人DNA指纹的研究及其应用

人ＤＮＡ指纹的研究及其应用课题负责罗超权（中山医科大学生化教研室；广州，５１００８９）该成果运用了先进的限制性片段长度多态性和聚合酶链反应技术首先系统地研究了中国人群５个基因座位（ＰＡＷ１０１，ａＰＯＢ，Ｄ１Ｓ８０，Ｄ１７Ｓ５，ＨＬＡ－ＤＱＡ）的等位...     

DNA指纹技术研究及应用进展

本文归纳整理了近年来国内外研究文献,对DNA主要指纹技术进展及在食品产地溯源、啤酒工业、中药质量控制、亲子鉴定、农作物生产、真菌分类等领域的应用进行阐述,有助于全面了解DNA指纹技术研究进展及应用情况.     

DNA指纹技术及应用

DNA指纹技术是分子生物学各种新兴技术中的一种,目前已被广泛应用于法医学、疾病诊断、肿瘤研究等领域.本文就DNA指纹技术的建立、发展及其应用作一综述.     

DNA指纹技术及应用

DNA指纹技术是分子生物学各种新兴技术中的一种 ,目前已被广泛应用于法医学、疾病诊断、肿瘤研究等领域。本文就 DNA指纹技术的建立、发展及其应用作一综述。1　 DNA指纹图的建立及发展　　近百年来的研究认为 ,任何遗传分析都是以遗传标志为基础的 ,而任何一个遗传标志的价值又在于其变异性 (即多态性 )的大小。有关遗传多态性的研究对促进人类学、遗传学、免疫学以及法医学的发展 ,以及对阐明某些疾病的发病机理乃至协助诊断等方面都起了十分重要的作用。但以往的研究都是利用各种外部表现型、生理缺陷型、同工酶、多态蛋白等作为遗传…     

人DNA指纹检测的初步研究(科研简讯)

1985年,Jeffreys等首次报道用人肌红蛋白基因内含子中一个33bp的重复序列片段探针揭露出人小卫星DNA片段的高度多态性,并称之为DNA“指纹”。此后,若干学者对此进行了研究,并己逐渐应用于法医学亲权鉴定和个体识别的案件,取得了可喜的进展。 目前,国内人基因组DNA重复序列克隆还不易获得,用人工合成还较昂贵。我们根据随机探针检测DNA限制性片段长度多态性时,对探针的选择不在于它的来源或它原来的功能,重要的是能检测出多态性的原则,以及鼠与人的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA有90％以上同源序列的事实,选用rMBP。cDNA3′-端非表达区高度重复序列的0.81Kb片段(从质粒pMBP-1获得),以α_32p-dCTP经随机引物延伸标记法标记后作探针。人白细胞DNA分别用HinfⅠ和HaeⅢ酸消化,经0.8％琼脂糖凝     

DNA指纹在法医中的应用

人基因组内高度多形态的许多微型卫星灶与串连式“核”序列组成的探针经过杂交后可同时被检测出来。Southern印迹杂交产生的DNA指纹是由多个高度变异的DNA片段组成,这种指纹不仅具有体细胞的及种系的稳定性,而且对于某一个体有完全的特异性。目前证明,这种技术可用于法医检验。棉布上粘污达4年之久的血迹及精液斑点可通过上述技术分离出     

随机引物PCR检测人DNA指纹条件的优化

【目的】探讨随机引物PCR检测人DNA指纹技术的最优化条件。【方法】应用随机引物PCR技术,用一对经筛选的短引物,对扩增人DNA指纹的条件进行了优化。【结果】实验结果显示DNA模板应新鲜,质量浓度在50～550mg/L均有扩增产物。dNTP的浓度0.2mmol/L最宜。Mg2+浓度5.0mmol/L效果最佳。循环参数以两个三步PCR,变性温度分别用94℃、90℃,时间各为30s,退火温度用43℃、48℃,时间分别为40s、50s,延伸温度用72℃,时间分别为1min、1min20s。【结论】按照优化的实验条件,得出的DNA指纹图重复性好,个体特异性高,为APHDF的推广提供了实验基础。     

随机引物PCR检测人DNA指纹条件的优化

[目的]探讨随机引物PCR检测人DNA指纹技术的最优化条件。[方法]应用随机引物PCR技术，用一对经筛选的短引物，对扩增人DNA指纹的条件进行了优化。[结果]实验结果显示：DNA模板应新鲜，质量浓度在50－550mg/L1均有扩增产物，dNTP的浓度0.2mmol/L最宜。Mg^2 浓度5.0mmol/L效果最佳。循环参数以两个三步PCR，变性温度分别用94℃、90℃，时间各为30s，退火温度用43℃、48℃，时间分别为40s、50s，延伸温度为72℃，时间分别为1min、1min20s。[结论]按照优化的实验条件，得出的DNA指纹图重复性好，个体特异性高，为APHDF的推广提供了实验基础。     

近交系大鼠DNA指纹分析研究

目的建立DNA指纹技术对近交系大鼠遗传监测的方法.方法采用DNA指纹图法对国内已知的7个品系9个近交系大鼠群体进行了分析,并对相同DNA进行了多次DNA指纹图重复实验.结果(1)不同品系之间DNA指纹图差异较大,其平均图带数为16.360±2.178,共有带率为0.061±0.008,相似系数为0.062±0.008,相同DNA指纹图概率为3.691×10-23.(2)同一群体不同个体之间DNA指纹图带的相似系数和共有带率(除SHR(哈)和WKY(哈)小于0.7外),其他均在大于0.9.(3)不同地区同一SHR和同一WKY品系间DNA指纹图也存在不同,其相似系数和共有带率均小于0.6.(4)相同DNA不同次制作的DNA指纹图谱基本一致(P>0.05).结论证实了该方法在近交系大鼠遗传监测中的可行性.     

一种随机探针人DNA指纹分析法的建立

根据随机探针(Anonymous Probe)检测DNA限制性片段长度多态性(RFLPs)分析原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA有90％以上同源序列的事实,选用rMBP-cDNA 3′-端非表达区高度重复序列的0.81千碱基对(kb)片段作探针,检测用HaeⅢ重酶解的人DNA限制性片段,结果可以分辨出22条谱带,受检的30例无血缘关系的个体之间,没有两个人的谱带是完全相同的,显示出此方法的高度特异性。本文还比较了若干DNA片段作探针和几种限制性内切酶水解人DNA后检测DNA指纹的初步结果。     

第二代法医DNA指纹的研究

1985年英国科学家Jeffreys等人应用基于限制性片段长度多态性的多基因座探针技术(DNA finger-printing,DNA指纹),克服了传统法医物证检验鉴别机率低的缺陷,使法医学个人识别和亲子鉴定实现了从只能排除到高概率认定的飞跃,标志着法医物证检验技术新纪元的开始。然而,DNA分型技术作为一种崭新的科技手段应用于法庭审判,在世界各国引起了巨大的争论与关注。近年研究证明,应用Jeffreys的DNA指纹法进行法医物证检验有一定限制。DNA指纹分析在标准化方面的困难和对检材需求量的苛求,至今难以克服。加之,DNA指纹分析无法确定每条谱带的染色体定位以及各位点之间的独立性,其概率计算至今仍有争论。因此,大多     

人型结核杆菌克隆DNA探针的制备及其应用的研究

用限制性内切酶ＰｓｔⅠ消化人型结核杆菌Ｈ３７ＲｖＤＮＡ,与质粒ｐＵＣ１９ ＤＮＡ连接后转化大肠杆菌,经同位素３２Ｐ标记的人型结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ全染色体ＤＮＡ探针筛选出６个阳性克隆（ＭＴ１￣６）,其中克隆ＤＮＡ片段ＭＴ２（４．２Ｋｂ）、ＭＴ４（３．５Ｋｂ）和ＭＴ５（３．０Ｋｂ）标记成探针,检测了２２种分支杆菌标准株和１５侏人型结核杆菌临床分离侏以及２种非分支杆菌,其杂交结果完全相同,与人型结核杆菌及     

应用DNA指纹分析光疗对新生儿DNA损伤的初步探讨

光疗是治疗新生儿黄疸的主要方法之一。近年来,有人认为光疗有可能引起DNA损伤,如果确实如此,有可能导致严重的后果。本文应用分子生物学技术—DNA指纹分析,从分子水平研究光疗对新生儿的DNA是否有损伤。 在人类基因组的结构基因之间分布着许多高度可变的小卫星DNA区域,它们是由串联重复的核苷酸顺序构成的。1985年英国遗传学家Jeffreys应用小卫     

儿童急性粒细胞白血病DNA指纹变化的研究

1985年英国遗传学家Jeffreys应用小卫星探针,通过Southern杂交法做出了具有个体特异性的DNA指纹,为临床研究肿瘤的基因重组提供了新的分子生物学方法。目前,有关白血病DNA指纹变化的临床研究甚少,国内尚未见报道。我们采用3种小卫星探针(MYO、M 13、LE 11.8),通过Southern杂交法,检测了8例儿童急性粒细胞白血病     

DNA改组及其应用

DNA改组是一种改造基因和蛋白的有效实验进化技术。DNA改组技术在医药、疫苗、农业、生物治疗、兽药研究、营养、人类基因治疗、生物武器的研究等重要领域都具有广阔的应用开发前景。本文综述了DNA改组的技术及其在疫苗方面的应用展望。     

光疗前后新生儿的DNA指纹分析

目的：了解光疗对新生儿的ＤＮＡ是否有损伤。方法：采用ＬＥ１１．８小卫星探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法检测接受光疗前后新生儿外周血的ＤＮＡ指纹谱带。结果：２２例接受光疗前后的新生儿ＤＮＡ指纹相比，均未见到任何谱带的改变。结论：光疗未引起新生儿的ＤＮＡ损伤，应用国产蓝光治疗器对高胆红素血症新生儿在４８ｈ内治疗是安全的。     

光疗前后新生儿的DNA指纹分析

目的：了解光疗法对新生儿的ＤＮＡ是有损伤。方法；采用ＬＥ１１．８小卫星探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法检测接受光疗前后新生儿外周血为ＤＮＡ指纹谱带。结果；２２例接受光疗前后的新生儿ＤＮＡ指纹相比，均未见到任何谱带的改变。结论；光疗未引起新生儿的ＤＮＡ损伤，应用国产蓝光治疗器对高阻红素血症新生儿在４８ｈ内治疗是安全的。