纯钛表面复合胶原蛋白凝胶涂层改性及其生物学性能初探

目的：在纯钛表面制备生物胶原蛋白涂层,并探究其对成骨细胞行为的影响。方法：将Ⅰ型胶原蛋白制成凝胶,并附着于纯钛试件表面形成生物胶原蛋白涂层。以光滑钛表面为对照组,胶原蛋白涂层改性钛表面为实验组。采用扫描电镜观察试件表面微形貌,X射线光电子能谱（X?ray photoelectron spectroscopy,XPS）分析试件表面元素组成,红外光谱测试仪（fouriertransform infrared spectrometer,FT?IR）检测试件表面基团,接触角仪检测试件表面亲水性。体外培养MC3T3?E1成骨细胞,通过激光共聚焦显微镜、CCK?8、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）以及Western blot评价钛表面成骨细胞的黏附、增殖和分化能力。结果：扫描电镜观察发现实验组试件表面机械划痕变浅,XPS元素分析和FT?IR检测证实钛表面存在胶原蛋白涂层。接触角测量结果显示,实验组试件较对照组具有更好的表面亲水性。体外细胞实验结果显示,胶原蛋白涂层钛表面能促进成骨细胞的黏附和增殖活性,并上调ALP活性以及成骨相关蛋白Runx2、Osterix和OCN的表达。结论：纯钛表面复合胶原蛋白凝胶涂层改性能增强钛表面亲水性,促进成骨细胞的黏附、增殖和分化。     

聚己内酯电纺纤维支架材料对骨髓基质细胞增殖及分化的影响

目的:观察聚己内酯(PCL)电纺纤维支架材料对骨髓基质细胞(BMSCs)增殖及分化特点的影响,评价其作为骨组织工程的支架材料的应用前景.方法:将兔BMSCs与PCL电纺纤维支架材料在培养板内共培养.采用形态学观察、MTT法及ALP检测等方法检测BMSCs在PCL电纺纤维表面的粘附、增殖和分化能力.结果:体外培养的BMSCs能在PCL电纺纤维表面正常粘附和增殖,并且表达较高的碱性磷酸酶活性.结论:PCL电纺纤维适合作为支架材料应用于BMSCs为种子细胞的组织构建.     

大鼠雪旺细胞和成骨细胞联合培养的实验研究

目的观察大鼠雪旺细胞与成骨细胞体外联合培养条件下,成骨细胞的生长和增殖情况。方法日龄3 d的SD大鼠,采用混合酶消化法体外分散培养雪旺细胞和成骨细胞,并用Millicell小室实现雪旺细胞与成骨细胞的联合培养。待细胞生长稳定后,用倒置相差显微镜观察细胞的形态学特征,MTT法检测成骨细胞的增殖情况。结果对照组成骨细胞于10 d左右可以铺满培养板底,此时细胞体积增大、数量增多,形态以多角形为主,细胞之间出现重叠生长,联系密切。共培养组成骨细胞生长速度增快,7 d左右即可铺满培养板底,逐渐形成铺路石状,其中心部位的细胞较密集,可以出现散在的钙化结节。MTT结果显示共培养组成骨细胞增殖明显。结论雪旺细胞对成骨细胞的生长、增殖具有一定的促进作用。但是,关于该作用是否是通过FGFs实现的还有待于进一步的研究。     

纳米羟基磷灰石与聚己内酯复合电纺纤维膜

用水热法合成的棒状纳米羟基磷灰石（nHA）,引发ε-己内酯（ε-CL）开环聚合得到nHAPCL复合材料。用静电纺丝法分别制备了聚己内酯（PCL）、nHA/PCL共混材料和nHAPCL复合材料的3种电纺纤维膜。通过FT-IR、DSC、SEM、TGA和拉伸试验机表征了样品的结构、热性能和力学性能。结果表明：nHA-PCL电纺膜的结晶性能优于nHA/PCL材料,且热稳定性和力学性能都优于其他两种膜,nHA-PCL电纺膜的完全分解温度为420 °C,拉伸强度和断裂伸长率分别达到28.2 MPa和55.6%。3种膜的纤维直径均小于500 nm,nHA-PCL电纺膜的纤维表面比较粗糙。在人体仿生液中诱导矿化4 d后,nHAPCL电纺膜纤维表面出现磷灰石沉积,而纯PCL和共混nHA/PCL电纺膜的纤维表面沉积的磷灰石很少,nHA-PCL复合电纺膜具有较好的诱导成骨性能。     

Experimental study on co-cultured rat Schwann cells and osteoblasts

目的 观察大鼠雪旺细胞与成骨细胞体外联合培养条件下,成骨细胞的生长和增殖情况.方法 日龄3 d的SD大鼠,采用混合酶消化法体外分散培养雪旺细胞和成骨细胞,并用Millicell 小室实现雪旺细胞与成骨细胞的联合培养.待细胞生长稳定后,用倒置相差显微镜观察细胞的形态学特征,MTT法检测成骨细胞的增殖情况.结果 对照组成骨细胞于10 d左右可以铺满培养板底,此时细胞体积增大、数量增多,形态以多角形为主,细胞之间出现重叠生长,联系密切.共培养组成骨细胞生长速度增快,7 d左右即可铺满培养板底,逐渐形成铺路石状,其中心部位的细胞较密集,可以出现散在的钙化结节.MTT结果显示共培养组成骨细胞增殖明显.结论 雪旺细胞对成骨细胞的生长、增殖具有一定的促进作用.但是,关于该作用是否是通过FGFs实现的还有待于进一步的研究.     

胶原静电纺纳米纤维膜对人牙髓细胞生物学行为的影响

目的:比较人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)在胶原静电纺纳米纤维膜(collagen nanofibrous matrix,Col_NFM)与直接沉积胶原膜(collagen flat film,Col_FF)上的黏附、增殖和分化情况,探究胶原纳米纤维支架对hDPCs生物学行为的影响。方法:采用扫描电镜(scanning electron microscopy, SEM)观察两种胶原膜的表面形貌,并比较其表面接触角和溶胀性能。将hDPCs分别接种于两种胶原膜表面共培养,SEM和激光共聚焦显微镜(laser scanning microscope,LSM)观察hDPCs在支架表面的生长形态,并用CCK-8法测定hDPCs的增殖情况。在诱导14 d后,比较成牙本质分化相关基因的表达变化,茜素红染色观察矿化结节的形成情况。结果:SEM图可见Col_NFM组纤维直径为(884±159) nm,纤维之间存在大量三维连通的孔隙结构,而Col_FF组表面平坦,未见孔隙结构。Col_NFM组瞬间表面接触角为85.03°±4.45°,溶胀度为3,Col_FF组瞬间表面接触角为98.98°±5.81°,溶胀度为1,Col_NFM组的亲水性和溶胀性能更佳。SEM和LSM结果显示,Col_NFM组hDPCs表现为不规则多角形,呈三维生长,Col_FF组细胞在二维平面上呈纺锤形生长。CCK-8结果显示,hDPCs在Col_NFM支架上增殖活性更高。在诱导14 d后,Col_NFM组成牙本质分化相关基因表达水平较Col_FF组显著升高(P<0.05),茜素红染色也更深。结论:Col_NFM具有纳米尺度的微观结构,并具备良好的亲水性和溶胀性能,相较于Col_FF,hDPCs在Col_NFM表面表现出更好的黏附、增殖和分化性能。     

MMT法评价多孔纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架材料的细胞毒性

目的制备多孔纳米羟基磷灰石/壳聚糖（nHA/CS）,对其进行细胞毒性检测。方法采用共沉淀法和粒子沥滤法制备多孔nHA/CS。分离培养大鼠成骨细胞,碱性磷酸酶（ALP）染色进行成骨细胞进行鉴定,倒置显微镜下观察培养过程中细胞的形态和增殖情况。MTT检测多孔nHA/CS支架材料对成骨细胞增殖的影响,评价细胞毒性。结果细胞可在多孔nHA/CS周围贴壁生长,并且附着、增殖,其生长及功能不受抑制。结论多孔nHA/CS无细胞毒性,有利于细胞的黏附和增殖,可以用于骨组织工程支架材料。     

聚己内酯静电纺丝纳米纤维基复合材料在口腔医学中的应用研究进展

静电纺丝可制备出模拟细胞外基质的生物支架材料，以聚己内酯（poly-caprolactone，PCL）作为静电纺丝原料可获得良好的生物相容性，而将PCL电纺纳米纤维与无机材料组合，可以改善支架材料亲水性和机械性能，调控降解性能，增强生物矿化能力，具有良好的应用前景。文章对PCL静电纺丝纳米纤维基复合材料在口腔医学中的应用进行综述。     

国产纳米级羟基磷灰石复合胶原膜降解产物的生物相容性研究

目的 验证国产纳米级羟基磷灰石复合胶原膜(nHAC)降解产物的生物相容性.方法 将国产nHAC降解产物与SD大鼠颅顶骨成骨细胞复合培养,从成骨细胞形态、增殖及碱性磷酸酶活性等方面评价国产nHAC膜降解产物对成骨细胞的生物相容性.结果 复合培养的成骨细胞能与正常培养的成骨细胞一样贴壁,增殖,并且能表现强烈的碱性磷酸酶活性.结论 国产nHAC膜降解产物既不影响成骨细胞的生长增殖也不影响成骨细胞的正常生理功能.有良好的生物相容性.     

素尔松对大鼠成骨细胞增殖分化的影响

目的 研究中成药素尔松对大鼠成骨细胞增殖分化的影响.方法 应用不同浓度素尔松处理大鼠成骨细胞,倒置显微镜下观察细胞形态变化,并计数绘制生长曲线;免疫组织化学染色碱性磷酸酶活性变化;茜素红S染色观察成骨细胞钙化灶的形成和变化:透射电镜观察细胞内部结构的变化.结果 镜下观察成骨细胞数量与对照组相比,随素尔松浓度加大而增多,碱性磷酸酶表达增强,钙化灶增多.电镜下观察细胞器未见明显变化.结论 素尔松能促进成骨细胞的增殖、分化;增强成骨细胞的合成代谢,促进成骨活动增加,钙盐的分泌增加.     

见证 回味 感恩 展望

20年前的金秋,首都医科大学附属北京朝阳医院心脏中心诞生了。满怀豪情壮志的胡大一教授带着先进的技术、全新的理念、科学的管理、年轻的团队来到这里,经过艰苦的创业和科学的管理,打造出了国内首家真正意义上的心脏中心。北京朝阳医院心脏中心的诞生标志着融心脏内科、外科、介入于一体的一种全新的管理和运作模式。