白花油麻藤不同极性部位对^60Coγ射线辐射小鼠外周血象的保护作用

目的观察白花油麻藤不同极性部位对骨髓抑制小鼠外周血象的影响，初步明确其促进造血的有效活性部位。方法6Gy^60Coγ射线亚致死量辐射造成骨髓抑制小鼠模型，灌胃给予白花油麻藤各部位药液，于给药后1、3、7、14、21、28d检测其外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）。结果辐射后小鼠外周血WBC、RBC、HGB、PLT较正常组明显下降，给予白花油麻藤各部位治疗后，其下降趋势减缓，与模型组比较，白花油麻藤95％部分和水部分可显著促进辐射小鼠外周血WBC、RBC、HGB、PLT的恢复（P〈0．05）。结论白花油麻藤50％乙醇提取物的95％洗脱部分和水洗脱部分可明显促进辐射所致骨髓抑制小鼠外周血象的恢复，可能是白花油麻藤促进造血的有效活性部位。     

外周血干细胞和骨髓基质细胞联合输注对急性放射病造血重建作用的实验研究

目的：观察外周血干细胞联合骨髓基质细胞输注对急性放射病造血功能恢复的影响。方法：8．5Gyγ射线照射的BALB／c小鼠，分别输入红细胞（对照组），动员的外周血干细胞（PBSCT组），外周血干细胞联合扩增的骨髓基质细胞（实验组），观察受体鼠4周的生存率，骨髓有核细胞（BMNC），粒细胞巨噬细胞集落形成单位（CFU－GM），成纤维细胞集落形成单位（CFU－F），外周血白细胞计数（WBC）等指标。结果：实验组的生存率，BMNC、GFU－GM，CFU－F较对照组和PBSCT组显著升高，P＜0．05，WBC的最低值较其他两组高（P＜0．01），WBC恢复较PBSCT组愉（P＜0．01），结论：外周血干细胞联合骨髓基质细胞 输注有促进急性放射病造血重建的作用，其作用优于单纯的外周血干细胞输注（移植）。     

DHEA对放、化疗损伤造血功能保护作用的实验研究

目的：研究17aα-D-高炔雌二醇-3-乙酯（DHEA）对137Csγ射线和环磷酰胺（CTX）所致小鼠造血及免疫功能损伤的保护作用。方法分别用8．0 Gy 137Csγ射线和CTX建立C57BL/6小鼠动物模型,观察DHEA低、中、高3个剂量对两个模型小鼠的造血干细胞脾结节形成细胞（CFU-S）数、外周血WBC、骨髓有核细胞数、脾脏指数的影响。结果 DHEA各组对小鼠137Csγ射线照射所致的外周血WBC、CFU-S数、骨髓有核细胞数的降低具有保护作用,并增大了脾脏指数。DHEA各组对环磷酰胺引起的小鼠WBC、CFU-S数、骨髓有核细胞数降低有抑制作用。结论 DHEA能减轻辐射和环磷酰胺对小鼠造血系统的损伤。     

骨髓基质细胞输注对外周血干细胞移植造血恢复的影响

为观察骨髓基质细胞输注对外周血干细胞移植（PBSCT）后造血恢复的影响，经放、化疗预处理的BALB／c小鼠，分别输入动员的外周血干细胞（PBSCT组）、外周血干细胞联合扩增的骨髓基质细胞（实验组），观察受体鼠4周的生存率、骨髓有核细胞（BMNC），粒细胞巨噬细胞集落形成单位（CFU－GM）、成纤维细胞集落形成单位（CFU－F）、外周血白细胞计数等指标。结果显示，实验组的生态率，BMNC、CFU－GM、CFU－F较PBSCT组显著升高（P＜0．005）；白细胞的最低值较PBSCT组高（P＜0．01），白细胞恢复较PBSCT组块（P＜0．01）。提示骨髓基质细胞输注有促进外周血干细胞移植造血恢复的作用。     

异基因骨髓源间充质干细胞对极重度放射损伤小鼠造血功能重建的影响

目的 探讨异基因骨髓源间充质干细胞(MSC)输注对极重度放射损伤小鼠造血功能重建的影响.方法 以C57BL/6(H-2b)雄性小鼠为供体制备MSC单细胞悬液.取雌性BALB/c(H-2d)小鼠120只作为受体,随机分为MSC-A组、MSC-B组、MSC-C组和PBS组(n=30).均接受60Co γ射线致死剂量(8Gy)照射,前3组小鼠于照射后2h分别经尾静脉输注MSC 1×106、1×105、5×104/R,PBS组在相同时间点经尾静脉输注等体积(0.4ml)PBS.观察小鼠的生存情况及外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)的变化,进行骨髓单个核细胞、粒-单系祖细胞(CFU-GM)及脾集落形成单位(CFU-S)计数,对Y染色体进行检测,并观察小鼠股骨骨髓的病理学变化.结果 各组小鼠经致死剂量照射后,WDC、HGB和PLT均迅速下降,PBS组小鼠于照射后17d内全部死亡.MSC-A、MSC-B、MSC-C组小鼠的外周血WBC、HGB、PLT在2周左右开始逐渐恢复,观察至56d,各组小鼠的生存率分别为61.9%、47.6%、38.0%.MSC各治疗组小鼠的生存率、骨髓单个核细胞、CFU-GM、CFU-S均明显高于PBS组(P<0.05),前述各项指标均随MSC输注数量的增加而增加.移植后10d,MSC各治疗组小鼠骨髓中均可检测到Y染色体,但仅在移植后初期短暂植入.MSC输注后42d,MSC各治疗组骨髓增生活跃.结论 异基因来源的骨髓源MSC单独输注可促进极重度放射损伤小鼠造血功能重建;随着MSC输注数量的增加,其促造血重建功能增强.     

胚胎期胺辐射对子鼠造血基质细胞功能的影响

目的 研究胚胎期２．０Ｇｙ＾１３７Ｇｓγ射线照射后对子鼠造血基质细胞的远期影响。方法 建立胚胎期受辐射小鼠模型；以细胞计数检测股骨骨髓有核细胞（ＢＭＮＣｓ）数；用免疫组化ＡＢＣ法检测基质细胞粒单系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和干细胞因子（ＳＣＦ）的表达；用体外小鼠骨髓细胞培养法以粒单细胞系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）为指标观察基质细胞对正常骨髓造血的支持功能。结果 胚胎期受辐射小鼠ＢＭＮＣｓ     

外周血造血干细胞移植后造血重建的细胞学动态观察

目的：了解自体外外周血造血干细胞移植（APBSCT）与异基因外周血造血干细胞移植（alloPBSCT)后骨髓重建造血功能的规律与差异。方法：观察了两组13例外周血造血干细胞移植（PBSC）后骨髓造血重建的细胞学特点,其中,APBSCT6例,allPBSCT7例,结果：两组人在移植后在白细胞（WBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（Hb)下降与回升有一定规律,不受年龄、性别的影响。两组之间无明显差异,P＞0．05。结论：重建造血的速度与输入单个细胞（MNC）数有一定相关性,移植时病人状态及适时的对症支持治疗也是决定重建速度的重要因素。     

造血干细胞辐射敏感性的比较

本文研究了在体内外照射条件下小鼠骨髓多向性造血干细胞(CFU-S)和粒系定向干细胞(CFU-C)的辐射敏感性。它们的D(?)值分别为103.4拉德和173.7拉德,反映了CFU-S和CFU-C是两类在性质上不全相同的干细胞群。在目前尚未建立起除啮齿类动物以外的多向性造血干细胞测定技术的情况下,我们应用体外琼脂培养技术,比较了在体外照射条件下狗与小鼠骨髓CFU-C的辐射敏感性,它们的D_0值分别为58.6拉德和190.2拉德,反映了两者在辐射敏感性上存在着明显的差异,为阐明不同种属动物的不同辐射耐受性提供了一个根据。联系到AET具有降低造血干细胞辐射敏感性以及提高动物的辐射耐受性的事实,进一步论证了在造血型放射病的发生和发展中,造血干细胞的损伤和修复是起着重要作用的。     

胚胎期受辐射对子鼠造血基质细胞功能的影响

目的　研究胚胎期 2 0Gy137Csγ射线照射后对子鼠造血基质细胞的远期影响。方法　建立胚胎期受辐射小鼠模型 ;以细胞计数检测股骨骨髓有核细胞 (BMNCs)数 ;用免疫组化ABC法检测基质细胞粒单系集落刺激因子 (GM CSF)和干细胞因子 (SCF)的表达 ;用体外小鼠骨髓细胞培养法以粒单细胞系祖细胞集落形成单位 (CFU GM )为指标观察基质细胞对正常骨髓造血的支持功能。结果　胚胎期受辐射小鼠BMNCs数明显低于正常小鼠 (P <0 0 1) ,其骨髓基质细胞生长因子GM CSF和SCF的表达均高于正常小鼠 (P <0 0 5 ) ,同时 ,胚胎期受辐射小鼠骨髓基质细胞对正常骨髓造血的支持能力也高于正常小鼠 (P <0 0 5 )。结论　 2 0Gy137Csγ射线对发育中的小鼠胚胎的造血基质细胞产生了明显影响。     

人骨髓间充质干细胞联合单倍体造血干细胞移植治疗急性放射病小鼠的实验研究

目的 观察人骨髓间充质干细胞（BMSC）联合单倍体相合造血干细胞（HSC）移植治疗辐射重度造血损伤小鼠的效果。方法 60只C57BL/6（H-2b）与BALB/c（H-2d）杂交第1代[CB6F1（H-2b×d）]小鼠用⁶⁰Co γ射线8.0 Gy全身照射后,按照完全随机设计分为照射对照、HSC单移植和BMSC+HSC共移植3组,每组20只。检测移植后各组小鼠存活率、外周血象、骨髓病理、骨髓细胞集落形成以及移植物抗宿主病（GVHD）评分等指标。结果 照射对照组小鼠辐照后第10天全部死于造血衰竭,平均活存时间为（7.13±0.31） d。与单移植组相比,共移植组小鼠的移植物抗宿主病（GVHD）表现和病理改变均明显减轻,GVHD评分明显降低（t=3.677、4.330、5.303、3.578,P<0.05）;共移植组的生存率和生存时间明显高于单移植组（t=3.317、5.183,P<0.05）。单移植组小鼠移植后第28天WBC（6.51±1.38）×10⁹/L、PLT（749.56±190.72）×10⁹/L、RBC（8.15±0.74）×10¹²/L、Hb（115±10.44） g/L,回升程度低于正常水平。共移植组小鼠移植后第28天WBC（12.50±2.07）×10⁹/L、PLT（968.25±216.62）×10⁹/L、RBC（9.22±1.04）×10¹²/L、Hb（137.57±14.89） g/L,回升程度接近正常水平。单移植组小鼠外周血象的回升速度和恢复水平明显低于共移植组小鼠（t=6.665、3.164、3.011、2.520,P<0.05）。移植后第7天共移植组小鼠骨髓抑制程度较单移植组轻,第28天共移植组小鼠骨髓新生造血灶多于单移植组。共移植组小鼠骨髓CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-GEMM集落计数在辐照后第7和28天均明显多于单移植组（t=3.625、2.966、3.020、3.536,P<0.05;t=4.369、4.849、5.044、4.243,P<0.05）。结论 BMSC联合单倍体造血干细胞移植能促进急性骨髓型放射病造血重建及植入,降低GVHD的发生,提高移植成功率。     

胎肝基质细胞强化骨髓移植治疗急性放射病

目的为进一步提高骨髓移植效果。方法以昆明种小鼠急性放射病为模型，进行了胎肝基质细胞强化同种异基因骨髓移植，观察了小鼠造血重建、急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）及小鼠存活率。结果胎肝基质细胞移植可强化骨髓移植效果，与单纯骨髓移植组比较，于照射后第１１天小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞计数，ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ、ＣＦＵ－Ｓ回升较快，ＣＦＵ－Ｆ已达正常，于照射后第１７天造血得以重建；ＧＶＨＤ较轻，存活率显著提高，达６０％。结论胎肝基质细胞改善了造血微环境，可能既改善了“龛位”，又增加了“龛位”使干细胞更多的植入，促进了造血重建，提高了骨髓移植效果，是一种“种子与土壤”并重的移植新方法。     

A contribution to the study of damage and regeneration of hemopoiesis during fractionated irradiation and repeated bone marrow transplantation

The experiment was aimed at studying two contradictory actions: damage to hemopoietic organs during application of radiation doses per fraction and regenerative efforts of the organism supported by repeated bone marrow transplantation. The mice received doses of 3 Gy of 60Co-gamma rays total body irradiation at four-day intervals up to a total dose of 18 Gy. After each dose per fraction half of the animals were injected with 10(6) bone marrow cells. At four-day intervals evaluations were made of the blood count, bone marrow and spleen cellularities, and spleen mass. In animals subjected only to irradiation the damage to hemopoietic organs was becoming deeper until the end of observation. In bone marrow recipients the decrease in bone marrow cellularity and the number of leukocytes stopped after day 16, and there was a steep growth of splenic cellularity and mass; the decrease in erythrocyte count stopped on day 20. Obviously a certain recovery of hemopoiesis occurred after the total dose of 12 Gy between days 12 and 16. The lodging of injected hemopoietic stem cells and their proliferation had to be preceded by a regeneration of the hemopoietic microenvironment.     

Human bone marrow mesenchymal stem cells expressing SDF-1 promote hematopoietic stem cell function of human mobilised peripheral blood CD34+ cells in vivo and in vitro

Purpose:?There is mounting evidence demonstrating that stromal cell derived factor-1 (SDF-1) plays an important role in homing of hematopoietic progenitor cells to bone marrow. This study was aimed to assess whether bone marrow mesenchymal stem cells overexpressing exogenous SDF-1 could synergistically promote the homing of CD34⁺ (Cluster of Differentiation [CD]) cells to bone marrow of lethally irradiated severe combined immunodeficiency (SCID) mice.

Methods:?Human SDF-1 complementary Deoxyribonucleic acid (cDNA) was transfected into bone marrow-derived mesenchymal stem cells with recombinant lentiviral vector. The expression of SDF-1 was detected by real-time Polymerase Chain Reaction (PCR) and Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), and the ex vivo chemotaxis function on CD34⁺ cells was measured by coculture system and Transwell system. SDF-1 gene-modified mesenchymal stem cell (MSC) and CD34⁺ cells were infused into lethally irradiated SCID mice and the hematopoietic reconstitution in the recipient mice was examined.

Results:?Messenger ribonucleic acid (mRNA) and protein of SDF-1 in infected MSC were significantly higher than that of the non-infected control MSC (p?<?0.05). The infected MSC have significant chemotaxis effect on CD34⁺ cells in?vitro and promote hematopoietic reconstitution after CD34⁺ cell transplantation in?vivo.

Conclusion:?MSC with high-level expression of SDF-1 can synergistically promote hematopoietic reconstitution after CD34⁺ cell transplantation in lethally irradiated SCID mice.     

西咪替丁对急性照射小鼠存活率及造血系统改变的影响

目的 观察西咪替丁对急性照射小鼠存活率及造血系统改变的影响.方法 采用137Cs γ射线全身照射小鼠,两次实验的照射剂量分别为6.0Gy和8.0Gy,剂量率均为1.01Gy/min.每次实验取健康雄性C57BL/6小鼠60只,按体重随机分为空白对照组?模型对照组?阳性药组(523)及33.3?100?300mg/kg西咪替丁组,每组10只.西咪替丁各剂量组于照射前6d灌胃给药,每天1次,照射后5h给药1次;阳性药组于照射前1d灌胃给药1次,照射后5h给药1次.检测8.0Gy照射后30d小鼠存活率,以及6.0Gy照射后30d小鼠外周血象?骨髓DNA含量和骨髓嗜多染红细胞微核率.结果8.0Gy照射后,模型对照组小鼠于第21天全部死亡,西咪替丁低?中?高剂量组30d存活率分别为50%?20%和30%;6.0Gy照射后第30天,与空白对照组比较,各照射组小鼠外周血白细胞明显降低(P<0.01),骨髓嗜多染红细胞微核率明显升高(P<0.05),骨髓DNA含量明显降低(P<0.05);与模型对照组比较,西咪替丁高剂量组外周血白细胞明显升高(P<0.01),西咪替丁各剂量组骨髓DNA含量明显升高(P<0.01,P<0.05),而骨髓嗜多染红细胞微核率明显降低(P<0.01,P<0.05)并趋于正常.结论 西咪替丁能提高急性照射小鼠30d存活率,且对其造血系统有较好的保护作用.     

造血干细胞联合AGM基质细胞移植对骨髓移植小鼠造血重建的影响

目的探讨造血干细胞与主动脉-性腺-中肾（aorta—gonad—mesonephros，AGM）区来源的基质细胞联合移植对同基因骨髓移植（bone marrow transplantation，BMT）小鼠BMT后骨髓造血的影响。方法建立同基因骨髓移植小鼠模型，随机分成4组：空白对照组、BMT组、BMT联合AGM基质细胞移植组（联合移植组）及川芎嗪组，另设正常组。分别于BMT后7、14、21和28d检测外周血细胞、骨髓单个核细胞（bone marrow mono—nuclear cells，BMMNC），3、7、10、14、21和28d检测骨髓组织学变化。结臬联合移植组骨髓单个核细胞较川芎嗪组恢复快，联合移植组及川芎嗪组外周血血细胞、骨髓单个核细胞、骨髓组织恢复均较单纯BMT组快，差异有统计学意义。结论BMT联合AGM基质细胞移植对骨髓移植造血重建具有促进作用。     

SCF和IL-6双基因共转染促进小鼠造血和免疫功能的恢复

目的：探讨逆转录病毒介导的IL－6和SCF双基因共转染骨髓基质细胞对辐射小鼠造血和免疫功能的影响。方法：利用动物实验观察逆转录病毒介导的含IL－6和SCF双基因共转染的骨髓基质细胞对辐射小鼠外周血，骨髓有核细胞数，骨髓细胞CFU－GM培养，脾脏淋巴细胞ITT，CD4／CD8等指标的影响。结果；表明转IL－6和SCF基因的骨髓基质细胞可以促进辐射小鼠造血和免疫功能的恢复，结论：IL－6与SCF基因在骨髓基质细胞中获得表达，为进一步研究转基因骨髓基质细胞对造血调控的作用奠定了基础。     

不同年龄小鼠造血系统辐射损伤与修复的比较观察

目的 观察辐射对不同年龄小鼠（幼年鼠、青年鼠、老年鼠）造血系统的损伤及恢复的影响,探讨幼年鼠、老年鼠受照后造血系统的变化及其与青年鼠的差异。 方法 不同年龄（幼年鼠:3周龄、青年鼠:8周龄、老年鼠:14月龄）雄性C57BL/6小鼠各60只,按照随机区组法分为对照组、2 Gy照射组、4 Gy照射组,每组各20只。其中,照射组小鼠用137Cs γ射线给予全身照射,对照组给予假照射。分别于照射后第3、7、14、28天取材,检测小鼠外周血计数、单侧股骨骨髓有核细胞计数、骨髓中造血干细胞（HSC）百分比、造血祖细胞（HPC）百分比及粒单系造血祖细胞集落形成单位（CFU-GM）绝对百分比。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验。 结果 照射组小鼠白细胞计数、单侧股骨骨髓有核细胞计数、HSC百分比和HPC百分比在第3天降至最低值,其中,幼年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的34.8%（t=6.129,P<0.05）、19.6%（t=7.084,P<0.05）,青年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的43.8%（t=3.043,P<0.05）、20.0%（t=7.084,P<0.05）,老年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的19.0%（t=22.080,P<0.05）、8.4%（t=24.590,P<0.05）, 4 Gy照射组降低程度重于2 Gy照射组,且呈剂量依赖性。第28天时幼年鼠照射组单侧股骨骨髓有核细胞计数未恢复正常,4 Gy照射组HSC绝对百分比仍低于50%,HPC绝对百分比恢复至50%左右。青年鼠照射组CFU-GM在第28天恢复至正常水平,而幼年鼠照射组（2 Gy照射:t=2.067,P<0.05;4 Gy照射:t=3.358,P<0.05）和老年鼠照射组（2 Gy照射:t=2.586,P<0.05;4 Gy照射:t=4.772,P<0.05）在第28天时显著低于青年鼠照射组,仍未恢复至正常水平。 结论 照射组小鼠造血系统大多数指标在第3天出现急性抑制且呈剂量依赖性,3 d后为损伤恢复期,多数指标在第28天可恢复至正常水平。与青年鼠相比,幼年鼠的血小板和造血干细胞功能对辐射损伤更为敏感,老年鼠的骨髓细胞增殖功能恢复能力下降。     

医源性急性放射病的临床探讨

目的 通过观察医源性急性放射病的临床和治疗经验，为事故性放射病的救治提供依据。方法 观察41例经过大剂量照射预处理的自体外周血造血干细胞移植患者的外周血象、体温和症状，并作统计学比较与相关分析。结果 照射后患者外周血白细胞、血小板逐渐下降，平均于照后第10天、第13天至最低值，分别于第18天、第17天恢复，血红蛋白仅有轻至中度降低。移植后使用rhG-CSF与未使用rhG-CSF患者造血重建时间差异有统计学意义。移植前采集的单个核细胞数与骨髓重建时间呈负相关。照射副作用除常见呕吐、乏力、腮腺肿大、口腔溃疡、肝功异常及皮肤损伤外，25．6％患者照射后体温升高。粒细胞减少或缺乏期感染发生率为63．4％，多为轻度，心脏功能及肾脏功能基本不受影响。患者均能平稳渡过骨髓抑制期。结论 rhG-CSF的应用可明显缩短粒细胞缺乏期，促进骨髓重建；而移植前采集足够数量的单个核细胞是治疗医源性放射病、缩短造血恢复时间的关键；严格实行全环境保护和及时、联合、足量应用抗生素的原则为医源性急性放射病患者能够顺利渡过极期、减少感染等合并症提供了保证。     

异基因造血干细胞移植治疗儿童血液病

目的造血干细胞移植可以根治白血病、再生障碍性贫血、血红蛋白病及先天性免疫缺陷等疾病,通过临床观察,分析研究异基因造血干细胞移植对儿童血液病的治疗效果。方法采用异基因造血干细胞移植治疗15例儿童血液病,其中非血缘脐血移植9例,同胞脐血移植3例,同胞外周血干细胞移植2例,同胞骨髓移植1例。采用白消安、环磷酰胺或环磷酰胺、全身照射为基础的预处理的方案。结果14例患者植入,1例于移植后15d死亡,未达植入标准。白细胞的植入时间各组间没有明显差异;脐血移植血小板的植入明显较骨髓或外周血延迟（P〈0．05）。主要并发症为巨细胞病毒感染和复发,11例患者生存;其中10例无病存活,占66．7％,存活最长时间为6年。Kaplan-Meier生存曲线提示：1年生存率为76．6％,预计5年生存率为57．4％。结论脐血移植具有移植物抗宿主疾病轻、较容易控制、搜寻时间短等优点,对儿童患者具有广泛的应用前景。提出了儿童脐血移植的选择策略。