诊断超声联合微泡增强骨髓间充质干细胞归巢兔缺血心肌的研究

目的 探讨诊断超声联合微泡对经静脉移植兔骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)归巢缺血心肌的靶向能力.方法 采用密度梯度离心与贴壁法培养兔BM-MSCs,用DAPI标记细胞.完全结扎冠状动脉左前降支(LAD)法建立兔心肌梗死模型.将分离培养的BM-MSCs经静脉途径移植人心肌梗死兔体内.根据移植时是否介入超声与微泡分成单纯静脉移植MSCs组与超声辐照+微泡+MSCs组,移植后48 h荧光显微镜下观察缺血梗死区域及其周围的荧光标记阳性细胞数目,并对两组进行计数和统计学分析.HE染色观察局部缺血心肌的病理学改变.透射电镜观察心肌血管及内皮细胞情况.结果 荧光显微镜下显示超声辐照+微泡+细胞组较单纯静脉细胞移植组阳性细胞分布更为密集.单纯静脉细胞移植组与超声辐照+微泡+细胞组阳性细胞个数分别为(146.8±18.78)个和(213.2±26.5)个,差异有统计学意义(P<0.01).HE染色结果显示超声+微泡+细胞组缺血心肌及周围区心肌组织间隙可见红细胞成分漏出,而单纯细胞组无此发现.透射电镜显示在超声联合微泡的介导下,心肌血管内皮细胞间隔增大,血浆成分渗出.结论 超声联合微泡经静脉移植MSCs后能增加MSCs在缺血及周围区心肌的聚集与归巢,增强其靶向性.     

高强度聚焦超声生物学效应的研究进展

高强度聚焦超声(HIFU)是当前肿瘤治疗领域研究和应用的热点之一.本文对HIFU治疗肿瘤的物理机制及HIFU的生物学效应进行综述.     

低频超声对卵巢癌细胞的生物学效应

目的　研究低频超声对体外培养的人卵巢癌细胞的急、慢性生物学效应。方法　人卵巢癌细胞 3AO受不同剂量、频率为 0 .2 4MHz超声波辐照 ,根据剂量 -效应曲线确定两种不致细胞急性损伤的声波剂量 ,观察受此两种剂量超声处理后细胞的增殖能力和克隆形成力的变化。结果　 3 .92W /cm2 × 10s和 5 .12W /cm2 × 5s未致细胞急性死亡。受 3 .92W /cm2 × 10s、5 .12W /cm2 × 5s辐照和对照组细胞倍增时间分别为 45 .2h、3 4 .4h和 2 8.6h ,克隆形成率分别为 2 1.3 %、5 0 .3 %和 46.0 % ,受 3 .92W /cm2 × 10s辐照细胞增殖和克隆形成均受到抑制 (P值均 <0 .0 1)。结论　 3AO对超声的敏感性较高 ,超声的迟发效应更决定于辐照持续时间。     

对心肌预缺血保护作用的实验研究心肌声学造影超声心动图三维重建

目的 探讨心肌声学造影超声心动图三维重建（3D－MCE）对心肌预缺血（IP）的估测。方法 套扎健康犬左前降支或左旋支,建立开胸犬IP模型。IP组犬4只及再灌注（IR）组犬5支分别于基础状态、缺血4h、缺血后再灌注1h,应用经胸三维超声探头,经左房注射自制的声振5％白蛋白对其进行3D－MCE检查,并三维重建。动物处死后将左室短轴分为5－6个断面,用TTC病理染色确定危险心肌与梗死面积。结果 ①3D－MCE显示心肌总质量及造影剂充盈缺损心肌质量与病理实测值高度相关（r分别为0．93,0．92）。②3D－MCE及TTC染色结果均显示IP组心肌受损范围小于IR组。③IP组再灌注1h后灌注缺损心肌质量与再灌注即刻差异无显著性意义,P＞0．05。IR组再灌注1h后灌注缺损心肌质量较再灌注即刻增加,P＜0．05。结论 3D－MCE在定量诊断心肌梗死和心肌缺血范围时,可重复动态观察IP对活体心肌的保护作用。     

超声联合微泡对正常兔角膜组织的生物学效应

目的观察不同声强和辐照时间的超声破坏微泡对兔正常角膜组织的生物学效应。方法采用不同声强(0.5W/cm2、1.0W/cm2、2.0W/cm2)和辐照时间(30s、60s、120s)的超声作用于微泡干预的兔眼角膜,并对角膜进行定量分析和病理组织观察。结果超声声强1.0W/cm2、2.0W/cm2与0.5W/cm2组比较,角膜组织损害严重,内皮细胞密度和六角形细胞比例差异有统计学意义(P<0.05);超声辐照时间120s与30s、60s比较,内皮细胞密度和六角形细胞比例有差异有统计学意义(P<0.05)。结论超声联合微泡能明显增强角膜组织的空化效应,且超声能量越大,角膜组织损害越严重。     

不同强度超声破坏微泡对犬心肌组织的生物学效应

目的 探讨不同强度的超声破坏微泡对犬心肌组织的生物学效应,优化出影响心肌微环境的最佳辐照条件.方法 9只健康成年杂种犬随机分成3组,每组3只.静脉输入2 ml微泡造影剂,同时采用频率为1 MHz,强度不同的超声辐照(0.5 W/cm2、1.0 W/cm2、2.0 W/cm2)犬心肌组织,辐照时间为5 min.辐照完毕后即刻处死动物,取局部心肌组织.进行病理组织HE染色和透射电镜观察犬心肌细胞及毛细血管内皮细胞等细胞超微结构改变.结果 0.5 W/cm2超声破坏微泡后心肌组织水肿,无出血;1.0 W/cm2超声破坏微泡后心肌组织轻微出血和少量炎症细胞浸润;2.0 W/cm2超声破坏微泡后心肌组织明显出血,炎症细胞一定程度浸润.结论 不同强度超声破坏微泡造影剂能使犬心肌组织产生不同程度的生物学效应;超声强度在1.0～2.0 W/cm2能在使心肌轻度损伤时引起一定程度的炎症反应.     

单纯超声及超声结合理化因子的联合作用对细胞的生物效应

讨论了单纯超声和超声结合多种物理和化学因子(如射线、高热、化疗药物、光敏剂等)对正常和恶性细胞在离体和在体条件下的不同作用，并提出与单纯超声的细胞杀伤作用相比，超声和其他因子的联合作用更安全、更有效、针对性更高。综述了单纯超声、超声结合物理、化学因子的生物效应，以期为超声抗癌的进一步研究积累资料：     

肠道缺血再灌注损伤对骨髓间充质干细胞旁分泌作用的影响

目的 观察肠道的缺血再灌注损伤刺激对骨髓间充质干细胞旁分泌作用的影响,以证实骨髓间充质干细胞在肠道修复中的旁分泌作用.方法 分离、培养、鉴定Wistar雄性大鼠的骨髓间充质干细胞,制备大鼠肠道缺血再灌注模型,分别提取肠道缺血再灌注模型大鼠、正常大鼠的肠上皮黏膜提取物,与骨髓间充质干细胞共同培养;分别在培养的第0小时、第24小时留取条件培养基,ELISA检测不同细胞条件培养基以及普通培养基中转化生长因子α(TGF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞因子(FGF),胰岛素样生长因子1(IGF-1).结果 TGF-α、VEGF、FGF、IGF-1的浓度在含有正常肠上皮提取物的条件培养基中的浓度分别为(84.05±29.58)、(51.01±14.91)、(84.87±30.60)、(65.44±23.93) ng/L;在含有缺血再灌注肠上皮提取物的培养基中的浓度分别为(120.04±43.31)、(70.82±25.33)、(96.81±51.70)、(81.62±22.08) ng/L,均明显高于普通培养基中的浓度[分别为(22.08±6.91)、(28.34±8.99)、(4.17±11.10)、(4.60±9.19) ng/L,P均＜0.05].其中TGF-α、VEGF的浓度明显高于含有正常肠上皮提取物的培养基(P＜0.05).结论 骨髓间充质干细胞可以旁分泌TGF-α、VEGF、FGF、IGF-1等生长因子;而在缺血再灌注损伤的微环境下,骨髓间充质干细胞对部分生长因子的分泌功能得到增强.     

间充质干细胞旁分泌作用的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)因具有可塑性、低免疫原性、免疫调节以及自我更新能力等特性,且在机体的损伤修复、组织功能重建、免疫调节及基因治疗等方面的作用,使其成为了现代生物领域中的热点.但干细胞治疗的成活率、分化率较低、归巢量少以及安全性等问题仍然存在,并且存有致瘤的风险.同时,...     

软骨细胞增殖与分化旁/自分泌通路的研究进展

软骨细胞在发育成熟过程中,在各种生长因子、细胞因子及各种外界环境如机械压力、细胞密度变化等的作用下,发生明显形态和生化成分的改变,表现出软骨细胞的特征性变化,是通过特定的细胞信号转导通路使特定基因表达启动或关闭引起的,其中各种旁分泌,自分泌因子在促进软骨形成过程中发挥着重要的作用.目前发现与软骨细胞相关的旁,自分泌家族主要有以下几类:转化生长因子β家族、成纤维生长因子家族、Hedgehog家族和Wingless家族.细胞内基因的表达并不是一种信号的结果,而是各种信号共同参与的结果.各个细胞通路之间的联系及相互关系还有待于今后进一步发现和证实,而明确各因子对软骨细胞增殖与分化的作用也将为组织工程化软骨的发展指引方向.     

激光共聚焦显微镜观察前胡丙素对新生大鼠缺氧再灌注心肌细胞内游离钙的影响

目的激光共聚焦显微镜观察缺氧再灌注损伤对心肌细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,以及前胡丙素对模拟心肌缺氧再灌注过程中减轻钙超载的作用。方法采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,建立模拟缺氧再灌注模型。实验分4组:正常组:细胞正常培养;缺氧预适应组:预先缺氧2 h,复氧1 h,再缺氧12 h后,复氧2 h;前胡丙素预处理组:先予前胡丙素单体终浓度为100μmol/L作用1 h,再行缺氧12 h,后复氧2 h;模拟缺氧再灌注组缺氧12 h,后复氧2 h。细胞上清检测LDH值。心肌细胞以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术检测心肌细胞([Ca2+]i)变化。结果模拟缺氧再灌注组心肌细胞([Ca2+]i)荧光强度值显著高于前胡丙素预处理组及缺氧预适应组(P<0.01),前胡丙素预处理组与缺氧预适应组细胞内荧光强度无明显组间差异。结论心肌细胞缺氧再灌注损伤导致Ca2+超载,而前胡丙素有明显减轻心肌细胞模拟缺氧再灌注时Ca2+超载的作用。应用激光扫描共聚焦显微镜技术可以直观地进行细胞内钙离子研究。