日本血吸虫未成熟卵对小鼠肝肉芽肿形成的免疫学影响

目的探讨日本血吸虫未成熟卵诱导宿主产生抗雌虫生殖和抗卵胚免疫的效果及其对小鼠肝肉芽肿形成的影响。方法采用未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）及其不同组分抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，检测小鼠产生的抗病免疫能力。结果经ＳＩＥＡ和ＳＩＥＡ２６～２８０００分子抗原免疫后，均可明显地降低攻击感染后免疫鼠的肝肉芽肿数目和大小。与对照组比较，上述两者免疫后的小鼠，其肝肉芽肿平均直径分别下降了２９．２６％和４９．６４％，尤以ＳＩＥＡ２６～２８０００分子抗原的免疫效果为佳，且感染鼠脾重明显下降（Ｐ＜０．０１）。但是成熟虫卵可溶性抗原以及ＳＩＥＡ－１分部抗原免疫对降低肝卵肉芽肿数量和大小以及脾肿大程度均无明显作用，甚至刺激肉芽肿反应增强。结论ＳＩＥＡ和ＳＩＥＡ２６～２８０００分子抗原免疫可诱导宿主产生抗雌虫生殖和抗卵胚发育的作用，并明显抑制虫卵肉芽肿的形成。     

日本血吸虫云南品系SIEA对小鼠的免疫保护作用

目的观察日本血吸虫云南品系SIEA(未成熟卵可溶性抗原)免疫小鼠后产生的免疫保护效果.方法ICR小鼠经日本血吸虫云南品系SIEA免疫后攻击感染血吸虫尾蚴,感染后46 d剖杀,观察减虫率、粪卵减少率、雌虫子宫内虫卵数、肝表面虫卵结节数、肝脏各期虫卵数及各期虫卵构成比.结果经SIEA免疫后感染血吸虫尾蚴的小鼠粪卵及雌虫子宫内虫卵减少率分别为33.25%,34.75%(P<50.05);肝表面虫卵结节密度下降47.76%(P<0.05);肝组织内虫卵总数下降,每雌肝卵减少率为41.83%(P<0.05);每雌成熟虫卵减少率为54.37%(P<0.05);肝组织内成熟虫卵比例下降,未成熟卵比例增加(P<0.05).结论日本血吸虫云南品系未成熟卵可溶性抗原(SIEA)的抗原性较强,诱导小鼠产生了抗卵胚发育及抗雌虫生殖免疫力,可望作为血吸虫抗病疫苗候选抗原.     

日本血吸虫铁蛋白基因的筛选,克隆与表达

采用Ｓｊ未成熟虫卵抗原超免疫兔血清对Ｓｊ成虫ｃＤＮＡ文库进行筛选，并对可能具有抗日本血吸虫生殖／卵胚发育潜能的抗原汾子进行克隆，表达。常规法免疫筛选Ｓｊ成虫文库，获得单个阳性克隆，ＰＣＲ扩增后琼脂糖电泳测定基因大小，ＤＮＡ测序，基因库搜索，找出同源基因。共鉴定出６个不同的基因克隆，选择其中的铁蛋白基因亚克隆于ｐＧＭＣ载体，重组蛋白以ＧＭＣＳＦ（粒细胞巨噬细胞集落刺激因子）－ＳｊＦｅｒ融合蛋白的形成     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导抗卵免疫的初步研究

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）及成熟虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，发现ＳＩＥＡ诱导小鼠产生显著的抗生殖及抗卵胚发育的免疫力；与对照组比较，ＳＩＥＡ免疫鼠在攻击感染后４６天，肝、肠组织内总虫卵数明显下降，成熟虫卵数和粪卵数分别降低了５９．９８％，６６．８６％和６６．９７％；粪卵下降程度与肝、肠组织中成熟虫卵的减少相一致，ＳＥＡ免疫后未呈现上述效应。     

日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导抗卵免疫的初步研究

采用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）及成熟虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，发现ＳＩＥＡ诱导小鼠产生显著的抗生殖及抗卵胚发育的免疫力，与对照组比较，ＳＩＥＡ免疫鼠在攻击感染后４６天，肝，肠组织内总虫卵数明显下降，成熟虫卵数和粪卵数分别降低了５９．９８％，６６．８６％和６６．９７％，粪卵下降程度与肝，肠组织中成熟虫卵的减少相一致，ＳＥＡ免疫后未呈现上述效应。     

肿瘤坏死因子—α对日本血吸虫雌虫产卵量影响的研究

离体的日本血吸虫雌性成虫在含肿瘤坏死因子的培养液中培养７２ｈ后，产孵量明显高于不含ＴＮＦ－α的对照组。在ＴＮＦ－α为１０ｎｇ／ｍｌ－４０ｎｇ／ｍｌ范围内，雌虫产卵量与ＴＮＦ－α呈剂量信赖性，感染血吸虫的小鼠经尾静脉反复注入多克隆抗ＴＮＦ－α抗血清后，其肝脏减卵率达２８．４％，结果提示ＴＮＦ－α具有促进雌虫产卵的作用。     

丙烯基硫脲对日本血吸虫成虫及虫卵作用的初步研究

采用丙烯基硫脲 30 0mg/ (kg·d)连续 3d经腹腔注射感染日本血吸虫 42d的小鼠 ,停药后 2h进行解剖 ,结果发现 :丙烯基硫脲对日本血吸虫雌雄成虫生长发育及雌虫卵巢长度无明显影响 (P >0 .0 5 ) ,而雌虫子宫内则出现无卵或虫卵形状不规则 ,呈沙粒状小团块物 ,未见明显虫卵卵壳。提示丙烯基硫脲作为酚抑制剂能有效抑制日本血吸虫雌虫成虫产卵     

旋毛虫肌蚴可溶性抗原与日本血吸虫抗血清交叉反应的研究

目的 从分子水平研究旋竿虫诱导抗日本血吸虫保护性免疫。方法 应用ＥＩＴＢ技术对旋毛虫肌蚴上清抗原与多种日本吸虫抗血清的交叉反应进行分析。结果 旋毛虫肌蚴抗原与日本吸虫感染血清、抗雄虫家兔血清、抗尾蚴血清、抗成熟卵及未成熟血清、抗环卵血清、抗成虫表膜血清及抗ＧＳＴ血清存在广泛交叉反应带。结论 旋毛虫抗血吸虫抗原具有复杂性,其与血吸虫不同发育阶段、不同组分免疫血清存在交叉反应。     

日本血吸虫铁蛋白基因的筛选、克隆与表达

采用Ｓｊ未成熟虫卵抗原超免疫兔血清（ＲＡＳｊＩＥＡ）对Ｓｊ成虫ｃＤＮＡ文库进行筛选，并对可能具有抗日本血吸虫生殖／卵胚发育潜能的抗原分子进行克隆、表达。常规法免疫筛选Ｓｊ成虫文库，获得单个阳性克隆，ＰＣＲ扩增后琼脂糖电泳测定基因大小，ＤＮＡ测序，基因库搜索，找出同源基因。共鉴定出６个不同的基因克隆。选择其中的铁蛋白（ＳｊＦｅｒ）基因亚克隆于ｐＧＭＣ载体。重组蛋白以ＧＭＣＳＦ（粒细胞巨噬细胞集落刺激因子）－ＳｊＦｅｒ融合蛋白的形式在细菌中高效表达。表达产物仅溶于８Ｍ尿素溶液中，分子量为４０ｋＤ。     

日本血吸虫未成熟虫卵超微结构和免疫电镜的初步观察

目的 观察日本血吸虫未成熟虫卵发育过程中形态学变化，深入了解抗卵胚免疫作用的效应机制。方法 应用透射电镜及免疫电镜方法，研究日本血吸虫卵及其肉芽肿反应超微结构，并对成熟虫卵及未成熟虫卵进行透射电镜和免疫电镜比较观察。结果 进一步证实日本血吸虫宙表面布满网络状纤丝和微棘状突起。成熟虫行毛微管呈现典型的９＋２结构。肉芽肿瘤细胞形态超微结构显示嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、浆细胞、淋巴细胞和纤维母细胞功能活跃     

日本血吸虫(云南品系)未成熟卵可溶性抗原免疫保护性观察(摘要)

目的对日本血吸虫云南品系未成熟卵可溶性抗原(solubleimmatureeggsantigen,SIEA)免疫鼠体内日本血吸虫成虫的睾丸及卵黄腺组织进行超微结构观察,探讨SIEA抗日本血吸虫生殖作用机制;观察日本血吸虫云南品系未成熟卵可溶性抗原(SIEA)的抗病免疫作用;观察小鼠经云南品系SIEA免疫后用皖鄂品系血吸虫尾蚴攻击感染,是否也能诱导产生抗病免疫效果.方法制备日本血吸虫云南品系未成熟卵可溶性抗原(SIEA).取适量SIEA加等量福氏佐剂,背部皮下多点注射免疫ICR小鼠后分2组,分别用大理钉螺和华东钉螺逸出的血吸虫尾蚴(30±2)条,攻击感染.于感…     

日本血吸虫成虫31／32KD蛋白保护性免疫力的研究

采用纯化的日本血吸虫成虫31／32KD蛋白加福氏佐剂免疫小鼠，不仅可减少虫负荷(减虫率28．1％)，还可降低血吸虫成虫的产卵量(减卵率71．4%)。抑制虫卵内芽肿的形成．结果提示，日本血吸虫成虫31／32KD蛋白具有较高的减卵率．可望作为混合多价疫苗的侯选组分．     

日本血吸虫成虫在体外培养中产卵和虫卵发育成熟的影响因素研究

在无血清８４１培养基中分别添加胸腺嘧啶核苷（１６×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）、鸟氨酸（１０ｍｇ／Ｌ）、强的松龙（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）和胰蛋白胨（１０ｇ／Ｌ），可促进日本血吸虫产卵。经１５ｄ的观察证实在８４１培养基中添加上述成份组成的８９１培养基比８４１培养基产卵量高、畸卵率低和产卵高峰持续时间长。成虫最初２４ｈ内产出的虫卵体外培养至第１５ｄ，ＲＰＭＩ１６４０培养基、无血清８４１培养基、８４１培养基和８９１培养基上成熟期虫卵的百分比依次为１１６±４７，１８７±５６，２８４±８３和３０１±７８。     

早老素在日本血吸虫生殖发育中的作用

目的 探讨早老素在日本血吸虫生殖发育及产卵中的作用.方法 分别收集日本血吸虫尾蚴感染小鼠后16、18、24 d后虫体,首先通过荧光定量PCR分析早老素在上述3个阶段表达;从感染后28 d雌虫中分离卵巢,荧光定量PCR分析早老素在卵巢的表达量.体外培养28 d雌雄合抱的成虫,应用siRNA对早老素进行干扰,10 d后,观察早老素被敲降后对血吸虫产卵量,雌雄合抱及生殖系统的影响.结果 荧光定量PCR结果显示,早老素在24 d雌虫表达量明显上调,同时证实该基因在卵巢组织高表达.当早老素被敲降后,雌雄合抱率和雌虫的产卵量也有明显下降.激光共聚焦结果显示相对于对照组和Mock组,RNA干扰组的生殖细胞减少,生殖系统形态出现异常.结论 早老素在日本血吸虫生殖发育和产卵中起重要调控作用.     

日本血吸虫成虫在体外培养中DNA合成的影响因素的实验研究

使用￣３Ｈ胸腺嘧啶核苷摄取作为日本血吸虫体外培养ＤＮＡ合成指标的研究发现：①在体外培养不同时间，血吸虫ＤＮＡ合成速度不同。在刚进入离体培养的２０ｈ内，血吸虫的ＤＮＡ合成被抑制在较低的水平。随后，血吸虫雌雄虫的ＤＮＡ合成迅速上升达到最高水平。在培养的１～６ｄ，血吸虫ＤＮＡ合成虽略有变化，但基本上维持在较高水平。在培养的６～１２ｄ，血吸虫ＤＮＡ合成迅速降低到低水平，②雌雄虫的ＤＮＡ合成不同，雌虫ＤＮＡ合成较雄虫高，差别有高度显著性。③培养基中的血清浓度不同，ＤＮＡ合成速度不同。当低于１０％血清浓度，有随着血清浓度的增加．ＤＮＡ合成也呈增加的趋势。当高于１０％血清浓度，随着血清浓度的增加．ＤＮＡ合成受抑制。在１０％血清浓度和２０％血清浓度的ＤＮＡ合成的差别有显著性（Ｐ＜０．０５）．证明１０％血清浓度是培养基中最适血清浓度。最后，讨论了各种影响体外培养日本血吸虫成虫ＤＮＡ合成因素的意义。     

日本血吸虫（大陆株）融合蛋白保护性免疫力的研究

采用日本血吸虫(大陆株)融合蛋白加福氏佐剂免疫小鼠,攻击感染后,不但可减少虫负荷(减虫率为29.2—51.0%),还可降低血吸虫雌虫的产卵量(减卵率为52.1—74.3%),血清抗体在初次免疫后3周即明显升高,并持续维持较高的水平。结果表明,经大肠杆菌表达的日本血吸虫重组融合蛋白能诱导抗攻击感染的保护性免疫力,可望作为混合多价疫苗的候选组份而大规模的生产。     

日本血吸虫卵基因表达文库的构建

日本血吸虫卵基因表达文库的构建陈淑贞吴海玮张兆松（南京医科大学寄生虫学教研室，南京２１００２９）关键词日本血吸虫；虫卵；基因表达；文库作者从人工感染日本血吸虫尾蚴４５天的家兔肝脏分离日本血吸虫卵，液氮中冻存。临用时研磨成粉再加变性液匀浆。按Ｐｒｏｍｅ...     

日本血吸虫不同发育阶段与旋毛虫抗原交叉性的研究

运用ＥＩＴＢ技术分析日本血吸虫（Ｓｊ）尾蚴、肝期童虫及雌雄成虫与旋毛虫（Ｔｓ）肌蚴抗原的交叉性。结果显示：Ｓｊ尾蚴、肝期童虫、成虫各阶段不同程度地被抗－ＴｓＳＡＲＳ，ＴｓＩＲＳ识别，其识别的抗原分子量在１５￣１００（尤５０￣７０）ｋＤ之间，两种抗血清识别的带型基本相同。所识别的各期Ｓｊ抗原中以尾蚴抗原最多，次为肝期童虫。３０天成虫仅雌虫抗原与上述两种抗血清在９７ｋＤ处显出一条弱带。抗－Ｓｊ♂ＡＲＳ     

雷公藤煎剂对小鼠肝脏日本血吸虫卵肉芽肿形成的影响

本文报道雷公藤对感染日本血吸虫小白鼠肝虫卵肉芽肿的影响。结果显示实验组肝单卵和多卵肉芽肿直径均明显小于对照组:肉茅肿内浆细胞和嗜酸性粒细胞极为罕见;平均每对成虫排入肝内的虫卵数少于对照组。表明雷公藤对日本血吸虫病鼠肝虫卵肉芽肿的形成有明显抑制作用。     

日本血吸虫成虫在体外培养中产卵和虫卵发育成熟的影响因素研究

在无血清８４１培养基中分别添加胸腺嘧啶核苷、乌氨酸、强的松龙和胰蛋白胨，可促进日本血吸虫产卵。经１５天的观察证实在８４１培养基中添加上述成份组成的８９１培养基比８４１培养基产量高，畸卵率低和产卵高峰持时间长。成虫最初２４ｈ内产出的虫卵体外培养至第１５天，ＲＰＭＩ１６４０培养基，无血清８４１２基８４１培养基和８９１培养基上成熟期虫卵物百分比依次为１１．６±４．７，１８．７±５．６，２８．４±８３．和