多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗大鼠模型的建立

背景:研究表明胰岛素抵抗在多囊卵巢综合征的发生与发展过程中起重要作用,建立理想的多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗动物模型是研究该疾病的基础。目的:探讨建立较为理想的多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗大鼠模型的方法。方法:将八九周龄SD雌性大鼠随机分为模型组和对照组。模型组给予胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素皮下注射,并以高脂饲料和50g/L葡萄糖水喂养,对照组皮下注射生理盐水,常规饮食喂养。结果与结论:造模6周后,模型组大鼠卵巢体积明显增大,且呈多囊性改变;血清睾酮、黄体生成素、空腹血糖和胰岛素水平高于对照组;骨骼肌组织中葡萄糖转运蛋白4表达明显低于对照组,且其葡萄糖转运蛋白4阳性颗粒靠近骨骼肌细胞膜边缘者较少。可见胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素皮下注射,并饲以高脂饲料和50g/L葡萄糖水是建立多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗大鼠模型较为理想的方法。     

多囊卵巢综合征大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1及其丝氨酸307位点磷酸化的表达

背景：胰岛素受体底物1的丝氨酸307位点磷酸化程度的增加参与了骨骼肌胰岛素抵抗的发生。目的：观察多囊卵巢综合征大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1的含量及其丝氨酸307位点磷酸化程度的变化。方法：将大鼠随机分为模型组和对照组,模型组给予人绒毛膜促性腺激素联合胰岛素皮下注射,并配以高脂饮食,构建大鼠多囊卵巢综合征模型;对照组皮下注射生理盐水,正常饲料喂养。结果与结论：干预6周后,Western blot检测结果显示,与对照组相比,模型组大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1表达量显著下降（P〈0.05）,而其丝氨酸307位点磷酸化蛋白表达明显升高（P〈0.05）。结果提示,多囊卵巢综合征大鼠骨骼肌细胞中胰岛素受体底物1蛋白表达下调及其丝氨酸307位点磷酸化蛋白表达上调与多囊卵巢综合征大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的发生密切相关。     

多囊卵巢综合征大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1及其丝氨酸307位点磷酸化的表达

背景:胰岛素受体底物1的丝氨酸307位点磷酸化程度的增加参与了骨骼肌胰岛素抵抗的发生。目的:观察多囊卵巢综合征大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1的含量及其丝氨酸307位点磷酸化程度的变化。方法:将大鼠随机分为模型组和对照组,模型组给予人绒毛膜促性腺激素联合胰岛素皮下注射,并配以高脂饮食,构建大鼠多囊卵巢综合征模型;对照组皮下注射生理盐水,正常饲料喂养。结果与结论:干预6周后,Western blot检测结果显示,与对照组相比,模型组大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1表达量显著下降(P<0.05),而其丝氨酸307位点磷酸化蛋白表达明显升高(P<0.05)。结果提示,多囊卵巢综合征大鼠骨骼肌细胞中胰岛素受体底物1蛋白表达下调及其丝氨酸307位点磷酸化蛋白表达上调与多囊卵巢综合征大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的发生密切相关。     

高脂饮食诱导肥胖模型大鼠骨骼肌组织蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B和胰岛素受体底物2的表达

背景:外周组织的胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要病因。目的:观察高脂饮食诱导的肥胖大鼠骨骼肌中蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B和胰岛素受体底物2的表达。方法:将20只SD大鼠随机等分为对照组和高脂组,分别给予常规饲料和高脂饲料喂养12周。结果和结论:与对照组相比,高脂组大鼠胰岛素敏感指数显著降低(P<0.01),大鼠葡萄糖耐量受损,胰岛素释放试验提示葡萄糖刺激的胰岛素第一时相分泌受损,骨骼肌组织中蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B蛋白表达水平明显增加(P<0.01),骨骼肌中胰岛素诱导的胰岛素受体底物2磷酸化程度降低(P<0.01)。提示高脂饮食诱导的肥胖大鼠骨骼肌中蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B蛋白表达量升高,使胰岛素诱导的胰岛素受体底物2磷酸化程度降低,可能是肥胖导致胰岛素抵抗的机制之一。     

高脂饲料和高果糖餐分别诱导胰岛素抵抗大鼠模型的胰岛素敏感性

目的:建立高脂饲料和高果糖餐诱导的胰岛素抵抗大鼠模型,分别评定两种动物模型的胰岛素敏感性。方法:实验于2004-03/06在南京中医药大学第一临床医学院中医内科急难症研究所完成,选用Wistar雄性大鼠72只,适应性饲养1周后,随机分为3组,即空白组、果糖模型组和高脂模型组,每组24只。空白组继续以普通标准大鼠饲料喂养,饮用自来水;果糖模型组以100g/L的果糖水取代自来水喂养;高脂模型组以高脂饲料取代普通标准大鼠饲料喂养,连续6周。每周测量各组大鼠的体质量、血压。6周结束时,分别测定各组大鼠葡萄糖耐量、血清游离脂肪酸、三酰甘油、血浆胰岛素,同时以正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术,结合输注3H-2DG测定股四头肌葡萄糖摄取率评定大鼠的胰岛素敏感性。胰岛素敏感性指数=1n1/(空腹血糖×空腹胰岛素)。结果:纳入72只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠体质量、血压比较:与空白组大鼠比较,高脂模型组体质量显著增加(t=2.819～11.430,P<0.01),果糖模型组血压显著升高(t=4.743～14.510,P<0.01)。②各组大鼠糖耐量比较:果糖模型组和高脂模型组大鼠的葡萄糖耐量显著低于空白组(t=2.833,4.030,P<0.05,P<0.01)。③各组大鼠血清三酰甘油、游离脂肪酸、血浆胰岛素含量比较:果糖模型组和高脂模型组大鼠显著高于空白组(t=3.059～10.391,P<0.01)。④各组大鼠胰岛素敏感性指数、葡萄糖输注率、葡萄糖摄取率比较:果糖模型组和高脂模型组大鼠显著低于空白组(t=2.212～58.052,P<0.01)。结论:高脂饲料和高果糖餐喂饲均可以诱导胰岛素抵抗大鼠模型。     

高脂饲料和高果糖餐分别诱导胰岛素抵抗大鼠模型的胰岛素敏感性

目的：建立高脂饲料和高果糖餐诱导的胰岛素抵抗大鼠模型。分别评定两种动物模型的胰岛素敏感性。方法：实验于2004-03／06在南京中医药大学第一临床医学院中医内科急难症研究所完成，选用Wistar雄性大鼠72只，适应性饲养1周后，随机分为3组，即空白组、果糖模型组和高脂模型组，每组24只。空白组继续以普通标准大鼠饲料喂养，饮用自来水；果糖模型组以100g／L的果糖水取代自来水喂养；高脂模型组以高脂饲料取代普通标准大鼠饲料喂养，连续6周。每周测量各组大鼠的体质量、血压。6周结束时，分别测定各组大鼠葡萄糖耐量、血清游离脂肪酸、三酰甘油、血浆胰岛素，同时以正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术，结合输注^3H-2DG测定股四头肌葡萄糖摄取率评定大鼠的胰岛素敏感性。胰岛素敏感性指数=1n 1／（空腹血糖&;#215;空腹胰岛素）。结果：纳入72只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①各组大鼠体质量、血压比较：与空白组大鼠比较。高脂模型组体质量显著增加（t=2．819-11．430，P〈0．01），果糖模型组血压显著升高（t=4．743-14．510。P〈0．01）。②各组大鼠糖耐量比较：果糖模型组和高脂模型组大鼠的葡萄糖耐量显著低于空白组（t=2．833，4．030，P〈0．05，P〈0．01）。③各组大鼠血清三酰甘油、游离脂肪酸、血浆胰岛素含量比较：果糖模型组和高脂模型组大鼠显著高于空白组（t=3．059-10．391，P〈0．01）。④各组大鼠胰岛紊敏感性指数、葡萄糖输注率、葡萄糖摄取率比较：果糖模型组和高脂模型组大鼠显著低于空白组（t=2．212—58．052，P〈0．01）。结论：高脂饲料和高果糖餐喂饲均可以诱导胰岛素抵抗大鼠模型。     

胰岛素抵抗模型的建立与评价

背景:胰岛素抵抗是代谢综合征,糖尿病和动脉粥样硬化的共同病理基础.目的:比较相同体质量不同饮食诱导及不同体质量相同饮食诱导建立胰岛素抵抗大鼠模型的可行性.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-10/2007-09在泰山医学院生命科学研究所完成.材料:SPF级1个月龄雄性SD大鼠20只;胰岛素溶液为江苏万邦生化医药股份有限公司产品,按照4 mU/(kg·min)的滴速标准用前临时配制.方法:按体质量分组4组:体质量在(140±10)g范围的为普通饲料组、高盐高脂饲料组、高糖高脂饲料组,体质量在(180±10)g范围为高糖高脂饲料组,每组5只.主要观察指标:用高脂饮食诱导建立胰岛素抵抗模型;用正常葡萄糖-高胰岛素钳夹试验验证是否有胰岛素抵抗:不同体质量、不同饮食配方与胰岛素抵抗模型的关系.结果:轻体质量和重体质量大鼠在基础血糖、基础血压方面差异无显著性,20只大鼠全部进入结果分析.①高脂喂养4个月后,两组大鼠体质量、肾脏和附睾周围脂肪重量及GIR60-120差异已无显著性意义,血压差异有显著性意义(P<0.05),Ln(FINS)、Ln(SINS)差异有极显著性意义(P<0.01).②体质量(140±10)g大鼠经高脂喂养4个月后,高脂喂养组与普通饲料组体质量差异无显著性意义.肾脏周围脂肪重量、喂养后血压、Ln(FINS)、Ln(SINS)及GIR60-120差异都有极显著性意义(P<0.01);高脂高糖及高脂高盐喂养大鼠除Ln(SINS)差异有极显著性意义外,其他指标之间差异无显著性意义.结论:基础体质量较低的大鼠易出现胰岛素抵抗,高脂饮食能更易成功诱导低体质量大鼠胰岛素抵抗模型,在高脂喂养中,饲料中的高糖与高盐对胰岛素抵抗生成影响的差别不大.     

运动干预对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌蛋白激酶B活性和蛋白与基因表达的影响

目的：探讨一次性游泳运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌蛋白激酶B（protein kinaes, PKB）mRMA表达、蛋白总量（t- PKB）及磷酸化PKB（p-PKB）的影响。方法：SD大鼠随机分为正常饮食组、高脂饮食组、高脂饮食+运动组。分别对高脂饮食组与高脂饮食+运动组饲以高脂饲料,4周后对高脂饮食+运动组大鼠运动干预2h。测血液葡萄糖和胰岛素浓度;Western blot法检测骨骼肌t-PKB蛋白表达、p-PKB磷酸化水平;RT-PCR法分析PKB mRNA表达。结果：高脂饮食组血糖和胰岛素浓度明显高于对照组;高脂饮食+运动组血糖和胰岛素浓度低于高脂饮食组;高脂饮食组PKB mRNA表达下降;高脂饮食+运动组 PKB磷酸化水平和蛋白总量高于高脂饮食组。结论：运动干预改善高脂饮食诱发胰岛素抵抗大鼠对胰岛素的敏感性,增加PKB磷酸化水平和蛋白与基因的表达。     

舒林酸对高脂饲养大鼠胰岛素抵抗的影响

目的 探讨舒林酸对高脂饲养肥胖大鼠胰岛素敏感性的影响以及对胰岛素靶组织受体后信号转导途径蛋白表达及其磷酸化的调节作用。方法 3周龄雄性SD大鼠20只随机分组给予普通饲料(5只)、高脂饲料(15只)饲养20周,用口服葡萄糖糖耐量试验筛选胰岛素抵抗造模成功大鼠共10只,再随机分组,予高脂饲料或高脂饲料加舒林酸干预,4周后以高胰岛素正葡萄糖钳夹试验评价不同干预组大鼠胰岛素敏感性变化。Western blot观察胰岛素受体底物1(IRS1)丝氨酸(Ser)/酪氨酸(Tyr)残基磷酸化水平的状态。结果 高胰岛素正糖钳夹实验表明高脂饲养组大鼠葡萄糖清除率显著下降,提示胰岛素抵抗大鼠模型成功建立。舒林酸干预组大鼠葡萄糖清除率较高脂饲养组大鼠显著上升。舒林酸干预组大鼠骨骼肌IRS1酪氨酸磷酸化表达上调,而丝氨酸磷酸化表达下降。结论 舒林酸通过调节IRS1 Ser/Tyr残基的磷酸化水平,改善高脂饮食肥胖大鼠的胰岛素敏感性。     

运动通过增强大鼠Caveolin-3/eNOS信号转导缓解胰岛素抵抗形成的机制

目的:探讨Caveolin-3/e NOS信号转导在游泳运动改善高脂饮食大鼠胰岛素抵抗(IR)中的作用,为胰岛素抵抗及其并发症的防治提供理论依据。方法:以SD大鼠为实验对象,随机分为3组:正常对照组(C组)、高脂饮食组(H组)、高脂饮食运动组(HE组)。通过8周高脂饲料喂养建立IR大鼠动物模型,同时对大鼠实施无负重游泳运动干预。用正糖钳技术结合胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI)评价动物模型的建立;通过观察运动对高脂饮食IR大鼠骨骼肌e NOS和GLUT4含量,Caveolin3(Cav-3)m RNA的表达水平,p Akt Ser473和Akt蛋白表达的变化,探讨运动干预IR的机制。结果:(1)8周高脂饮食喂养后,H组大鼠葡萄糖输注速率(GIR)显著下降(P0.01),ISI水平显著下降(P0.01),HOMA-IR水平显著增加(P0.01),提示胰岛素抵抗大鼠建模成功。(2)8周游泳干预后,与H组相比,HE组大鼠GIR显著增加(P0.01),血清INS含量和HOMA-IR水平均显著降低(P0.01),ISI水平显著增加(P0.05或P0.01);骨骼肌Cav-3 m RNA表达水平,p Akt Ser473和Akt蛋白表达水平均显著增加(P0.05或P0.01)。结论:8周游泳运动可通过上调骨骼肌Cav-3的表达水平,激活e NOS/Akt通路,从而增加GLUT4移位,缓解高脂饮食大鼠IR的形成。     

胰岛素抵抗和非胰岛素抵抗多囊卵巢综合征患者的临床特征

目的 探讨多囊卵巢综合征（PCOS）胰岛素抵抗患者的临床特征。方法 选择临床诊断为PCOS，同时葡萄糖负荷60、120min血胰岛素≥160mU／L的患者33例为胰岛素抵抗组，选择胰岛素及糖负荷后60、120min血胰岛素正常的PCOS患者130例作为对照组。对比两组患者早卵泡期或闭经状态下各项性激素、体重指数、各个时点的血糖水平以及葡萄糖曲线下面积。结果 ①胰岛素抵抗组的睾酮和体重指数水平比对照组高（P〈0．05），而黄体生成素水平比对照组低（P〈0.05）；②糖负荷后各时点的血糖以及葡萄糖曲线下面积，胰岛素抵抗组均高于对照组（P〈0.05）。结论 两组PCOS患者性激素有不同改变，胰岛素抵抗者以睾酮升高为主，而非胰岛素抵抗患者则以黄体生成素升高为主要变化，肥胖可能是胰岛素抵抗的一个原因，胰岛素抵抗更容易出现糖耐量的异常。     

白细胞介素6对2型糖尿病大鼠骨骼肌糖代谢的影响

目的：通过研究白细胞介素6（IL－6）对2型糖尿病（T2DM）大鼠骨骼肌葡萄糖转运体4（GLUT4）和糖原含量的影响,探讨其影响T2DM糖代谢的机制。方法：健康雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（N组）10只,糖尿病IL-6抗原干预组（A组）10只,糖尿病IL－6抗体干预组（B组）8只,糖尿病对照组（C组）8只。测定血糖、血清胰岛素、血脂等指标;取股四头肌比色法测定肌糖原含量,免疫组化法测定骨骼肌GLUT4蛋白表达。结果：T2DM大鼠骨骼肌糖原含量和GLUT4蛋白表达较正常大鼠明显降低,IL-6抗体干预可以升高T2DM大鼠骨骼肌糖原含量和GLUT4蛋白表达。结论：T2DM大鼠骨骼肌GLUT4蛋白表达减少;IL－6抗体阻滞通过增加GLUT4蛋白表达促进骨骼肌对糖的利用。     

余甘子提取物对糖尿病大鼠肌肉和脂肪组织胰岛素信号通路的影响

背景:余甘子具有明显的降血糖作用,但其作用机制尚不清楚。目的:观察余甘子提取物对大鼠骨骼与脂肪组织中胰岛素信号通路相关蛋白的影响。方法:将30只SD大鼠随机等分为对照组、模型组和余甘子组,后2组以腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型。余甘子组用余甘子提取液灌胃6周,模型组和对照组灌胃同体积的蒸馏水。结果与结论:与对照组相比,糖尿病大鼠的体质量、空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数均显著升高(P<0.05),脂肪和肌肉组织磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶BmRNA及葡萄糖转运蛋白4mRNA和蛋白水平显著下降(P<0.05,P<0.01),灌胃余甘子提取物6周后,余甘子组大鼠体质量、空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数均比模型组下降(P<0.05),脂肪和肌肉组织磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶B和葡萄糖转运蛋白4mRNA水平明显增加(P<0.01,P<0.05),且脂肪组织葡萄糖转运蛋白4蛋白表达增加(P<0.01),但肌肉组织葡萄糖转运蛋白4蛋白差异没有显著性意义。提示余甘子提取物可调控胰岛素介导的磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/葡萄糖转运蛋白4信号转导通路,发挥降血糖作用。     

甘丙肽对骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4的影响

背景：甘丙肽能促进骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4膜转位和葡萄糖清除,葡萄糖转运蛋白4是运动促进骨骼肌细胞摄取葡萄糖的主要载体,从而增加骨骼肌摄取葡萄糖而降低血糖。目的：探讨甘丙肽与胰岛素联用对糖尿病大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4膜位移的作用。方法：由第一作者检索1991年1月2011年12月PubMed数据库（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed）及万方数据库（http：//www.wanfangdata.com.cn）。英文检索词为＂Galanin;insulin＂,中文检索词为＂甘丙肽;葡萄糖转运蛋白4＂。检索文献量总计143篇,选择甘丙肽与胰岛素在改善骨骼肌摄取葡萄糖的特点及其临床应用方面的文献,排除陈旧及重复实验文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志的文章,最终纳入37篇符合标准的文献。结果与结论：甘丙肽是一种广泛分布在神经系统的神经肽,具有广泛的神经生物学功能。运动能提高血浆甘丙肽浓度以及甘丙肽对2型糖尿患者的保护机制已经得到认可。甘丙肽及胰岛素都有降低血糖的功效。糖尿病是甘丙肽和胰岛素共同障碍的结果,那么甘丙肽与胰岛素联用的疗效自然成为关注的焦点,即两者联用对糖尿病大鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4膜位移的作用,是否比单独运用甘丙肽或胰岛素对骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4膜位移的作用更强是目前研究的趋势。     

耐力运动对大鼠葡萄糖运载体基因表达及转位的影响

目的　研究耐力运动对大鼠骨骼肌细胞葡萄糖运载体 4(glucosetransporter 4,GLUT4)基因表达及转位机制的影响。方法　将SD大鼠随机分为两组 :对照组和耐力运动组。耐力运动组大鼠进行 6周游泳训练。用Western印迹法检测大鼠骨骼肌细胞内膜和外膜的GLUT4蛋白含量 ,用Northern杂交法和斑点印迹法检测大鼠骨骼肌细胞内GLUT4mRNA含量。实验前后检测大鼠血清胰岛素和血糖浓度。结果　运动组大鼠经过 6周游泳训练后 ,与对照组大鼠相比 ,骨骼肌细胞内膜GLUT4含量增加 16.0 %(P <0 .0 1) ,细胞外膜GLUT4含量增加 71.9% (P <0 .0 1) ,骨骼肌细胞内GLUT4mRNA含量增加2 5 .6% (P <0 .0 1)。结论　耐力运动可增加骨骼肌细胞内GLUT4基因表达水平 ,促进骨骼肌细胞内的GLUT4从内膜向细胞外膜转位 ,从而提高骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取和利用。     

胰岛素抵抗对多囊卵巢综合征育龄妇女生育能力的影响

目的探讨胰岛素抵抗对多囊卵巢综合征(PCOS)育龄妇女生育的影响。方法选择PCOS患者143例,分成3组:PCOS患者曾有1次或1次以上自然流产史并无正常妊娠65例作为流产组,PCOS患者正常妊娠且无不良妊娠史42例作为正常妊娠组,另选择仅因PCOS因素来我院行辅助生育治疗的不孕患者36例作为不孕组;并选择同时期仅因为输卵管因素或男方因素不孕的正常育龄妇女44例作为对照组,于月经期第3~7天、闭经者任一时期早晨空腹抽血测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)及血糖、胰岛素。观察胰岛素抵抗与PCOS患者的相关性。结果 PCOS流产组与不孕组的空腹血浆胰岛素≥20 m U/L的发生率、空腹血糖:空腹血浆胰岛素(4.5)发生率均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),PCOS流产组、不孕组的空腹血浆胰岛素≥20 m U/L的发生率、空腹血糖:空腹血浆胰岛素4.5发生率高于PCOS正常妊娠组,但差异无统计学意义(P0.05);PCOS的流产组HOMA-IR4.5的发生率高于PCOS正常妊娠组与对照组,且差异有统计学意义(P0.05),PCOS不孕组HOMA-IR4.5的发生率与PCOS正常妊娠组及对照组,差异无统计学意义(P0.05)结论胰岛素抵抗可能参与多囊卵巢综合征育龄妇女流产与不孕的发生。