肾小球肾炎患者血清及尿液中一氧化氮合酶测定

目前认为一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈｅａｓｅ，ＮＯＳ）一般有三种［１］，它们在肾脏中的定位已基本阐明［２］。通过测定正常人及两种肾小球肾炎患者血清及尿液中ＮＯＳ水平，来探讨一氧化氮对肾脏疾病的致病机理，以期为肾脏疾病的诊断提供依据，并通过动态观察和调控体内的ＮＯ的合成水平为治疗肾脏疾病提供新的思路。１　材料和方法１．１　研究对象　正常对照组：３０例，男１５例，女１５例，平均年龄２９岁，经全面体格检查及实验室检查表明无各系统疾病的健康人。慢性肾小球肾炎４８例，男２８例，女２０例，…     

急性脑梗死患者血神经肽Y与一氧化氮合酶的关系

目的 观察急性脑梗死(ACI)患者血浆神经肽Y(NPY)、血清一氧化氮合酶(NOS)水平的动态变化,探讨二者的关系及其临床意义.方法 采用前瞻性对照研究的方法.脑梗死(CI)组为大连医科大学附属一院神经科2008年5月至2009年3月的住院患者,共30例(男21例,女9例),年龄(58.07±12.15)岁.首次发病,病程48 h以内,符合中华神经科学会及中华神经外科学会1996年制定的脑梗死诊断标准.排除半年内患急性心肌梗死、周围血管病、感染、肿瘤、严重脏器功能障碍等疾病.对照组均为同期健康体检者,共27例(男15例,女12例),年龄(55.00±11.03)岁.两组具有可比性.采集对照组及CI组(发病48 h内和病后10 d)空腹肘静脉血,用放免法检测NPY水平,化学比色法检测NOS水平.计算责任梗死灶体积,应用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)进行神经功能缺失程度评定.样本间的构成比采用x2检验,组间差别的分析采用t检验,双变量间单因素相关分析采用直线相关分析.结果 ①NPY水平两组差异无统计学意义(P＜0.05).②结构型NOS(cNOS)水平发病48 h内比对照组显著降低,与梗死体积、同期NIHSS评分呈显著负相关(P＜0.05),与NIHSS评分的差值呈显著正相关(P＜0.05).病后10 d比发病48 h内显著升高.③诱导型NOS(iNOS)水平发病48 h内比对照组显著升高(P＜0.05),与梗死体积、同期NIHSS评分呈显著正相关(P＜0.05),与NIHSS评分的差值呈显著负相关(P＜0.05).病后10 d比发病48 h内显著降低(P＜0.05).④CI组NPY水平与cNOS,iNOS水平没有显著相关(P＜0.05).NPY水平的差值与cNOS水平的差值呈显著负相关(P＜0.05).结论 ACI患者血浆NPY水平变化不显著,与病情无明显相关.发病48 h内血清cNOS水平与病情呈显著负相关,iNOS水平与病情呈显著正相关,其水平可以反应CI的严重程度.发病48 h内和病后10 d血浆NPY水平的变化与血清cNOS水平的变化呈显著负相关.     

慢性乙型肝炎患者血清诱导型一氧化氮合酶和超氧化物歧化酶检测的临床意义

目的：探讨慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒DNA（HBV‐DNA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬酸氨基转移酶（AST）浓度与一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和超氧化物歧化酶（SOD）水平的相关性。方法选取轻度（24例）、中度（30例）、重度（18例）慢性乙型肝炎患者和健康体检者（30例）分别设为A、B、C、D组,运用实时荧光定量PCR技术和化学酶分析法检测血清HBV‐DNA、ALT、AST、NO、iNOS和SOD水平。结果D组与A、B、C组之间的ALT、AST、NO、iNOS和SOD水平存在显著性差异（P＜0．05）。ALT水平与NO、iNOS水平呈正相关（r分别为0．487、0．521,P＜0．05）,与SOD水平呈负相关（r＝－0．574,P＜0．05）。AST水平与NO、iNOS水平呈正相关（r分别为0．453、0．545,P＜0．05）,与SOD水平呈负相关（r＝－0．484,P＜0．05）。结论在慢性乙型肝炎患者中,随着ALT和AST水平升高,NO和iNOS水平也升高,SOD水平下降,表明与肝细胞受损有关。     

急性脑血管病患者血清中一氧化氮和一氧化氮合酶含量变化

目的观察脑血管病患者急性期及恢复期血清中一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的含量,以及两者间的关系,以探求NO和NOS在急性脑血管病中的作用。方法应用硝酸盐还原酶法测定NO。NOS测定是根据体内L-精氨酸`经NOS催化下与氧反应生成NO和胍氨酸的原理,用每毫升血清每分钟生成1nmolNO为一个酶活力单位来表示。结果脑血管病患者急性期组血清NO和NOS水平明显水高于恢复期组及对照组,NO与NOS呈正相关;脑梗死恢复期组NO无明显变化,而NOS降低,NO与NOS相关性不显著。结论脑血管病患者急性期血清NO和NOS含量的升高,促进了疾病的发生和发展。     

高原肺水肿患者血清一氧化氮、一氧化氮合酶及内皮素浓度的变化

目的　观察高原肺水肿患者血清中一氧化氮、一氧化氮合酶及内皮素浓度的变化 ,探讨一氧化氮、一氧化氮合酶、内皮素浓度对高原肺水肿发生、发展的影响。方法　对 34例急进高原的高原肺水肿患者进行治疗前、治愈后血清中一氧化氮、一氧化氮合酶及内皮素含量测定 ,并与 2 0例高原正常健康人作对照研究。结果　高原肺水肿患者血清中一氧化氮、一氧化氮合酶含量在治疗前显著低于治愈后和对照组 (P <0 0 1) ,内皮素含量治疗前显著高于治愈后和对照组 (P <0 0 1) ,治愈后血清中一氧化氮、一氧化氮合酶及内皮素水平与对照组无明显差异 (P >0 0 5 )。结论　高原肺水肿血清中NO、NOS水平降低 ,ET 1水平增高是造成高原肺水肿的重要原因之一 ,其浓度的变化对高原肺水肿的发生、发展及转归产生一定的影响     

OSAHS患者血清一氧化氮和一氧化氮合酶测定及其与肥胖的关系

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)水平的变化及其与肥胖指数的相关性。方法选择41例男性OSAHS患者为OSAHS组,并按体重指数(BM I)分为OSAHS伴肥胖组(26例)和OSAHS不伴肥胖组(15例);另选16例单纯肥胖患者和20名健康人,比较各组间血清NO、NOS的动态变化。结果与健康对照组比较,OSAHS 2组患者NO水平明显降低(P<0.01),而单纯肥胖组差异无统计学意义(P>0.05);OSAHS伴肥胖组NO水平比不伴肥胖组低,但差异无统计学意义(P>0.05),各组间NOS差异均无统计学意义(P>0.05)。结论OSAHS患者存在着血管内皮细胞的损伤,但并不因肥胖使其损伤加重。     

OSAHS患者血清一氧化氮和一氧化氮合酶测定及其与肥胖的关系

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者血清一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平的变化及其与肥胖指数的相关性。方法选择41例男性OSAHS患者为OSAHS组,并按体重指数（BMI）分为OSAHS伴肥胖组（26例）和OSAHS不伴肥胖组（15例）;另选16例单纯肥胖患者和20名健康人,比较各组间血清NO、NOS的动态变化。结果与健康对照组比较,OSAHS 2组患者NO水平明显降低（P〈0.01）,而单纯肥胖组差异无统计学意义（P〉0.05）;OSAHS伴肥胖组NO水平比不伴肥胖组低,但差异无统计学意义（P〉0.05）,各组间NOS差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论OSAHS患者存在着血管内皮细胞的损伤,但并不因肥胖使其损伤加重。     

诱导型一氧化氮合酶在胎膜早破胎膜组织中的表达及意义

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在胎膜早破胎膜组织中的表达及意义。方法：选择临产前行剖宫产终止妊娠的孕妇60例,其中早产胎膜早破组（pPROM）、足月胎膜早破组（tPROM）作为研究组,正常足月妊娠组为对照组,每组各20例,采用免疫组织化学染色法检测胎膜组织中iNOS的表达,采用苏木素-伊红染色检测胎膜的炎症情况,分析胎膜组织中iNOS的表达与绒毛膜羊膜炎的关系。结果：3组胎膜中均有一定程度iNOS表达,iNOS主要表达于炎症细胞中,pPROM组胎膜中的iNOS表达水平高于对照组（P〈0.01）。绒毛膜羊膜炎孕妇胎膜中的iNOS表达水平高于非绒毛膜羊膜炎孕妇（P〈0.01）。结论：iNOS在pPROM胎膜组织中的表达水平较高,这种高表达可能与绒毛膜羊膜炎的发生有关。     

角叉菜胶炎性痛及痛过敏诱导大鼠脊髓后角神经元一氧化氮合酶变化的时间特征

目的：观察角叉菜胶炎性痛及痛过敏中脊髓后角一氧化氮合酶的变化，特别是其时间特征。 方法：实验于2004-05／08在河北工程学院医学院生理学实验室完成。选用清洁级健康雄性Wistar大鼠40只，随机分为5组，每组8只：对照组：不加任何处理。注射角叉菜胶12h组，注射角叉菜胶24h组，注射角叉菜胶48h组，注射角叉菜胶72h组，大鼠右后掌足跖部皮下注射30异／L角叉菜胶0．1mL建立炎性痛模型，分别在注射角叉菜胶后12，24，48，72h取材。应用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶组织化学法测定脊髓一氧化氮合酶表达。应用光学显微镜下观察并计数脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞数目；应用HPLAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统软件测定尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞的灰度值，用于定量分析染色深度，灰度值与染色深度呈反比。结果：纳入动物40只，均进入结果分析。①L5脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞数量的变化：对照组可见少量尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞，注射角叉菜胶后12，24，48h，无论是同侧还是对侧的脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内，阳性细胞数目均较对照维增加，24h达到高峰，以后逐渐减少，至72h，两侧均恢复至对照水平。此外，两侧脊髓后角比较，在注射角叉菜胶后各时间点，注射侧的阳性细胞数目均比对侧多。②L5脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板层尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞染色深度的变化：注射角叉菜胶后，双侧脊髓后角尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞染色均逐渐加深，至24h达高峰，以后逐渐降低。统计结果表明，12，24，48h组阳性细胞染色深度均较对照组明显加深（即灰度值降低），其中24h加深最显著；至72h时，注射部位对侧脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板层内的阳性细胞染色已恢复至对照组水平，而同侧尚未降至对照组水平。两侧比较，发现注射角叉菜胶后各时间点，注射同侧均较对侧阳性细胞染色加深。 结论：角叉菜胶炎性痛及痛过敏中，脊髓后角一氧化氮合酶活性增强，且这种增强有一定的时间变化特征。     

冠心病患者血清一氧化氮及其合酶水平的变化及临床意义

本测定冠心病的一氧化氮（NO）及其合酶（NOS）水平，探讨它们在冠心病（CHD）中的作用及临床意义。     

单侧输尿管梗阻后大鼠肾脏诱导型一氧化氮合酶的表达及其意义

如何尽快诊断急性上尿路梗阻病变并解除梗阻，以及促进梗阻后肾功能的恢复一直是医学界的重要研究课题。研究急性上尿路梗阻病变的常用模型为单侧输尿管梗阻(UUO)模型，本研究旨在观察iNOS在UUO大鼠肾脏的表达及意义。     

缺氧脑组织与一氧化氮及其合酶

目的：在脑缺血性损伤过程中，一氧化氮发挥着复杂的作用，多途径参与了生理和病理过程，许多实验的结论看似矛盾，但经过人们大量和细致的分析，已可以得出一些大致的规律性认识。资料来源：应用计算机检索Medline 1987-01／2001-03有关一氧化氮及其合酶与缺氧脑组织关系的献，检索词“Hypoxla，Nitricoxide，Nitric oxide synthase”，并限定语言种类为English。资料选择：对所选献进行初审，排除综述类献及Meta分析，然后全查找余下的献。质量评价主要考察资料的真实性，实施过程是否严格，统计学分析是否合理。资料提炼：共检索28篇关于一氧化氮及其合酶与缺氧脑组织关系的献，20篇献符合纳入标准，排除的8篇章中，4篇是因重复的同一实验，其他4篇为小样本实验结果。资料综合：在脑缺氧过程中一氧化氮起着复杂而关键的作用，在脑缺氧过程中，伴随着一氧化氮的变化。一氧化氮的释放受一氧化氮合酶的调控，一氧化氮合酶的活性与缺氧的相关因子有关。结论：一氧化氮在脑缺氧过程中起着保护与损伤双重作用，其对脑组织损伤或保护取决于脑缺氧的不同时期和一氧化氮局部含量等因素。适量的一氧化氮对脑缺氧有防护作用，而在脑缺血缺氧的大部分时期则应使用诱生型一氧化氮合酶和神经元型一氧化氮合酶的选择性抑制剂抑制一氧化氮的毒性作用。     

大鼠肾缺血后处理血清一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的:探讨后处理在大鼠肾缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)中对血清-氧化氮(NO)及-氧化氮合酶(NOS)的影响。方法:SD大鼠36只,雌雄不拘,随机分为3组。Ⅰ组为假手术组;Ⅱ组为对照组,建立肾I/R模型;Ⅲ组为实验组(即后处理模型),建立缺血模型,于缺血后再灌注前行反复多次的短暂再灌注及停灌注作后处理,Ⅲ组再灌注2min停灌注2min,反复3次。于24h测定大鼠血清NO、NOS、BUN、Scr的浓度以及肾脏病理变化。结果:与Ⅰ、Ⅲ组比较,Ⅱ组NO、NOS明显升高(P<0.01)。Ⅰ组和Ⅲ组Scr、BUN较Ⅱ组明显降低(P<0.01)。Ⅰ组肾组织未见明显的形态学改变。Ⅱ组肾近曲小管上皮细胞空泡变性和坏死,肾小管管腔扩张,内见管型和坏死脱落细胞,管周血管明显扩张淤血。Ⅲ组病理改变明显轻于Ⅱ组。结论:后处理抑制NO、NOS的产生而发挥对肾I/R损伤的保护作用。     

高原地区消化性溃疡患者血清一氧化氮和一氧化氮合酶的变化

目的观察高原地区消化性溃疡患者血清一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶（NOS）活性的变化。方法在海拔2 260 m的西宁地区选择了35例胃溃疡和28例十二指肠溃疡患者进行血清NO含量和NOS活性测定,并与同一条件下的50名健康人作对照比较。结果与对照组[NO：（65.5±8.1）U/mL,NOS：（30.5±4.4）μmol/L]比较,胃溃疡组[NO：（54.2±9.3）U/mL,NOS：（24.6±4.2）μmol/L]和十二指肠溃疡组[NO：（53.7±8.7）U/mL,NOS：（24.0±4.9）μmol/L]血清NO含量和NOS活性显著降低（P〈0.01）;而胃溃疡组和十二指肠溃疡组相比较差异无统计学意义（P〉0.05）;结论在高原地区消化性溃疡的发生、发展可能与血清NO和NOS水平有关。     

脂多糖诱导巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶的实验研究

目的观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(in-ducible nitric oxide synthase,iNOS)的诱导作用。方法常规方法获取小鼠腹腔巨噬细胞随机分成两组:空白对照组(培养基中不含LPS)及LPS组(分别含LPS0.01,0.1,1.0,10mg/L的培养基培养24h)。采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western Blotting方法测定诱导型一氧化氮合酶的基因及蛋白表达水平。结果RT-PCR和Western Blotting结果表明,经0.1mg/LLPS刺激后细胞iNOS mRNA及蛋白表达水平均明显升高,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05),并且在一定范围内呈剂量-效应关系。结论LPS可诱导小鼠巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶。     

脂多糖诱导巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶的实验研究

目的 观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对小鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(in-ducible nitric oxide svnthase,iNOS)的诱导作用.方法 常规方法获取小鼠腹腔巨噬细胞随机分成两组:空白对照组(培养基中不含LPS)及LPS组(分别含LPS 0.01,0.1.1.0,10mg/L的培养基培养24h).采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western Blotting方法测定诱导型一氧化氮合酶的基因及蛋白表达水平.结果 RT-PCR和Westem Blotting结果表明,经0.1mg/L LPS刺激后细胞iNOS mRNA及蛋白表达水平均明显升高,与空白对照组比较有显著性差异(P&lt;0.05),并且在一定范围内呈剂量--效应关系.结论 LPS可诱导小鼠巨噬细胞产生诱导型一氧化氮合酶.     

活血化瘀汤对骨折愈合过程中诱导型一氧化氮合酶基因表达的影响

目的：观察活血化瘀汤对骨折愈合中诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响，从而调控成骨作用。方法：实验于2002-12／2004-08在华中科技大学基础学院分子生物学实验室完成。将24只SD大鼠胫骨中段闭合骨折骨髓内克氏针固定制成骨折模型，随机分为活血化瘀汤组(n=12)及生理盐水组(n=12)；于骨折后4，7，14，21d收集骨痂样本，反转录聚合酶链反应测定诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达水平。结果：24只大鼠均进入结果分析。骨折后7，14，21d所有骨痂样本诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达增强，骨折后14d达到峰值，活血化瘀汤组与生理盐水组比较，骨折后7，14d骨痂诱导型一氧化氮合酶基因表达显性增强(P=0．0037)。结论：活血化瘀汤可能通过增加早期大鼠骨痂诱导型一氧化氮合酶源性一氧化氮，影响骨细胞增殖功能，从而促进骨折愈合。     

阿司匹林对内皮祖细胞数量与功能及其诱导型一氧化氮合酶的影响

目的观察阿司匹林对外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的影响。方法采用密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7d后收集贴壁细胞,加入不同浓度阿司匹林(1、2、5、10 mmol/L)分别培养3、6、12、24 h。激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,将其在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管形成试剂盒来观察EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,免疫印迹杂交法(Western blot)半定量测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量。结果阿司匹林减少外周血EPCs数量,并且EPCs数量随阿司匹林浓度和作用时间增加而减少。其增殖能力、迁移能力、黏附能力、体外血管形成能力和iNOS含量亦随阿司匹林浓度和作用时间增加而降低。结论阿司匹林通过EPCs中iNOS含量,降低EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,从而抑制内皮细胞的生成。     

脓毒症大鼠急性肺损伤肺血管通透性、炎症因子、诱导型一氧化氮合酶的变化及意义

目的:观察脓毒症大鼠急性肺损伤肺血管通透性、炎症因子、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的变化特点及其意义.方法:24只雄性SD大鼠随机分为脓毒症组和对照组,脓毒症组按5 mg/kg体重腹腔注射脂多糖(LPS),对照组给予等量生理盐水,于注射后2h、6h经腹主动脉采血、处死,比较动脉血气分析、ELISA法检测的肺组织iNOS、白介素-6(IL-6)含量、右下肺肺组织病理切片计算的病理学肺损伤积分.结果:与对照组比较,脓毒症组大鼠氧合指数显著下降、肺组织iNOS、IL-6含量、病理学肺损伤积分均显著增加,P＜0.01.结论:脓毒症大鼠肺iNOS的过度表达增加了炎症因子的释放、增加肺血管通透性,加重肺损伤.