中第10号染色体缺失的磷酸酶和PTEN蛋白阳性表达率为100％，胃癌中PTEN表达阳性率为61．8％；PTEN表达与胃癌的分化程度高低、浸润深度、是否有淋巴结转移和临床分期关系密切（P〈0．01，〈0．05），与患者年龄、肿瘤部位无关（P〉0．05）。PTEN异常表达可为胃癌诊断和判断其生物学特性提供可靠的指标。     

基质金属蛋白酶-2和环氧合酶-2在胃癌中的表达及意义

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在胃癌组织中的表达以及相互关系。方法收集外科胃癌手术患者30例，标本分别取自胃癌组织、癌旁3cm和6cm组织，同时取10例胃镜检查正常者的胃黏膜组织作为对照，用免疫组化法检测组织中COX-2和MMP-2蛋白的表达情况。结果30例胃癌组织中，26例COX-2表达呈阳性，而10例正常组织则无表达，两者间差异有统计学意义（P〉0．01）。30例胃癌组织中MMP-2的表达阳性率为83．33％（25／30），癌旁3cm组织为66．7％（20／30），癌旁6cm组织为3．3％（9／30），10例正常组织中仅2例有表达，癌旁6cm组织与正常组织比较差异无统计学意义（P〉0．05），胃癌和癌旁3cm组织与正常组织比较差异有统计学意义（P〈0．05）。在胃癌患者的癌旁3cm组织中，MMP-2、COX-2蛋白表达之间存在显著正相关（P〈O．01）。结论胃癌组织中有COX-2、MMP-2的高表达，且两者之间的表达强度具有等级相关性。COX-2蛋白可能通过诱导MMP-2蛋白的表达上调，增加胃癌细胞的侵袭力，从而成为其促进胃癌浸润、转移的途径之一。     

甲基转移酶3B基因在胰腺癌中的表达

目的检测胰腺癌组织中甲基转移酶3B（DNMT3B）基因表达,分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。方法应用实时定量PCR和免疫组织化学方法检测42例胰腺癌组织及相应癌旁组织、10例正常胰腺组织中DNMT3B mRNA和蛋白表达。结果胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织DNMT3B mRNA表达量分别为9．4±5．9、1．02±0．71和0,相差非常显著（P〈0．05）;DNMT3B蛋白表达阳性率分别为83．3％、14．3％和10．0％,相差也非常显著（P〈0．01）。DNMT3B mRNA表达与临床分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移密切相关（P〈0．05或P〈0．01）;DNMT3B蛋白表达与肿瘤的部位、淋巴结转移有关（P〈0．01或P〈0．05）;DNMT3B mRNA和蛋白表达均与年龄、性别、神经浸润、肿瘤大小、血CEA和CA19—9浓度无关。结论胰腺癌DNMT3B mRNA和蛋白高表达提示胰腺癌已发生淋巴结转移,预后较差。     

Brgl在结肠癌中的表达研究

Brgl是一种抑癌基因,参与染色质重塑过程,在细胞增殖、分化过程中起重要作用。研究发现Brgl参与了某些恶性肿瘤的发生。目的：检测Brgl在结肠癌中的表达,初步探讨Brgl与结肠癌的关系。方法：应用免疫组化法检测30例结肠癌、30例结肠腺瘤、20例癌旁组织中Brgl的表达情况。结果：Brgl在结肠癌组织中的表达强度显著高于结肠腺瘤和癌旁组织（P〈0．05）,结肠腺瘤与癌旁组织中的表达强度差异无统计学意义（P=0．05）。Brgl在结肠癌、结肠腺瘤、癌旁组织中的阳性表达率分别为86．7％、60．0％、25．0％,结肠癌和结肠腺瘤组织Brgl阳性表达率显著高于癌旁组织（P〈0．05）,结肠癌组织Brgl阳性表达率显著高于结肠腺瘤组织（P〈0．05）。结论：Brgl可作为判断结肠肿瘤分化程度的生物学指标。     

p28 GANK在结肠癌中的表达及其意义

背景:结肠癌是消化系统常见恶性肿瘤之一。p28GANK促进人类多种肿瘤恶性演变,然而其在结肠癌中的作用尚未明确。目的:探讨p28GANK在结肠癌中的表达及其意义。方法:纳入2006年1月～2007年2月浙江省湖州市中心医院收治的结肠癌患者78例,应用免疫组化法检测患者癌组织及其相应癌旁非癌组织标本p28GANK的表达情况,分析其在结肠癌和癌旁组织中的表达差异,以及p28GANK表达与结肠癌临床病理特征和预后的关系。结果:p28GANK在结肠癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织[69.2%(54/78)对15.4%(12/78)](P<0.01)。结肠癌组织p28GANK表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移、Dukes分期相关(P<0.05)。p28GANK阳性表达与结肠癌患者术后生存期缩短显著相关(P<0.01)。结论:p28GANK表达与结肠癌恶性程度相关,其高表达提示患者预后不良。     

FAK在食管癌组织中的表达及临床意义

目的检测局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)在食管癌组织及正常食管组织中的表达,探讨FAK在食管癌发生、发展中的意义。方法采用免疫组化SP法检测FAK在40例食管癌组织、40例正常食管组织中的表达情况。结果免疫组化结果提示:40例食管癌组织中有16例(40.0%)FAK呈强阳性染色,15例(37.5%)FAK呈弱阳性染色,9例(22.5%)FAK表达缺失;40例正常食管组织中,3例(7.5%)FAK呈强阳性染色,7例(17.5%)FAK呈弱阳性染色,30例(75.0%)FAK表达缺失,FAK在食管癌组织的阳性表达率(77.5%)显著高于正常食管组织的阳性表达率(25.0%),两组比较差异有统计学意义(P0.05)。FAK的表达与食管癌患者的性别、年龄无关(P0.05),而与分化程度相关(P0.05),低分化食管癌组FAK蛋白表达高于高中分化组。结论 FAK在食管癌组织中表达增高,其表达量与食管癌的分化程度有关,FAK在正常食管组织中表达缺失或减少。FAK可能与食管癌的发生、发展有重要关系,其表达的高低有可能作为食管癌预后判断的一种新指标。     

D-二聚体测定在结肠癌中的临床意义

[目的]观察D-二聚体测定在结肠癌中的临床意义。[方法]62例接受治疗的结肠癌患者为观察组,以同期体检的健康人群为对照组;观察2组患者D-二聚体阳性率,观察组中发生转移及未发生转移患者化疗前的D-二聚体测定结果比较、化疗前后D-二聚体变化与疗效之间的关系、临床分期与D-二聚体含量之间的关系。[结果]观察组D-二聚体检查阳性率为46.77%,对照组为0%,观察组患者D-二聚体检查阳性率明显高于对照组(P<0.05)。观察组中未发生转移、发生周围淋巴结转移、发生远处脏器转移患者D-二聚体含量分别为(0.23±0.09)mg/L、(1.51±1.45)mg/L、(2.23±1.29)mg/L,三者之间比较差异有统计学意义(P<0.05);结肠癌Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期D-二聚体含量分别为(0.27±0.08)mg/L、(1.16±0.36)mg/L、(2.01±0.82)mg/L,各分期D-二聚体含量比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组化疗后完全缓解+部分缓解患者D-二聚体变化值为(-0.43±0.21)mg/L,较治疗前显著性下降(P<0.05);病变稳定患者为(0.08±0.09)mg/L,与治疗前无明显改变(P>0.05);病变进展患者为(0.92±0.34)mg/L,较治疗前显著升高(P<0.05)。[结论]D-二聚体含量与结肠癌发病情况、是否发生转移及转移情况、疾病临床分期、预后等有着密切的联系,应灵活运用并掌握该项检查。     

肾细胞癌组织中内皮抑素、VEGF、MVD的表达变化及意义

目的观察肾细胞癌（RCC）组织中内皮抑素、VEGF、微血管密度（MVD）表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SABC法检测50例肾细胞癌（RCC）及30例正常肾组织的内皮抑素、VEGF、CD34。结果内皮抑索和VEGF在癌旁正常肾脏组织中的阳性表达率分别为37％和20％,在肾癌组织中阳性表达率分别为76％和74％,在肾癌组织中的表达强度显著高于癌旁正常肾脏组织（P均〈0．05）。内皮抑素和VEGF表达水平在高分期的病例中呈高表达,与低分期的病例比较,P〈0．05。RCC组织中的MVD均值为（35．62±11．38）条／HP,明显高于癌旁正常肾脏组织的（18．71±9．53）条／HP,P〈0．01。临床分期为Ⅲ～Ⅳ期RCC组织MVD为（41．29±10．65）条／HP,显著高于Ⅰ－Ⅱ期的（24．74±7．83）条／HP,P〈0．01。内皮抑素和VEGF与MVD的表达有关（P均〈0．05）。结论RCC组织中内皮抑素、VEGF阳性表达率和MVD升高。三者可作为评估RCC恶性程度、转移及预后的重要指标。     

结肠癌转移相关的基因-1在结肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨与结肠癌转移相关的基因-1（MACC1）在结肠癌中的表达及其与结肠癌发生、浸润、转移的关系。方法应用免疫组化SP法检测20例癌旁正常结肠黏膜组织、22例结肠腺瘤组织和40例结肠癌组织中MACC1蛋白的表达,分析各组之间表达的差异及其与结肠癌临床病理特征之间的关系。结果结肠癌组MACC1的阳性表达率显著高于癌旁正常结肠黏膜及腺瘤性息肉组（90．0％比20．0％,27．3％）,P〈0．001。MACC1表达强度与患者的性别、年龄、淋巴结转移情况、肿瘤直径大小及分化程度无相关性,与结肠癌浸润深度、TNM分期及腹腔播散和远处转移有关,并随着结肠癌浸润程度的加深、TNM分期的进展及发生腹腔播散和远处转移,MACC1的表达强度明显增高（P〈0．05）。结论MACC1的过表达在结肠癌的发生、浸润及转移过程中起重要作用。     

LOX、VEGF在胃癌进展中的作用关系

目的探讨赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)、血管内皮因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在胃癌进展中的作用关系。方法收集手术切除的新鲜胃癌组织65例,采用Western blotting方法检测胃癌组织中的LOX、VEGF蛋白表达,并比较二者在T1T2与T3T4胃癌组织、有无淋巴结转移胃癌组织中的关系。结果 (1)LOX在T3T4胃癌中的相对表达量为0.6003±0.1279,在T1T2胃癌中的相对表达量为0.4278±0.1437,差异有统计学意义(P0.05);(2)VEGF在T3T4胃癌中的相对表达量为0.6975±0.1639,在T1T2胃癌中的相对表达量为0.4263±0.1128,差异有统计学意义(P0.05);(3)LOX在伴有淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.6827±0.1987,在无淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.4235±0.1763,差异有统计学意义(P0.05);(4)VEGF在伴有淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.6769±0.1659,在无淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.4128±0.1471,差异有统计学意义(P0.05);(5)在T1T2和T3T4胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平呈正相关(r=0.735,P0.05),在有淋巴结转移和无淋巴结转移的胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平也呈正相关(r=0.914,P0.05)。结论 T3T4胃癌中LOX与VEGF的表达水平明显高于T1T2胃癌,在有淋巴结转移的胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平明显高于无淋巴结转移的胃癌组织中,且LOX与VEGF表达呈正相关;LOX与VEGF在胃癌的进展中有促进作用,并且相互协同。     

CAV-1在结直肠癌患者肠黏膜中的表达及其意义探讨

[目的]研究质膜微囊蛋白1（caveolin-1,CAV-1）在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）患者大肠黏膜中的表达,并初步探讨其临床意义.[方法]在肠镜室募集无器质性肠道疾病患者12例、结直肠癌患者16例,通过结肠镜分别在无器质性肠道疾病患者的乙状结肠处和结直肠癌患者的病变明显处取材,每例取3块.获取的标本经免疫组织化学染色,检测CAV-1在结肠黏膜中的表达.[结果]免疫组织化学法检测CAV-1在无器质性肠道疾病患者和结直肠癌结肠黏膜中的表达发现,CAV-1蛋白阳性染色主要位于胞浆,胞核少见或未见染色;在无器质性肠道疾病患者的结肠黏膜组织胞浆中仅有少量阳性染色点,而CAV-1在结直肠癌组织中的表达明显,染色呈现颗粒状.无器质性肠道疾病患者组CAV-1表达的阳性指数为（12.87±2.76）,结直肠癌组的表达明显增强,其阳性指数为（34.42±5.44）,较无器质性肠道疾病患者表达明显增强（P＜0.01）.[结论]CAV-1在直结肠癌黏膜中高表达,CAV-1是结直肠癌发病的促使因子.     

大肠癌组织中TAMs、TGF—β1表达与上皮间质转化的关系

目的探讨大肠癌组织中肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）、转化生长因子β1（TGF—β1）表达与上皮间质转化（EMT）的关系。方法采用免疫组化法检测80例大肠癌及癌旁正常组织中CD68标记的TAMs、TGF—β1、上皮标志物E．cadherin、间质标志物Vimentin蛋白。结果大肠癌组织中TAM计数为（30．6±8．2）个／HP,TGF—β1蛋白阳性58例（72．5％）,E-cadherin蛋白阳性31例（38．8％）,Vimentin蛋白阳性38例（47．5％）;而癌旁正常组织中分别为（16．4±7．2）个／HP、23例（28．8％）、64例（80．0％）、0例。两者比较,P均〈0．01。TAMs计数及TGF-β1、E—cadherin、Vimentin蛋白表达与大肠癌分化程度、浸润深度、Duke分期和淋巴结转移有关（P均〈0．05）。TAMs计数、TGF-β1与E—cadherin蛋白表达呈负相关（r值分别为-0．64、-0．39,P均〈0．01）,而与Vimentin蛋白表达成正相关（r值分别为0．62、0．33,P均〈0．05）。结论大肠癌组织中TAMs浸润及TGF—β1高表达所造成的炎症环境可能与大肠癌的EMT有关。