小细胞肺癌患者外周血中Th9细胞水平检测及其临床意义

目的: 检测小细胞肺癌(SCLC)患者血清中白细胞介素9(IL-9)的水平和外周血中Th9的细胞比例,探讨Th9在SCLC疾病进展过程中的作用。方法: 选择20例局限期SCLC患者(局限期SCLC组)、16例扩散期SCLC患者(扩散期SCLC组)和10名健康对照者(健康对照组)。ELISA法检测各组研究对象血清中IL-9水平,流式细胞术检测各组研究对象外周血Th9细胞在CD4⁺T细胞中所占比例。结果: SCLC组患者外周血中Th9细胞比例高于健康对照组(t=3.731,P<0.01),局限期SCLC患者外周血中Th9细胞比例低于扩散期SCLC组(t=2.825,P<0.01)。SCLC组患者血清IL-9水平高于健康对照组(t=4.001,P<0.01),局限期SCLC组患者血清中IL-9水平低于扩散期SCLC组(t=3.089,P<0.01);结论: Th9可能通过分泌IL-9直接促进SCLC的疾病进展,外周血中Th9细胞和IL-9可能成为评价小细胞肺癌的分子标志。     

35例多发性硬化患者Th17细胞及相关细胞因子的检测

目的 探讨多发性硬化(MS)患者外周血Th17细胞水平及相关细胞因子的意义.方法 采用流式细胞分析法检测35例MS患者(MS组)和20例健康者(对照组)外周血Th17细胞占CD4+T细胞比例,ELISA法检测外周血IL-17、IL-23水平.结果 MS组患者外周血Th17/CD4+T细胞比例[(1.94±0.32)%]显著高于对照组[(0.60±0.25)%],差异有统计学意义(P<0.01);MS组患者外周血IL-17、IL-23水平亦明显高于对照组[IL-17:MS组(69.01±19.29)ng/L、对照组(25.94±15.61)ng/L;IL-23:MS组(550.80±112.06)ng/L、对照组(158.78±33.19)ng/L,(P<0.01)].患者外周血IL-17水平与IL-23水平呈正相关(r=0.731,P<0.01).结论 MS患者外周血Th17/CD4+T细胞比例增加,相关细胞因子IL-17、IL-23水平升高,Th17细胞可能参与了MS的发生与发展.     

成人原发免疫性血小板减少症患者外周血Th9细胞的表达及其临床意义

目的 观察Th9细胞及IL-9在成人原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)患者中的表达,探讨其在ITP发病过程中的作用.方法 纳入新诊断的成人ITP患者25例及年龄性别匹配的健康对照患者25例,利用流式细胞术检测研究对象外周血Th9细胞比例,实时荧光定量PCR检测IL-9、TGF-β、PU.1和IRF4的相对表达量,ELISA法检测IL-9的表达情况,血细胞计数仪进行血小板(PLT)计数.结果 与健康对照组相比,ITP患者外周血Th9细胞比例增高,且PLT≤30×109/L的患者Th9细胞比例高于PLT＞30× 109/L的患者(P＜0.05).ITP患者IL-9 mRNA及蛋白水平均增高,且PLT≤30×109/L的患者IL-9 mRNA及蛋白水平高于PLT＞30×109/L的患者(P＜0.05).与健康对照组相比,ITP患者Th9细胞发育的主要调控因子TGF-β、PU.1和IRF4水平增高(P＜0.05).ITP患者Th9细胞比例和IL-9蛋白水平均与PLT负相关(r=-0.428 1,P=0.032 8;r=-0.537 5,P=0.005 6).随访11例患者,发现经有效治疗后,Th9和IL-9与治疗前相比均呈下降趋势(P＜0.05).结论 Th9的异常活化可能参与了成人ITP疾病的发生与发展,这为进一步理解ITP的免疫学发病机制及选择免疫调节治疗潜在靶点提供了新的线索.     

舌鳞癌患者外周血Th17细胞及其细胞因子变化的临床意义

目的 探讨舌鳞癌患者外周血辅助性T细胞17(Th17)及其细胞因子变化的临床意义.方法 以该院2013年1月至2016年1月收治的66例舌鳞癌患者为研究对象,同期行健康体检的42例志愿者为对照.采集所有研究对象外周血,流式细胞术检测外周血Th17细胞比例,ELISA法检测白细胞介素(IL)-17、转化生长因子-β(TGF-β)和IL-6因子水平.结果 观察组和对照组外周血Th17细胞比例、IL-17、TGF-β、IL-6分别为(1.46±0.41)%、(0.31±0.12)%,(123.36±21.20)pg/mL、(20.76±8.95)pg/mL,(215.80±21.52)pg/mL、(26.90±10.41)pg/mL,(17.32±8.02)pg/mL、(5.85±1.49)pg/mL,差异有统计学意义(P<0.05).Th17细胞比例、IL-17、TGF-β和IL-6水平随着舌鳞癌临床分期的增加而升高(P<0.01).TGF-β与IL-17水平呈正相关(r=0.626,P=0.021),IL-6水平与Th17细胞比例和IL-17均呈正相关(r=0.626、0.597,P=0.021、0.034).结论 Th17细胞和IL-17表达的增加在舌鳞癌的发生、发展中发挥着重要作用,Th17细胞和IL-17因子可成为抗肿瘤治疗的重要靶点.     

类风湿关节炎患者外周血CD+4CD+25调节性T细胞和白介素17及转化生长因子β的表达研究

目的 观察类风湿关节炎(RA)患者外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例及血清白介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平变化及三者的相互关系.方法 选取33例RA患者,其中RA活动期患者22例,RA非活动期患者11例.另选取15例健康体检者作为对照组.RA患者及健康者外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例采用流式细胞仪(FCM)检测,血清IL-17、TGF-β水平采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测.结果 RA活动期患者外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例[(1.46±0.72)%]显著低于对照组[(2.72±2.07)%],血清IL-17[(384±106)pg/ml]、TGF-β[(23.8±10.0)pg/ml]水平显著高于RA非活动期患者[(245±110)pg/ml与(14.7±7.5)pg/ml]和对照组[(174±50)pg/ml与(9.8±4.0)pg/ml],差异均有统计学意义(P＜0.01).血清IL-17水平与外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例呈负相关(r=-0.375,P＜0.05),与血清TGF-β水平呈正相关(r=0.650,P＜0.01).结论 外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例及血清IL-17、TGF-β表达水平与RA疾病活动有关,且三者相互联系,相互影响,相互制约,共同参与RA的发生、发展.     

克雷伯菌肺炎患儿外周血中Th17细胞及白细胞介素的变化

目的观察Th17细胞及白细胞介素-17(IL-17)、IL-21和IL-22在克雷伯菌肺炎(KP)患儿外周血中的变化,探讨其在克雷伯菌肺炎临床诊治中的意义。方法采用流式细胞术(FACS)检测36例KP患儿与32例健康儿童外周血Th17淋巴细胞亚群的表达情况。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-17、IL-21和IL-22的水平。结果 KP组外周血Th17细胞占CD4+T细胞8.15%±3.46%,显著高于健康组5.37%±4.12%(P<0.01)。KP组血清IL-17水平高于健康组(23.13±6.27 pg/mL比12.53±6.64 pg/mL,P<0.05);IL-21和IL-22表达水平与健康组相比差异无显著性(P>0.05)。结论儿童KP感染者外周血Th17细胞比例明显升高,并伴有IL-17水平的升高,提示Th17细胞及其产生的细胞因子IL-17在克雷伯菌肺炎免疫失调过程中起着重要作用。     

梅毒血清固定患者外周血中Th17/Treg细胞、Foxp3和ROR-γt的表达水平及相关性研究

目的 通过检测梅毒血清固定患者外周血Th 17/Treg细胞比例及其特异性转录因子叉头状转录因子3(Foxp3)和维甲酸相关核孤儿受体(ROR-γt)的mRNA表达水平以及相关的细胞因子水平,探讨其与梅毒血清固定免疫机制的关系.方法 采集60例梅毒血清固定患者(观察组)和60例健康对照者(对照组)的外周血,分离单一核细胞(PBMCs),采用流式细胞仪检测Th17和Treg细胞比例;提取总RNA,采用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)法检测Foxp3和ROR-γt的mRNA表达水平;采用ELISA法测定PBMCs上清液中IL-17和转化生长因子-β(TGF-β)水平.结果 观察组外周血中的Treg细胞比例[(9.68±1.54)％]、Foxp3的mRNA[(2.85±0.16)％]和TGF-3[(275.15±20.89) pg/ml]的表达水平明显高于对照组[(5.96±1.27)％、(1.96±0.14)％、(156.33 ±41.49) pg/ml];观察组中的Thl7细胞比例[(1.13±0.31)％]、ROR-γt的mRNA[(0.98±0.16)％]和IL-17的表达水平[(12.21 ±4.73) pg/ml]明显低于对照组[(1.98±0.17)％、(1.85±0.15)％、(18.98±6.89) pg/ml],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 外周血中Treg和Th17细胞比例的变化、Foxp3和ROR-γtmRNA表达水平的异常与梅毒血清固定的免疫机制相关,梅毒血清固定患者可能存在Treg/Th17的失衡,且向Treg细胞漂移.     

CD4~+ IL-9~+ T细胞及CD4~+ EBI3~+ T细胞在系统性红斑狼疮患者外周血中的变化及意义

目的白细胞介素9及白细胞介素35可能在自身免疫性疾病的发生中发挥重要作用,然而到目前为止尚没有研究证实其与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者的关系。本研究通过检测SLE患者外周血单个核细胞(peripheralblood mononudear cell,PBMC)中CD4+IL-9+T细胞及CD4+EBI3+T细胞百分比,探讨其在SLE患者外周血中的变化及与疾病活动性的关系。方法采用流式细胞仪分别检测28例SLE患者及12名健康体检者外周血中CD4+IL-9+T细胞及CD4+EBI3+T细胞百分比,比较其在正常对照组及SLE患者中的差异及其与部分临床指标的相关性。3组间比较采用方差分析,与临床资料的相关分析采用非参数的Spearmen的相关分析。结果活动期SLE患者外周血中CD4+IL-9+T细胞百分比[(2.11±0.26)%]高于健康对照组[(0.28±0.05)%](P<0.01)和稳定组[(0.86±0.16)%](P<0.01),稳定组高于健康对照组(P<0.05);活动期患者外周血中CD4+EBI3+T细胞百分比[(0.19±0.05)%]低于健康对照组[(1.86±0.67)%](P<0.01)及SLE稳定组[(1.31±0.32)%](P<0.01),稳定组较健康对照组低(P<0.05)。CD4+IL-9+T细胞百分比与抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)、抗dsDNA、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、24h尿蛋白定量、SLE活动指数(SIE disease activity index,SLEDAI)呈正相关,与C3呈负相关;CD4+EBI3+T细胞百分比与抗dsDNA、ESR、24 h尿蛋白定量、SLEDAI呈负相关,与C3呈正相关。结论 SLE患者外周血CD4+IL-9+T细胞百分比增加,CD4+EBI3+T细胞百分比下降,与疾病活动性相关,提示CD4+IL-9+T细胞及CD4+EBI3+T细胞含量可作为反映SLE活动性的指标。     

Th9细胞对非小细胞肺癌患者CD_8~+T 细胞抗肿瘤活性的调控作用

目的:观察并分析Th9细胞及其分泌的白细胞介素-9(IL-9)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者CD_8~+T细胞抗肿瘤活性的影响。方法:选择32例NSCLC患者(肺癌组)和11例健康对照者(对照组)。分离肺癌组血浆、外周血单个核细胞(PBMCs)、肿瘤部位和非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液(BALF)及对照组血浆和PBMCs,检测Th9细胞比例、IL-9水平和转录因子PU.1 mRNA相对表达量。纯化肺癌组Th9细胞、CD_8~+T细胞和原代NSCLC细胞,使用重组IL-9刺激CD_8~+T细胞,观察细胞增殖和分泌穿孔素、颗粒酶B水平。建立Th9细胞、CD_8~+T细胞与原代NSCLC细胞的共培养细胞,观察IL-9对CD_8~+T细胞的细胞杀伤功能和非细胞杀伤功能的影响。组间比较采用t检验、配对t检验或Wilcoxon配对检验。结果:肺癌组外周血Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于对照组(均P<0.0001),肺癌组肿瘤部位分离的BALF中Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于非肿瘤部位(均P<0.0001)。IL-9刺激可增加肺癌组CD_8~+T细胞增殖和穿孔素、颗粒酶B分泌,IL-9刺激还可提升肺癌组CD_8~+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,主要表现为细胞死亡比率增加、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌升高。Th9细胞也可提升肺癌组CD_8~+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,抗IL-9中和抗体可抑制Th9细胞对CD_8~+T细胞功能的调控作用。结论:Th9细胞可能通过分泌IL-9在体外增强NSCLC患者CD_8~+T细胞的抗肿瘤功能。     

外周血Th9和IL-9水平在COPD发病中的作用

目的探讨外周血中Th9比例及IL-9水平在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病过程中的作用及临床意义。方法选择176例COPD患者为研究对象,按照病情不同分为COPD稳定期(n=73)和COPD急性加重期(AECOPD)(n=103),并取健康非吸烟人群85例和健康吸烟人群60例作为对照组。对四组患者进行肺功能测试,采用流式细胞术法(FCM)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其外周血Th9比例及IL-9水平。结果 COPD稳定期和AECOPD患者第1秒用力呼气容积(FEV_1)、最大呼气流量(PEF)、FEV_1/FVC及6 min步行试验(6MWT)值均显著低于健康非吸烟组及健康吸烟组,差异有统计学意义(P0.05),AECOPD患者上述指标水平均低于COPD稳定期患者,差异有统计学意义(P0.05)。AECOPD组患者外周血Th9比例及IL-9水平高于COPD稳定期及健康对照组,差异有统计学意义(P0.05),COPD稳定期Th9比例及IL-9水平与健康对照组比较也明显提高,差异有统计学意义(P0.05),健康非吸烟组与健康吸烟组间Th9比例及IL-9水平无明显差别。AECOPD患者IL-9水平与Th9比例呈轻度正相关(r=0.578,P0.05),COPD稳定期组两者不具有相关性。结论 Th9细胞可能通过分泌IL-9在COPD的疾病进展中发挥重要作用,IL-9可以作为COPD呼吸道炎症的检测指标之一。     

Sox9、siRNA表达载体的构建与鉴定

目的构建Sox9 siRNA表达载体，分析Sox9在软骨肉瘤中的作用机制。方法根据Kou Ⅰ，IkegawaS提椟的Sox9 mRNA序列，设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSilencer质粒中，并对重组质粒（命名为pSilencer／Sox9 siRNA）进行酶切及测序鉴定。结果双酶切证实Sox9 siRNA表达载体克隆构建成功，插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致。结论成功构建Sox9 siRNA表达载体。     

尿中MMP-9及MMP9-NGAL复合物对筛查乳腺疾病的临床意义

目的检测妇女尿中MMP-9及MMP-9／NGAL复合物,对乳腺疾病是否具有筛查作用。方法采用明胶酶底物电沫法,检测正常女性（60例）、乳腺良性疾病病人（41例）、乳腺癌病人（127例）尿中MMP-9及MMP-9／NGAL复合物的表达。结果乳腺疾病（乳腺良性疾病＋乳腺癌）尿中MMP-9及MMP-9／NGAL复合物,与正常女性比较差异非常显著（P〈0．01）。乳腺癌病人尿中MMP-9及MMP-9／NGAL复合物,与正常女性比较差异非常显著（P〈0．01）。乳腺良性疾病与正常女性比较差异有显著性（P〈0．05）。结论检测尿中MMP-9及MMP-9／NGAL复合物,对乳腺疾病的筛查具有重要意义。尤其对乳腺癌筛壹更具意义。     

Caspase-9与胃癌的相关性研究

目的：探讨Caspase-9在胃癌中的表达及其与凋亡指数的相关性。方法：应用免疫组化法检测胃癌中Caspase-9的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡。结果：Caspase-9在正常胃黏膜、早期胃癌、进展期胃癌阳性表达率分别是10％、36．36％、61．11％,三者差异有统计学意义（P〈0．01）;Caspase-9在高、中、低分化癌组织中的表达率分别为85．71％、52．17％、12．5％,其表达率在三者间差别有统计学意义（P〈0．01）;凋亡指数在正常胃黏膜、早期胃癌、进展期胃癌有差异,在高、中、低分化癌组织也有差异（P均〈0．0I）;Caspase-9、凋亡指数与临床分期无关。结论：胃癌细胞凋亡异常可能是胃癌的发病原因之一,Caspase-9、凋亡指数可作为临床判断胃癌恶性程度的一项指标。     

胃癌中CEA、CAl9-9和CAl25的检测及其临床意义

目的 :研究胃癌及癌前病变患者血清中CEA、CAl9- 9和CAl2 5的水平及其临床意义。方法 :用免疫荧光技术检测 4 0例胃癌患者、35例胃癌术后患者 ,2 0例癌前病变患者和 39例正常人血清中CEA、CAl9- 9和CAl2 5的水平。结果 :胃癌患者血清中CEA、CAl9- 9和CAl2 5的水平分别为 15.2 1土 2 .0 1、51.2 8土 3.2 2和 4 3.2 1土 5.71,阳性率分别为 52 .5%、4 0 %和 6 5% ,联合检测的阳性率为92 .5%。结论 :血清中CEA、CAl9- 9和CAl2 5的检测对胃癌诊断有临床意义 ,联合检测更能提高阳性率 ,且可作为胃癌术后疗效评价和预后判断的指标。     

基质金属蛋白酶9在颅咽管瘤中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）在颅咽管瘤中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法对切片进行染色,利用高清晰彩色医学图文分析系统对30例釉质上皮型颅咽管瘤和30例鳞型乳头型颅咽管瘤及5例正常脑组织标本中MMP-9的表达进行检测分析。结果 MMP-9在颅咽管瘤中呈高表达,釉质上皮型肿瘤表达强于鳞型乳头型,复发组高于原发组。同时,MMP-9也表达于肿瘤的血管内皮细胞,实体性肿瘤表达更明显。结论 MMP-9广泛表达于颅咽管瘤细胞和血管内皮细胞,可能参与了肿瘤的侵袭、复发和血管生成,在一定程度上可以作为评价颅咽管瘤侵袭性和预后的指标。     

基质金属蛋白酶-9与脑缺血损伤的关系研究进展

基质金属蛋白酶-9（MMP-9）能降解和重塑造细胞外基质，破坏血-脑屏障，导致脑损伤和脑水肿。了解MMP-9在脑缺血再灌注损伤中的作用、表达、影响其表达的因素及有关抗体的研究及应用，可以为脑梗死的早期诊断、预防和治疗开辟新的途径。     

MMP-9,CD34在甲状腺乳头状癌中的表达

基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinase,MMP)是一组锌离子依赖性内肽酶 ,能降解细胞外基质 (extracellma trix ,ECM )。细胞外基质在肿瘤的浸润和转移过程中起着关键性作用 ,而基质金属蛋白酶通过对ECM的降解促进肿瘤细胞对周围组织的浸润。MMP 9是基质金属蛋白酶家族中的重要成员 ,主要功能是降解Ⅳ型胶原 ,而Ⅳ型胶原又是基底膜的主要成分 ,因而MMP 9能降解基底膜 ,基底膜的降解既是肿瘤浸润和转移过程中的关键步骤 ,同时又是肿瘤血管形成的重要环节 ,对于肿瘤血管生成、肿瘤细胞的侵袭和转移均具有重要意义[1,2 ] 。本研究检测了甲状腺乳头状癌     

MMP-9在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨MMP-9在胃癌中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化技术SP法检测MMP-9基因蛋白在68例胃癌的表达情况，以20例非肿瘤性胃黏膜组织作对照。对随访14个月至13年的35例患者作了生存分析。结果68例胃癌组织MMP-9阳性表达率86．76％（59／158），对照组胃黏膜组织阳性表达率20．00％（4／20）。有淋巴结转移胃癌的MMP-9阳性表达率比无淋巴结转移者高，分别为95．65％、68．18％（P〈0．05）；侵及黏膜及黏膜下层、肌层和浆膜层胃癌的MMP-9阳性表达率分别为33．33％、91．30％、92．05％（P〈0．05）。MMP-9阳性者术后1、3、5、7、10年以上生存率分别为90．00％、56．67％、36．67％、10．00％和3．33％，MMP-9阴性患者术后1、3、5、7、10年以上生存率分别为100％、100％、80．00％、60．00％和40．00％。MMP-9阳性患者术后生存率比MMP-9阴性患者显著降低（P〈0.01）。结论MMP-9高表达促进肿瘤转移。MMP-9在胃癌的表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关；与患者年龄、性别无关。     

水通道蛋白9在培养肝细胞脂肪变性模型中的表达及意义

目的:探讨油酸诱导的脂肪变性肝细胞模型中水通道蛋白9(Aquaporin-9,AQP9)的表达及意义.方法:用油酸诱导正常肝细胞株L-02建立肝细胞脂肪变模型.采用油红O染色观察细胞内的脂滴,并检测细胞内甘油三脂,游离脂肪酸.甘油含量,RT-PCR法和Western blotting法分别检测AQP9 mRNA和蛋白的表达.结果:油红O染色显示24h开始出现脂肪变性,72h脂肪变性最重;模型组TG、FFA、甘油含量均在各时相点较对照组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01);模型组AQP9 mRNA的表达上调,于24h开始增高,72h表达最强,与对照组相比差异有统计学意义(P相似文献   

MMP-9在肺结核病变组织中的表达及其临床意义

目的探讨肺结核病变组织MMP-9表达特征,分析其表达与结核病发展的相关性。方法利用SP免疫组织化学方法,对57例肺结核病变组织和25例正常肺组织中MMP-9表达进行研究。结果MMP-9表达多呈胞浆表达。结核组MMP-9表达阳性PU值为8.966±2.91,显著高于对照组的7.657±1.585(P=0.011)。在结核组中,初治与复治之间,痰菌阳性与阴性之间,空洞与非空洞之间,不同病变范围之间MMP-9表达均差异无显著性(均P>0.05)。结论MMP-9高表达可能是肺结核病变组织区别于正常肺组织的重要特征之一,与结核病的发生相关,可作为结核病辅助诊断的标志物。