葛根素对两肾一夹高血压大鼠左心室Apelin／APJ基因表达的影响

目的:探讨葛根素对两肾一夹(2K1C)高血压大鼠左心室Apelin/Apj基因表达的影响。方法:清洁级雄性SD大鼠30只,随机均分为正常组、模型组和葛根素组。分别测定平均颈动脉压(mCAP)、左室舒张末期压(LVEDP)以及左心室压力变化最大速率(LV±dp/dtmax),左心重与体重比值(LVM/BW)来评价高血压模型。RT-PCR方法检测左心室组织apelin、APJ基因表达的变化。结果:①与正常组相比,模型组大鼠mCAP、LVEDP以及LVM/BW分别升高36.58%(P<0.05)、333.8%(P<0.01)和20.24%(P<0.01),而LV dp/dtmax则降低85.35%(P<0.05)。两组大鼠LV-dp/dtmax差异无统计学意义。②与模型组相比,葛根素组大鼠LVEDP、LVM/BW以及LV-dp/dtmax分别降低65.24%(P<0.05)、13.12%(P<0.05)和96.28%(P<0.01),LV dp/dtmax则升高179.18%(P<0.01)。两组大鼠mCAP差异无统计学意义。③左心室组织apelinmRNA、APJmRNA表达水平:模型组比对照组分别高77.66%和119.00%(均P<0.05),而葛根素组较模型组分别低27.40%和45.66%(均P<0.05)。结论:Apelin/APJ系统可能在葛根素逆转大鼠左室肥厚的发生发展过程中扮演重要的角色。     

葛根素对两肾一夹高血压大鼠Apelin及其受体的影响

目的：探讨葛根素对两肾一夹高血压大鼠Apelin及其受体变化的影响。方法：清洁级雄性SD大鼠30只,随机均分为正常组、模型组和葛根素组。分别测定平均颈动脉压(mCAP)、左室舒张末期压（LVEDP）以及左心重与体重比值(LVM／BW)来评价高血压模型。放免法测定血浆、左心室组织匀浆Apelin水平,免疫组化和RT-PCR分别检测左心室组织Apelin, APJ表达的变化。结果： 与正常组相比,模型组大鼠mCAP、LVEDP以及LVM/BW分别升高36.58％ (P<0.05), 333.8％(P<0.01),20.24%(P<0.01)。与模型组相比,葛根素组大鼠LVEDP, LVM/BW分别降低65.24%(P<0.05), 13.12%(P<0.05),2组大鼠mCAP差异无统计学意义。放免结果：模型组血浆和左心室匀浆Apelin-36浓度较正常组高18.56%(P<0.05), 207.38％(P<0.05),而葛根素组较模型组降低24.21%(P<0.05), 49.40%(P<0.05)。RT-PCR结果：左心室组织Apelin mRNA, APJ mRNA表达水平,模型组比正常组分别高77.66％(P<0.05), 119.00％(P<0.05);而葛根素组较模型组降低27.40%(P<0.01), 45.66%(P<0.01)。免疫组化染色结果：左心室组织Apelin和APJ蛋白表达水平,模型组较正常组分别高129.51%, 154.1％(P<0.01);而葛根素组较模型组降低65.36%(P<0.01), 62.87%(P<0.01)。结论： 葛根素对肾性高血压左室肥厚具有保护作用,该作用可能是通过调节Apelin及其受体表达实现的。     

葛根素联用氯沙坦对肾性高血压大鼠心肌MMP-1/TIMP-1比值的影响

目的观察葛根素联用氯沙坦对肾性高血压大鼠心肌MMP-1/TIMP-1 mRNA及蛋白表达比值的影响。方法 SD大鼠65只,雄性,随机抽取8只为假手术组,其余采用两肾一夹法造成肾性高血压大鼠模型。造模成功的大鼠随机分成葛根素高、中、低剂量组,氯沙坦组,联用组以及模型组(n=8)。连续给药8周后计算左心室质量指数(LVWI),Masson染色观察胶原纤维改变,并计算心肌胶原容积分数;测心肌羟脯氨酸(HYP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平,RT-PCR及Western blot测心肌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA及蛋白表达。结果与模型组相比,各用药组心肌胶原容积分数、HYP水平降低(P<0.01或P<0.05),联用组效果最好(P<0.05);葛根素高、中剂量组和联用组心肌AngⅡ水平显著降低(P<0.01或P<0.05),联用组效果最好(P<0.05);除葛根素低剂量组外其他用药LVWI显著降低(P<0.01或P<0.05),MMP-1与TIMP-1 mRNA及蛋白表达的比值显著降低(P<0.05),联用组效果最好(P<0.05)。结论葛根素联用氯沙坦能显著下调心肌局部MMP-1/TIMP-1 mRNA及蛋白比值,改善肾性高血压大鼠心肌纤维化。     

葛根素对低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室Apelin/APJ系统的影响

目的 探讨葛根素防治慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室肥大的效应是否与新的小分子活性肽Apelin及其受体(APJ)有关.方法 清洁级SD雄性大鼠30只,随机分为对照组、低氧高二氧化碳模型组和葛根素组.放免法测定血浆与右心室组织匀浆的Apelin-36水平,RT-PCR检测右心室组织Apelin与APJ mRNA表达.结果 右心室与左心室加室间隔的质量比[RV/(LV s)]:模型组明显高于对照组(P<0.01),而葛根素组明显低于模型组(P<0.01);平均肺动脉压(mPAP):模型组明显高于对照组(P<0.01),而葛根素组明显低于模型组(P<0.05);平均颈动脉压(mCAP)各组间比较无显著统计学意义(P>0.05).血浆Apelin-36水平:模型组明显高于对照组(P<0.01),葛根素组又高于模型组(P<0.05).右心室肌匀浆Apelin-36水平:模型组明显高于对照组(P<0.05),葛根素组又明显比模型组高(P<0.01).右心室肌Apelin mRNA水平:模型组明显低于对照组(P<0.05),而葛根素组显著高于模型组(P<0.01).右心室肌APJ mRNA:模型组低于对照组(P<0.05),而葛根素组高于模型组(P<0.05).结论 葛根素防治低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室肥大的机制可能部分与调节Apelin/APJ系统有关.     

葛根素对肾性高血压大鼠的降压作用及对肾组织ANGⅡ的影响

目的:观察葛根素对两肾一夹大鼠血压及肾组织ANGⅡ水平的影响,探讨葛根素抗肾间质纤维化机制。方法:Sprague-Dawley大鼠70只,雌雄各半,采用两肾一夹方法(2K1C)制成肾性高血压动物模型,腹腔注射葛根素200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg,另设假手术组,每组8只大鼠。给药6周,每两周测一次血压,给药6周后处死取双肾,放免法测肾脏组织匀浆中ANGⅡ含量,将肾脏切片做HE染色观察纤维化程度。结果:葛根素均有降血压作用,且随剂量升高血压下降越来越明显。随着ANGⅡ浓度增加肾脏纤维化程度加剧。葛根素高、中剂量均能显著降低肾脏组织中ANGⅡ含量(P0.01或P0.05),低剂量葛根素则影响不显著(P0.05);葛根素各组对肾脏均有抗纤维化作用(P0.01)。结论:葛根素具有降压作用,对肾脏有抗纤维化作用,机制可能与葛根素减少肾脏局部ANGⅡ含量及降压作用有关。     

葛根素对两肾一夹高血压大鼠apelin及其受体的影响

目的:探讨葛根素对两肾一夹高血压大鼠apelin及其受体变化的影响.方法:清洁级雄性SD大鼠30只,随机均分为正常组、模型组和葛根素组.分别测定平均颈动脉压(mCAP)、左室舒张末期压(LVEDP)以及左心重与体重比值(LVM/BW)来评价高血压模型.放免法测定血浆、左心室组织匀浆apelin水平,免疫组化和RT-PCR分别检测左心室组织apelin,APJ表达的变化.结果:与正常组相比,模型组大鼠mCAP,LVEDP以及LVM/BW分别升高36.58%(P＜0.05),333.8%(P＜0.01),20.24%(P＜0.01).与模型组相比,葛根素组大鼠LVEDP,LVM/BW分别降低65.24%(P＜0.05),13.12%(P＜0.05),2组大鼠mCAP差异无统计学意义.放免结果:模型组血浆和左心室匀浆apelin-36浓度较正常组高18.56%(P＜0.05),207.38%(P＜0.05),而葛根素组较模型组降低24.21%(P＜0.05),49.40%(P＜0.05).RT-PCR结果:左心室组织apelin mRNA,APJ mRNA表达水平,模型组比正常组分别高77.66%(P＜0.05),119.00%(P＜0.05);而葛根素组较模型组降低27.40%(P＜0.01),45.66%(P＜0.01).免疫组化染色结果:左心室组织apelin和APJ蛋白表达水平,模型组较正常组分别高129.51%,154.1%(P＜0.01);而葛根素组较模型组降低65.36%(P＜0.01),62.87%(P＜0.01).结论:葛根素对肾陛高血压左室肥厚具有保护作用,该作用可能是通过调节apelin及其受体表达实现的.     

代谢综合征大鼠主动脉Apelin及其受体的表达及意义

目的 观察代谢综合征（MS）大鼠主动脉Apelin及其受体（APJ）的表达变化。方法 16只雄性SD大鼠按随机数字表法均分为对照组和MS组,每组8只。MS组采用高果糖饲料（60%）喂养,对照组采用常规饲料喂养,喂养周期为10周。采用Masson染色法检测血管胶原沉积情况,酶联免疫吸附法检测大鼠血清和主动脉组织Apelin含量,免疫组化法检测大鼠主动脉组织APJ的表达。结果 高果糖饮食可成功诱导高血压、高三酰甘油（TG）血症和高血糖等特征的代谢综合征模型,MS组大鼠主动脉胶原沉积明显,血清Apelin浓度和主动脉组织Apelin/APJ表达较对照组明显下调（P<0.05）。结论 MS大鼠主动脉发生重构,Apelin/APJ表达下调。提示Apelin可能为新的血管保护因子。     

肾性高血压大鼠模型与自发性高血压大鼠的比较

目的：探讨肾性高血压大鼠模型与自发性高血压大鼠（SHR）之间的异同,为临床治疗继发性高血压和原发性高血压提供一定实验依据。方法：采用左肾动脉结扎的方法复制肾型高血压大鼠模型,筛选造模成功的大鼠6只设为模型组,随机选取SHR大鼠6只,平衡血压2周后设为SHR组,另以6只正常sD大鼠作为空白组。采用尾动脉无创测压法检测血压,每周1次,连续4周后,心脏超声检测心脏指标,荧光实时定量PCR技术检测肝脏血管紧张素转换酶（ACE）和内皮细胞（ET）mRNA的表达水平。结果：（1）肾性高血压大鼠造模成功;（2）与空白组比较,模型组的血压显著升高（P〈0．01）;与模型组比较,SHR大鼠血压明显升高（P〈0．01）。（3）通过检测各组大鼠心脏超声发现,肾性高血压大鼠及SHR大鼠LVDd、LVDs、LVPWd、LVPWs均增大,EF显著降低（P〈0．01）。且SHR大鼠LVDd、LVDs、LVPWd、LVPWs增大较肾性高血压大鼠更为明显（P〈0．01）,EF虽无统计学意义,但仍有降低趋势。（4）通过检测肝脏ET、ACEmRNA表达量发现,与空白组比较,模型组ACE、ETmRNA的表达量均明显升高（P〈0．01）;与模型组比较,SHR组ACE、ETmRNA的表达量明显升高（P〈0．01或P〈0．05）。结论：SHR大鼠较肾性高血压大鼠模型血压高、心功能低、缩血管作用明显。     

葛根素对自发性高血压大鼠肾血管核因子-κB表达的影响

目的探讨葛根素对自发性高血压大鼠核因子-kappaB（NF-κB）表达的影响。方法将24只自发性高血压大鼠随机分为对照组、葛根素组（腹腔注射葛根素）和贝那普利组（灌胃贝那普利）。免疫组化染色法观察各组肾血管NF-κB的表达，放免法检测各组大鼠血清血管紧张素Ⅱ；光镜下观察各组大鼠肾动脉狭窄的程度。结果NF-κB在自发性高血压大鼠肾血管均有表达；与对照组比较，葛根素组和贝那普利组NF-κB表达降低，血管紧张素Ⅱ下降，肾动脉狭窄程度明显减轻。结论葛根素可能通过抑制血管紧张素Ⅱ引起的NF-κB活化以下调NF-κB表达，从而减轻肾动脉狭窄程度。     

芝麻素对肾性高血压大鼠重要脏器的抗氧化作用

目的探讨芝麻素对肾性高血压大鼠靶器官的抗氧化作用.方法复制两肾一夹型肾性高血压大鼠(RHR)模型,给药6w后,测定大鼠心、肝、脑、肾靶器官组织匀浆超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)含量.结果芝麻素高(100mg/kg·d)、中(33mg/kg*d)剂量可明显降低各器官组织匀浆的ROS、MDA含量,升高SOD的活力,且具有剂量依赖关系.结论芝麻素对肾性高血压大鼠重要器官具有保护作用,其机制可能与调节氧自由基代谢,提高抗氧化能力有关.     

葛根素对缺氧缺血性脑病新生大鼠脑细胞凋亡及Bim蛋白表达的影响

目的观察葛根素对缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠脑细胞凋亡及Bim蛋白表达的影响。方法7日龄Wistar大鼠随机分成假手术组、HIE模型组、葛根素治疗组,每组22只,参照Rice法制作HIE模型,应用Western-blot和流式细胞术在不同时间点分别检测大脑皮质Bim蛋白的表达和细胞凋亡情况。结果HIE模型组和葛根素治疗组脑细胞Bim蛋白表达灰度值在12 h分别为137.00±5.00和78.20±4.38,24 h分别为164.40±5.50和90.40±3.36,均显著高于假手术组(29.60±3.20和30.00±3.74),葛根素治疗组Bim蛋白表达低于HIE模型组。HIE模型组和葛根素治疗组脑皮质早期凋亡细胞比例在12 h分别为(16.2±1.86)%和(8.54±1.91)%,24 h分别为(20.03±2.02)%和(13.36±1.64)%,均显著高于假手术组((0.76±0.09)%和(1.34±0.24)%),葛根素治疗组细胞凋亡低于HIE模型组。结论葛根素能抑制HIE新生大鼠脑细胞凋亡启动因子Bim蛋白表达,具有抗脑细胞凋亡作用。     

济脉通与硝苯地平合用对SHR血压的影响及其抗高血压机制的初步研究

目的:研究济脉通与硝苯地平合用对SHR血压的影响,并探讨其降压作用机制,阐述其联合用药的特点或优势。方法:采用自发性高血压大鼠(SHR)模型,设立模型组、济脉通组(450 mg.kg-1)、硝苯地平组(5 mg.kg-1)、济脉通与硝苯地平联合用药组(300 mg.kg-1+0.5 mg.kg-1),连续给药8周后,测定血压、心率、氧化、血脂及激素指标。结果:与模型组比较,3个给药组均有降低SHR收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)的作用;硝苯地平组使心率(HR)加快(P0.05),济脉通组和联合用药组对HR则无显著性影响。联合用药组明显降低尿素(URE)、丙二醛(MDA)、血浆内皮素(ET)及血浆血管紧张素II(AngⅡ)含量(P0.05,P0.05,P0.05,P0.01),明显提高一氧化氮(NO)、环磷酸腺苷(CAMP)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)含量(P0.05),是其可能的降血压机制。结论:济脉通与硝苯地平联合用药对自发性高血压大鼠有明显的协同降压作用,研究结果表明中西医联合用药对高血压病的治疗具有优势。     

天麻素和葛根素在大鼠体内联合应用的药动学研究

建立同时测定天麻素及其代谢产物天麻苷元、葛根素和内标对羟基苯乙醇(Tyr)4种成分在大鼠血浆中药物浓度的HPLC方法,并应用该法研究单独或合并静脉注射及灌胃给药天麻素、葛根素后,三者在大鼠体内药代动力学过程及相互影响。以Tyr为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,上清液用N2吹干,残渣用乙腈-0.05%磷酸(20∶80)复溶后,以乙腈-0.05%磷酸水为流动相梯度洗脱,用Agilent ZORBAX SB-Aq C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离,在221 nm处测定天麻素、天麻苷元和内标,250 nm处测定葛根素。单独或合并给药天麻素、葛根素后,检测大鼠血浆中三者浓度,用Win Nonlin 5.2药动学软件和SPSS 17.0软件分别计算各给药组药动学参数并进行统计分析,比较单独或合并给药后天麻素、葛根素药动学过程。天麻素、天麻苷元和葛根素低、中、高浓度及内标对羟基苯乙醇的绝对回收率均>77.20%;天麻素、天麻苷元、葛根素分别在0.10~101,0.03~7.58,0.05~5.98 mg·L-1具有良好的线性(r>0.999 6,n=5),三者定量下限分别为0.10,0.03,0.05 mg·L-1,日内及日间精密度均<12%,准确度85.61%~110.3%,且测定物在整个分析过程中稳定。结果表明,天麻素和葛根素联合给药后,大鼠体内主要药代动力学参数(AUC,Cmax,T1/2,Tmax,MRT)与单独给药后有显著性差异。无论是灌胃还是静脉注射,清除率(CL)降低,平均滞留时间(MRT)延长;相对生物利用度均有提高,尤以灌胃组效果显著,其中灌胃天麻素合用组为单用组的1.5倍,灌胃葛根素合用组为单用组的10.7倍。天麻素和葛根素合用后能相互促进吸收,降低消除速率,增加体内滞留时间。该法可同时测定大鼠体内天麻素、天麻苷元和葛根素血药浓度和药动学,且方法准确,操作简便。     

辛伐他汀对高血压大鼠心肌肥厚及细胞外信号调节激酶的影响

 目的探讨辛伐他汀对自发性高血压大鼠(SHR)心肌肥厚及细胞外信号调节激酶(ERK)的影响。方法将14只14周龄雄性SHR随机分成2组,每组7只;其中辛伐他汀组40mg·kg^-1·d^-1灌胃;对照组灌胃载体(0.5%羧甲基纤维素钠);共10 周。并以雄性同周龄Wistar Kyoto大鼠(WKY)作对照比较。以左心室质量与体重的比值反映心肌肥厚的程度;用Western-blot 方法检测大鼠心肌总ERK(t-ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)以及丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)水平。结果SHR辛伐他汀组心肌肥厚指数明显低于SHR对照组(P<0.05)。3组大鼠t-ERK水平无显著性差异(P>0.05);辛伐他汀组心肌p-ERK和p-ERK/t-ERK比值明显低于SHR对照组(P<0.01),与WKY组接近;辛伐他汀组心肌MKP-1水平低于SHR对照组(P<0.05), 与WKY组无显著差异。结论辛伐他汀能抑制心肌肥厚,其作用机制可能与降低ERK活性有关。     

地龙耐热蛋白对自发性高血压大鼠心肌血管紧张素Ⅱ水平及血管紧张素Ⅱ-1型受体表达的影响

目的探讨地龙耐热蛋白对自发性高血压大鼠(SHR)心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平及AngⅡ-1型(AT1)受体表达的影响。方法采用放射免疫法测定血浆和心肌AngⅡ水平。采用免疫荧光法测定心肌AT1受体表达水平。结果模型组血浆和心肌AngⅡ水平均显著高于对照组(P<0.01),地龙耐热蛋白高剂量组、低剂量组血浆和心肌AngⅡ水平均低于模型组(P<0.05)。对照组与模型组比较,心肌细胞膜和胞浆AT1受体表达减少;地龙耐热蛋白低剂量组和高剂量组与模型组比较,心肌细胞膜和胞浆AT1受体表达均显著减少。结论地龙耐热蛋白可降低血浆、心肌AngⅡ水平,下调心肌AT1受体的表达,且其下调机制可能与降低心肌AngⅡ水平有关。     

芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠心脏炎性损伤的协同保护作用

目的:观察芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rats,SHR)心肌炎性损伤的协同保护作用,为高血压病心肌炎性损伤的临床防治提供实验依据。方法:以8只正常血压大鼠(normal blood pressure rat,WKY)为空白组A,72只10周龄SHR大鼠随机分为模型组B,苯那普利(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))组C,芒果苷单用(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组D,葛根素单用组E(20 mg·kg~(-1)·d~(-1)),芒果苷(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))组F,芒果苷(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组G,芒果苷(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))组H,芒果苷(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组I,芒果苷(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))+葛根素片(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))组J。每天10 m L·kg-1连续灌胃,灌胃给药2个月后停药,取材前禁食12 h。用显微镜观察大鼠心肌组织病理形态结构,免疫组化法检测大鼠心肌组织白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达,酶联免疫法检测SHR心肌组织IL-6,IL-10,TNF-α水平。结果:各组大鼠心脏组织均未见明显病理形态学改变;免疫组化和酶联免疫结果显示,与模型组比较,各组给药大鼠心肌组织IL-6,IL-10,TNF-α含量均有不同程度下降(P0.05,P0.01)。结论:芒果苷联合葛根素对自发性高血压大鼠心脏组织病理形态学无显著影响;但可下调大鼠心脏组织异常升高的炎症因子IL-6,IL-10,TNF-α水平,具有一定的协同增效作用。