间接免疫荧光试验在人群埃可30型肠道病毒IgG抗体检测中的应用

目的建立埃可30型肠道病毒（Echovirus30,Ech030）国内流行株血清特异性IgG抗体检测的间接免疫荧光法（IFA）,了解人群既往感染情况。方法采用由爆发人群分离得到的病毒株感染人胚肺二倍体细胞（MRC-5）制备抗原片,探讨IFA检测血清Ech030 IgG抗体的方法,并初步用于检测苏北病毒性脑膜炎爆发后收集的该地区儿童血清中Ech030 IgG抗体。结果建立了Ech030肠道病毒血清特异性IgG抗体的IFA检测方法。在44份健康儿童血清中筛检到28份（63．6％）Ech030IgG抗体阳性,3份患者血清Ech030IgG抗体均为阳性。结论Ech030国内流行株IgG抗体的IFA操作简便、经济,可用于血清流行病学调查。爆发地区儿童中存在大量的无症状感染者。     

间接免疫荧光试验在人群埃可30型肠道病毒IgG抗体检测中的应用

目的建立埃可30型肠道病毒(Echovirus30,Echo30)国内流行株血清特异性IgG抗体检测的间接免疫荧光法(IFA),了解人群既往感染情况。方法采用由爆发人群分离得到的病毒株感染人胚肺二倍体细胞(MRC-5)制备抗原片,探讨IFA检测血清Echo30 IgG抗体的方法,并初步用于检测苏北病毒性脑膜炎爆发后收集的该地区儿童血清中Echo30 IgG抗体。结果建立了Echo30肠道病毒血清特异性IgG抗体的IFA检测方法。在44份健康儿童血清中筛检到28份(63.6%)Echo30 IgG抗体阳性,3份患者血清Echo30 IgG抗体均为阳性。结论Echo30国内流行株IgG抗体的IFA操作简便、经济,可用于血清流行病学调查。爆发地区儿童中存在大量的无症状感染者。     

间接免疫荧光法检测抗眼肌抗体及应用

用间接免疫荧光法检测人血清中眼肌结合抗体（ＥＭ－Ａｂ），结果表明，１５例Ｇｒａｖｅｓ’甲亢伴突眼症（ＧＯ），７０例甲亢无突眼患者血清中的ＥＭ－Ａｂ阳性率分别为６６．６％和２７．４％，本法特异性好，与ＥＬＩＳＡ法结果比较总符合率为９７．２％。     

间接免疫荧光试验检测抗核抗体的前带效应分析

目的探讨间接免疫荧光试验(IIFA)检测抗核抗体(ANA)中的前带效应对ANA荧光滴度的影响。方法将880例血清样本以1∶100稀释进行手工检测,筛选ANA荧光滴度≥1∶1 000的样本分别以1∶100、1∶1 000、1∶10 000稀释检测,统计有前带效应(1∶1 000稀释比1∶100稀释荧光亮)的样本数;将前带效应的样本采用欧蒙Sprinter XL全自动荧光加样仪和EUROPattern全自动荧光分析仪检测ANA(1∶100稀释),与手工法检测ANA(1∶100稀释)进行比较,检测前带效应样本的特异性自身抗体,分析其荧光模型、荧光滴度及阳性特异性自身抗体的分布特点。结果有明显前带效应的样本数为34例,占总样本数的3.86%,占高滴度(≥1∶1 000)ANA样本数的29.57%。通过手工法检测或通过Sprinter XL全自动荧光加样仪检测均发现前带效应,其荧光模型及荧光滴度相似,值得注意的是,EUROPattern只能选取图片中间区域判读。在有前带效应的血清样本中,以荧光滴度≥1∶10 000最常见(74.42%)。在荧光模型方面,以斑点型最为多见(46.51%)。在特异性自身抗体的分布方面,以抗核糖核蛋白(RNP)抗体最多见(62.79%),其次为抗双链DNA抗体(51.16%)和抗SSA抗体(51.16%)。结论 IIFA检测高滴度ANA样本在低稀释度时容易产生前带效应,从而导致错误的ANA荧光滴度判断,临床检验实验室应引起重视。     

间接免疫荧光抗体法快速检测脓液中的厌氧菌

用脆弱、多形和不解糖类杆菌3种常见厌氧菌标准株的免疫血清,以间接免疫荧光抗体法(IFA)检测75份脓液中的厌氧菌,与厌氧培养结果比较,IFA3种菌的敏感性为72.7％,阳性符合率为88.9％,阴性符合率为81.4％.少数IFA阳性与培养鉴定结果不完全一致。3份IFA阳性培养阴性.IFA方法简便,2小时内可得结果,是一种快速、特异和敏感的厌氧菌检测方法.     

间接免疫荧光法与酶联免疫吸附试验对比检测抗核抗体

50年来,人们对抗核抗体(ANA)的认识不断加深.ANA的现代定义是指细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称,ANA特异性靶抗原逐一被发现并得到纯化.从1957年Holbborow等首先以啮齿动物组织冰冻切片为抗原底物,应用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA以来,许多研究者对ANA检测方法进行了大量研究.目前除了IIF以外,还有酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹法、快速胶乳颗粒试剂法等.用IIF检测ANA敏感性高、特异性强,以往临床常规检测ANA一般用免疫荧光法作为筛选试验,但采用的底物不同则结果有差异.常用的两种底物有人喉癌上皮细胞(Hep-2)与鼠肝细胞,目前国内外大多以Hep-2为底物的IIF检测ANA[1].该方法被称为“金标准“,但该方法操作较复杂,读片人要有一定经验.因此,有些单位采用以提取抗原和基因重组抗原为底物的ELISA检测ANA.但是,根据2003年我国48家医院自身抗体检测的质控总结,ANA正确率仅为47%[2],专家提出,自身抗体检测的质控势在必行[3].为比较IIF与ELISA检测ANA的异同,作者对本院80例血清标本同时进行这两种方法检测,报告如下.……     

间接免疫荧光法与酶联免疫吸附试验检测抗核抗体对比分析

目的:应用间接免疫荧光法(indirect immunofluoreseent assay,IF)与酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 检测临床疑似自身免疫疾病患者血清抗核抗体并进行相关性及对比分析.方法:IF法按说明书操作,在荧光显微镜下观察到特异的荧光核型为阳性;ELISA法按说明书操作,浓度≥18 U/mL为阳性,12 ～ 18U/mL为可疑,≤12 U/mL为阴性.结果:检测临床疑似自身免疫患者血清138份,IF法阳性50份,阴性88份,阳性率36.23%,ELISA法阳性78份,阴性60份,阳性率56.52%.经卡方检验 P ＜ 0.01.其中IF法样本血清稀释倍数与ELISA法检测浓度的Spearman相关系数为0.499.结论:两种方法检测抗核抗体差异有显著性,ELISA法敏感度明显高于IF法.同时,IF法样本血清抗核抗体血清稀释倍数与ELISA法的浓度呈一定相关性.     

浙江省首次间接免疫荧光法证实输入性登革热病例

登革热(DF,Dengue,fever)是一种全球性急性虫媒传染病,由登革热病毒(DV,Dengue,virus)引起。登革热流行于热带和亚热带60个国家及地区,以东南亚国家最为严重。我国自1978年广东省佛山登革热暴发以来,共发生13次流行。浙江省以前尚未证实有登革热病例。2003年,我们用间接免疫荧光法检测登革热抗体(以下简称IFAT),发现了2例输入性病例,现报告如下。     

间接免疫荧光法与蛋白质免疫印迹试验检测自身免疫性肝炎抗体的效果

目的 分析采用间接免疫荧光法与蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测自身免疫性肝炎(AIH)抗体的效果.方法 选择2017年2月—2018年6月云南省滇南中心医院(红河哈尼族彝族自治州第一人民医院)收治的231例肝炎患者作为研究对象,包括AIH组(33例)、病毒性肝炎组(136例)、 原发性胆汁性肝...     

抗核抗体的检测间接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验法的比较

目的应用间接免疫荧光法(Indirect lmmunofluoreseent,Assay,IFA)与酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosor-bent Assay,ELISA)检测血清抗核抗体并进行比较。方法IFA法按说明书操作,在荧光显微镜下观察到特异的荧光模型为阳性;ELISA法按说明书操作,S/CO≥1.10为阳性,0.91~1.09为可疑,≤0.90为阴性。结果检测临床疑似血清99份,IFA法阳性35份,阳性率35.36%,ELISA法阳性34份,阳性率34.35%,两法符合率87.88%,x2=0.1,P>0.05,结果有差异标本12份。结论检测疑似病人血清标本两法阳性率无显著性差异。     

2002年广州地区暴发的登革热流行特点分析

目的 了解2002年广州地区暴发登革热(DF)的流行特点,为其诊断、预防和治疗提供依据。方法 采用间接酶联免疫(ELISA)法、免疫斑点法、免疫层析法,对3 716例发热待查、疑似患者的血清特异性抗体IgM、IgG进行检测。用C6/36细胞对DF病例176份标本进行病毒分离,以间接免疫荧光(McAb-IFA)、RT-PCR方法鉴定。结果 本次广州地区暴发流行的登革热血清学确诊病人为886人。流行开始于5月份,8、9、10 月份达高峰期,11月有明显下降。发病以青壮年为主。在3 716例发热待查、疑似患者中,血清IgG、IgM抗体阳 性886例,阻性率27.84％。病毒分离阳性46份,阳性率26.1％。经单克隆抗体间接免疫荧光(McAb-IFA)、 RT-PCR检测鉴定为I型登革热病毒。结论 在疾控工作中,应加强Ⅰ型登革热病毒的监测工作。     

汕头市登革热的流行与控制情况分析

目的　了解汕头市登革热流行特点和流行因素,探讨预防控制对策。方法　对1999～2 0 0 3年汕头市登革热监测和登革热病例流行病学调查材料进行分析。结果　1999～2 0 0 3年,汕头市共报告登革热178例,疫情涉及6区4 4个街道;病例基本集中在9～11月份,临床表现以典型登革热为主,各年龄人群均可发病。结论　汕头市登革热疫情同周边城市登革热流行程度密切关联,疫情地区分布呈高度集中的特点,人群对登革热普遍易感。自然条件、居民居住条件和生活习惯是疫情流行的相关因素。加强监测力度,密切注视周边城市登革热疫情动态,做好环境整治和防蚊灭蚊工作,是防治登革热的关键。     

广州市东山区1995年某居民住宅一起登革热暴发调查

１９９５年９月１５日至１０月１６日广州市东山区某居民住宅区发生一起登革热疫情。流行病学、病原学及血清学调查证实，是一起由ＤＥＮＩ型病毒引起的暴发。罹患率０．４３％，流行期长达３１天，与疫情报告不及时、控制不利有关。     

间接免疫荧光法与化学发光法检测抗核抗体的对比分析

目的 探讨间接免疫荧光法(IIFA)和化学发光法(CMIA)检测抗核抗体(ANA)的异同.方法 确诊为自身免疫性疾病患者血清240例,同时采用IIFA法和CMIA法检测ANA.对两种方法检测结果不符者采用欧蒙印迹法复查抗核抗体谱.结果 IIFA法与CMIA法检测240例ANA阳性率分别为90.83%和78.75%,差异有统计学意义(P<0.05);两种检测方法的符合率为77.92%;在53例两种方法检测结果不一致的标本中,41例IIFA(+)CMIA(-)患者抗核抗体谱阳性率仅为14.63%;而12例IIFA(-)CMIA(+)患者抗核抗体谱阳性率高达66.67%,差异有统计学意义(P<0.05);IIFA不同荧光核型中,"其他型" 在两种方法检测符合率方面低于颗粒型、胞浆型、均质型核型(P<0.05).结论 CMIA法检测总ANA的敏感度低于IIFA法,而CMIA法的特异度优于IIFA法,因此将IIFA法作为ANA的筛查方法,再结合CMIA法检测,可在获得荧光核型信息观察抗体滴度的同时,进一步对ANA进行定量.而且应用两种不同方法学原理的实验互相佐证,还可以减少实验误差,提高检测的准确度.     

风疹病毒特异性IgG抗体亲和力测定的临床意义

目的区分风疹病毒原发性感染、继发性感染的病毒活化或再感染。方法对12 y以下患儿的风疹病毒IgG抗体(RV-IgG)阳性血清,采用尿素变性酶联免疫吸附实验(ELISA法)测定RV-IgG抗体亲和力指数(AI)。结果1~12 y的患儿中,只有4.8%(3/63)的病例有低亲和力抗体(AI<30%)。1 y以内患儿中高达56.2%(18/32)的病例有低亲和力抗体,明显高于1~12 y患儿。1 y以内患儿中,1~3 mo和4~6 mo患儿低亲和力抗体比例低(分别为36.4%和44.4%),而7~12mo患儿有83.3%为低亲和力抗体。结论RV的早期感染大都发生在1y以内。IgG抗体亲和力测定是鉴别初次感染和体内病毒活化及再感染的有效方法。     

IgA和IgG型抗中性粒细胞胞质抗体联合检测诊断韦格纳肉芽肿的价值

【目的】探讨IgA和IgG型抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）联合检测在韦格纳肉芽肿（WG）临床诊断中的应用价值。【方法】对28例临床诊断为wG及172例其他自身免疫性疾病患者血清,应用间接免疫荧光法检测ANCAIgA和IgG型抗体。【结果】wG病患者胞质型ANCA（cANCA）IgG型抗体和cANCAIgA型抗体阳性率最高,均显著高于其他自身免疫性疾病,且差异有显著性（P〈0．05）。联合检测ANCAIgG及IgA亚型抗体阳性率为89．3％（25／28）,明显高于单独检测ANCAIgG或IgA亚型阳性率53．6％（15／28）和35．7％（10／28）,且差异有显著性（P〈0．05）。【结论lIgA和IgG型抗中性粒细胞胞浆抗体联合检测有助于wG的早期准确诊断。     

Seroprevalence of Dengue and Zika Virus in Blood Donations: A Systematic Review

The presence of antibodies to Zika virus (ZIKV) and dengue virus (DENV) can be detected in blood donations. Donation-based surveillance provides an alternative strategy to estimate population prevalence by detecting antibodies that are circulating. To estimate population prevalence, we conducted a systematic review of literature on the seroprevalence of ZIKV and DENV antibodies in blood donations. We searched PubMed and Web of Science for studies that reported the seroprevalence of ZIKV and DENV in blood donations. The title and abstract of each study were screened by 2 reviewers simultaneously for possible inclusion, and the full text of selected studies was reviewed to ensure that they met inclusion criteria (used primary data collection, reported evidence of immunoglobulin M (IgM) or immunoglobulin G (IgG) antibodies in the blood supply, and included a representative sample of the total population). Immunoglobin test measuring levels of antibodies to IgM and IgG and number of positive cases were extracted from each study. No exclusions were made based on language or country. Our initial search identified 1890 studies after excluding duplicates, of which 76 were assessed for full text eligibility to ensure that they met our final inclusion criteria. There were 14 studies included in our review; 11 examined the seroprevalence of DENV, and 3 examined ZIKV. The highest seroprevalence by IgM was 2.82% for DENV and 0.53% for ZIKV. Our results indicate that the seroprevalence of ZIKV and DENV antibody presence in countries with active transmission is higher than reports by traditional surveillance in some countries. This finding is expected due to the large percentage of asymptomatic cases. The highest seroprevalence was observed for IgG, which can persist over long periods of time compared to IgM. Screening of blood donations may help supplement traditional surveillance measures, especially during outbreak settings.     

ELISA法联合CLIFT法检测抗双链DNA-IgG抗体应用于系统性红斑狼疮的诊断价值

目的：采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）, 观察抗双链DNA（double-stranded DNA, dsDNA）IgG抗体在系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus, SLE）患者和非SLE患者中的分布特点, 并评估ELISA法联合绿蝇短膜虫间接免疫荧光试验（crithidia luciliae immunofluorescence test, CLIFT）检测抗dsDNA-IgG抗体用于SLE诊断的效能。方法：收集上海交通大学医学院附属瑞金医院检测抗dsDNA-IgG抗体的住院患者的临床资料, 共4 726例采用ELISA法, 其中830例同时采用CLIFT检测, 用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC）分析2种检测方法辅助诊断SLE的效能。结果：采用ELISA法检测的 4 726例住院患者中, dsDNA抗体阳性者398例, 其中SLE 183例, 占dsDNA 阳性者46.0%, 非 SLE疾病依次为肝脏疾病（28.4%）、其他结缔组织病（7.5%）、血液系统疾病（5.3%）及呼吸系统疾病（3.8%）;830例采用CLIFT检测ds DNA, 134例结果显示为dsDNA抗体阳性的患者中, 其中SLE者占94.0%, 另有非SLE诊断病例包括自身免疫性肝病3例, 肝硬化、肾炎、银屑病和抗磷脂综合征各1例。830例完成ELISA法与CLIFT双检测的患者中, SLE患者共197例, 非SLE患者633例, ELISA法检测灵敏度为74.6%, 特异度仅为92.9%;而CLIFT法测dsDNA抗体具有较高的特异度, 为98.7%, 灵敏度为64.0%。联合2种方法平行检测dsDNA抗体可明显提高SLE的诊断效能, ROC曲线下面积最高（0.869 0）。结论：单独应用ELISA法时, 应警惕假阳性较高, 需排除其他非SLE疾病的诊断;联合使用ELISA法和CLIFT法检测抗dsDNA抗体可较单独应用CLIFT法明显提高SLE的诊断效能, 二者联合平行检测结果为阴性, 用于排除SLE更有意义。