变应性鼻炎肾阳虚复合豚鼠模型筛选与评价

目的:在卵清蛋白致敏变应性鼻炎豚鼠模型基础上,采用糖皮质激素、羟基脲、腺嘌呤3种不同阳虚诱导剂诱发,建立变应性鼻炎肾阳虚复合模型,以筛选建立理想而稳定的变应性鼻炎(Allergic Rhinitis,AR)病证结合动物模型。方法:采用卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导建立变应性鼻炎豚鼠模型,同时给予糖皮质激素、羟基脲或腺嘌呤建立肾阳虚复合模型,观察动物宏观体征及死亡情况、局部过敏症状,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)法测血清中s Ig E和组胺含量,苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察肾和睾丸组织形态学改变。结果:糖皮质激素、羟基脲和腺嘌呤3种致肾阳虚药物均可使动物表现出肾阳虚症状及体征、体重下降并具有一定的致死率。与空白组相比,糖皮质激素对肾脏和睾丸组织形态影响较小,羟基脲和腺嘌呤对肾脏和睾丸等形态结构影响较大。结论:对比3个肾阳虚复合模型,羟基脲复合组模型比激素复合组和腺嘌呤复合组模型更稳定,且死亡率较低,较为理想。不过变应性鼻炎病证结合动物模型的指标评价标准尚待进一步研究。     

肾阳虚变应性鼻炎动物模型的研究

目的研究腺嘌呤制作肾阳虚变应性鼻炎动物复合模型,探讨肾阳虚对变应性鼻炎（AR）的影响。方法分别用糖皮质激素、腺嘌呤和卵清蛋白（0V）建立肾阳虚AR豚鼠复合模型,观察动物鼻部症状、PCA试验、鼻腔黏膜嗜酸细胞计数和肾、睾丸组织学的变化。结果肾阳虚状态下豚鼠对致敏原的应答反应较对照组强烈,运用腺嘌呤造模豚鼠鼻痒、喷嚏、流涕等变应性症状最为突出。结论肾阳虚体质易致AR产生,或协同加重鼻黏膜的变态反应性程度：传统糖皮质激素制作肾阳虚AR模型抑制AR症状欠客观,腺嘌呤制作肾阳虚AR模型是更好选择。     

固本祛风汤对变应性鼻炎豚鼠模型行为学的影响

目的:探讨中药固本祛风汤治疗变应性鼻炎(AR)豚鼠模型的疗效以及对其行为学的影响.方法:将90只豚鼠随机分成正常对照组、模型组、辛芩颗粒组和中药治疗组,以卵清蛋白致敏激发造成变应性鼻炎豚鼠模型,分别给予中药和辛芩颗粒,观察各组动物的行为学改变.结果:中药治疗组症状显著低于模型组,其差别有统计学意义(P＜0.05).结论:固本祛风汤可明显改善变应性鼻炎豚鼠模型的症状,从而发挥对AR的治疗作用.     

固本祛风汤对变应性鼻炎豚鼠模型组织病理学的影响

目的探讨固本祛风汤治疗变应性鼻炎(AR)豚鼠模型的疗效以及对其组织病理学的影响。方法将90只豚鼠随机分成正常对照组、模型组、辛芩颗粒组和中药治疗组,以卵清蛋白致敏激发造成变应性鼻炎豚鼠模型,分别给予中药和辛芩颗粒,治疗后进行组织病理学观察。结果中药治疗组鼻黏膜炎性细胞浸润及水肿、充血程度明显低于模型组(P<0.05)。结论固本祛风汤可显著减轻AR豚鼠模型鼻黏膜的炎症反应,从而发挥对AR的治疗作用。     

摄涕止鼽汤对实验性变应性鼻炎IL-5、ECP含量的影响

目的:探讨摄涕止鼽汤治疗变应性鼻炎(AR)的疗效机制。方法:在卵清蛋白致敏复制AR大鼠模型的基础上,应用氢化考的松及恐吓大鼠造成肾阳虚AR模型,予以摄涕止鼽汤治疗,观察药物对肾阳虚AR模型动物血清IL-5和嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)表达的影响。结果:治疗各组模型动物血清中IL-5、ECP均降低,且高剂量组与阳性对照组相当。结论:摄涕止鼽汤治疗变应性鼻炎的作用机制,可能是通过调节细胞因子的表达实现的。     

中药醒鼻凝胶滴剂治疗豚鼠变应性鼻炎的疗效观察

目的观察中药醒鼻凝胶滴剂对豚鼠变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的干预作用及与白三烯E_4(LTE_4)、IgE的关系,探讨醒鼻凝胶滴剂干预治疗的可能机理,并为中药的新药研发和临床应用提供实验依据。方法以卵清蛋白(OVA)加氢氧化铝基础致敏,局部以2%卵清蛋白激发复制豚鼠AR模型,实验豚鼠分为正常组、病模组和治疗组,每组10只。治疗组分别给予醒鼻凝胶滴剂Ⅰ号、醒鼻凝胶滴剂Ⅱ号及雷诺考特滴鼻给药治疗,正常组及模型组以同样方法予生理盐水。比较各组AR豚鼠的行为学表现,测定血清中LTE_4、IgE含量。结果中药醒鼻凝胶滴剂高、低二个浓度组豚鼠的变应性鼻炎的行为学评分明显减低(与AR病模对照组比较,P<0.01);血清中LTE_4、IgE含量降低(与AR病模对照组比较,P<0.01)。结论中药醒鼻凝胶滴剂治疗豚鼠变应性鼻炎有显著疗效,其作用机制是通过降低机体的LTE_4、IgE含量等因素产生的。     

脾气虚变应性鼻炎大鼠鼻中隔黏膜P物质及雌激素受体阳性细胞的表达

目的观察鼻中隔黏膜P物质(SP)、雌激素受体阳性(Estron Receptor Positive,ER+)细胞在变应性鼻炎大鼠及脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中的表达变化,以研究脾气虚证与变应性鼻炎的相关性。方法以卵清蛋白为变应原建立大鼠变应性鼻炎模型(AR组),饮食不节加劳倦过度综合因素再加上卵清蛋白建立大鼠脾气虚变应性鼻炎模型(脾气虚AR组)。取该2组和健康大鼠血清行组胺检测,并取鼻中隔黏膜行常规HE染色,采用免疫组化法检测3组动物鼻中隔黏膜SP、ER+细胞表达。结果SP、ER+在2组动物中的表达均增高,与AR组相比,脾气虚AR组鼻中隔黏膜SP表达有进一步增强的趋势,但2组间相比较无显著性差异;鼻黏膜ER+细胞数目没有明显变化。结论SP的表达增加可能是脾气虚型变应性鼻炎病情加重的一个重要原因,而鼻黏膜ER+可能与脾气虚变应性鼻炎大鼠病情加重没有明显关系。     

肺脾气虚证变应性鼻炎大鼠模型的建立及评价

目的建立肺脾气虚证变应性鼻炎大鼠模型,并对模型进行评价。方法 24只SD大鼠分为肺脾气虚证变应性鼻炎模型组、变应性鼻炎模型组和空白对照组。肺脾气虚证变应性鼻炎模型组(8只)采用烟熏+番泻叶灌胃+卵清蛋白与氢氧化铝混悬液腹腔注射+卵清蛋白鼻腔激发的方法制作肺脾气虚证变应性鼻炎大鼠模型,变应性鼻炎模型组(8只)采用卵清蛋白与氢氧化铝混悬液腹腔注射+卵清蛋白鼻腔激发的方法制作变应性鼻炎大鼠模型,空白对照组(8只)仅予普通饲料喂养。均持续60天。观察大鼠的一般情况和鼻部症状,测量体质量、摄食量和负重游泳实验时间,ELISA测定血清IgE水平,鼻黏膜病理HE染色观察鼻黏膜纤毛和炎性细胞。结果与空白对照组比较,肺脾气虚证变应性鼻炎模型组大鼠出现喷嚏、挠鼻频繁、流涕等鼻部症状,伴有气急、活动减少、毛发蓬乱发黄无泽、易掉落、精神萎靡倦怠、喜蜷缩聚堆和便溏等肺脾气虚证症状;其体质量增长较慢,摄食量减少。肺脾气虚证变应性鼻炎模型组大鼠负重游泳时间比空白对照组短,血清IgE水平高于空白对照组,镜下可见鼻黏膜纤毛脱落,排列紊乱,腺体增多,局部炎性细胞浸润。结论烟熏+番泻叶灌胃+卵清蛋白与氢氧化铝混悬液腹腔注射+卵清蛋白鼻腔激发的方法可建立肺脾气虚证变应性鼻炎大鼠模型。     

脾虚型AR大鼠鼻黏膜白介素mRNA的活性表达

目的：观察脾气虚型变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织白细胞介素-2,4,6（IL-2,4,6,）mRNA的表达,探讨脾气虚与变应性鼻炎的病理相关性。方法以卵清蛋白法和卵清蛋白加饮食不节法分别建立大鼠变应性鼻炎模型（AR模型组）和脾气虚变应性鼻炎模型（脾虚AR模型组）,分别取鼻黏膜组织,RT-PCR检测IL-2,4,6,mR-NA表达水平,进行组间比较。结果IL-2mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-2mRNA的表达明显降低。IL-4mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.01、P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-4mRNA的表达明显升高,脾虚AR模型组升高更明显。IL-6mRNA的表达空白组与模型组相比较具有显著性差异（P〈0.01、P〈0.05）,模型组鼻黏膜组织IL-6mRNA的表达明显升高,但AR模型组升高更明显。结论变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织IL-2表达明显降低,IL-4,6表达明显升高,脾虚AR模型组升高更明显。说明IL-2,IL-4,IL-6活性表达水平可能是脾虚型变应性鼻炎的一个重要因素。     

脾虚与变应性鼻炎的相关性实验研究

目的 :从动物实验角度探讨脾虚与变应性鼻炎的相关性 ,为临床运用健脾法治疗变应性鼻炎提供实验依据。方法 :利用大黄泻下法造成“脾虚”豚鼠模型 ,应用卵清蛋白为致敏原 ,建立变应性鼻炎动物模型 ,运用健脾益气的中药进行药物反证。结果 :从动物的症状、被动皮肤免疫反应 (PCA)试验、鼻分泌物及鼻粘膜嗜酸细胞(EOS)及肥大细胞 (MC)计数等观察指标表明 ,脾虚状态下豚鼠对致敏原的应答反应较对照组强烈。结论 :在同样的致敏原作用下 ,脾虚动物较正常动物更容易发生变应性鼻炎。     

补中益气汤对脾虚型变应性鼻炎的治疗作用

目的 探讨补中益气汤对脾虚型变应性鼻炎(AR)豚鼠模型的影响。方法 将花色豚鼠随机分为AR(A)组、AR 脾气虚(B)组、补中益气汤(C)组和空白对照(D)组。各组用卵清蛋白(D组用生理盐水代替)行基础致敏，结束后行PCA试验，确定卵清蛋白IgE抗体效价升高后，以卵清蛋白滴入鼻腔行局部致敏(D组滴入生理盐水)，C组同时给予灌胃补中益气汤(5．6g／kg)，观察豚鼠鼻部症状的变化。实验结束时处死豚鼠，行鼻分泌物涂片子找嗜酸细胞(EOS)及取鼻粘膜病理切片子找嗜酸细胞与肥大细胞。结果 A、B、C组在局部致敏的前期，均出现了抓鼻、打喷嚏、流清涕等典型的鼻部症状，至后期，C组鼻部症状减轻；C、D组鼻分泌物及鼻粘膜EOS阳性率均低于A、B组，而C、D组之间别无显著性差异；鼻粘膜肥大细胞计数C组亦低于A、B组。结论 补中益气汤能抑制脾虚AR豚鼠鼻粘膜嗜酸细胞及肥大细胞的浸润，从而改善鼻部症状。     

细辛挥发油对过敏性鼻炎豚鼠鼻黏膜和组胺影响的初步研究

目的:探讨细辛挥发油对过敏性鼻炎(AR)豚鼠行为学指标、鼻黏膜病理形态和血液组胺含量的影响。方法:将FMMU豚鼠40只按体重随机分为生理盐水对照组、AR模型组、辛芩颗粒组、细辛挥发油组,每组10只。采用鸡卵清蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR豚鼠模型,对照组和模型组给予生理盐水,辛芩颗粒组给予辛芩颗粒4.65g·kg-1,细辛挥发油组给予细辛挥发油按生药量计0.45 g·kg-1,观察豚鼠行为学指标和鼻黏膜病理形态的变化,测定血液组胺含量。结果:细辛挥发油组鼻痒、喷嚏、清涕等行为学指标及鼻黏膜炎症程度均有明显改善,血液组胺含量明显降低。结论:细辛挥发油能有效缓解过敏性鼻炎的局部症状,降低血液组胺含量,改善鼻黏膜炎症的局部浸润,达到治疗过敏性鼻炎的目的。     

灵龟八法对肾阳虚模型豚鼠自由基代谢的影响

目的观察运用灵龟八法按时开穴灸对衰老的影响和作用机理。方法以健康成年豚鼠为研究对象,随机分为5组,肾阳虚模型灵龟八法预防组(Ⅰ组)、肾阳虚模型命门灸预防组(Ⅱ组)、肾阳虚模型灵龟八法治疗组(Ⅲ组)、肾阳虚模型命门灸治疗组(Ⅳ组)、肾阳虚模型对照组(Ⅴ组),以SOD、MDA为客观指标,比较灵龟八法按时开穴灸、命门灸对肾阳虚模型豚鼠自由基代谢的影响差异。结果在造模结束后,Ⅰ组及Ⅱ组没有出现肾阳虚征象,SOD、MDA的改变不明显;Ⅲ组、Ⅳ组及Ⅴ组均出现明显的肾阳虚症状,且SOD降低(P<0.01)、MDA升高(P<0.01或P<0.05);经治疗后,Ⅲ组的肾阳虚症状基本消失,SOD升高(P<0.01)、MDA降低(P<0.01),与造模前相比无明显差异(P>0.05);Ⅳ组的肾阳虚症状改善明显,SOD升高(P<0.05),但与造模前相比仍有差异(P<0.05),MDA降低(P<0.05),与造模前相比无显著性差异(P>0.05);而Ⅴ组的肾阳虚症状、SOD、MDA均无明显变化(P>0.05)。结论灵龟八法按时开穴灸、命门灸均可以有效调节肾阳虚模型豚鼠的自由基代谢,对肾阳虚模型豚鼠具有明显的预防及治疗作用,其抗衰老机理与调节自由基代谢密切相关;灵龟八法按时开穴灸对肾阳虚模型豚鼠的治疗作用略优于命门灸。     

寒、热证豚鼠变应性鼻炎细胞功能及形态学观察

目的：研究寒证及热证豚鼠变应性鼻炎（AR）细胞功能和形态学特征。方法：以寒性、热性中药分别给予豚鼠造成寒证、热证模型，然后以甲苯二异氰酸酯和盐酸萘甲唑啉点鼻，分别造成AR和鼻炎模型，观察其细胞功能、数量及电镜下超微形态学特点。结果：AR模型豚鼠血嗜碱性粒细胞（BC）脱颗粒指数高于鼻炎模型豚鼠；其中寒证AR豚鼠又高于热证AR豚鼠（P＜0．05）。寒证AR豚鼠鼻粘膜肥大细胞（MC）及嗜酸性粒细胞（EC）数量多，浸润广泛，颗粒包膜不清，密度不均，颗粒内见空泡、融合及管道；而热证AR豚鼠及对照组豚鼠MC及EC数量少，无浸润，颗粒包膜清，密度均一，无颗粒空泡、融合及管道。结论：寒证AR豚鼠BC、MC、EC呈明显活化状态。     

甘草提取物防治变应性鼻炎的实验研究

目的:验证甘草提取物治疗变应性鼻炎是否有效。方法:建立变应性鼻炎的豚鼠模型,通过用甘草提取物滴鼻治疗后来检测鼻分泌物、鼻粘膜中主要致病物质的变化情况。包括HE染色和Chromotrope 2R特染分别检测豚鼠鼻分泌物及鼻粘膜组织中炎性细胞总数及嗜酸性粒细胞数;TUNEL法检测鼻粘膜组织中嗜酸性粒细胞凋亡;甲苯胺蓝染色检测鼻粘膜组织中肥大细胞数及脱颗粒数;ELISA法检测鼻粘膜组织中组胺含量。结果:研究发现用甘草提取物滴鼻治疗后变应性鼻炎豚鼠的鼻痒、喷嚏、流涕等症状得到明显减轻。检测发现甘草提取物滴鼻治疗后变应性鼻炎豚鼠鼻分泌物及鼻粘膜组织中的炎性细胞总数、嗜酸性粒细胞数明显减少(P(0.05);豚鼠鼻粘膜组织中的嗜酸性细胞凋亡率明显增加(P(0.05);肥大细胞数及脱颗粒数明显减少(P(0.05);组胺含量明显减少(P(0.05)。其中甘草提取物高剂量组鼻分泌物及鼻粘膜组织中的这些指标的减少程度与地塞米松组相当。结论:从动物实验研究结果证明甘草提取物在治疗变应性鼻炎上是有效的。     

注射用灯盏花素主动全身过敏反应评价指标的探索

目的观察豚鼠及大鼠对注射用灯盏花素诱导的主动全身过敏反应（ASA）的表现,增加与过敏反应相关指标的检测,探索从多层次、多方面评价中药注射剂潜在的过敏性。方法将Hartley豚鼠及BN大鼠分别随机分为卵蛋白（OVA）组、注射用灯盏花素组、阴性对照组,给予相应的药物或生理盐水,进行ASA实验,观察药物激发后30 min动物ASA。取肺组织HE染色观察病理改变。采用放免法检测BN大鼠在致敏前、致敏第18日以及激发后血清总IgE水平的变化。结果对Hartley豚鼠或BN大鼠,OVA组均呈现阳性过敏反应症状,注射用灯盏花素组则为阴性。肺组织病理切片显示,OVA组或灯盏花素组肺组织血管周围均有明显淋巴细胞浸润等免疫病理表现。与阴性对照组或药物致敏前比较,OVA组或灯盏花素组大鼠给药后血清总IgE水平显著升高（P〈0.05或P〈0.01）。结论增加不同品种动物及指标,能更全面评价注射用灯盏花素的潜在致敏性。     

制附子总碱的急性毒性及对过敏性鼻炎豚鼠鼻黏膜和组胺的影响

目的:探讨制附子总碱对过敏性鼻炎(AR)豚鼠行为学指标、鼻黏膜病理形态和血液组胺含量的影响,同时测定制附子总碱的半数致死量(LD50),对其临床应用进行安全性评价。方法:40只FMMU豚鼠按体质量随机分为正常对照组、AR模型组、辛芩颗粒组、制附子总碱组,每组10只。采用卵清蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR豚鼠模型,正常对照组和AR模型组给予生理盐水,辛芩颗粒组每天给予辛芩颗粒4.65g/kg,制附子总碱组每天给予总碱提取物按生药量计1.13g/kg,观察豚鼠行为学指标和鼻黏膜病理形态的变化,测定血液组胺含量;对制附子总碱进行小鼠急性毒性实验。结果:制附子总碱组鼻痒、喷嚏、清涕等行为学指标及鼻黏膜炎症程度均有明显改善,血液组胺含量明显降低;制附子总碱的LD50为56.3g/kg制附子。结论:制附子总碱在临床用药方面是安全的;制附子总碱能有效缓解过敏性鼻炎的症状,降低血液组胺含量,改善鼻黏膜炎症的局部浸润,达到治疗过敏性鼻炎的目的。