rhGM-CSF对小鼠口腔粘膜损伤的防治作用

目的：探讨rhGM-CSF促进口腔腔溃愈合的作用机制。方法：取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞，用rhGM-CSF刺激成纤维细胞后第2、4、6天用细胞计数及^3H－胸腺嘧啶掺入法（^3H-TdR）测定其增殖情况，结果rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用，在80－100ng/ml时，细胞生长达到最佳状态，过高浓度rhGM-CSF的刺激作用反而下降。结论：rhGM-CSF可以通过刺激成纤维细胞增殖及DNA合成促进口腔溃疡愈合。     

rhGM—CSF和rhG—CSF对急性白血病骨髓CFU—F形成的影响

应用人骨髓ＣＦＵ－Ｆ体外培养技术,观察ｒｈＧＭ－ＣＳＦ、ｒｈＧ－ＣＳＦ对急性白血病骨髓ＣＦＵ－Ｆ生成的影响。结果表明,上二者对ＣＦＵ－Ｆ的形成均有明显促进作用及协同效应,用ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的作用大于ｒｈＧ－ＣＳＦ。提示二者可能通过这种促进作用和改善骨髓微环境而更有效地发挥造血调节机能。     

氨甲喋呤致口腔粘膜损伤动物模型的建立

氨甲喋呤(methotrexate,MTX)[1]是一种常用的抗代谢类化疗药物,体内与二氢叶酸和一氢叶酸还原酶结合,使叶酸不能形成四氢叶酸,导致嘌呤及胸腺嘧啶核苷酸合成的障碍,引起DNA、RNA及蛋白质合成的抑制,影响肿瘤细胞增殖,也影响更新较快的造血细胞及上皮细胞,从而引起口腔炎、骨髓抑制等副作用.进行防治化疗药物所致口腔炎的临床研究,首先应建立稳定的动物模型.文献[2-5]中提供了多种引起口腔溃疡的方法,但化疗药物引起口腔溃疡的动物模型研究尚未见报道.本项研究目的在于探索建立氨甲喋呤致小鼠口腔粘膜损伤动物模型的时相及用药剂量.     

rhGM—CSF对放疗化疗后动物血象的影响

ｒｈＧＭＣＳＦ对放疗化疗后动物血象的影响韩金祥赵建王美岭孙光林海作者单位：山东省医学科学院生物技术研究中心，济南２５００６２粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）是一种调节造血细胞功能的重要的细胞因子。它可刺激机体造血祖细胞增殖并分化粒细胞、...     

rhGM—CSF对^60Co照射小鼠外周血细胞和骨髓细胞动态变化？…

探讨重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对受照小鼠外周血和骨髓细胞的影响。方法采用６．０Ｇｙ＾６０Ｃｏ－γ照射小鼠造成造血功能损伤，采尾静脉血计数外周血白细胞及其分类，取一侧股骨骨髓计数骨髓有核细胞，取另侧骨髓制片观察骨髓粒系分裂池，存贮池，成熟池骨髓细胞绝对值动态变化。     

脐血血浆,rhGM—CSF增强急性髓性白血病细胞对Ara—C敏感性的…

研究了脐血血浆、基因重组人粒－单细胞集落刺激因子对２０例急性髓性白血病细胞体外对糖胞苷敏感性的影响。采用ＭＴＴ法测定Ａｒａ－Ｃ的细胞毒作用发现，ＣＢＰ及ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可显著增强Ａｒａ－Ｃ对耐药ＡＭＬ细胞的毒性作用，与对照组相比，Ｐ〈０．０５；     

抗CD3McAb和rhGM—CSF对再障患者CFU—GM生长的体外影响的研究

用ＣＦＵ－ＧＭ单固体琼脂培养技术研究了抗ＣＤ３单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和重组人集落刺激因子对再生障碍性贫血（ＡＡ）患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ体外生长进行研究。结果表明：１０μｇ／ｍｌ的抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和０．１μｇ／ｍｌ的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ均可增加ＡＡ患者ＣＦＵ－ＧＭ的集落数,抗ＣＤ３ＭｃＡｂ作用较ｒｈＧＭ＝ＣＳＦ显著,且不同患者对抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的敏感性不同,对ＡＡ患者,临床治疗时,应先行     

F68及其联合DMSO对脐血造血细胞的低温保护作用

目的研究普鲁兰尼克(F68)及其联合DMSO在-80℃条件下对脐血造血干细胞的低温保护作用,为临床应用提供依据.方法脐血造血细胞冻存30、60、90 d后复苏,应用台盼蓝拒染率、集落形成试验、3H-TdR掺入率等,测定经F68保护体系冻存的脐血活力,并与目前通用的冷冻保护剂二甲亚砜及CP-1进行了对比研究.结果在-80℃条件下,F68对脐血造血细胞具有明显的冷冻保护作用,并与DMSO具有协同保护效果,联合F68及DMSO的保护体系可使MNC、CFU-GM的平均回收率及台盼蓝拒染率在第90天时分别达到(83.4±6.3)%,(68.8±7.9)%, (92.5±5.1)%,优于目前通用的细胞冻害保护液CP-1及DMSO.90 d的冻存期内,脐血细胞活力无明显下降.结论 F68及其与DMSO组成的冻存方案对脐血造血干细胞具有良好的冻存保护效果.     

脐血造血干细胞不同温度长期冻存效果的实验研究

目的通过观察在不同温度条件下长期冻存的效果,以探讨脐血造血干细胞适宜的保存时间。方法以终浓度为5%二甲基亚砜(DMSO)、3%羟乙基淀粉(HES)和4%人血白蛋白(HSA)作为细胞冷冻保护剂,分别采用-80℃冰箱直接冻存和程控降温-196℃液氮冻存,冻存前及冻存3、6及12个月后,应用全自动血细胞分析仪测定脐血单个核细胞(MNC)计数,台盼蓝拒染法显微镜下计数细胞存活率及流式细胞仪测定CD34 细胞计数。结果在-80℃冰箱冻存3个月后,脐血MNC计数、台盼蓝拒染率及CD34 细胞计数冻存前后比较差异均无显著性。冻存6个月后,脐血台盼蓝拒染率较冻存前差异有显著性(P<0.05)。冻存12个月后,脐血各项指标较冻存前差异均有显著性,其中台盼蓝拒染率差异存在非常显著性(P<0.01)。在-196℃液氮冻存3、6及12个月后,脐血MNC计数、台盼蓝拒染率及CD34 细胞计数冻存前后比较均无显著差异。结论以终浓度为5%二甲基亚砜(DMSO)、3%羟乙基淀粉(HES)和4%人血白蛋白(HSA)作为细胞冷冻保护剂,脐血造血干细胞在-80℃冰箱中可以有效保存3个月,6个月后存在部分细胞损害,此时的脐血不适合作干细胞移植。脐血经程控降温-196℃液氮冻存12个月后,造血干细胞仍保存完好,适宜长期保存。     

两种不同方法分离脐血造血干细胞实验研究

目的比较两种不同方法分离脐血造血干细胞的结果。方法采用Ficoll法、HES法分离脐血单细胞,比较两种方法优点。结果HES法所得MNC产率(79.31±2.68)%、GM-CFU数(60.92±9.49)均显高于Ficoll分离法所得MNC产率(41.72±4.19)%、GM-CFU数(31.17±5.26) (P<0.01)。该研究采用S法分离脐血造血干细胞对HLA相合的相关脐血移植已成功重建造血。结论HES分离法病原菌污染机,且单个核细胞、造血干/祖细胞的回收率较高,对重建造血无不良影响,是一种较好的分离方法。     

脐血造血细胞分离和冻存的研究

用６％羟乙基淀粉学淀，比重１．０７７，１．０８０的Ｆｉｃｏｌｌ－泛影葡胺及比重１．０８０的Ｐｅｒｃｏｌｌ分层分离脐血有核细胞，发现以比重１．０８０的Ｐｅｒｃｏｌｌ分层后粒－单核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ０回收率最高，可达１０４％，随全血加入培养体系中的少量血浆会明显影响ＣＦＵ－ＧＭ回收率的计算，６例脐血用不同保护剂及降温方法冻存证明－７０℃冰箱降温效果接近甚至优于程控降温，结果表明，用Ｐｅｒｃ     

CD34~+脐血造血干细胞的体外培养及其生物学特性研究

目的:建立稳定的CD34+脐血造血干细胞(CD34+UHSC)的体外分离、培养扩增体系,并研究其生物学特性。方法:密度梯度离心及免疫磁珠法从脐血中分离CD34+UH-SC,加入细胞因子SCF、IL-3和IL-6进行体外培养扩增,观察细胞形态及其生长特性。应用流式细胞仪测定细胞周期及其CD34分子的表达,研究其增殖、生长和分化特性。以RT-PCR法检测干细胞高表达基因ABCG2的转录表达。结果:在体外培养条件下,CD34+UHSC悬浮生长,约1周后易形成克隆球,增殖旺盛,呈现指数生长期;细胞增殖周期随体外培养时间延长而逐渐趋缓;CD34+UHSC表面标志亦随体外培养时间延长而表达下降,同时ABCG2基因的表达亦逐步下调。结论:体外获得纯化的CD34+UHSC,生长稳定、增殖能力强,但随体外培养时间的延长,CD34+分子标志逐步丢失,提示在增殖旺盛的指数生长期7～21d内最适用于各项相关实验研究。     

脐血干细胞的研究进展

脐血干细胞是近几年来发观的．类具有与骨髓干细胞相同的多向分化潜能的原始祖细胞。本文就其细胞特性、诱导分化以及在临床治疗中的研究现状作一综述，并与研充卡日对较为成熟的骨髓干细胞进行比较。对脐血干细胞在组织工程学中的应用前景作进一步的探讨     

人脐血基质细胞深低温保存的实验研究

目的　探讨一种简便可行的人脐血基质细胞冻存方法。方法　采用 5 %二甲基亚砜 (DMSO) ,3%羟乙基淀粉 (HES)和 4 %人血白蛋白 (HAS)作冷冻保护剂 - 80℃冻存人脐血基质细胞 ,观察不同时相点的基质细胞活性、细胞计数 ,回收率 ,基质细胞集落形成单位 (CFU F)及其支持集落生长的作用 (CFU S ,CFU GM ,CFU E)。结果　保存 6个月后人脐血基质细胞的细胞活性仍保持在 (90 .6± 2 .8) % ,CFU F产率也达到 (83.6± 1 .8) % ,其支持集落生长的作用与保存前无统计学差异。结论　本方法是一种简便易行的人脐血基质细胞保存法     

双份异基因脐血干细胞移植治疗粘多糖病的护理

目的探讨双份异基因脐血干细胞移植治疗粘多糖病的护理措施。方法对1例行双份异基因脐血干细胞移植术的粘多糖患儿进行有效护理。护理措施包括：严格无菌操作;做好双份脐血的解冻、复温及输注;移植期间严密观察病情变化,尤其是心率、血压、小便颜色的观察及处理;做好移植后抗GVHD的处理以及感染控制;认真做好心理护理和出院指导。结果患儿成功移植,于移植后＋29天中性粒细胞开始重建,＋36天时顺利出仓,未发生相关并发症。结论有效的护理有助于提高双份异基因脐血干细胞移植治疗粘多糖病患者的生活质量及预后的改善。     

人脐血间充质干细胞体外分离、培养与鉴定

目的 建立体外分离和培养人脐血间充质干细胞的方法,并探讨脐血间充质干细胞是否具有与骨髓间充质干细胞相一致的免疫表型.方法 无菌条件下采集正常产胎儿脐血,用相对密度为1.077的淋巴细胞分离液分离脐血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,UCB-MSCs),采用贴壁培养法获得MSCs,体外培养并对其增殖进行观察.用流式细胞仪检测细胞周期状态和白细胞表面抗原.结果 来源于脐血的MSCs在含有15%胎牛血清和低糖DMEM培养基中可以贴壁,并表现为间充质样细胞;传3代后,此类细胞可以纯化、扩增;其细胞倍增时间为60h左右.流式细胞分析细胞周期显示大部分细胞(85%)处于G0/G1期;此类细胞稳定地表达相关的抗原标记CD29、CD44、CD54、CD105,但不表达造血细胞系的表面标记CD34、CD45.结论 脐血中可培养出非造血干细胞,其白细胞表面抗原表达与骨髓间充质干细胞有较强的一致性.     

青蒿琥酯对K562细胞和脐血CD34+造血干/祖细胞的选择性作用

目的 探讨青蒿琥酯(artesunate, AST)对K562细胞和正常造血干/祖细胞是否具有选择性作用.方法 选用K562细胞及脐血CD34 造血干/祖细胞,加入不同浓度AST.MTT法检测药物对上述两种细胞增殖的影响;甲基纤维素半固体培养法考察AST对其体外扩增和多向分化能力的影响;以流式细胞术Annexin V-FITC-PI双染定量检测细胞凋亡率;Western blot方法检测BCR-ABL融合蛋白的表达.结果 青蒿琥酯对K562细胞有明显的抑制增殖和诱导凋亡的作用(P＜0.01),并存在时效和量效关系,对集落抑制作用明显(P＜0.01).青蒿琥酯在12.5～25 μg/ml作用48 h对脐血CD34 造血干/祖细胞增殖抑制作用和诱导凋亡作用不明显(P＞0.05),对集落生成亦无明显抑制作用(P＞0.05).经青蒿琥酯作用48 h,K562细胞BCR-ABL蛋白以剂量依赖方式被降解(P＜0.01). 结论 青蒿琥酯在一定浓度范围内对K562细胞具有选择性抑制增殖和诱导凋亡的作用,对脐血CD34 造血干/祖细胞影响较小.