茶叶,蚕豆对人肾小球系膜细胞分泌IL—8影响的实验研究

目的：研究茶叶和蚕豆等人肾小球系膜细胞（ｈＭＣ）的增殖和合成、分泌ＩＬ－８的影响。方法：应用体外技术、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法ＭＴＴ法观察苛叶和蚕豆等对ｈＭＣ增殖的抑制作用。用ＥＬＩＳＡ夹心法测定ＩＬ＿１、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）刺激ｈＭＣ的培养上ＩＬ－８和ＩＬ－６的含量，并观察茶叶、蚕豆对ｈＭＣ分泌ＩＬ－６和ＩＬ－８的抑制作用。结果和结论：茶叶和蚕豆等对体外２的ＨＭＣ的增殖有抑制作用，ＩＬ－１、ＴＮＦ     

白细胞介素—10对大鼠肾小球系膜细胞炎症效应的拮抗作用

探讨白细胞介素（ＩＬ）－１０对肾小球系膜细胞炎症效应的调节作用。方法采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法与细胞计数，观察系膜细胞的增殖反应，以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交观察ＩＬ－１与肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）的基因表达；生物活性检测法评估ＩＬ－１与ＴＮＦα的产生；细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达，用细胞ＥＬＩＳＡ法。结果ＩＬ－１０（２５ｎｇ／ｍｌ）抑制５％胎牛血清与ＩＬ－１诱导的系膜细胞增殖，抑制率分别为３９％和５２％。ＩＬ－１０也抑制脂多糖（ＬＰＳ）刺激的系膜细胞ＩＬ－１与ＴＮＦα生物活性的产生（抑制率分别为４８％与６８％）和基因表达，同时它还抑制ＩＬ－１诱导的系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１。结论ＩＬ－１０是一种对肾小球系膜细胞炎症效应具有抑制作用的细胞因子。     

茶叶、蚕豆对人肾小球系膜细胞分泌IL-8影响的实验研究

目的：研究茶叶和蚕豆等对人肾小球系膜细胞（ｈＭＣ）的增殖和合成、分泌ＩＬ－８的影响。方法：应用体外培养技术、３Ｈ－ＴｄＲ掺入法及ＭＴＴ法观察茶叶和蚕豆等对ｈＭＣ增殖的抑制作用。用ＥＬＩＳＡ夹心法测定ＩＬ－１、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）刺激ｈＭＣ的培养上清中ＩＬ－８和ＩＬ－６的含量，并观察茶叶、蚕豆对ｈＭＣ分泌ＩＬ－６和ＩＬ－８的抑制作用。结果和结论：茶叶和蚕豆等对体外培养的ｈＭＣ的增殖有抑制作用，ＩＬ－１、ＴＮＦ可刺激ｈＭＣ分泌ＩＬ－８和ＩＬ－６，而ＩＬ－８对中性粒细胞和Ｔ细胞有强大趋化作用，ＩＬ－６可促进ｈＭＣ增生。茶叶等可抑制ｈＭＣ分泌ＩＬ－８和ＩＬ－６，从而抑制ｈＭＣ增生，减轻炎症反应     

IL—1和IL—6对肾小球系膜细胞炎症效应的作用

应用＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和四甲基偶氮唑ＭＴＴ比色法探讨了人重组白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１，ＩＬ－１）和白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）对成人肾小球系膜细胞增殖的影响。结果发现，在无血清培养条件下，γＩＬ－１（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＩＬ－１）和γＩＬ－６（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＩＬ－６）均不能刺激系膜细胞的繁殖；而在有少量胎牛血清存在的条件下     

强力宁对慢性活动性肝炎患者IL－6、TNF－α影响的体外研究

为了解甘草甜素对慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生的肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白介素－６（ＩＬ－６）的影响，用强力宁（主要成分为甘草甜素）对１８例ＣＡＨ患者ＰＢＭＣ产生ＩＬ－６、ＴＮＦ－α的能力进行了研究。结果显示在体外培养条件下，强力宁可使ＰＢＭＣ产生ＩＬ－６、ＴＮＦ－α的能力减弱；而且ＰＢＭＣ产生ＩＬ－６、ＴＮＦ－α的能力降至最低（接近正常）时所需的剂量在ＣＡＨ活动期明显低于稳定期（Ｐ＜０．０１）。提示用强力宁治疗ＣＡＨ时应根据不同病程调节剂量。研究尚发现强力宁可能具有诱生ＰＢＭＣ膜产生可溶性ＩＬ－６受体的作用，从而中和了培养上清液中的ＩＬ－６。上述结果可部分解释其治疗ＣＡＨ的机理。     

P物质对大鼠脾细胞免疫功能的影响

目的：研究Ｐ物质（ＳＰ）对脾细胞免疫功能的调节作用。方法：采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法、放射免疫测定和流式细胞仪等方法,检测了ＳＰ对体外培养的大鼠脾细胞的增殖和分泌ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＦ功能及Ｔ细胞表型表达的影响。结果：ＳＰ能明显刺激脾细胞的增殖,其中浓度为１×１０－ ４ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ时作用最强;ＳＰ能促进Ｔ细胞ＣＤ分子的表达,使ＣＤ４＋ ／ＣＤ８＋ 升高;ＳＰ能显著促进脾细胞分泌ＩＬ－２,对脾细胞分泌ＩＬ－６具有抑制作用,而对分泌ＴＮＦ无作用。结论：证实了ＳＰ是具有广泛的免疫调节作用的一种神经肽。     

HDV阳性重型肝炎患者外周血中TNF,IL—1及IL—6的变化

目的 观察ＨＤＶ（＋）重型肝炎外周血中ＴＮＦ、ＩＬ－１及ＩＬ－６变化状况。方法 分离１６例ＨＤＶ（＋）／ＨＢＶ（＋）重型肝炎血清和ＰＢＭＣ培养上清,ＥＩＡ法则ＴＮＦ,ＩＬ－１参照Ｍｉｚｅｌ法,ＩＬ－６参与ＯｋｕｄａＭｕｒａｇｕｃｈｉ,以２１例ＨＤＶ（－）／ＨＢＶ（＋）重型肝炎为疾病对照,２０例献血员为正常对照。结果 两且重型肝炎患者血浆及ＰＢＭＣ上清中ＴＮＦ、ＩＬ－１及ＩＬ－６均非常显著升高,与献     

甲状腺细胞产生白细胞介素-6及其调节的研究

目的 研究碘化钠（ＮａＩ）、促甲状腺激素（ＴＳＨ）、白细胞介素－１（ＩＬ－１）、肿瘤坏死因了－α（ＴＮＦ－α）、地塞米松（ＤＥＸ）、肾上腺素等因子对Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）甲状腺细胞（ＴＥＣ）生成ＩＬ－６的影响。方法 以超敏ＥＬＩＳＡ方法,检测甲状腺培养细胞上清液中ＩＬ－６含量。结果 单层培养的ＴＥＣ能够产生高浓度的ＩＬ－６、ＴＳＨ（１０＾３ｍＵ／Ｌ）、ＩＬ－１（１０Ｕ／ｍｌ）、ＴＮＦ－α（１０＾－     

c-myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管周细胞增殖的影响

应用细胞培养、核酸斑点杂交、~３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（~３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞 ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０１）及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（Ｐ＜０．０１）,反义ＯＤＮｓ显著阻抑 ＨＥＣＣＭ诱导的周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ＜０．０１）及~３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（Ｐ＜０．０５）,而同义ＯＤＮｓ无上述作用（Ｐ＞０．０５）。结果提示,ＨＥＣＣＭ可通过上调ｃ－ｍｙｃ基因表达促进肺血管周细胞增殖,反义ＯＤＮｓ通过下凋ｃ－ｍｙｃ基因表达,抑制ＨＥＣＣＭ诱导的肺血管周细胞增殖。     

尾加压素在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制

目的 观察近年新发现的活性肽尾加压素（Ｕｒｏｔｅｎｓｉｎ Ⅱ,ＵⅡ）在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制。方法 （１）采用＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＵⅡ对原代培养的大鼠气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的影响,应用不同阻断剂观察ＵⅡ诱导细胞ＤＮＡ合成的信号转导通路。（２）采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针,测定ＵⅡ对胞浆游离钙浓度的影响。结果 （１）ＵⅡ呈浓度（１０＾－１０～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）依赖性刺激ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时,为对照组的７倍（Ｐ〈０．０１）;（２）蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）阻断剂Ｈ７、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）阻断剂ＰＤ９８０５９及钙通道阻断剂尼卡的平均能抑制ＵⅡ刺激的ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,其抑制率分别为２９％（Ｐ〈０．０５）,４５％（Ｐ〈     

血管外膜源一氧化氮对尾加压素Ⅱ诱导的血管平滑肌增殖的抑制作用

目的观察血管外膜生成的一氧化氮(NO)对尾加压素Ⅱ(UrotensionⅡ,UⅡ)刺激的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及机制。方法取大鼠胸主动脉,去除内皮,分以下几组进行组织孵育10h①完整外膜血管组;②单纯中膜组;③中膜与剥离的外膜共育组;④中膜与用L-N-硝基精氨酸(L-NNA)预处理的外膜共育组。每例胸主动脉剪为二段,分两个亚组UⅡ(10-7mol/L)组和对照组。3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法检测各组VSMC的细胞增殖。另取大鼠腹主动脉外膜,用10-8和10-7mol/LUⅡ刺激4h。Griess法测血管外膜生成的亚硝酸盐(NO2-)含量,3H-L-精氨酸(3H-L-Arg)标记的同位素法测定外膜一氧化氮合酶(NOS)活性。结果①各UⅡ亚组3H-TdR掺入比相应对照组分别增加62.9%～98.3%(均P<0.01)。②在10-7mol/LUⅡ刺激下,完整外膜组及中膜+外膜组的3H-TdR掺入分别比单纯中膜组低20.5%和20.3%(P<0.01);中膜+L-NNA预处理的外膜组3H-TdR掺入分别比中膜+外膜组及完整外膜组高27.1%和27.3%(P<0.01),而与单纯中膜组差异无显著性(P>0.05)。③与对照组相比,10-8和10-7mol/L的UⅡ使外膜NOS活性分别增加92.1%和177%(P<0.01);使外膜生成的NO2-含量分别增加88.7%和178%(P<0.01)。结论血管外膜生成的NO可抑制UⅡ刺激的VSMC的增殖,其抑制作用为UⅡ激活的血管外膜NOS/     

The alteration of inflammatory cytokine during acute pancreatitis]

OBJECTIVE: To observe the alteration of both inflammatory and anti-inflammatory cytokines during acute pancreatitis, and to investigate the effect of somatostatin on modulation of inflammatory and anti-inflammatory cytokines in experimental acute pancreatitis. METHODS: SD male rats were divided into 3 groups: group 1. the normal rats as control (n = 6); group 2, the rats with acute pancreatitis induced by transabdominal injection of 5% sodium cholate sulfur (at the volume of 1.0 ml/kg) into the parcreatic duct and not given drug treatment; group 3, the rats injected with stilamin 20 micrograms/kg, intravenously, 30 minutes after the successful induction of acute pancreatitis. The animals in groups 2 and 3 were killed at 2, 6 and 24 hours after operation. The blood samples were taken for measurement of IL-1, TNF alpha, IL-6 (by Bioassay) and IL-10, TNF-beta (by ELISA). The wet weight of pancreatic tissue and amylase were also determined. RESULTS: Serum IL-1, TNF alpha, IL-6, IL-10 and TGF-beta in control group were 0.56 +/- 0.06 ng/ml, 23.50 +/- 1.87 IU/ml, 69.0 +/- 6.40 IU/ml, 32.05 +/- 14.87 pg/ml and 66.4 +/- 13.20 pg/ml, respectively. After acute pancreatitis was induced, the serum level of these inflammation-concerned cytokines increased significantly in group 2 (P < 0.05). Serum IL-1, TNF alpha, IL-6, IL-10 and TGF-beta in group 2 at 24 hours after pancreatitis were 1.15 +/- 0.13 ng/ml, 55.33 +/- 12.79 IU/ml. 127.17 +/- 13.91 IU/ml, 68.13 +/- 19.90 pg/ml, and 103.77 +/- 28.95 pg/ml, respectively. After administration of somatostatin, the inflammation-concerned cytokines in group 3 were remarkably decreased (P < 0.05). Serum IL-1, TNF alpha, IL-6, IL-10 and TGF-beta in group 3 were 0.83 +/- 0.12 ng/ml, 33.00 +/- 7.40 IU/ml. 71.83 +/- 6.34 IU/ml, 42.2 +/- 14.55 pg/ml, and 45.98 +/- 18.10 pg/ml, respectively. The indeies of the severity of pancreatitis, such as amylase and the weight of pancreas alse improved in group 3. CONCLUSION: Both inflammatory and antiinflammatory cytokines increased remarkably in the rats with acute pancreatitis. This result indicates that there is a potential tendency of inflammatory response syndrome and compensatory anti-inflammatory response syndrome in the course of acute pancreatitis. Somatostatin can modulate the derangement of these cytokines in acute pancreatitis.     

Ⅱ型糖尿病患者血IL－6、TNF水平的变化

应用ＩＬ－６、ＴＮＦ的生物学检测法测定５８例Ⅱ型糖尿病（ＤＭⅡ）患者血ＩＬ－６、ＴＮＦ水平变化。结果：ＩＬ－６为２３６±２３．６４ｋｕ／Ｌ，ＴＮＦ为４１５±２４．１６ｋｕ／Ｌ，非常显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）。经治疗后，两者均明显下降（Ｐ＜０．００２，Ｐ＜０．０２），但仍显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）。表明ＤＭⅡ患者ＩＬ－６、ＴＮＦ水平均显著高于正常人，可能与ＤＭⅡ的发病有关。     

肿瘤坏死因子对淋巴激活素活化的杀伤细胞抗肿瘤活性的影响

用B_(16)W_(10)黑色素瘤作靶瘤,C_(57)BL/6小鼠为荷瘤动物,小鼠脾细胞经白细胞间介质-2培养3d为效应细胞即LAK细胞,观察了肿瘤坏死因子对LAK细胞抗肿瘤活性的影响。体外实验结果表明:单独肿瘤坏死因子(500U/ml)或低剂量白细胞间介质-2(10U/ml)均不影响LAK细胞的杀瘤活性;肿瘤坏死因子能增强亚适剂量白细胞间介质-2(100U/ml)诱导的LAK细胞活性。而不增强最适剂量白细胞间介质-2(1000U/ml)诱导的LAK细胞活性。体内实验结果表明:对局部肿瘤,瘤内同时注射肿瘤坏死因子和白细胞间介质-2和LAK细胞时,6只荷瘤鼠4只瘤块消失。其中2只存活期超过60d。对全身肺转移癌、肿瘤坏死因子、白细胞间介质-2和LAK细胞联合静脉注射亦显抗瘤作用增强,该组小鼠肺表面瘤结节数和肺结节发生率减少。     

沙尘暴PM2.5对大鼠呼吸系统免疫损伤机制研究

目的探讨沙尘暴细颗粒物(PM2.5)染毒对大鼠呼吸系统的炎症免疫损伤情况及其损伤机制。方法将40只正常成年雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和各染毒组低、中、高剂量4个组,每组10只。采用气管直接注入染毒法,分别给大鼠灌注0、1.5、7.5、37.5mg/kg剂量的颗粒物悬浮液。灌注24h后处死大鼠,并对其肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-13(IL-13)水平及免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)的含量进行检测。结果高剂量组大鼠BALF中IL-1、IL-6、IL-8、TNF水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),IL-4、IL-10及IL-13在各剂量组间表达水平差异无统计学意义;高剂量组大鼠BALF中IgG与IgM的含量与对照组比较显著升高(P<0.01),各组IgA含量的变化差异无统计学意义。结论沙尘暴细颗粒物PM2.5可引起大鼠呼吸系统显著的免疫损伤,其中以高剂量的PM2.5染毒对机体的损伤尤为显著,机体暴露于高剂量沙尘暴细颗粒物PM2.5环境可增加呼吸系统疾病发生的危险。     

葛根素对妊娠期糖尿病大鼠糖脂代谢作用的研究

目的?观察葛根素对妊娠期糖尿病大鼠糖脂代谢的影响。方法?选用高脂喂养的妊娠d1的Wistar大鼠,予链脲佐菌素（STZ）25?mg/kg一次性腹腔注射,注射72?h后,空腹血糖稳定在6.67~16.67?mmol/L为GDM模型复制成功。将造模成功的大鼠随机分为模型组、葛根素组各6只,另取6只正常妊娠大鼠为正常对照组,从妊娠d1起葛根素组予以葛根素0.25?g/(kg·d）灌胃,正常组及模型组给予等容积0.9%的生理盐水灌胃,至产出子鼠。观察各组大鼠25周时血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素（FBINS）、血脂、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、瘦素（Leptin）、脂联素（APN）的变化情况,qPCR检测肝脏组织中瘦素受体、胰岛素受体及脂肪组织中TNF-α、IL-6、APN、Leptin mRNA的表达。结果?葛根素组大鼠FBG、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、总胆固醇（TC）、TNF-α、IL-6、Leptin与模型组比较均有明显下降（P<0.05~0.01）,葛根素组大鼠高密度脂蛋白（LDL-H）、APN水平与模型组比较有显著上升（P<0.05~0.01）,葛根素组大鼠脂肪组织中胰岛素受体mRNA的表达较模型组显著增加,葛根素组大鼠肝脏组织中TNF-α、Leptin mRNA的表达较模型组明显下降（P<0.05）。结论?葛根素可改善妊娠期糖尿病大鼠糖脂代谢,其作用机制可能与调节TNF-α、Leptin、APN水平相关。      

辛伐他汀对鼠心脏成纤维细胞DNA合成的影响

目的探讨辛伐他汀(Sim)对新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFs)DNA合成的影响及甲羟戊酸(MVA)的干预效应。方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定DNA合成,观察不同浓度Sim及MVA分别作用不同时间对CFsDNA合成功能的影响。结果 (1)CFs的3H-TdR掺入率随着Sim干预浓度的增加而降低,其中10-6和10-5mol／L Sim组的3H-TdR掺入率分别为(1175±202．66)、(771±164．86)cpm／2000细胞, 显著低于对照组的(1608±204．32)cpm／2000细胞(均P<0．01);(2)10-5mol／L Sim作用CFs 6、12、18、24、30、36、42、48 h, 随着Sim作用时间的延长,CFs的3H-TdR掺入率呈递减趋势,与时间呈明显的负相关(r=-919,P<0．01);(3)CFs的3H-TdR 掺入率随着MVA干预浓度的增加呈进行性上升,其中10-4、10-3 mol／L MVA 10-5 mol／LSim组3H-TdR掺入率分别为 (1612±308．57)、(1995±353．83)cpm／2000细胞,显著高于对照10-5mol/L Sim组的(771±164．86)cpm／2000细胞(P<0．01); (4)10-3 mol／L MVA分别作用CFs 6-48 h,CFs的3H-TdR掺入率随着MVA作用时间的延长而逐渐增加,呈明显的正相关(r=0．968,P<0．01)。结论 Sim呈浓度-时间依赖方式抑制CFs DNA的合成且可被MVA拮抗,提示Sim可抑制CFs 增殖,延缓心肌纤维化,其作用可能通过MVA途径实现。     

口服补镁对实验性老年2型糖尿病大鼠胰岛素受体亲和力的影响

目的观察口服补镁对老年2型糖尿病大鼠胰岛素受体亲和力的影响。方法采用给老年2型糖尿病大鼠模型口服补镁的方法,测定肝细胞胰岛素受体亲和力,并应用高胰岛素、正葡萄糖钳夹技术测定稳态下葡萄糖输注率、空腹血糖、空腹胰岛素及血浆镁离子浓度等指标。结果高剂量补镁组（2g／kg）高、低亲和力胰岛素受体结合常数分别为（4．83±0．09）×10^8／mol和（1．12±0．17）×10^6／mol,高、低亲和力胰岛素受体结合容量分别为（4．46±0．16）×10^10／mgPr、（8．32±0．27）×10^13／mgPr,与糖尿病对照组相比各组数据均显著升高（P〈0．05）;同时,高剂量补镁组空腹血糖、空腹胰岛素及胰岛素敏感指数HOMA-IR明显下降,稳态下葡萄糖输注率显著升高。结论镁补充可提高2型糖尿病大鼠胰岛素受体亲和力,降低胰岛素抵抗。     

Characterization of a small molecule inhibitor of tumor necrosis factor-alpha production

Background Numerous studies have shown that reducing the level of tumor necrosis factor-alpha （TNFα） through the use of anti-TNF antibodies or soluble TNF receptor is a safe and efficacious treatment to inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis. Therefore, novel approaches to achieve this outcome are desired. The aim of this study was to investigate the characterization of a small molecule inhibitor, Y316, which blocks TNF mRNA upregulation and TNF production by lipopolysaccharides （LPS） stimulated monocytes. Methods Peripheral blood mononuclear cells （PBMC） from healthy volunteers were plated in 24-well plates and stimulated with LPS （1 pg/ml）, phorbol-12-myristate-13-acetate （PMA） （100 ng/ml）, zymosan （10 IJg/ml） and Tsst （100 ng/ml）. Supernatants were collected after 4-hour culture at 37℃, and quantitative determination of TNFα, interleukin-113 （IL-1β）, IL-6, IL-8, IL-10 and IL-2 production in the supernatants was performed by colorimetric enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. Total RNA of PBMC was isolated and cytokine mRNA quantitation was performed by using a RNA level measuring kit （R ＆ D Systems）. PBMC were pretreated with Y316 （10 μmol/L, 1 μmol/L, 0.1 μmol/L, 0.01 μmol/L and 0.001 μmOl/L） or dimethyl sulfoxide at 37℃ for 10 minutes, and then stimulated with LPS or PMA, protein concentrations of p44.42, IKBa, P38 and Jun NH2-terminat kinase were determined by Western blotting. Cyclic adenosine-3＇,5＇-monophosphate （cAMP） of PBMC was measured by enzyme immunoassay kit （Amersham Pharmacia Biotech）. Results Y316 blocked TNF production and inhibited the upregulation of TNF mRNA levels in response to LPS, and also prevented the production of IL-1 and IL-6. In contrast, Y316 augmented the production of IL-10 in LPS-stimulated monocytes. Y316 failed to prevent the production of IL-2 and TNF in antigen-stimulated T cells, suggesting that its effects may be cell-type specific. Y316 prevented the phosphorylation and activation of the MAPK, ERK, and therefore appeared to mediate its effects on TNF by acting at an early point in the signaling cascade induced in response to LPS. There was no effect of Y316 on cAMP levels either alone or in the presence of LPS. Conclusions Y316 appears to be a small molecule inhibiting TNF production, which may act via a novel mechanism. Identification of the target of Y316 may lead to the development of alternative strategies for achieving selective cytokine inhibition.