糖尿病大鼠皮肤伤口愈合过程中结缔组织生长因子的表达

背景:结缔组织生长因子表达在糖尿病伤口愈合过程中的变化及意义少见报道.目的:观察链脲佐菌素诱导的糖尿病模型大鼠复合创伤修复过程中结缔组织生长因子表达的变化及意义.方法:将Wistar大鼠随机分成正常对照组和模型组,3周后将各组动物复合背部1.3 cm2全厚皮切除形成伤口.结果与结论:链脲佐菌素诱发的糖尿病模型大鼠伤口愈合明显延迟,创伤后第4,8,12 和16天创面愈合率明显低于正常对照组(P < 0.01).术后第8天,糖尿病组大鼠肉芽组织成熟度和新生血管形成指标得分均低于正常对照组(P < 0.01).正常对照组的结缔组织生长因子蛋白表达呈时间递增趋势,而糖尿病组的结缔组织生长因子表达在整个创面愈合过程的后期(第12天后)均明显低于正常对照组(P < 0.01).结果提示,糖尿病大鼠皮肤伤口愈合后期创面组织结缔组织生长因子表达相对正常对照组减少可能是导致创面愈合迟缓的重要原因之一.     

糖尿病性骨质疏松模型雌激素、一氧化氮及转化生长因子131的变化

背景：糖尿病和卵巢去势是骨质疏松发生的两大主要原困,均会出现一氧化氮和转化生长因子β1的变化。目的：探讨雌激素、一氧化氮、转化生长因子B1在糖尿病性骨质疏松模型中的变化及意义。方法：采用链脲佐菌素诱导制备糖尿病大鼠模型,于造模后4,8,12,16周,进行骨密度检测,并应用放免法检测m清雌激素水平,硝酸还原酶法检测血清一氧化氮水平,ELISAi~检测血清转化生长因子D1水平,免疫组织化学法检测骨中转化生长因子B1水平。结果与结论：随着链脲佐菌素诱导时间的延长,糖尿病大鼠股骨骨密度逐渐降低（P〈O.05或P〈0.01）;血清一氧化氮水平逐渐降低（P〈0.05或P〈0.01）;血清转化生长因子β1水平逐渐升高（P〈0.01）：血清雌激素水平轻度降低,与同时间点正常大鼠比较差异无显著性意义（P〉0.05）。免疫组织化学结果显示转化生长因子β1主要表达于成骨细胞的胞浆中,其阳性表达随链脲佐菌素诱导时间的延长逐渐下降（P〈0．01o说明糖尿病大鼠血清一氧化氮水平和骨组织中转化生长因子β1水平的变化导致了骨吸收增加。骨形成减少,使骨密度降低,参与了糖尿病性骨质疏松的发生。     

2型糖尿病非收缩性难愈伤口模型的建立

背景:目前糖尿病创口的难愈性给临床的治疗增加了极大地困难。目的:建立2型糖尿病状态下非收缩性难愈伤口的动物模型。方法:高脂饮食喂养联合低剂量链脲佐菌素诱导形成大鼠2型糖尿病模型,在其背部造成圆形创面,用硅树脂固定伤口,模拟人类创面愈合过程,病理切片检查创面周缘肉芽组织皮肤厚度、微血管密度、胶原纤维及胶原蛋白水平的变化。结果与结论:与正常组相比,链脲佐菌素注射72h后高脂饮食喂养大鼠的空腹血糖、血清三酰甘油及胆固醇均明显增加,差异有显著性意义(P<0.05～0.01);创伤后第1,3,5,7,14天,糖尿病组与正常组相比皮肤厚度、微血管密度、胶原纤维及胶原蛋白水平均有明显下降(P<0.01)。提示高脂喂养联合链脲佐菌素诱导大鼠2型糖尿病的方法简便有效;创伤后检测指标均证明糖尿病大鼠比正常大鼠创面难愈。     

冻干血小板对大鼠难愈合创伤模型的实验治疗

血小板含有20多种生长因子,对于创伤尤其是难愈性创伤具有治疗作用。本研究以糖尿病SD大鼠为基础,建立了一种难愈合创口模型,用于评价冻干血小板对难愈性创伤修复的治疗作用。采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)65mg/kg对大鼠腹腔注射制备糖尿病模型。取正常大鼠10只,糖尿病大鼠20只,将其分为正常对照组(NDR)、糖尿病对照组(DR)和冰冻干燥血小板治疗组(TLP);在各组大鼠背部造成直径2cm圆形创面,分别于第l、3、5、7、12天进行创面照相和透明膜描计法计算创面愈合速度。结果显示,注射STZ72小时后糖尿病组血糖明显高于16.7mmol/L。1周后糖尿病大鼠体重与正常对照组比较明显减轻(p<0.05)。糖尿病对照组创口的愈合速度在各个时间点均低于正常对照组创口(p<0.05),冰冻干燥血小板治疗组创口愈合速度显著快于糖尿病对照组。第12天时,正常对照组和治疗组创口再上皮化率分别达到88.1%和81.8%,而糖尿病组只有62.8%。结论 :以链脲佐菌素建立的糖尿病大鼠能成功制备难愈合创口模型,冰冻干燥血小板对该难愈性创伤模型具有治疗作用。     

高脂饲料与小剂量链脲佐菌素建立糖尿病合并骨质疏松的大鼠模型

目的：用高脂饲料与小剂量链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，观察其骨的变化。方法：实验于2004—09／2005—12在广东医学院药理教研室、组胚教研室和骨生物研究室完成。取24只雌性SD大鼠单纯随机分成正常对照组（n=9），糖尿病组（n=15），正常对照组予普通饲料加生理盐水5mL／kg灌胃．糖尿病组予普通饲料加脂肪乳剂灌胃5mL／kg，1次／d。连续16周后，糖尿病组腹腔注射2g／L链脲佐菌素30mg／kg，继续用脂肪乳剂喂养6周；正常对照组腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液，继续普通饲料喂养6周。实验结束后测体质量，取血测血糖和血脂，取胫骨做骨组织形态计量学分析。 结果：18只大鼠进入结果分析。①糖尿病组大鼠高密度脂蛋白胆固醇浓度和体质量显著低于正常对照组，（P〈0．05，0．01），血糖和三酰甘油显著高于正常对照组，（P〈0．01，0．05）。②糖尿病组大鼠胫骨上段骨小梁面积百分数、数量、厚度及骨小梁荧光周长百分率明显低于正常对照组（P〈0．05），骨小梁分离度和破骨细胞数目指数高于正常对照组（P〈0．05）。 结论：高脂饲料与链脲佐菌素建立的糖尿病大鼠模型合并有骨质疏松症。     

糖尿病大鼠表皮干细胞的分离培养及特性

背景：表皮干细胞作为皮肤组织特异性干细胞,在创面修复中发挥关键作用。但有关糖尿病皮肤来源的表皮干细胞体外分离培养及生物特性研究较少。目的：探索糖尿病大鼠表皮干细胞体外分离培养的方法及其生物特性,为糖尿病难愈创面的防治及机制研究提供实验依据。方法：SD大鼠随机分成糖尿病组和正常对照组。糖尿病组采用一次性腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,正常对照组不作处理。分别取成模糖尿病和正常大鼠背部全层皮肤,采用酶消化联合Ⅳ型胶原黏附法分离培养大鼠表皮干细胞。倒置相差显微镜下观察细胞形态变化和细胞克隆形成,细胞计数绘制生长曲线,计算克隆形成率,免疫细胞化学染色和图像分析软件鉴定K19、β1-integrin阳性表达和测定阳性细胞的积分吸光度（IA）值。结果与结论：糖尿病组大鼠表皮干细胞原代贴壁数量较少,其克隆形成率明显低于正常对照组（P〈0.01）。表皮干细胞的K19、β1-integrin均呈阳性表达,糖尿病组阳性细胞的IA值均低于正常对照组（P〈0.01）。结果提示,运用酶消化联合Ⅳ型胶原黏附法可以实现糖尿病大鼠表皮干细胞的体外分离培养;糖尿病大鼠表皮干细胞体外增殖能力较正常皮肤增殖能力弱,这可能是导致糖尿病创面难愈合的重要因素之一。     

皮下移植骨髓间充质干细胞修复大鼠糖尿病足溃疡

背景：糖尿病足溃疡严重威胁患者的健康甚至生命,目前缺乏良好的治疗手段,而干细胞疗法在组织再生和创面修复方面展现出独特的优势及潜力。目的：评价骨髓间充质干细胞经创缘皮下移植对大鼠糖尿病足溃疡的治疗效果。方法：全骨髓贴壁法体外培养Wistar大鼠骨髓间充质干细胞至第3代,经DAPI标记。36只雄性Wistar大鼠随机分成骨髓间充质干细胞移植组、正常足溃疡对照组、糖尿病足溃疡对照组,大鼠糖尿病经腹腔注射链脲佐菌素诱导,所有大鼠在双后足背上切取一3mm×7mm矩形全层皮肤制成足溃疡模型。于骨髓间充质干细胞移植后第2,5,8,11天评估各组大鼠创面愈合情况及相关蛋白和基因水平的表达情况。结果与结论：正常足溃疡对照组的创面愈合率大于骨髓间充质干细胞移植组和糖尿病足溃疡对照组,但后2组之间无差异。冰冻切片发现骨髓间充质干细胞移植组荧光强度和区域在第5天达到高峰。苏木精-伊红染色显示第5天正常足溃疡对照组肉芽组织最厚,骨髓间充质干细胞移植组比糖尿病足溃疡对照组厚。免疫组化发现骨髓间充质干细胞移植组CD31平均小血管数目在第8天和第11天比糖尿病足溃疡对照组多（P〈0.05）;骨髓间充质干细胞移植组平均Ki-67阳性细胞数在各时间点均比糖尿病足溃疡对照组多（P〈0.01）。ELISA和RT-PCR结果均显示,正常足溃疡对照组血管内皮细胞生长因子表达水平较骨髓间充质干细胞移植组、糖尿病足溃疡对照组高。第5天和第8天骨髓间充质干细胞移植组表达水平显著高于糖尿病足溃疡对照组（P〈0.01）。说明骨髓间充质干细胞经创缘皮下移植明显促进大鼠糖尿病足溃疡的愈合,此疗效可能是通过促进创伤中血管内皮细胞生长因子的表达实现的。     

维生素D对糖尿病大鼠骨代谢的保护作用

目的：应用骨组织形态计量学方法观察1,25（OH）2D3对小剂量多次腹腔注射链脲佐菌素所致糖尿病大鼠骨代谢的影响。 方法：实验于2004—10／2005—10在天津医科大学完成。30只雄性SD大鼠全随机设计分成3组，即正常对照组，链脲佐菌素组，1，25（OH）2D2干预组，每组10只。正常对照组及链脲佐菌素组：花生油0．05mL／d灌胃。1,25（OH）2D3组：1,25（OH）2D31μg／（kg&;#183;d），溶于0．05mL花生油灌胃。后两组于实验第5周开始小剂量多次腹腔注射链脲佐菌素，直至链脲佐菌素组全部成模。成模2周后处死。各组大鼠在处死前第14天和第4天，给大鼠口服四环素以标记骨组织和进行动力学研究。制备大鼠胫骨不脱钙骨切片，应用骨组织形态计量学方法，观察各组胫骨骨计量学参数的变化。 结果：实验动物全部进入结果分析。（1）1，25（OH）2D3处理组糖尿病的发病数明显低于链脲佐菌素组（8，10只，P〈0．01）。（2）链脲佐菌素组的单位面积骨量、平均骨小梁宽度、平均骨小梁接点数、骨形成表面、骨形成速率、四环素单标记面、四环素双标记面、骨矿化表面与正常对照组相比显著降低（P〈0．01），骨小梁间距、矿化延迟时间显著增加（P〈0，01）。（3）与链脲佐菌素组相比，1，25（OH）2D3处理组的单位面积骨量、平均骨小梁宽度、平均骨小梁接点数、骨形成表面、骨形成速率、四环素单标记面、四环素双标记面、骨矿化表面均增加，平均骨小梁间距、矿化延迟时间降低，差异有显著性意义（P〈0．05）。 结论：1，25（OH）2D3减少小剂量多次腹腔注射链脲佐菌素SD大鼠糖尿病的发病率，能增加骨量、促使骨矿化、改善骨结构，促进骨形成。     

原位定型微囊化载体制剂在糖尿病大鼠皮肤溃疡中的作用

背景：原位定型微囊化载体制剂成分之一胰岛素可以促进溃疡愈合。目的：观察原位定型微囊化载体制剂在糖尿病大鼠皮肤溃疡中的疗效。方法：腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,应用外科方法建立全层皮肤缺损模型。根据皮肤溃疡处干预方式将实验动物分为4组。①空白对照组用生理盐水处理创面。②一般制剂组应用甲硝唑＋山莨菪硷1＋普通短效胰岛素处理创面。③单纯微囊组创面外敷不含有效药物成分的微囊化载体膜。④微囊化有效制剂组溃疡处外涂微囊化载体制剂膜,内含药物成分与一般制剂组相同。定时测量溃疡面积,记录溃疡愈合时间,取创面全层组织进行组织学观察,测定表皮生长因子受体、纤维连接蛋白阳性细胞数量。结果与结论：微囊化有效制剂组大鼠溃疡愈合时间短于其他3组（P〈0.05或P〈0.01）,微囊化有效制剂组表皮生长因子受体和纤维连接蛋白阳性细胞数目高于其他各组（P〈0.05或P〈0.01）。结果表明,原位定型微囊化载体制剂能够缩短愈合时间和促进糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合。     

链脲佐菌素致小鼠糖尿病模型的建立与评价

目的探讨链脲佐菌素诱导小鼠实验性糖尿病模型的建立。方法一次性腹腔注射链脲佐菌素（150mg/kg）建立糖尿病小鼠模型,正常小鼠作对照。每周监测其体重和血糖变化,连续观察8周;摘取胰腺和肾脏,常规HE染色,光镜下进行组织形态学观察。结果与对照组相比,模型组小鼠体重明显减轻（P〈0.01）,血糖持续升高（P〈0.01）;模型组小鼠胰岛形态不规则,体积萎缩变小,胰岛内分泌细胞数量明显减少;肾小球明显肥大,且毛细血管数目显著增多。结论单剂量腹腔注射链脲佐菌素（150mg/kg）诱导糖尿病小鼠模型,是糖尿病相关研究较理想动物模型之一。     

阿托伐他汀对高血压大鼠血管纤维化及结缔组织生长因子的影响

目的:探究阿托伐他汀(atorvastatin)对肾血管性高血压血管纤维化及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:24只SD大鼠随机分为假手术组(N组)、高血压组(RH组)、阿托伐他汀组(他汀组)各8只;将RH组及他汀组大鼠建立二肾一夹肾血管性高血压(2K1C-RH)大鼠模型。术后4周末,他汀组开始以阿托伐他汀(10mg.Kg-1.d-1)灌胃,共8周。治疗前后RT-PCR法检测各组大鼠收缩压、胸主动脉CTGF、纤维连接蛋白(FN)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的表达,并用免疫组化显示CTGF的表达。结果:与N组比较,RH组大鼠胸主动脉CTG-FmRNA、FNmRNA、ColⅢmRNA显著增加(P0.01);他汀组与RH组比较则3项指标明显下调(P0.05)。结论:阿托伐他汀能抑制高血压血管纤维化,可能与下调CTGF的表达有关。     

藻酸盐银联合水凝胶敷料对慢性创面愈合的作用

背景：研究发现藻酸盐及水凝胶敷料等均可促进创面愈合,而新型敷料藻酸盐银联合水凝胶敷料,对于难治慢性创面的愈合作用尚不清楚。目的：观察藻酸盐银联合水凝胶敷料对慢性创面治疗的作用。方法：选择江苏省人民医院烧伤整形科住院慢性创面患者34例,随机分为2组：治疗组应用藻酸盐银联合水凝胶敷料序贯换药;对照组采用1%磺胺嘧啶银冷霜抹在凡士林纱布上外敷,于治疗后7,10,14,17,21d进行创面分泌物细菌培养、观察创面愈合情况及速度、药物不良反应、换药时创面痛感、肉芽破坏等情况。结果与结论：治疗组创面细菌检出率明显低于对照组（P〈0.05）。治疗组创面愈合时间比对照组平均缩短约6d,创面愈合速度较对照组明显加快（P〈0.05）。两组均无药物不良反应,治疗组创面换药时无明显疼痛感,肉芽组织无明显破坏。提示藻酸盐银联合水凝胶敷料序贯治疗慢性创面具有显著抗菌及促进创面肉芽组织和上皮再生、促进创面愈合的作用,且无不良反应。     

烫伤创面愈合后的瘢痕形成与神经支配

背景：既往研究表明神经因素在创面愈合中具有重要调控作用,但有关神经调节与创面愈合后瘢痕形成之间的关系鲜有报道。目的：观察烧伤创面愈合过程中神经支配与创面愈合质量之间的关系。方法：将30只大鼠右侧T9～L1阶段脊神经根切断,制作失神经支配皮肤模型;然后在大鼠背部右侧失神经支配皮肤区域制作直径4cm的深II度烫伤创面,设为模型组,左侧对称正常皮肤制作同样的创面,设为对照组,伤后连续观察创面变化,于7,14,21d采用免疫组织化学法观察I和III胶原分泌情况,并计算I/III型胶原比例的变化,探讨创面愈合速度及愈合质量。结果与结论：模型组l,III型胶原分泌和I／HI型胶原比值于伤后各时间点均显著低于对照组（P〈0.O5）。模型组I型胶原分泌与伤后7,14,21d逐渐增3JH（P〈0.05）,III型胶原于伤后21d时分泌明显增高（P〈O.05）,I/III型胶原比值与伤后21d时明显降低（P〈0.05）。结果证实,创面早期神经支配可以促进创面愈合,创面重塑期减轻神经支配可能会改善创面重塑质量。     

人工真皮移植修复儿童严重创伤创面

背景：近年来组织工程学取得巨大进展,皮肤组织工程尤为引人注目。人工真皮（PELNAC）相对应用较广泛,但报道以成人为主,缺乏修复儿童创面的报道。目的：探讨人工真皮作为儿童严重创伤创面真皮覆盖物的临床效果。方法：回顾性总结分析22例创面负压引流、人工真皮复合自体刃厚皮片或薄中厚皮片移植覆盖儿童严重创伤创面（实验组）的治疗效果,并与19例创面负压引流、创面肉芽培养、自体刃厚皮片或薄中厚皮片移植于同等创面（对照组）的治疗效果进行对比。分析评价指标包括人工真皮的存活率、创面完全覆盖所需的手术次数、植皮后创面完全愈合时间、随访创面移植区域的色泽、质地、皮下丰满度、瘢痕增生情况以及关节功能影响等。结果与结论：人工真皮移植后10-14 d存活率达90%以上。实验组2例第二次刃厚皮片移植,对照组8例第二次刃厚皮片移植,实验组创面植皮存活率优于对照组（P〈0.05）。实验组植皮后创面完全愈合的平均时间为（13.86±3.09） d,对照组为（19.10±4.62） d,实验组平均植皮后创面完全愈合时间短于对照组（P〈0.05）。经超过10个月随访,实验组的植皮区色泽、弹性优于对照组;实验组创面移植区域较对照组真皮部分皮下丰满度良好、瘢痕增生明显较轻;实验组关节功能受到不同程度影响5例,对照组关节功能受到影响10例,两组差异有显著性意义（P 〈0.05）。提示人工真皮抗感染力强、存活率高。将人工真皮应用于儿童严重创伤创面,与创面负压引流、培养肉芽及自体刃厚皮片或薄中厚皮片移植相比,能缩短创面植皮后愈合时间,提高愈合创面的质量,减少对关节功能的影响。     

低强度超声波对开放性创口的冲洗效果

背景：虽然医疗技术不断进步,但开放性损伤导致的伤口感染率仍然较高。目的：对比低强度超声波与传统方法对开放性创伤伤口冲洗的效果。方法：收集84例开放性创伤患者,观察经低强度超声波冲洗的42例患者（观察组）的伤口细菌清除及愈合情况,并与经常规冲洗的42例患者（对照组）细菌清除及愈合情况。结果与结论：观察组清创2h后伤口组织中细菌清除率、伤口甲级愈合率明显高于对照组（P〈0.01,P〈0.05）;观察组5d伤口愈合面积明显大于对照组,其平均愈合时间较对照组有明显缩短（P〈0.01）。说明使用低强度超声波创伤冲洗机对伤口进行冲洗,具有清除效果确切和操作简便易行,同时能促进伤口愈合。     

外用中药对失神经支配创面VEGF表达的影响

目的：观察外用中药对大鼠失神经支配创面血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。方法120只SD大鼠被随机分成4组：A组（龙血膏组）、B组（生肌膏组）、C组（失神经凡士林纱条换药组）和D组（非失神经凡士林纱条换药组）。对A组、B组、C组大鼠制造背部失神经支配的深创面模型,之后各组创面分别以龙血生肌膏、生肌愈皮膏、凡士林外用治疗,D组大鼠背部制作深创面模型,以凡士林治疗。于4、7、11、15、21d各时间点测算各组的创面愈合率,并对创面组织进行VEGF的免疫组化染色观察。结果各时间点A、B组创面愈合率均高于C、D组（P〈0.05）,C组低于D组（P〈0.05）。A、B、D组VEGF阳性表达第11天达峰值,C组第15天达峰值。第4、7、11天时A、B组VEGF阳性表达明显高于C、D组（P〈0.05）,C组低于D组（P〈0.05）;第21天时A、B、D组低于C组（P〈0.05）。结论外用中药对失神经支配创面的愈合有促进作用,可能与外用中药能增强失神经支配创面早、中期VEGF表达有关。     

封闭式负压引流治疗皮肤缺损的效果分析及其护理

[目的]探讨封闭式负压引流(VSD)治疗皮肤缺损的效果及其相应护理措施。[方法]随机选取116例皮肤缺损病人,将其分为观察组60例,采用封闭式负压引流治疗,对照组56例采用传统换药治疗,比较两组病人的疗效与探讨VSD术前术后的护理措施。[结果]观察组病人引流通畅,感染得到有效控制,肉芽组织生长良好,无不良反应发生;观察组治疗有效率高达95%,显著高于对照组(53.57%)(P0.05);观察组病人换药次数、抗生素使用天数、肉芽组织生长时间、创面封闭时间与住院时间均显著低于对照组,差异有统计学意义(均P0.05)。治疗后,观察组VAS评分显著低于对照组与治疗前(均P0.05)。[结论]封闭式负压引流治疗皮肤缺损效果显著,配合以全方位的护理措施可加快皮肤缺损的愈合。     

雷公藤甲素对T2DM大鼠肾小管-间质损伤的保护作用

目的：观察雷公藤甲素（Triptolide,TP）对2型糖尿病（T2DM）大鼠肾小管-间质骨形态发生蛋白-7（BMP-7）、结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响及保护作用。方法：Wistar大鼠50只,随机分为正常组（NC组）、模型组（DM组）和观察组（TP组）。DM及TP组大鼠均采用高脂高糖联合小剂量STZ建立T2DM模型。模型成功后,TP组大鼠给予TP 200μg.kg-1.d-1灌胃。结果：治疗8周后,与NC组比较,DM组及TP组大鼠肾重/体重（KW/BW）、空腹血糖（FBG）、尿白蛋白（UAL）及CTGF、TGF-β1mRNA蛋白的表达、ED-1阳性细胞数均明显增多（P〈0.05,0.01）,TP组低于DM组（P〈0.05,0.01）;肾组织BMP-7mRNA及蛋白表达下调（P〈0.01）,TP组高于DM组（P〈0.05）。相关分析表明,尿蛋白与BMP-7 mRNA存在负相关,与CTGF、TGF-β1mRNA存在正相关;肾小管-间质内ED-1阳性细胞数与TGF-β1的表达明显相关;TGF-β1与CTGF的表达呈正相关,而与BMP-7存在负相关（均P〈0.01）;萎缩肾小管比例及间质纤维化均与TGF-β1、CTGF表达明显正相关,与BMP-7负相关（均P〈0.05）。结论：TP对T2DM大鼠肾小管-间质损害具有明显的保护作用,其机制可能与下调CTGF、TGF-β1及部分恢复BMP-7的表达有关。