一种消除免疫组织化学非特异性染色的简易方法

免疫组织化学技术因具有操作简单、敏感性高、特异性强 ,又能将形态、代谢、机能密切结合起来等优点 ,已广泛用于临床病理诊断、科研及多种基础学科的研究。然而 ,操作过程中常遇到的非特异性染色 ,往往会对实验结果的判定造成严重影响 ,从而限制了免疫组织化学技术的广泛应用。现结合我们的实验过程 ,介绍一种简易的非特异性染色消除方法。1　材料与方法1 .1　标本与试剂 :应用免疫组织化学SP法检测涎腺 (包括腮腺、颌下腺、唇腺 )中的雌激素受体(estrogenreceptor ,ER)。所有标本来自囊肿或良性肿瘤旁正常组织 ,常规固定包埋。主要试剂 …     

免疫组织化学染色技术的应用体会

目的 探讨免疫组织化学染色技术的应用.方法 免疫组织化学染色技术是一种多步骤、多因素决定的实验方法,有很多干扰因素,无论是组织取材、固定、制片、抗原暴露及修复、液体及抗体的配制、修复温度、显色等等因素都会影响免疫组织化学染色.结果 提高免疫组织化学染色技术,是为了制作出优良的免疫组织化学切片,提高病理诊断水平.结论 免疫组织化学染色技术特异性强、灵敏度高、定位准确等优点应得到最为广泛的推广和应用.     

浆细胞的组织化学染色

常规HE染色对典型的浆细胞根据形态及着色特点不难确认。但对于不典型的或为了观察研究其形态结构特点，需用特殊方法显示。以往一般选用天青11伊红染色或Unna甲基蓝伊红染色法，胞核和胞浆都为蓝色，前者为深蓝，后者为浅蓝。然而这两种染色的结果都不够分明。我们改用Feulg6n一亚甲蓝染色法，染色的结果胞核为红色，胞浆成绿色，这样对比度就十分明显，容易辨认；该染色法尤其适合于显微细胞分光光度计测定和彩色图象分析法。具体方法如下。毛试剂配制1．110％中性福尔马林或Bouin氏液l．22％Schat试剂蒸馏水192M浓盐酸stul亚硫酸钠sg…     

微波炉用于免疫组织化学染色的体会

免疫组织化学在病理技术上作为辅助诊断技术已广泛应用,特别是肿瘤病理的诊断和鉴别诊断。目前免疫组织化学染色最广泛的方法是：链菌亲合素—过氧化酶复合物法（Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ－ｐｅｒｏｘｄａｓｅｃｏｎｊｕｇａｔｅｄＭｅｔｈｏｄ）,简称Ｓｐ法。该法具有...     

自动免疫组织化学染色与手工免疫组织化学染色质量的对比观察

由于传统手工免疫组化实验存在可复性、一致性较差的缺点 ,在一定程度上阻碍了免疫组化技术在临床病理学上的应用。为了找出使用自动免疫组化 (ＩＨＣ)染色与手工免疫组化染色之间制片质量的差异 ,我们进行了 14种抗体计 6 9片的自动ＩＨＣ染色与手工ＩＨＣ染色对比观察。1　材     

全自动免疫组织化学染色技术的应用

目的：探讨全自动免疫组织化学染色技术在基层医院的应用。方法：随机选取常见肿瘤50例,经包埋、切片后分为2组,分别采用全自动免疫组化机与手工操作2种免疫组化染色方法,显微镜下观察染色结果。结果：免疫组化机染色的组织定位准确,染色强度强,背景清晰,未见切片边缘着色现象。而手工染色虽然组织定位准确,但染色强度强弱不一,背景不清晰,存在非特异性染色,切片边缘着色现象较多,两者比较有显著性差异,均P〈0．05。结论：全自动免疫组织化学染色技术比手工操作染色效果好,易于做到染色标准化。     

大肠癌免疫组织化学染色探讨

大肠癌免疫组织化学染色探讨湖南省长沙市三医院病理科（４１０００２）吕文玲关键词癌胚抗原，大肠癌分类号Ｒ７３５．３自１９６５年Ｇｏｌｄ和Ｆｒｅｃｄｍａｎ报道了癌胚抗原（简称ＣＥＡ）作为一种肿瘤标记物以来，它已被广泛应用于胃肠道及其他器官肿瘤的研究。现将...     

对免疫组织化学染色的几点体会

目前常用的免疫组织化学染色方法有ＡＢＣ法、ＳＰ法和ＬＳＡＢ法等。免疫组化染色已成为科研和临床工作常用方法。为此,我们就近年来该方面的工作介绍以下几点体会。１组织标本、固定液和缓冲液组织标本离体后,应在３０ｍｉｎ之内及时进行固定,所取组织不宜过大,并应...     

牙源性角化囊性瘤骨吸收相关因子组织化学及免疫组织化学双重染色表达

目的：应用组织化学及免疫组化双重染色法研究几种骨吸收相关因子如细胞核因子,κβ受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor-κB ligand, RANKL）、骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、白细胞介素1α（interleukin 1α, IL-1α）、甲状旁腺激素相关蛋白（parathyroid hormone-related protein, PTHrP）和破骨细胞标志物抗酒石酸磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase staining,TRAP）在牙源性角化囊性瘤（KCOT）囊壁组织上的表达特点。方法：20例KCOT石蜡标本连续切片5张,1张HE染色核实诊断,其余4张采用组织化学和免疫组织化学双重染色法,分别检测TRAP、 RANKL、OPG、IL-1α和PTHrP抗体在KCOT囊壁组织上的表达。结果：KCOT囊壁组织上分别有TRAP、RANKL、OPG、IL-1α和PTHrP的阳性表达,其中TRAP和RANKL主要表达在囊壁结缔组织与骨交界面位置。10例有TRAP阳性表达,12例RANKL阳性表达可位于纤维结缔组织内、血管腔周围和上皮层。TRAP和RANKL双阳性表达5例。OPG在囊肿上阳性表达少。IL-1α在上皮层和纤维结缔组织层均有表达,但阳性细胞主要是棘细胞层和表层细胞。PTHrP也可在上皮细胞层和结缔组织层表达。结论：RANKL、IL-1α和 PTHrP等骨吸收相关因子参与调节牙源性角化囊性瘤中破骨细胞的分化和活化,导致骨吸收。     

快速免疫组织化学染色技术

为探索免疫组织化学染以全程最短时间，采用微波技术，用ＥＭＡ、Ｋｅｒａｔｉｎ、Ｄｅｓｍｉｎ、Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ、ＬＣＡ、Ｓ－１００、ＧＦＡＰ７种抗体和ＡＢＣ、ＳＡＢＣ、Ｓ－ＰＫｉｔ，对不同的肿瘤组织进行免疫组化染色，并与常规免疫组化方法比较。结果显示：快速免疫组化全程时间在６０￣８０ｍｉｎ左右；除膜抗原外，其余抗体的染色效果与常规免疫组化相同或更优；生物素化二抗和酶联亲和素试剂盒则以Ｓ－ＰＫｉｔ最好     

淋巴组织免疫组织化学染色方法的探讨

目的:鉴于病理淋巴组织的切片常见组织较硬、细胞脆性大,免疫组织化学染色显色模糊,甚至出现假阴性现象,探讨淋巴组织制片与免疫组化染色的新方法与新思路。方法:采用B-5固定液、软化剂的处理进行石蜡切片、免疫组织化学染色方法进行染色。结果:制出背景清晰、定位准确、反差分明、效果较好的免疫组化染色淋巴组织切片。结论:经B-5固定液固定、软化剂处理过的淋巴组织免疫组化切片能为淋巴组织疾病诊断提供定位准确、阳性明显的抗原表达信息。     

免疫组织化学染色检测乳腺癌石蜡切片ER PR的体会

我科自 1990年开展免疫组织化学常规工作以来 ,重点是乳腺癌雌、孕激素受体检测 ,在方法上使用过ＰＡＰ法、ＡＢＣ法、ＳＰ法。试剂用过浓缩型抗体和既用型抗体。组织上用过冰冻组织及常规石蜡切片。结果是ＰＡＰ法阳性率 83 7% ,ＡＢＣ法 76 5 % ,ＳＰ法 6 7 4% ,冰冻 6 5 3% ,石蜡切片 78 2 %。这些结果同ＤＤＣ法比较存在一定的假阳性、假阴性的情况 ,对患者的进一步治疗有一定的影响 ,为了能更准确的反映病人的受体检测结果 ,现将我们工作中的几点体会 ,归纳如下。1　蒸馏水的选择免疫组化工作要求水质是很严格的 ,每道程序之间都用Ｐ…     

免疫组织化学双重染色法在胰腺损伤研究中的应用

胰腺对消化功能及营养物质的代谢具有重要的调节作用,我们在胰腺损伤的实验研究中,为了观察及辨别胰腺内分泌细胞的损伤情况,采用免疫组织化学双重染色的方法,即在同一张切片上同时显示胰岛中胰高血糖素及胰岛素两种抗原呈不同颜色,有利于观察两种抗原的表达,使分析结果更为准确,现介绍如下。１材料与方法１．１材料胰腺取自灌注固定后的胰腺损伤Ｗｉｓｔａｒ大鼠。一抗Ｇｌｕｃａｇｏｎ（胰高血糖素抗体）、ｉｎｓｕｌｉｎ（胰岛素抗体）、ＫＳ试剂盒均为北京中山生物技术有限公司产品。１．２方法胰腺取出后立即置人 Ｂｏｕｉｎｓ…     

冰冻切片快速免疫组化染色的体会

对于一些软组织肿瘤和一些交界性或肿瘤成分少的上皮性肿瘤在冰冻切片中依靠形态学诊断有时非常困难,免疫组化能有所帮助.但常规免疫组化染色需时较长,不适用于冰冻诊断,我们用的是Enhanced polymerone-step staining(EPOS)法,它是目前国际上用得比较多的方法,文献报告上重复性和稳定性好,对确定和排除肿瘤有明确的辅助诊断作用.     

常规石蜡切片免疫组织化学双标记染色

作者用铁蛋白抗体和α_1-抗胰糜蛋白酶抗体,S-100蛋白抗体和α_1-抗胰糜蛋白酶抗体,对恶性组织细胞增生症瘤组织常规石蜡切片的免疫组化双标记染色进行了探讨。实验步骤简单,结果明确,是一种较为理想的免疫酶双标记染色。     

脊髓后角AchE和ENK酶组织化学及免疫组织化学联合染色法的应用

脊髓胶状质（SG）是一级传入C纤维的投射区。脑啡肽（ENK）和乙酰胆碱酯酶（AchE）在此处分布也十分丰富。与痛觉传递有关的假说及针刺镇痛的机制都涉及到胶状质的ENK能神经元可能对一级传入纤维终未产生突触前抑制作用。     

全自动免疫组织化学染色仪的使用体会

全自动免疫组织化学染色仪以其标准化、操作简便、自动程度高而逐渐被病理学者广泛使用。我科自2007年起引进Lab Vision Autostaines 720自动染色仪,Lab Vision自动染色仪是一部由计算机驱动的自动化液相操作系统,可以兼容