罗汉果对雄性小鼠骨髓微核和精子形态的影响

背景:对罗汉果的遗传毒性进行研究,可为其安全使用提供实验依据.目的:观察罗汉果水提液对雄性小鼠骨髓细胞微核率和附睾精子畸形率的影响,了解其是否有遗传毒性.方法:按罗汉果水提液最大使用剂量(3 g/mL)和最大灌胃容量(20 mL/kg)灌胃小鼠,观察罗汉果水提液的急性毒性.将雄性昆明小鼠随机分为5组,分别灌胃给予30,15,7.5 g/kg的罗汉果水煎液、蒸馏水,连续5 d;或腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺.于灌胃第5天,采用骨髓嗜多染红细胞微核试验计算小鼠的骨髓微核率.于首次灌胃后第35天,观察小鼠精子畸形率.结果与结论:罗汉果水提液对昆明小鼠的经口急性毒性最大耐受剂量大于120 g/kg.罗汉果水提液30,15,7.5 g/kg灌胃后,小鼠的骨髓微核率、精子畸形率与正常小鼠无差异(P > 0.05),均明显低于环磷酰胺诱发的骨髓微核率和精子畸形率(P < 0.05).说明罗汉果水提液对成年雄性小鼠无明显遗传毒性.     

姜蒜精华素安全性实验研究

目的对姜蒜精华素片进行安全性实验研究。方法依据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)进行急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、30d喂养试验。结果小鼠的急性毒性MTD均大于15g/KgBW;Ames试验未呈现遗传毒性;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验阴性;30d喂养试验未呈现毒性。结论在本实验条件下姜蒜精华素片无毒属安全性食品。     

N,O-羧甲基壳聚糖对小白鼠精子畸形的影响

目的：观察能明显促进禽类等动物的生长发育。改善肉质的新型饲料添加剂N，O-羧甲基壳聚糖对昆明种小白鼠精子畸形的影响，分析其应用在畜牧生产中的安全性。 方法：实验于2005—06—22／2005—08—06于南京农业大学动物医学院药理组实验室完成。挑选体质量25～28g的小鼠50只，以随机数字表法分为生理盐水组、环磷酰胺组、N，O-羧甲基壳聚糖（南京龙源天然多酚合成厂提供，商品名为毕罗喜，质量浓度为105g／kg）2，4，8g／kg剂量组，每组10只。N，O-羧甲基壳聚糖2，4，8g／kg剂量组分别给予相应剂量的N，O-羧甲基壳聚糖，溶于1mL生理盐水，2，4g／kg剂量1次灌服，8g／kg剂量分2次灌服。每次间隔约3h；生理盐水组给予生理盐水1mL；环磷酰胺组给予环磷酰胺0．04g／kg，溶于1mL生理盐水。给药前禁食10h，不禁水。连续灌胃5d，给药后30d麻醉下处死，取两侧附睾按Wyrobek方法涂片。观察小白鼠精子畸形状况。评估标准参照农业部兽药评审委员会办公室编写的兽药试验技术规范汇编（2001年）。评估内容参照沈建忠主编的动物毒理学（中国农业出版社，2002年），包括各种畸形的精子形态：不定形、胖头、香蕉头、无钩、双头（多头）和双尾（多尾）等，及其分类计数。每组随机选取5只小鼠，计算总畸形率。精子畸形率（％）=畸形精子总数／检查精子总数&;#215;100。 结果：最终25只小鼠进入结果分析，每组5只。①环磷酰胺组的精子畸形率远高于生理盐水组和N，O-羧甲基壳聚糖2，4，8s／kg剂量组（6．10％，2．48％，2．46％，2．64％，2．78％，P〈0．01）；N，O-羧甲基壳聚糖2，4，8g／kg剂量组与生理盐水组比较，差异无显著性意义（P〉0．05），且各剂量组之间差异也没有显著性意义（P〉0．05）。②各组精子畸形主要表现为头部或尾部异常。以无定形和胖头居多，占35．48％（292／823）和29．28％（241／823）；其次是无钩形及香焦形多见，占19．68％（162／823）和13．49％（111／823）；偶尔可见双头双尾形，只占2.07％。 结论：N，O-羧甲基壳聚糖精子畸形试验结果呈阴性，说明其对雄性生殖细胞没有明显的遗传毒性。     

对一种强化碱性戊二醛消毒剂的毒理学评价

为了解四环牌强化碱性戊二醛的安全性,进行了急性经口毒性、蓄积毒性、皮肤变态反应、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核和精子畸形试验。结果,该剂对小鼠经口LD50为6329mg/kg（体重）,蓄积系数K>5;豚鼠皮肤变态反应试验未出现过敏反应;试验用戊二醛剂量诱导PCE微核细胞率与阴性对照组差异无统计学意义（P>0.05）,对小鼠精子畸形发生率无影响。因此,在本实验条件下,强化碱性戊二醛为实际无毒、弱蓄积毒性。极轻致敏性物质,没有致突变作用。     

酸性氧化电位水毒性的试验研究

为了解酸性氧化电位水消毒使用的安全性,采用动物试验法对其进行了毒理学评价。结果,酸性氧化电位水对大、小鼠急性经口毒性LD50均大于10000 mg/kg(体重),属实际无毒级。皮肤和眼刺激性试验结果刺激强度积分为0分,属无刺激性。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验结果均为阴性,无致微核和无致精子畸形作用。亚急性毒性试验各剂量组试验动物生长发育和处死动物解剖检查各项指标未发现明显改变;雌性动物3个剂量组天冬转氨酶活性均显著升高,高剂量组动物白细胞数显著下降;雄性动物高剂量组肝脏脏器系数比对照组显著降低,血清白蛋白含量显著上升,这些指标仍在本实验室正常范围内;但血清天冬转氨酶活性增高异常。结论,酸性氧化电位水急性毒性属实际无毒级,对皮肤和眼睛无刺激性,无致微核和精子畸形作用,未显示明显亚急性毒性。     

阳离子表面活性剂与戊二醛复合消毒剂毒性评价

目的了解一种阳离子表面活性剂与戊二醛复合消毒剂的安全性,评价其毒性。方法采用急性经口毒性试验、皮肤刺激试验、急性眼刺激试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验等评估复合消毒剂的安全性。结果该复合消毒剂原液急性经口毒性试验LD505 000 mg/kg;对完整皮肤和眼无刺激性;各剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和精子畸形率与阴性对照相比无显著性差异,与阳性对照差异显著。结论该复合消毒剂无毒性,安全性良好。     

N,O-羧甲基壳聚糖对小白鼠精子畸形的影响

目的:观察能明显促进禽类等动物的生长发育,改善肉质的新型饲料添加剂N,O-羧甲基壳聚糖对昆明种小白鼠精子畸形的影响,分析其应用在畜牧生产中的安全性。方法:实验于2005-06-22/2005-08-06于南京农业大学动物医学院药理组实验室完成。挑选体质量25～28g的小鼠50只,以随机数字表法分为生理盐水组、环磷酰胺组、N,O-羧甲基壳聚糖(南京龙源天然多酚合成厂提供,商品名为毕罗喜,质量浓度为105g/kg)2,4,8g/kg剂量组,每组10只。N,O-羧甲基壳聚糖2,4,8g/kg剂量组分别给予相应剂量的N,O-羧甲基壳聚糖,溶于1mL生理盐水,2,4g/kg剂量1次灌服,8g/kg剂量分2次灌服,每次间隔约3h;生理盐水组给予生理盐水1mL;环磷酰胺组给予环磷酰胺0.04g/kg,溶于1mL生理盐水。给药前禁食10h,不禁水。连续灌胃5d,给药后30d麻醉下处死,取两侧附睾按Wyrobek方法涂片,观察小白鼠精子畸形状况。评估标准参照农业部兽药评审委员会办公室编写的兽药试验技术规范汇编(2001年)。评估内容参照沈建忠主编的动物毒理学(中国农业出版社,2002年),包括各种畸形的精子形态:不定形、胖头、香蕉头、无钩、双头(多头)和双尾(多尾)等,及其分类计数。每组随机选取5只小鼠,计算总畸形率。精子畸形率(%)=畸形精子总数/检查精子总数×100。结果:最终25只小鼠进入结果分析,每组5只。①环磷酰胺组的精子畸形率远高于生理盐水组和N,O-羧甲基壳聚糖2,4,8g/kg剂量组(6.10%,2.48%,2.46%,2.64%,2.78%,P<0.01);N,O-羧甲基壳聚糖2,4,8g/kg剂量组与生理盐水组比较,差异无显著性意义(P>0.05),且各剂量组之间差异也没有显著性意义(P>0.05)。②各组精子畸形主要表现为头部或尾部异常。以无定形和胖头居多,占35.48%(292/823)和29.28%(241/823);其次是无钩形及香焦形多见,占19.68%(162/823)和13.49%(111/823);偶尔可见双头双尾形,只占2.07%。结论:N,O-羧甲基壳聚糖精子畸形试验结果呈阴性,说明其对雄性生殖细胞没有明显的遗传毒性。     

微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用研究

目的探讨微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用。方法性成熟Wistar大鼠,雌性100只,雄性50只,按雌性：雄性=2：1合笼配对,每日清晨检查阴拴和精子,发现者定为受孕零天。孕鼠随机分为5组（每组20只）：给药组（设3个剂量组：给予微孔草子油2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg,ig）、环磷酰胺组（7mg/kg,sc）和菜子油组（给予等容积菜子油,ig）。受孕第7天开始,给药组、菜子油组每天给予受试物1次,连续10d。环磷酰胺组于受孕第11天给予环磷酰胺,每日1次,连续3d。受孕第20天处死孕鼠,观察受试物对孕鼠和胚胎的毒性及致畸作用。结果微孔草子油各剂量组孕鼠体重、活胎率明显高于环磷酰胺组（P〈0.01）,死胎率、吸收胎率显著低于环磷酰胺组（P〈0.01）,与菜子油组间无显著性差异（P〉0.05）;微孔草子油各剂量组胎鼠体重、身长、尾长与菜子油组无显著性差异（P〉0.05）,外观、内脏、骨骼未发现畸形;环磷酰胺组140只胎鼠中有112只出现畸形。结论微孔草子油在2.5g/kg、5.0g/kg、10.0g/kg剂量时对孕鼠和胚胎无明显的毒性和致畸作用。     

萘乙酸对小鼠精子的影响作用

目的观察萘乙酸对小鼠精子的损伤作用。方法将25只雄性小鼠随机分为5组,每组5只。正常对照组和阳性对照组小鼠喂饲普通颗粒饲料,高、中、低剂量组小鼠饲料中分别加入剂量为5 0001、0002、00 mg/kg的萘乙酸。各组动物均喂养4周后处死。阳性对照组于处死前3 d每天腹腔注射环磷酰胺20 mg/kg体重。采用显微镜法观察记录小鼠精子数量、活性和形态,计算精子的密度、活率、活力及畸形率。结果高剂量组的精子活率和精子畸形率分别为（11.48±1.06）%和13.98%,正常对照组则为（17.44±0.86）%和2.72%,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论萘乙酸可诱发小鼠精子畸形,降低精子的活率。     

聚甲基丙烯酸甲酯／二氧化硅纳米义齿树脂材料遗传毒性的小鼠骨髓微核试验评价

背景:甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米复合材料已通过了包括细胞毒性试验、溶血试验、急性全身毒性试验、口腔黏膜刺激试验、皮肤致敏反应试验的生物安全性检测.目的:采用小鼠骨髓微核试验进一步探讨聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂对细胞遗传物质可能产生的损伤作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-11/2008-01在天津医科大学公共卫生学院毒埋实验室完成.材料:SPF级昆明小白鼠50只,随机分为5组:阴性对照组,低、中、高剂量混悬液组,阳性对照组,10只/组.聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂由天津医科大学口腔医院制备.方法:将聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂材料粉碎成细小颗粒,过筛后加入生理盐水形成混悬液,质量浓度为0.3 g/mL.阴性对照组灌胃生理盐水:低、中、高剂量混悬液组分别按15.0,7.5,3.75 g/kg灌胃混悬液进行染毒;阳性对照组腹腔注射环磷酰胺,按40 mg/kg给药.第1次染毒后24 h再次染毒,末次染毒后6 h取材,取胸骨骨髓加入胎生血清制备涂片,Giemsa染色.主要观察指标:每只小鼠骨髓涂片计数1 000个嗜多染红细胞,记录含微核的嗜多染红细胞数,求出微核率.结果;阴性对照组微核率为0.248%,阳性对照组为4.384%,低、中、高剂量混悬液组微核率分别为0.150%,0.254%,0.277%.与阴性对照组比较,低、中、高剂量混悬液组微核率无明显变化(P0.05),阳性对照组微核率显著升高(P<0.01).结论:聚甲基丙烯酸甲酯,二氧化硅纳米义齿树脂对小鼠细胞染色体无明显的诱变效应,具有较好的生物安全性.     

榆黄蘑提取物对保护肝脏作用的初步探讨

目的探讨榆黄蘑提取物的保肝作用,为开发利用榆黄蘑提供实验基础。方法给动物灌胃给药,腹腔注射环磷酰胺制作小鼠肝损伤模型,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果榆黄蘑提取物沉淀部分大剂量(0.8 g/kg/d)和中剂量(0.4 g/kg/d)组对降低肝损伤小鼠血清中ALT和AST的含量有显著效果,上清液小剂量(0.4 g/kg/d)组对降低AST含量也有显著效果;沉淀部分中剂量和上清液小剂量组对MDA含量也有显著降低作用。结论榆黄蘑提取物沉淀部分和上清液均具有明显的保肝作用。     

致死剂量N-甲基-D-天冬氨酸中毒模型小鼠对丙泊酚的反应

背景：丙泊酚具有较好的抗惊厥作用,但其作用机制尚不清楚。目的：观察丙泊酚对致死剂量N-甲基-D-天冬氨酸中毒模型小鼠的行为学及存活率的影响。方法：建立N-甲基-D-天冬氨酸致死模型昆明小鼠,给药前10min,腹腔注射丙泊酚12.5,25,50,75,100mg/kg,观察中毒小鼠的行为学改变及存活率,阳性对照组在造模前腹腔注射非特异性的N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂地佐环平2mg/kg,为排除丙泊酚溶剂脂肪乳可能的作用,设定了脂肪乳组,在造模前腹腔注射等容积的脂肪乳作为对照。结果与结论：腹腔注射N-甲基-D-天冬氨酸175mg/kg可导致小鼠全身惊厥发生并且很快死亡,而提前给予丙泊酚12.5,25,50,75,100mg/kg后,可见其可剂量依赖性的对抗小鼠惊厥的发生,并降低小鼠的死亡率,地佐环平（2mg/kg）可完全预防惊厥发生,而脂肪乳不能抑制惊厥的发生,对致死剂量N-甲基-D-天冬氨酸中毒模型小鼠无保护作用。提示丙泊酚的抗惊厥作用可能与N-甲基-D-天冬氨酸受体有关。     

纳米羟基磷灰石/细菌纤维素复合组织工程支架的细胞毒性和生物相容性

背景：天津大学材料学院利用仿生学方法制备的纳米羟基磷灰石/细菌纤维素复合支架材料,具有与天然骨相似的结构和性能。目的：研究纳米羟基磷灰石/细菌纤维素复合组织工程支架的细胞毒性和生物相容性。方法：①急性全身性毒性实验：将纳米羟基磷灰石/细菌纤维素材料浸提液与生理盐水分别注射至昆明小鼠腹腔,注射24,48,72 h记录小鼠体质量。②致敏实验：在日本大耳白兔背部皮下分别注射纳米羟基磷灰石/细菌纤维素材料浸提液与生理盐水,72 h内观察注射部位水肿及红斑情况,间隔14 d后再次行激发实验。③热源实验：在日本大耳白兔耳缘静脉注射纳米羟基磷灰石/细菌纤维素材料浸提液,注射后检测体温变化。④溶血实验：在稀释的兔抗凝血中分别加入纳米羟基磷灰石/细菌纤维素材料浸提液、生理盐水与蒸馏水。⑤将第3代兔骨髓间充质干细胞与纳米羟基磷灰石/细菌纤维素材料共培养,观察材料表面细胞增殖、生长及黏附状态。结果与结论：纳米羟基磷灰石/细菌纤维素复合支架材料无急性全身毒性、无致敏性、无热源反应、无溶血反应,该支架材料具有三维网络结构,骨髓间充质干细胞在材料表面生长、增殖及黏附良好,表明纳米羟基磷灰石/细菌纤维素复合支架材料具有良好的生物相容性与细胞相容性。     

银杏红曲维生素组方调脂有效性与安全性研究

目的探讨银杏红曲维生素组方(MGM)对混合型高脂血症大鼠血脂水平的影响及其急性毒性。方法采用混合型高脂血症SD大鼠模型,灌胃给予25 mg/kg、50 mg/kg剂量的MGM和阳性对照品32 d后,评价MGM的调脂效果。采用最大耐受剂量法评价23.2 g/(kg·d)的MGM单次给药72 h后对BALB/c小鼠与SD大鼠2种啮齿类动物的急性毒性。结果 MGM及阳性对照品给药32 d后较给药前显著降低高脂血症大鼠总胆固醇、甘油三酯和LDL-C的含量(P均<0.001),其中25 mg/kg的MGM的调脂效果与50 mg/kg剂量的阳性对照品相当,表明MGM的复方优于阳性对照品的调脂效果。急性毒性实验结果显示MGM对大、小鼠的最大耐受剂量为23.2 g/(kg·d),相当于人体推荐口服剂量的1933倍,在该剂量下观察小鼠与大鼠心脏、肝脏、肾脏的病理切片结果未发现损伤性病变。结论 MGM显著降低高脂血症大鼠的血脂水平,在推荐量范围内服用MGM安全可靠。     

贯叶金丝桃提取物对抑郁模型小鼠行为及海马神经元损伤影响的研究

目的探究贯叶金丝桃提取物（hypericumperforatumextracts,HPE）对抑郁模型小鼠行为、海马神经元损伤的影响。方法用小鼠尾悬挂实验和强迫游泳实验对HPE的抗抑郁作用进行研究;将50只昆明种小鼠分为空白对照组,氟西汀组,HPE高（1．2g／kg）、中（0．60g／kg）、低剂量（0．20g／kg）组,采用长期不可预见性中等强度应激造成小鼠慢性应激抑郁模型,Nissl染色法观察海马CAl,CA3区神经元形态及锥体细胞数目。结果与空白对照组比较,HPE能显著缩短强迫游泳小鼠及尾悬吊小鼠的不动时间,并呈一定的剂量依赖性;与空白对照组比较,氟西汀组小鼠海马CA3区锥体细胞数量明显减少（P〈0101）,HPE高、中、低剂量组能明显增加海马CA3区锥体细胞数量。结论贯叶金丝桃提取物能改善小鼠的抑郁样行为,保护抑郁模型小鼠海马神经元损伤。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ对环磷酰胺冲击治疗狼疮肾炎心脏毒性评估的临床意义

目的探讨心肌肌钙蛋白I（cTnI）对环磷酰胺冲击治疗狼疮肾炎的心脏毒性评估的临床意义。方法应用美国贝克曼库特公司生产的进入2免疫分析系统（Access Immunoassay System2,AIS2）对环磷酰胺冲击治疗狼疮肾炎前后cTnI水平进行测定,比较治疗前后cTnI的变化,对环磷酰胺的心脏毒性进行评估。结果环磷酰胺冲击治疗前患者血清cTnI为（0.034±0.013）ng/L,冲击治疗后次日患者血清cTnI为（0.038±0.012）ng/L,冲击治疗后1周患者血清cTnI为（0.037±0.011）ng/L,冲击治疗后2周患者血清cTnI为（0.036±0.012）ng/L,以上3组结果两两比较,差别无统计学意义。结论环磷酰胺以20mg/kg剂量冲击治疗狼疮肾炎未发现有cTnI明显升高,说明该剂量冲击治疗狼疮肾炎未引起心脏毒性的发生。     

低剂量辐射联合环磷酰胺对肿瘤细胞凋亡、细胞周期及骨髓增殖影响

目的探讨低剂量辐射联合环磷酰胺对小鼠移植肿瘤细胞的凋亡、细胞周期以及骨髓增殖的影响。方法昆明种雄性小鼠60只随机分为空白对照组、荷瘤对照组（假照组）、低剂量照射组（LDR组）、CTX化疗组（CTX组）和低剂量照射联合化疗组（LDR＋CTX组）,小鼠左后肢腹股沟皮下接种S180肉瘤细胞（空白组除外）,接种后第5、8天LDR组和LDR＋CTX组小鼠给予γ射线全身照射75 mGy,照射36 h后CTX组和LDR＋CTX组小鼠采用环磷酰胺（CTX）化疗,测量肿瘤大小变化,并取肿瘤组织采用流式细胞仪分析凋亡、细胞周期,取冲洗骨髓组织分析骨髓增殖情况。结果与假照组相比,各处理组肿瘤生长缓慢;LDR组肿瘤细胞凋亡增加;CTX组、LDR＋CTX组G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显减少,后者较前者为著（t=2.52,P〈0.05）。与空白对照组相比,假照组、LDR组骨髓细胞浓度未见明显变化,化疗组（CTX组、LDR＋CTX组）明显减少,后者较前者有明显提高（t=4.71,P〈0.05）;CTX组、LDR＋CTX组的增殖指数（PI）明显增加,LDR＋CTX组较CTX组进一步升高（t=3.41,P〈0.05）。结论低剂量辐射联合环磷酰胺可使机体肿瘤细胞G1期阻滞加剧,对肿瘤增殖细胞杀伤作用增强,明显提高机体抗肿瘤的作用,同时保护机体的骨髓造血机能,具有辅助肿瘤化疗的实际临床意义。     

煅烧骨的安全性

背景：经高温处理的煅烧骨具有类似自然骨的连续微孔结构,良好的生物相容性和降解性. 目的：观察牛煅烧骨的生物相容性、细胞相容性及毒性. 方法：①细胞相容性实验：将牛煅烧骨与第3代已诱导的Wistar大鼠骨髓间充质干细胞复合培养.②溶血实验：将煅烧骨浸提液、生理盐水与双蒸水加入兔血中.③凝血实验：将煅烧骨加入兔血浆中.④急性毒性实验：在昆明种小鼠尾静脉分别注射煅烧骨浸提液、生理盐水.⑤微核实验：在小鼠腹腔分别注射煅烧骨浸提液、生理盐水与环磷酰胺.⑥局部刺激性实验：将煅烧骨浸提液、生理盐水分别注射于兔两侧脊柱皮下.⑦热源检测实验：在兔耳静脉注射煅烧骨浸提液.⑧皮下植入实验：将煅烧骨材料植入Wistar大鼠背部皮下. 结果与结论：煅烧骨材料无细胞毒性,具有良好的细胞及血液相容性;对皮肤、肌肉无刺激作用;对心、肝、肾重要器官无毒性作用;皮下植入后对周围组织无刺激作用,能够部分降解吸收并被机体组织替代;无致热作用,对凝血功能无影响,对小鼠骨髓细胞无抑制及毒性作用.