胰岛素样生长因子-1拮抗高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞的毒性作用

目的：比较胰岛素样生长因子１（ｉｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ１，ＩＧＦ１）和表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）对高浓度葡萄糖的腹膜间皮细胞毒性作用的影响。方法：体外培养人腹膜间皮细胞，在上清中加入８３．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１葡萄糖和不同浓度ＩＧＦ１或ＥＧＦ，培养２４、４８和７２ｈ后，测定３Ｈ胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）掺入率和上清中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）水平。结果：５０μｇ·Ｌ－１的ＩＧＦ１作用７２ｈ后，８３．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１葡萄糖溶液中培养间皮细胞的３ＨＴｄＲ掺入率较高糖抑制组增加（７５±１５）％（Ｐ＜０．０１），作用２４ｈ，上清中ＬＤＨ水平较高糖抑制组减少（３４±８）％（Ｐ＜０．０１）；ＥＧＦ对高糖细胞毒性无明显影响（Ｐ＞０．０５）。结论：ＩＧＦ１能拮抗高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞的毒性作用。     

胰岛素样生长因子—1拮抗高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞的毒 …

目的 比较胰岛素样生长因子－１（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－１，ＩＧＦ－１）和表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）对高浓度葡萄糖的腹膜间皮细胞毒性作用的影响。方法 体外培养人腹膜间皮细胞，在上清中加入８３．３ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１葡萄糖和不同浓度ＩＧＦ－１或ＥＧＦ，培养２４，４８和７２ｈ，测定＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入率和上清中乳酸脱     

游离脂肪酸对基础状态β细胞胰岛素分泌和前胰岛素原mRNA表 …

目的：研究游离脂肪酸（油酸和软脂酸）对基础状态大鼠β细胞胰岛素分泌和前胰岛素原ｍＲＮＡ表达的影响。方法：体外分离培养Ｗｉｓｔａｒ乳鼠β细胞，与软脂酸或油酸共同孵育２４ｈ后，测定胰岛素浓度和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测前胰岛素原ｍＲＮＡ表达。结果：（１）软脂酸（０．２５ｍｍｏｌ／Ｌ）或油酸（０．１２５ｍｍｏｌ／Ｌ）组β细胞胰岛素分泌量明显高于对照组。（２）经软脂酸和油酸共同培养２４ｈ     

NO介导脂多糖及IL—1β刺激肾小球系膜细胞的增殖

为了研究ＮＯ在介导细胞脂多糖及白细胞介素－１β对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响。采用重氮化反应法和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察系膜细胞产生ＮＯ及促细胞增殖能力。结果显示，ＩＬ－１β和ＬＰＳ有明显刺激系膜细胞产生ＮＯ能力和促细胞增殖作用，并具有协同作用。     

胰高糖素样肽GLP-1(7-36)NH2对体外培养的新生大鼠胰岛细胞作用的研究

目的与方法探讨ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２对培养的新生大鼠胰岛细胞胰岛素和胶高糖素释放的影响,并以Ｆｌｕｏ－３为探针,用５７０型粘附式细胞仪研究ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２对β细胞内Ｃａ２＋的作用。结果在含１１．２ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖的ＫＲＢＢ液中孵育１ｈ,ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２在１０~－１１－１０~－８ｍｏｌ／Ｌ使胰岛细胞胰岛素分泌增加和胰高糖素分泌减少;在１０~－９ｍｏｌ／Ｌ时,促胰岛素释放作用最大。在含２.８ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时,ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２使胰岛素分泌无明显增加,但在含葡萄糖５６、１１．２和１６.７ｍｍｏｌ／Ｌ时,胰岛素分泌明显增加：在含葡萄糖１６．７ｍｍｏｌ／Ｌ时,ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２使胰岛β细胞内Ｃａ~２＋升高明显。结论ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ_２具有葡萄糖浓度依赖的促胰岛素释放作用和抑制胰高糖素分泌作用。     

游离脂肪酸对基础状态β细胞胰岛素分泌和前胰岛素原mRNA表达的影响

目的：研究游离脂肪酸（油酸和软脂酸）对基础状态大鼠β细胞胰岛素分泌和前胰岛素原ｍＲＮＡ表达的影响。方法：体外分离培养Ｗｉｓｔａｒ乳鼠β细胞，与软脂酸或油酸共同孵育２４ｈ后，测定胰岛素浓度和３ＨＴｄＲ掺入量，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测前胰岛素原ｍＲＮＡ表达。结果：（１）软脂酸（０．２５ｍｍｏｌ／Ｌ）或油酸（０．１２５ｍｍｏｌ／Ｌ）组β细胞胰岛素分泌量明显高于对照组。（２）经软脂酸和油酸共同培养２４ｈ后，β细胞３ＨＴｄＲ掺入量增高。（３）软脂酸和油酸试验组β细胞前胰岛素原ｍＲＮＡ表达均高于未经游离脂肪酸培养的对照组。结论：游离脂肪酸可能通过促进基础状态β细胞前胰岛素原ｍＲＮＡ表达和细胞增生，造成基础状态β细胞分泌胰岛素过多，从而参与了高胰岛素血症的发生。     

脱氧腺苷对大鼠胰岛细胞作用的研究

本研究探讨了２－脱氧核苷和３－脱氧核苷对大鼠离体的郎罕氏胰岛细胞分泌胰岛素的影响。２－脱氧核苷（１０ｍｍｏｌ／Ｌ）和３－脱氧核苷（０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）均可抑制上糖诱导的胰岛素释放，并且降低特异性磷酸二酯酶抑制剂Ｏｒｇ９９３５或腺苷酸环化酶激活剂Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ促进胰岛素分泌的作用，而Ａ１腺苷受体拮抗剂ＤＰＣＰＸ（０．０５－１μｍｏｌ／Ｌ）阻滞脱氧腺苷对胰岛素分泌的抑制作用。结果提示，脱氧腺对胰岛     

三种阿片肽对体外培养大鼠胰岛胰岛素释放的影响

目的：观察不同浓度的３种阿片肽对体外孵育胰岛分泌胰岛素的影响。方法：大鼠胰岛培养中分别加入１０＾－１５，１０＾－１２，１０＾－９，１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ４种浓度的β内啡肽（β－ＥＰ）、亮啡肽（Ｌ－ＥＫ）和强啡肽Ａ１－１３（ＤｙｎＡ１－１３）。结果：３种阿片肽都能刺激胰岛素分泌。高浓度（１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）β－ＥＰ和ＤｙｎＡ１－１３相对于低浓度（１０＾－１５ｍｏｌ／Ｌ）胰岛素分泌反而减少，但仍高于正     

胰岛素和卡托普利对糖尿病大鼠肾小球系膜细胞的影响

目的　观察胰岛素和卡托普利对体外培养的肾小球系膜细胞生长的影响和白细胞介素６（ＩＬ－６）及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）产生情况。方法以糖尿病大鼠模型对此进行研究。结果糖尿病大鼠（ＤＭ大鼠）系膜细胞其氚-胸腺嘧啶核苷（~３Ｈ－ＴｄＲ）掺入的每分钟记数值明显高于正常大鼠。加不同浓度胰岛素时ＤＭ大鼠和正常大鼠系膜细胞~３Ｈ－ＴｄＲ掺入的记数和上清液中ＩＬ－６的含量均分别较不加胰岛素时明显升高。加不同浓度卡托普利时，ＤＭ大鼠系膜细胞~３Ｈ－ＴｄＲ掺入的记数值和上清液中ＴＮＦ含量较不加组明显减低。结论对正常大鼠系膜细胞抑制作用只有在卡托普利１０~(－３)ｍｏｌ／Ｌ时才表现出来。胰岛素促进~３Ｈ－ＴｄＲ掺入和ＩＬ－６的产生，卡托普利抑制~３Ｈ－ＴｄＲ掺入和ＴＮＦ的产生。     

PKC抑制剂Ro31－8220对大鼠肝产生IL－6和纤维蛋白原的作用

目的：研究重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）对原代培养大鼠肝细胞分泌纤维蛋白原（Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ，Ｆｇｎ）的影响及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｒｏ３１－８２２０对枯否细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法：以酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）测定Ｆｇｎ；测定Ｉ－６采用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入增殖法。结果：大鼠肝细胞（３×１Ｏ６／ｍｌ）与ｒｈＩＬ－６（０～１００ｋＵ／Ｌ）孵育２４ｈ，刺激肝细胞分泌Ｆｇｎ增加；Ｒｏ３１－８２２０（０．１～１０μｍｏｌ／Ｌ）显著抑制枯否细胞释放ＩＬ－６。结论：提示ＩＬ－６是调节纤维蛋白原合成的重要细胞因子，推测ＰＫＣ抑制剂可通过抑制枯否细胞分泌ＩＬ－６来降低Ｆｇｎ的分泌。     

胰高糖素样肽-1(7-36)NH2引起胰岛β细胞cAMP的变化

目的 探讨ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２促胰岛素分泌的细胞内机制。方法 用放免法检测ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２在不同葡萄糖浓度下对培养的新生大鼠胰岛β细胞的胰岛素分泌量和ｃＡＭＰ含量的变化。结果 在２．８ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时,ＧＬＰ－１（７－３６）ＮＨ２使β细胞胰岛素分泌和ｃＡＭＰ含量无明显增加;优降糖能使胰岛素分泌增加,而ｃＡＭＰ含量无明显变化。在５．６,１１．２和１６．７ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖时,     

细胞生长抑制测定TGF-β1生物活性

目的：选择检测转化生长因子β１（Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ β１,ＴＧＦ－β１）的灵敏可靠的方法。方法：用水貂肺上皮细胞（ＣＣＬ－６４）作为抑制细胞,结合＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和ＭＴＴ法,对照标准含量之ＴＧＦ－β１,分别对上述方法性能进行了比较。结果：＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法较ＴＭＭ法灵敏度,稳定性好。结论：＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定ＴＧＦ－β１活性,简便实用,经济可靠,适于推广     

测定TGF—β1生物活性^3H—TdR细胞生长抑制法和MTT法比较研究

目的：探讨检测转化生长因子－β１（ＴＧＦ－１）灵敏可靠的方法。方法；用水貂肺上皮细胞（ＣＣＬ－６４）作为抑制细胞，分别采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和ＭＴＴ法。对照ＴＧＦ－β１标准含量，计算出细胞生长抑制剂，比较两法灵敏性和稳定性。结果：ＣＣＬ－６４细胞生长抑制与ＴＧＦ－β１是负相关；回归系数假设检验两种检验方法有显著差异；＾３Ｈ－ＴｄＲ法误差率比ＭＴＴ法小。结论：＾３Ｈ－ＴｄＲ法测定ＴＧＦ－β１活性较     

三碘甲腺原氨酸（T3）对大鼠胰岛体外培养时胰岛素分泌的影响

本文检测了离体大鼠胰岛在１．５４或１５．４ｔμｍｏｌ／ＬＴ＿３浓度下体外培养５天后葡萄糖诱发胰岛素分泌水平。结果表明，当培养液内葡萄糖浓度为１１．１与２２．０ｍｍｏｌ／Ｌ时，葡萄糖诱发急相或慢相胰岛素释放，Ｔ＿３（ｌ．５４μｍｏｌ／Ｌ）处理组胰岛与对照组比较均显著降低。提示高糖情况下，Ｔ＿３对葡萄糖诱发离体胰岛胰岛素分泌有直接的延迟性抑制作用，而胰岛内胰岛素含量改变可能是导致葡萄糖诱发胰岛素分泌减低的重要因素之一。     

IL—1和IL—6对肾小球系膜细胞炎症效应的作用

应用＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和四甲基偶氮唑ＭＴＴ比色法探讨了人重组白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１，ＩＬ－１）和白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）对成人肾小球系膜细胞增殖的影响。结果发现，在无血清培养条件下，γＩＬ－１（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＩＬ－１）和γＩＬ－６（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＩＬ－６）均不能刺激系膜细胞的繁殖；而在有少量胎牛血清存在的条件下     

氧化修饰LDL对培养人脐胸脉内皮细胞DNA合成和胆固醇酯合成…

目的：研究氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）对内皮细胞的损伤作用。方法：以胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和胆固醇酯薄层层析法，观察ｏｘＬＤＬ对培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＮＥＣ）ＤＮＡ合成和胆固醇酯含量的影响。结果：ｏｘＬＤＬ抑制内皮细胞ＤＮＡ合成，并与浓度及作用时间相关，１００ｍｇ．Ｌ＾－１的ｏｘＬＤＬ作用２４ｈ的内皮细胞掺入＾３Ｈ－ＴｄＲ的ｄｐｍ数为不加ＬＤＬ组的４８％（Ｐ〈０．００１），天     

急性髓细胞白血病细胞IL—2受体基因的研究

为研究髓细胞白血病（ＡＭＬ）细胞白介素－２受体（ＩＬ－２Ｒ）基因及ＩＬ－２在ＡＭＬ中的作用，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对４１例ＡＭＬ患者化疗前白血病细胞ＩＬ－２Ｒα ｍＲＮＡ和ＩＬ－２ＲβｍＲＮＡ进行检测，并对部分ＩＬ－２Ｒ基因阳性表达细胞用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定其对重组人ＩＬ－２（ｒＨＩＬ－２）的反应。结果显示，ＡＭＬ组织ＩＬ－２Ｒα和ＩＬ－２β基因表达是一普遍现象，４１例中白血病     

普罗布考对过氧化氢诱导平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨普罗布考（Ｐｒｏｂｕｃｏｌ）对Ｈ２Ｏ２诱导的平滑肌细胞（ＳＭＣＳ）增殖的抑制作用。方法：采用细胞计数法和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察０．１～１００μｍｏｌ／Ｌ Ｐｒｏｂｕｃｏｌ对新生牛血清（ＮＣＳ）和过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）促ＳＭＣＳ增殖的抑制作用。结果：１０μｍｏｌ／Ｌ及１００μｍｏｌ／Ｌ Ｐｒｏｂｕｃｏｌ作用９６ｈ,可抑制１０％ＮＣＳ刺激的ＳＭＣＳ增殖,而１,１０及１００μｍｏｏｌ／Ｌ Ｐｒ     

PKC抑制剂Ro31—8220对大鼠肝产生IL—6和纤维蛋白原的作用

目的；研究重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）对原代培养大鼠肝细胞分泌纤维蛋白的ＩＦｉｂｒｉｎｏｇｅｎ，Ｆｇｎ）的影响及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｒｏ３１－８２２０对枯否细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法；以酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）测定Ｆｇｎ；测定ＩＬ－６采和「＾３Ｈ」－ＴｄＲ掺入增殖法。结果；大鼠肝细胞（３×１０＾５／ｍｌ）与ｒｈＩＬ－６（０－１００ｋＵ／Ｌ）孵育２４ｈ，刺激肝细胞分泌Ｆｇｎ增加     

c—myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管？…

应用细胞培养、核酸斑点杂交、Ｈ＾３－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ〈０．０１）及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（