γδT细胞对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨γδT细胞对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法从宫颈癌患者手术切除的肿瘤组织分离肿瘤浸润淋巴细胞,固相抗体包被法体外扩增得到γδT细胞(效应细胞),与人宫颈癌HeLa细胞(靶细胞)按照不同的比例共培养24h或48h后,MTT法检测HeLa细胞增殖情况,流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡。结果γδT细胞与HeLa细胞按不同效靶比共培养24h和48h后,MTT法检测结果显示,增殖率均较对照组显著降低(P<0.05)并显示了剂量依赖性,效靶比为32∶1时,50%以上的细胞停止增殖;γδT细胞与HeLa细胞(效靶比为4∶1)共培养24h后FCM分析结果显示,HeLa细胞凋亡率较对照组显著增强(P<0.01)。结论γδT细胞对人宫颈癌HeLa细胞增殖有抑制作用并呈现剂量依赖性,对细胞凋亡有促进作用。     

中草药诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及其分子机制

本文综述中草药或其有效成分诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究进展，指出中草药诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制主要是细胞周期阻滞作用，提高细胞内游离钙离子水平，调控凋亡相关基因表达并激活相关信号转导通路，下调端粒酶活性和降低线粒体膜电位等。     

槲皮素对宫颈癌HeLa细胞凋亡、迁移的影响

目的 探讨槲皮素对人宫颈癌HeLa细胞凋亡及迁移的影响,并探讨其可能的机制.方法 以不同浓度槲皮素(0,20,40,80μmol/L)处理生长状态良好的HeLa细胞48 h,用流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)含量,ELISA法检测细胞丙二醛(MDA)含量及总超...     

p38δ在宫颈癌细胞中的表达及其对缺氧HeLa细胞凋亡的影响

目的探讨p38δ在宫颈癌组织细胞和HeLa细胞系中蛋白表达水平及p38δ对缺氧诱导HeLa细胞凋亡的影响。方法采用蛋白印迹法检测组织及细胞蛋白表达水平。采用慢病毒转染及细胞耐药性筛选构建稳定表达p38δ HeLa细胞株。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染色法检测细胞凋亡水平。结果宫颈癌细胞系HeLa 细胞中p38δ蛋白表达水平低于非癌性细胞系人胚肾293 细胞及小鼠胚胎纤维细胞,差异有统计学意义（P <0.05）;宫颈癌组织细胞中p38δ蛋白表达水平低于正常宫颈组织细胞,差异有统计学意义（P <0.05）;p38δ 过表达提高缺氧条件下HeLa细胞凋亡水平,差异有统计学意义（P <0.05）;p38δ 过表达促进缺氧条件下HeLa 细胞中凋亡相关因子Bcl-2 蛋白表达水平下调及Bax、p53 蛋白表达水平上调,差异有统计学意义（P <0.05）。结论在宫颈癌组织细胞和宫颈癌HeLa 细胞中,p38δ的蛋白表达水平降低。HeLa细胞中高表达p38δ 促进缺氧细胞凋亡。     

薤白总皂苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响

目的观察薤白总皂苷对宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡作用的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的薤白总皂苷(25、50、100、250、500、1000μg/ml)于不同作用时间(24、48、72 h)处理宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT法检测不同浓度的薤白总皂苷在不同作用时间下对HeLa细胞增殖率的影响;用100和200μg/ml的薤白总皂苷处理宫颈癌HeLa细胞48 h后,Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,JC-1染色法测定细胞线粒体跨膜电位水平,Caspase试剂盒检测HeLa细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性,荧光定量PCR测定Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果薤白总皂苷对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间一剂量依赖性;薤白总皂苷(100和200μ/ml)处理能显著降低HeLa细胞线粒体膜电位,抑制HeILa细胞增殖,促进其凋亡(P<0.05,P<0.01);上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05,P<0.01)。结论薤白总皂苷有显著的抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能与其降低HeLa细胞线粒体膜电位,上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和Bcl-2与Bax的比值以及增强Caspase-9和Caspase-3的活性有关。     

桦褐孔菌醇对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的：研究桦褐孔菌醇（Inotodi01）体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制。方法：以不同浓度的Inotodiol处理HeLa细胞24h、48h和72h,采用MTT法检测细胞增殖情况,透射电镜观察细胞超微结构变化,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测caspase-3蛋白的表达。结果：Inotodiol能抑制HeLa细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖关系（P〈0．05,P〈0．01）;超微结构观察可见细胞体积缩小、核固缩、核内异染色质增多并边集、凋亡小体形成等典型的凋亡形态学改变;TUNEL法显示,经50μg/ml的lnotodiol处理48h,HeLa细胞发生凋亡;免疫细胞化学结果表明,与对照组相比,Inotodiol组HeLa细胞中caspase-3蛋白表达上调（P〈0．01）。结论：在一定浓度范围内,Inotodiol可在体外抑制HeLa细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与其上调easpase-3蛋白的表达有关。     

人宫颈癌细胞凋亡与Bcl—2表达的研究

目的 探明Ｂｃｌ－２在宫颈癌细胞凋亡过程中的作用。方法 采用＾６０Ｃｏ和顺铂处理体外培养的３株人宫颈癌细胞株Ｈｅｌａ、ＳｉＨａ、ＲＪＣ,２４ｈ后检测细胞恨和Ｂｃｌ－２。结果 发现放射线＾６０Ｃｏ和顺铂均可以诱发宫颈癌细胞凋亡;它们都表达Ｂｃｌ－２,其表达率随着细胞调良的出现而下降;两种因素联合应用后诱导细胞凋亡和降低Ｂｃｌ－２表达的作用增强。结论 Ｂｃｌ－２的表达可能参与了宫颈癌细胞凋亡的调节过程     

GSTθ转染对宫颈癌HeLa细胞侵袭性的影响

目的 了解增加GSTθ表达水平对人类宫颈癌HeLa细胞生长及侵袭能力的影响。方法 通过脂质体将pcDNA3-GSTθ真核质粒载体转染获得高GSTθ表达水平的HeLa稳定转染细胞;采用RT-PCR检测GSTθmRNA的表达水平;采用细胞记数和MTT法测定细胞的生长;采用划痕拍照方法观察细胞侵袭能力的改变。结果 GSTθ高水平表达显著地延缓和降低HeLa细胞的生长,并使HeLa细胞的侵袭能力下降。结论 GSTθ高水平表达可以延缓和降低细胞生长并降低HeLa细胞的侵袭能力。     

蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。     

小檗碱对HeLa细胞凋亡及其凋亡相关蛋白表达的影响

目的 研究小檗碱对人宫颈癌HeLa细胞株增殖及凋亡的影响及其发生机制.方法 采用MTT法观察小檗碱对HeLa细胞增殖的影响,DNA ladder、流式细胞仪等方法进行细胞凋亡检测,用Western blotting方法检测凋亡过程中相关蛋白Bel-2和Bax表达的变化.结果 小檗碱在体外试验中能明显抑制HeLa细胞的增殖,在一定的时间、剂量范围内呈时间-剂量依赖关系.20、40 mg/L小檗碱作用48 h后,细胞DNA片段分析可看到凋亡时降解形成的梯带,流式细胞仪检测到了细胞凋亡峰,各组的凋亡率分别是(16.7±2.8)%、(29.6±4.4)%,与对照组(1.9±0.6)%和5 mg/L小檗碱组(2.3±0.8)%相比差异显著(P＜0.01).在凋亡过程中,Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下凋.结论 小檗碱体外能抑制HeLa细胞增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下调有关.     

低氧对宫颈癌HeLa细胞黏附及侵袭能力的影响

目的 研究低氧对宫颈癌HeLa细胞的黏附、运动以及侵袭行为的影响.方法 宫颈癌HeLa细胞放置于常氧、5%O2、3%O2、1%O2培养,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测低氧诱导因子HIF-1α、E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA表达,Transwell小室进行细胞侵袭分析.结果 常氧、5%O2、3%O2、1%O2条件下HIF-1α mRNA/β-actin光密度比值为(0.423±0.116)、(0.764±0.111)、(1.687±0.126)、(0.215±0.099),随氧分压降低呈现升高后降低的趋势.E-钙黏蛋白/β-actin光密度比值为(1.045±0.171)、(0.719±0.114)、(0.386±0.105)、(0.157±0.063),随氧分压降低而降低.不同氧浓度下细胞侵袭力分别为(112.5±20.7)、(254.3±27.5)、(333.6±45.2)、(124.5±24.6),随氧分压降低呈现升高后降低的趋势.结论 适度缺氧可以升高HeLa细胞中HIF-1α的表达,降低肿瘤细胞间黏附力,并增强肿瘤细胞侵袭能力,HIF-1α表达的改变可能是导致肿瘤细胞黏附能力下降、侵袭能力增加的原因之一.     

顺铂诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡与自噬的研究

目的 探讨顺铂对Hela细胞凋亡和自噬的影响.方法 用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)观察顺铂对HeLa细胞生长抑制情况;Hoechst 33342荧光染色检测细胞凋亡;间接免疫荧光法检测自噬标志蛋白LC3和P62的变化;免疫印记法检测细胞凋亡蛋白Bax/Bcl-2、Caspase-3和自噬标志蛋白LC3和P62的变化.结果 顺铂对Hela细胞生长抑制作用表现为时间剂量依赖关系;顺铂作用Hela细胞导致Bax/Bcl-2比值和Caspase-3表达增加,同时自噬标志蛋白LC3和P62活化.结论 顺铂诱导Hela细胞发生凋亡,伴有自噬发生.     

siRNA沉默MACC1基因表达对宫颈癌细胞增殖及侵袭的影响

目的探讨siRNA沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达对Hela宫颈癌细胞增殖及侵袭的影响。方法通过脂质体将siRNA MACC1及siRNA NC转入Hela细胞中,RT-PCR及western blot检测转染效果,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力,western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cyclin E,基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9蛋白表达及细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化水平。结果与siRNA NC组比较,siRNA MACC1组中MACC1蛋白及mRNA表达量降低(P0.01),细胞活力及侵袭能力下降(P0.01),细胞周期阻滞在G1期,cyclin D1、cyclin E、MMP2、MMP9及p-ERK表达量下调(P0.01)。结论siRNA MACC1能显著的抑制宫颈癌Hela细胞增殖与侵袭,可能与下调ERK磷酸化水平有关。     

芍药苷诱导子宫颈癌HeLa细胞凋亡的相关性分析

目的 探讨芍药苷对人子宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响.方法 不同浓度芍药苷作用于人宫颈癌HeLa细胞后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同时间HeLa细胞的生长抑制效应,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染色流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率及细胞周期变化,透射电镜观察HeLa细胞形态变化,免疫细胞化学法检测芍药苷作用后HeLa细胞Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的变化.结果 不同浓度的芍药苷作用不同时间后,对子宫颈癌HeLa细胞的生长抑制率呈明显的浓度-时间依赖关系,在24、48、72 h的IC50值分别为5054、2965、2459 μg/ml(P＜0.05);应用不同浓度芍药苷后HeLa细胞凋亡率逐渐增高,对照组及1000、2000μg/ml组凋亡率分别为0.94%、10.94%、13.95%(P＜0.05),细胞周期S期比例呈增多趋势;芍药苷作用48 h后透射电镜下可见HeLa细胞出现典型凋亡改变;芍药苷作用于HeLa细胞48 h后,与对照组相比Bcl-2表达减少、Bax及Caspase-3表达增多(P＜0.05).结论 芍药苷能够诱导子宫颈癌HeLa细胞凋亡,其作用机制可能与抗凋亡基因Bcl-2表达减弱及促凋亡基因Bax、Caspase-3表达增强有关.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。方法 体外培养HeLa细胞,分为对照组和实验组,实验组用不同浓度的EGCG处理24、48、72 h,对照组加入等体积的培养基。采用MTT法测定EGCG对HeLa细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;EGCG(浓度分别为20、40、80μg/mL)处理HeLa细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期、分光光度计检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Casepase-3)相对活性、Western blot法检测bcl-2/bax蛋白表达情况。结果 EGCG(浓度10~100μg/mL)能抑制HeLa细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;浓度为20、40、80μg/mL的EGCG作用HeLa细胞48 h后,细胞凋亡率逐渐上升,分别为12.4%、23.4%、35.4%,明显高于对照组(3.3%);细胞周期结果显示EGCG能抑制细胞的G1期行进和G1/S转换,降低S期细胞比例;实验组HeLa细胞Caspase-3相对活性分别为(1.36±0.07)、(1.85±0.06)、(2.45±0.07),均高于对照组(0.93±0.06),差异均有统计学意义(P<0.05);bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,呈剂量依赖性。结论EGCG能抑制HeLa细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与增加细胞Casepase-3活性、下调bcl-2基因的表达及上调bax基因有关。EGCG是一种前景广阔的抗肿瘤药物。     

胡桃醌联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的促凋亡作用及其机制

目的：探讨胡桃醌与顺铂联合应用对宫颈癌HeLa细胞促凋亡作用的机制,阐明其对相关信号转导通路的作用。方法：选取处于对数生长期的HeLa细胞,将其分为对照组、胡桃醌组、顺铂组和胡桃醌＋顺铂组（联合用药组）。采用MTT法观察不同时间点HeLa细胞的增殖抑制率;Hoechst 33258染色法荧光显微镜下观察细胞凋亡形态;Westernblotting法检测各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和caspase-3及PI3K/AKt通路中AKt和pAKt表达水平。结果：MTT法,各用药组HeLa细胞增殖于24、48和72h均可被抑制,与对照组比较,胡桃醌组及顺铂组对细胞的抑制较明显,而联合用药组抑制更加显著;与单用药组比较,联合用药组对细胞的抑制更显著。Hoechst 33258染色,胡桃醌组和顺铂组在处理细胞12 h后,出现明显的凋亡细胞形态,联合用药组该现象更明显。Western blotting检测,与对照组比较,12 h后胡桃醌组和顺铂组HeLa细胞中Bcl-2和pAKt蛋白表达水平明显降低,而Bax、Cleave-caspase-3和AKt蛋白表达水平明显升高,联合用药组上述变化更加明显。结论：胡桃醌和顺铂联合应用可通过抑制PI3K/AKt通路,进而促进HeLa细胞凋亡。     

C pd5抗宫颈癌作用的研究磁

目的：观察2‐（2‐巯基乙醇）‐3‐甲基‐1,4‐萘醌（Compound 5,Cpd5）对人宫颈癌 HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑蓝（M T T ）法观察Cpd5对HeLa细胞的生长抑制作用,Annexin V／PI双标记流式细胞术检测Cpd5对 HeLa细胞的凋亡诱导,Hoechst‐33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态。结果10、20、30、40、50μmol／L Cpd5处理 HeLa细胞48 h ,生长抑制率分别为4.23、13.11、35.13、51.37、79.90％。不同时间点（12、24、48和72 h ）检测,细胞生长抑制率存在剂量‐时间依赖关系。流式细胞术检测,30μmol／L Cpd5处理12、24和48 h后,细胞凋亡率分别达7.15、16.07、44.16％;50μmol／L组的细胞凋亡率明显高于30μmol／L ,且随时间增加而显著增加。结论 Cpd5能以剂量－时间依赖的方式抑制HeLa细胞增殖并诱导调亡,是潜在的抗宫颈癌新药。     

芹菜素通过组成性激活JNK敏化TRAIL诱导HeLa细胞凋亡

目的 研究芹菜素(API)与重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)合用对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制是否涉及组成性激活JNK.方法 体外培养人宫颈癌HeLa细胞.碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)定量分析亚二倍体细胞(sub-G1)百分率.比色法测定细胞Caspase-3活性.DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA梯形条带.Western Bloting检测细胞蛋白的表达.结果 API(20μmol/L)和TRAIL (20ng/mL)以及两者合用作用48 h的人宫颈癌HeLa细胞系sub-G1百分率分别是(3.56±0.20)%、(6.69±0.40)%和(59.87±420)%;HeLa细胞Caspase-3的活性分别是培养基对照组的1.4、1.5和39倍.DNA琼脂糖凝胶电泳显示:20μmol/LAPI与20 ng/mL的TRAIL联合处理,展示出典型DNA梯形条带图谱,Caspase-3抑制剂zDEVD -fmk能够消除API和TRAIL合用促细胞凋亡作用.API以浓度依耐方式增高HeLa细胞JNK蛋白磷酸化水平.JYK特异性抑制剂SP600125能阻断API激活JNK,并抑制API增强TRAIL促细胞凋亡作用.结论 芹菜素敏化TRAIL诱导细胞凋亡作用与其组成性激活JYK有关.     

SOX15基因对Caco2结肠癌细胞增殖、凋亡及迁移侵袭的影响

目的 检测SOX15在结肠癌细胞株中表达水平以及对细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的影响.方法 应用RT-PCR检测SOX15在Cac02、SW480、HT29、HCT116结肠癌细胞以及正常结肠组织中的表达水平.通过脂质体Lipofectamine 2000将重组质粒pEGFP-N1-SOX15及空质粒pEGFP-N1转染进Caco2细胞,应用RT-PCR及Western blot分别检测SOX15在Caco2细胞中的mRNA以及蛋白表达水平;CCK-8检测SOX15对Caco2细胞活力的影响,克隆形成实验观察细胞增殖变化,Transwell检测SOX15对细胞迁移及侵袭能力的调控,流式细胞仪分析细胞凋亡率.结果 SOX15在Caco2、SW480、HT29、HCT116结肠癌细胞中mRNA及蛋白质表达明显低于其在正常组织中的表达水平(P ＜0.01).pEGFP-N1-SOX15转染组细胞mRNA(1.23 ±0.10)和蛋白(1.13±0.08)表达显著高于pEGFP-N1对照组[(0.54±0.06)、(0.19±0.03),P＜0.01]及空白对照组[(0.51±0.03)、(0.14±0.02),P＜0.01];与空白对照组及pEGFP-N1对照组相比,pEGFP-N1-SOX15转染组可明显抑制细胞增殖及迁移侵袭能力(P＜0.01),并诱导细胞发生凋亡(P＜0.01).结论 SOX15在结肠癌细胞中低表达,过表达SOX15可明显抑制结肠癌细胞Caco2的增殖及迁移、侵袭能力,并促进细胞凋亡.