短尾蝮蛇毒中磷脂结合抗凝蛋白的分离纯化及鉴定

目的从短尾蝮蛇毒中分离纯化一种抗凝蛋白,并对其生化性质进行研究。方法利用阳、阴离子交换、凝胶过滤的方法分离纯化这种抗凝蛋白,用活化部分凝血活酶时间(APTT)测定其抗凝活性,用SDS-PAGE测定其蛋白相对分子量,用等电聚焦法测定蛋白的等电点.用薄层析方法确定抗凝蛋白与磷脂酰胆碱结合。结果从短尾蝮蛇中分离纯化出的抗凝蛋白是二聚体,相对分子量为24.0×103(非还原)和14.6×103(还原)。等电点为pH 5.2。该蛋白具有精氨酸酯酶活性,能明显地延长活化的部分凝血活酶时间(APTT),其抗凝活性与磷脂结合有关。结论此方法成功地从短尾蝮蛇毒中纯化出一种抗凝蛋白。因其能够与磷脂结合,又具有明显的抗凝活性,因此把该蛋白称为磷脂结合抗凝蛋白(phospholip id-b ind ing anticoagu lation prote in,PBAP)。     

抗磷脂抗体的血栓形成机制及临床研究进展

抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,APA)是存在于循环血清中的一组能与磷脂特异性结合的一组多克隆免疫 球蛋白的统称,其表现形式包括IgG、IgM及IgA。APA通过其识别的抗原特异性不同,与各种磷脂—蛋白复合物结合,干扰各种依赖磷脂的凝血和抗凝因子发挥作用。若临床表现为动静脉血栓形成、习惯性流产及/或血小板减少中的一种     

磷脂酰乙醇胺结合蛋白与阿片依赖关系的研究

目的：磷脂酰乙醇胺结合蛋白（PEBP）是海马胆碱能神经刺激肽（HCNP）的前体蛋白，参与多种信号转导过程。本课题组前期蛋白质组研究发现PEBP在吗啡依赖大鼠不同脑区具有差异表达。因此，本研究目的为观察该蛋白是否在阿片依赖过程中发挥作用并探讨其可能机制。方法；采用蛋白免疫印迹实验验证PEBP蛋白在吗啡依赖大鼠不同脑区的差异表达。建立大鼠吗啡依赖与自然戒断模型，     

抗动脉粥样硬化潜在新靶标磷脂转移蛋白的研究进展

磷脂转移蛋白能介导脂蛋白间磷脂的转移，对高密度脂蛋白和极低密度脂蛋白的代谢都具有重要的调控作用。动物试验和流行病学研究表明血浆磷脂转移蛋白可能是治疗动脉粥样硬化的新靶标。该文对磷脂转移蛋白的分子生物学、结构、生理功能、动物试验、流行病学研究以及磷脂转移蛋白抑制剂的研究进行综述。     

大豆磷脂对脑缺血大鼠脑中磷脂含量的影响

目的研究大豆磷脂对脑缺血大鼠脑中磷脂含量的提升作用。方法Wistar大鼠喂大豆磷脂 5d后结扎左右颈总动脉 ,测定结扎后 1、6h时的血清与大脑磷脂含量 ,并与赋型组对比。结果喂大豆磷脂大鼠血中磷脂含量明显升高 ,结扎颈总动脉 6h大脑磷脂含量上升 ,总磷脂为 (89.1± 10 .9)mg g蛋白 ,磷脂酰胆碱为 (38.5± 7.9)mg g蛋白 ,磷脂酰乙醇胺为 (2 9.5± 6 .3)mg g蛋白 ,磷脂酰肌醇为 (1.75± 0 .5 4 )mg g蛋白 ,其中总磷脂和磷脂酰胆碱含量显著高于赋型组 (P <0 .0 5 )。结论大豆磷脂有抑制脑缺血大鼠大脑磷脂含量下降作用     

脂质体化白细胞介素6组方的免疫佐剂活性

本文报道了脂质体化白细胞介素6(IL-6)用作免疫佐剂的性能、以及与其他佐剂的比较结果。作者以65kDa热休克蛋白为模型抗原,在Balb/c小鼠体内比较了IL-6与其他佐剂的效果。 脂质体是由磷脂和其他极性两性物在水相中分散形成,由于它的弱免疫原性、低毒性和可生物降解等特性,因此它既是多种蛋白抗原的载体,又是免疫佐剂。此外,脂质体与某些有佐剂性质的细胞因子(如γ干扰素、白细胞介素1α等)结合,从而可增强免疫佐剂活性。游离形式的细胞因子由于在体内迅速被清除和失活,因而其应用受到限制。每天注射和提高剂量则会损害健康,且应用不便。将细胞因子结合到脂质体,形成一种缓释作用,则可排除上述不利因素。     

用于肿瘤治疗的PI3K/mTOR双重抑制剂的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶（PBK）是细胞内重要的信号转导分子,在细胞存活、增殖和分化过程中起重要调节作用。且是磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B／雷帕霉素靶蛋白信号转导通路的关键节点蛋白,与细胞周期、血管形成、肿瘤发生和侵袭的关系密切,现已证实PBKs是潜力巨大的药物治疗靶点,针对该通路的抑制剂近年来成为研究热点,抗肿瘤治疗前景看好。     

抗磷脂抗体与妊娠丢失的研究进展

抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies，aPL)是一族能与多种阴性磷脂、磷脂连接蛋白或两者形成的复合物结合的抗体，包括抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibodies，aCL)、狼疮抗凝抗体(Lupusanticoagulant，LA)、抗磷脂酰丝氨酸抗体、抗磷脂酰胆碱抗体等。1975年，Nisson等首次报道了aPL与妊娠丢失有关。近年来，国内     

茶多酚磷脂复合物的制备

目的研究茶多酚磷脂复合物的制备。方法对反应溶剂、药脂比、溶剂量、反应时间、反应温度进行单因素考察,筛选最优条件,进行正交试验,确立最优工艺。结果以30mL无水乙醇为反应溶剂,药物与磷脂比例为1∶1.5,30℃水浴回流搅拌0.5h,所得磷脂复合物的平均结合率为98.85%。结论采用工艺简单、成本较低的方法制备茶多酚磷脂复合物,可提高茶多酚提取物亲脂性,为进一步研究茶多酚磷脂复合物的体内药物动力学提供参考。     

磷脂类皮肤载体给药系统的研究进展

<正> 由于磷脂本身结构与人类皮肤脂质有高度的相似性,故其具有组织亲和力强、生物降解性好、无毒性等优点,已被越来越广泛地用于皮肤载体给药系统的研究中。本文综合考察了近年国内、外对磷脂类皮肤载体给药系统的最新研究进展,包括磷脂自身的特性及其相关的皮肤载体给药系统如脂质体、传递体、药物磷脂复合物等的发展,并对其作用特点与机制等加以探讨,以期为进一步研究开发此类制剂提供参考。1 磷脂的特性1.1 磷脂的分类和理化性质 磷脂可分为天然磷脂(如卵磷脂、豆磷脂)和合成磷脂(如     

Raf kinase inhibitory protein (RKIP): A physiological regulator and future therapeutic target

Background: Raf kinase inhibitory protein (RKIP) belongs to the phosphatidylethanolamine binding protein (PEBP) family that is expressed in both prokaryotic and euakaryotic organisms. Objective: In this review, we discuss the role of RKIP as a modulator of signal transduction, the relationship of RKIP to other members of the PEBP family, and the role of RKIP in human health and disease. Results/conclusion: In mammals, RKIP regulates activation of MAPK, NF-κB and G protein coupled receptors (GPCRs). As a modulator of key signaling pathways, RKIP affects various cellular processes including cell differentiation, the cell cycle, apoptosis and cell migration. Emerging evidence suggests that RKIP is implicated in several human diseases or disorders, among them metastatic tumorigenesis and Alzheimer's disease.     

七氟烷后处理对大鼠心肌缺血再灌注NF-κB和TNF-α的影响

目的研究七氟烷后处理对大鼠心肌缺血再灌注过程中NF-κB及TNF-α的影响。方法 40只Wistar雄性大鼠随机分为5组(n=8):假手术组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、1.0%、2.0%、3.0%七氟烷后处理组(S1、S2、S3组)。建立心肌缺血再灌注模型。光镜下观察心肌组织病理学变化,免疫组化测大鼠NF-κB的活性,ELISA法测TNF-α的浓度。结果与C组相比,I/R组、各S组NF-κB的活性及TNF-α的浓度显著升高(P<0.05);与I/R组相比,各S组NF-κB的活性及TNF-α的浓度显著降低(P<0.05);S1组与S3组各指标间无明显差异(P>0.05);与S1组、S3组相比,S2组NF-κB的活性及TNF-α的浓度显著降低(P<0.05)。结论七氟烷后处理可通过抑制NF-κB的活性,降低TNF-α的表达水平,达到心肌保护作用,且浓度为2.0%的七氟烷效果最佳。     

丹参酮ⅡA对TNF-α诱导的ECV304细胞NF-κB、IκB-α表达及粘附分子ICAM-1、VCAM-1mRNA表达的影响

目的探讨丹参酮ⅡA对血管内皮细胞株ECV304NF-κB、IκB-α及粘附分子ICAM-1、VCAM-1mRNA表达的影响,以阐明其抗动脉粥样硬化作用及机制。方法通过建立TNF-α诱导的ECV-304细胞损伤模型,以抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)做为对照,间接细胞ELISA方法定量检测NF-κB、IκB-α的表达,RT-PCR方法检测各组细胞ICAM-1、VCAM-1mRNA的表达。结果TNF-α可增加ECV304细胞转录因子NF-κB的表达,同时降低其抑制因子IκB-α的表达,低浓度的丹参酮ⅡA对TNF-α引起的ECV304细胞NF-κB的表达升高无明显抑制作用,但可增加其IκB-α的表达;高浓度的丹参酮ⅡA可明显抑制NF-κB的表达,同时增加其抑制因子IκB-α的表达。同时丹参酮ⅡA抑制TNF-α诱导的ECV304细胞ICAM-1、VCAM-1mRNA表达。结论丹参酮ⅡA可通过抑制转录因子NF-κB的激活及其相关粘附分子ICAM-1、VCAM-1mRNA表达,这有利于抑制动脉粥样硬化过程中的炎症从而发挥抗动脉粥样硬化作用。     

子宫内膜样腺癌组织中 NF-κB p65与ERα的表达及意义

本研究采用免疫组织化学SP方法检测不同类型子宫内膜组织中NF-κB p65蛋白和ERα蛋白的表达,旨在探讨NF-κB p65蛋白在不同类型子宫内膜组织腺上皮细胞中的表达及其与ERα蛋白之间的关系。结果发现NF-κB p65蛋白在正常子宫内膜组（10例）、子宫内膜增生症组（60例）以及子宫内膜样腺癌组（20例）中核表达率逐渐增高,且三组间差异具有显著性（p<0.05）,内膜样腺癌组NF-κB p65蛋白的表达高于增生症组及正常内膜组,增生症组高于正常内膜组（p均<0.05）;在增生症中,非典型增生高于单纯性增生及复杂性增生,复杂性增生高于单纯性增生（p均<0.05）;ERα蛋白则在单纯性增生、复杂性增生、非典型增生子宫内膜和子宫内膜样腺癌组织中的表达逐渐降低,且具有统计学意义（p<0.05）。二者的表达在子宫内膜样腺癌组织中呈负相关性（r= -0.491,p=0.028）。最后,我们认为NF-κB p65蛋白在子宫内膜组织腺上皮细胞核中的表达率逐渐增加可能促进了子宫内膜样腺癌的形成和进展,ERα在子宫内膜样腺癌发展过程中表达逐渐下降,二者之间可能通过交互调节作用（cross-talk）而相互抑制。     

5-HT receptor regulation of neurotransmitter release

Serotoninergic neurons in the central nervous system impinge on many other neurons and modulate their neurotransmitter release. This review focuses on 1) the function of presynaptic 5-hydroxytryptamine (5-HT) heteroreceptors on axon terminals of central cholinergic, dopaminergic, noradrenergic, or GABAergic neurons and 2) the role of GABAergic interneurons expressing 5-HT heteroreceptors in the regulation of acetylcholine, dopamine, or noradrenaline release. In vitro studies on slices or synaptosomes and in vivo microdialysis experiments have shown that 5-HT(1A), 5-HT(1B), 5-HT(2A), 5-HT(2C), 5-HT(3), and/or 5-HT(4) heteroreceptors mediate this modulation. 5-HT(1B) receptors on neocortical cholinergic, striatal dopaminergic, or hippocampal GABAergic axon terminals are examples for release-inhibiting 5-HT heteroreceptors; 5-HT(3) receptors on hippocampal GABAergic or 5-HT(4) receptors on hippocampal cholinergic axon terminals are examples for release-facilitating 5-HT heteroreceptors. GABA released from GABAergic interneurons upon activation of facilitatory 5-HT receptors, e.g., 5-HT(2A) or 5-HT(3) receptors, mediates inhibition of the release of other neurotransmitters such as prefrontal neocortical dopamine or neocortical acetylcholine release, respectively. Conversely, attenuated GABA release in response to activation of inhibitory 5-HT heteroreceptors, e.g., 5-HT(1A) or 5-HT(1B) receptors on GABAergic interneurons is involved in paradoxical facilitation of hippocampal acetylcholine and striatal dopamine release, respectively. Such 5-HT heteroreceptors are considered potential targets for appropriate 5-HT receptor ligands which, by enhancing the release of a relevant neurotransmitter, can compensate for its hypothesized deficiency in distinct brain areas. Examples for such deficiencies are the impaired release of hippocampal or neocortical acetylcholine, striatal dopamine, and hippocampal or neocortical noradrenaline in disorders such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, and major depression, respectively.     

枸杞多糖对小鼠海马神经元细胞系缺糖缺氧损伤保护作用及机制研究

目的探讨枸杞多糖(LBP)对小鼠海马神经元细胞系HT22细胞缺糖缺氧损伤保护作用的机制。方法采用含1 mmol/L连二亚硫酸钠的无糖DMEM培养基建立HT22细胞缺糖缺氧损伤模型,设对照组、模型组和LBP高、中、低剂量(100、50、25 mg/L)组,以CCK8法检测细胞活性,流式细胞术检测检测细胞凋亡情况;Western blotting检测Bcl-2、Bax蛋白表达情况;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TNF-α、NF-κB、I-κBα、Caspase-9基因转录活性。结果与对照组比较,模型组HT22细胞存活率显著降低、凋亡率显著增加(P<0.05);TNF-α、NF-κB、Caspase-9基因转录活性显著上调,I-κBα基因转录活性显著下调(P<0.05);Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,LBP各剂量组细胞存活率显著上升、凋亡率显著下降(P<0.05);TNF-α、NF-κB、Caspase-9基因转录活性显著下调,I-κBα基因转录活性显著上调(P<0.05);Bax蛋白表达水平显著降低,Bcl-2的蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。结论 LBP可能是通过下调TNF-α、NF-κB、Caspase-9基因转录活性以及Bax蛋白表达,增强I-κBα基因转录活性及Bcl-2的蛋白表达,抑制缺糖缺氧损伤诱导神经细胞凋亡的发生。     

泻心汤有效组分不同配伍对内毒素肺损伤大鼠NF-κB及IκB表达的影响

目的研究泻心汤有效组分及其配伍对内毒素肺损伤大鼠NF-κB及IκB表达的影响。方法大鼠灌胃给予黄芩总黄酮提取物(TFL)、大黄总游离蒽醌提取物(TFA)、大黄总结合蒽醌提取物(TCA)、TFL与TFA配伍高、低剂量(A高A低)、TFL与TCA配伍(B)及醋酸地塞米松(Dex)4d,末次给药后1h股静脉注射脂多糖(LPS)建立大鼠内毒素肺损伤模型,1、2、4h各组分别处死6只动物,收集肺组织,免疫印记(Western blot)检测核因子κB(NF-κB)、κB抑制因子(IκB)的蛋白表达。结果大黄总游离蒽醌、A高及Dex在1、2、4h均能够明显抑制NF-κB p65的核转位(P<0.01),所有给药组在2、4h均能够明显抑制胞质中的IκBα的降解(P<0.01)。结论泻心汤有效组分及其配伍对内毒素肺损伤大鼠保护作用与抑制NF-κB的核转位及IκB的降解有关。     

NF-κB靶向性哑铃形“圈套”寡核苷酸对海马神经元及神经元样细胞中COX-2表达的影响

目的设计合成靶向性NF-κB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对神经元样细胞及海马神经元中NF-κB及环氧化酶-2(COX-2)的抑制作用。方法采用NF-κB靶向性哑铃形圈套ODNs转染培养的PC12细胞,用Western blot方法对PC12细胞内NF-κB和COX-2的蛋白表达进行分析;转染培养的海马神经元再经LPS刺激后,用RT-PCR法检测COX-2mRNA。结果经靶向性NF-κB哑铃形圈套ODNs处理的PC12细胞中NF-κB的表达明显降低(P<0.01),同时伴有COX-2表达明显减少(P<0.01);海马神经元中COX-2mR-NA的表达明显降低(P<0.01)。结论靶向性NF-κB的哑铃形圈套ODNs可抑制神经元样细胞及神经细胞中NF-κB和COX-2的表达,且NF-κB对COX-2具有调控作用。     

阿托伐他汀对人血管内皮细胞E3RSI κB酶mRNA与UBC5酶mRNA表达的影响

目的通过研究阿托伐他汀对人血管内皮细胞泛素系统中E3RSIκB酶mRNA及UBC5酶mRNA表达的影响,探讨其抗炎机制。方法采用逆转录聚合酶链反应方法观察人ECV304细胞泛素蛋白连接酶家族中的E3RSIκB酶及泛素缀合酶中的UBC5酶的mRNA表达情况。结果阿托伐他汀能剂量依赖地抑制脂多糖诱导的人ECV304细胞E3RSIκB酶及UBC5酶的mRNA表达增加,脂多糖组E3RSIκB酶及UBC5酶的mRNA相对表达量分别为4.535±0.779、1.426±0.062;阿托伐他汀0.1μmol.L-1、1μmol.L-1、10μmol.L-1组的E3RSIκB酶及UBC5酶的mRNA相对表达量分别为2.907±0.103、1.726±0.058、0.723±0.079和1.208±0.062、1.103±0.125、0.414±0.039。结论阿托伐他汀能够减轻脂多糖诱导的ECV304细胞E3RSIκB酶及UBC5酶的mRNA表达增加,说明其能通过减少核因子κB抑制因子α的降解抑制核因子κB的活性进而达到抗炎效果。