铁皮石斛研究进展

综述了20余年来国内有关铁皮石斛的组织培养、化学成分、药理作用、菌根真菌等研究工作，并对其产业化开发的有关问题作了初步的探讨。     

铁皮石斛组织培养研究进展

铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex lindl）又名黑节草、铁皮兰,为多年生附生型草本植物,属国家2级保护的名贵濒危药材[1],《神农本草经》列为上品[2],在《本草纲目》中也被收录。现代药理研究表明,石斛具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的功效[3]。由于受特殊的生物学及生态学特性限制,其自然繁殖力极低、     

铁皮石斛组织培养研究进展

目的：探讨铁皮石斛种子无菌萌发的最佳条件、原球茎诱导试管苗的最佳配方、不同器官诱导芽分化的最佳条件、试管苗生根的最佳配方。方法：收集、整理、归纳近20年来国内外有关铁皮石斛组织培养的文献资料。结果：将文献中铁皮石斛种子无菌萌发的情况、原球茎诱导试管苗的情况、不同器官诱导芽分化的情况及试管苗生根的情况分别列表进行对照比较。结论：各种外植体都可诱导不定芽的分化,以MS培养基使用量为普遍,试管苗生杭率达到96.67%。     

铁皮石斛栽培技术的研究概况

综述了近年来国内关于铁皮石斛栽培技术的研究概况。     

铁皮石斛F1代多糖和醇溶性浸出物变异规律研究

采用苯酚-浓硫酸法和醇溶性浸出物热浸法测定11个铁皮石斛F₁代家系多糖和浸出物的含量,结果表明5月与2月采集的样品多糖质量分数分别为32.89%~43.07%,25.77%~35.25%,醇溶性浸出物质量分数分别为2.81%~4.85%,7.90%~17.40%,家系间存在显著差异;多糖含量低的亲本通过与多糖含量高的亲本杂交,能显著提高子代多糖含量,杂交优势明显,杂交育种是提高铁皮石斛多糖含量而进行品种选育的有效途径。采收时间显著影响铁皮石斛多糖和浸出物含量,所有家系5月采样多糖含量均高于2月,浸出物含量则相反,但不同家系变化幅度差别很大,各个家系有其自身规律,研究铁皮石斛优良家系(品种)多糖和浸出物积累规律,确定其最佳采收时间,对充分发挥优良品种作用、提高药效具有重要意义。     

铁皮石斛人工栽培研究概况

查阅近10年关于铁皮石斛种植的相关文献,就铁皮石斛人工栽培的条件与方法进行了阐述。重点讨论了其种苗的组织培养方式,为铁皮石斛的人工栽培提供一定的理论依据。     

铁皮石斛F1代田间试验与优良家系选择

基于随机区组试验设计,对14个铁皮石斛F₁代家系进行遗传测定,结果表明不同家系间农艺性状和产量均存在显著差异,杂交优势明显;筛选出6a×2b,9×66,78×69共3个优良家系在产量、农艺性状与产品专用化等方面具有明显的优势。农艺性状与生物产量、经济产量相关性分析表明,株高、茎粗、茎节数量、节间距、叶片数量、叶片长度、叶片宽度等农艺性状与生物产量、经济产量存在显著相关性,其中茎粗、叶片数量和叶片长度对生物产量、经济产量影响最为显著,并能建立最优线性回归模型;萌蘖数少于4.5株/丛时,生物产量、经济产量均会随萌蘖数的增加而增加,但大于4.5株/丛时,萌蘖数对生物产量、经济产量影响不大。二年生与一年生主要农艺性状比较,萌蘖数、茎粗和叶形指数基本稳定,可用于早期 选择。     

铁皮石斛人工繁殖和栽培研究进展

石斛是兰科石斛属药用植物的总称,为我国名贵的传统中药材[1].石斛最早收载在<神农本草经>,有"石斛,一名林兰.味甘,平,无毒.主伤中,除痹,下气,补五藏虚劳赢瘦,强阴.久服厚肠胃,轻身延年."[2].     

铁皮石斛的研究与应用

对铁皮石斛的组织培养、栽培技术及其综合利用进行综述,铁皮石斛类含有大量有益于人类健康的活性成分,在食疗、临床应用、养生保健、观赏及美容护肤领域有着广泛的应用前景。     

铁皮石斛快繁及多糖含量测定

目的测定铁皮石斛组培苗的多糖含量。方法对铁皮石斛进行组织培养,用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛组培苗的多糖含量。结果铁皮石斛组培苗的多糖含量为25.09%。结论铁皮石斛组培苗的多糖含量达到2010版《中华人民共和国药典》的规定标准,具有一定的药用价值。     

铁皮石斛无性系繁育培养基专用性的研究

以浙江雁荡山×云南广南种质的杂交组合茎段为外植体,筛选出1/2MS +IBA1.0 mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1腋芽诱导培养基与1/2MS+IBA1.5 mg·L-1+6-BA0.5 mg·L-1芽增殖培养基,在浙江、云南、广西、湖南等159个铁皮石斛野生与人工种质中应用,腋芽诱导率达94.3％,具有较好的通用性;芽增殖培养时,不同种质分化出单芽、丛芽、原球茎3种增殖途径,增殖效果存在显著差异.研究结果表明,不同种质铁皮石斛的增殖对培养基有专用性需求,开发铁皮石斛无性系繁育专用培养基具有紧迫性和重要的应用价值.     

铁皮石斛中基本氨基酸含量变异规律

目的:了解铁皮石斛种质、生理年龄对氨基酸含量的影响,为铁皮石斛药材质量评价与优质药材培育提供依据.方法:采集浙江人工栽培骨干基地一至三年生铁皮石斛11个种质33个样品,经盐酸水解后采用氨基酸分析仪测定基本氨基酸含量.结果:铁皮石斛中7种人体必需氨基酸的平均质量分数为0.28～2.96 mg·g-1,其他9种基本氨基酸的平均质量分数为0.53～4.20mg·g-1;种质对多种氨基酸的积累存在极显著或显著影响,生理年龄对氨基酸的积累也有显著影响,氨基酸含量随着生理年龄增加而增加.结论:铁皮石斛含有丰富的氨基酸,通过品种选育、延长采收期可以增加人体必需氨基酸和其他基本氨基酸的含量.     

铁皮石斛产业发展存在的问题与对策

近年来,随着铁皮石斛产业的不断发展,以产、学、研相结合的产业联盟逐渐形成,在产业急剧扩张的背后,也暴露出很多问题如产业基础研究薄弱、开发产品品种单一,深入研究不足、质量难以保障,产业泡沫逐渐形成,为防止铁皮石斛重蹈“普洱茶”的厄运,笔者认为企业及科研院所应加强基础研究及创新应用、强化政府引导,规范市场运作,保障铁皮石斛质量,从而使铁皮石斛产业健康、可持续发展.     

铁皮石斛中11种金属元素含量的研究

目的:全面了解不同种质、采收年龄以及市场销售的石斛类药材中11种金属含量与变异规律,为铁皮石斛药材质量评价与优质药材培育提供依据.方法:采集浙江人工栽培骨干基地一至三年生铁皮石斛11个种质32个样品,购买市场销售的石斛类药材11个样品;经湿法消化后采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)、原子吸收光谱法(AAS)测定11种金属元素含量.结果:铁皮石斛中钾、钙、镁、锰、锌、铬、铜平均质量分数分别为1205.23,766.82,158.25,31.06,4.28,8.28,0.97mg·kg(-1),砷、汞、铅、镉4种重金属元素含量除1个样品镉元素超过限量指标0.07 mg·kg(-1)外,均在规定限度范围内;种质与生理年龄对金属元素的积累存在显著的影响.结论:铁皮石斛含有丰富的人体必需金属元素,浙江产的铁皮石斛与市场销售的石斛类药材重金属限量指标整体上是安全的;通过品种选育可望增加人体必需的金属元素含量,降低有害金属元素含量;生理年龄对金属元素的影响与各种元素承担的生理生化作用有关.     

高效液相色谱法测定铁皮石斛中柚皮素的含量

目的:探寻铁皮石斛中指标性成分,建立指标性成分的含量测定方法,并测定浙江省不同种植基地、不同生长年限铁皮石斛中柚皮素的含量.方法:采用高效液相色谱法测定柚皮素的含量.色谱柱为XB C18(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-0.2％磷酸水溶液为流动相,检测波长为290 nm.结果:柚皮素在0.026～0.208μg线性关系良好(r=1);平均加样同收率为96.3％(RSD 1.8％).同一生长年限不同种植基地铁皮石斛中柚皮素含量波动范围较大;并且同一种植基地铁皮石斛随着生长年限的增加柚皮素的含量先增加后降低,三年生铁皮石斛中柚皮素的含量最高.结论:该方法准确、可靠,可用于铁皮石斛药材及相关产品中柚皮素的含量测定,为完善铁皮石斛药材质量标准提供参考.     

铁皮石斛总生物碱含量变异规律

目的:全面了解不同种质、不同采收年限铁皮石斛药材总生物碱含量及其变异规律,为铁皮石斛真伪鉴别与优质药材培育提供依据。方法:采集铁皮石斛人工栽培骨干基地一至三年生铁皮石斛17个种质41个样品,以及市售不同价位枫斗药材11个样品;采用酸性染料比色法测定总生物碱含量。结果:人工栽培的铁皮石斛与市场购买的铁皮枫斗药材总生物碱在0.019 0%～0.043 0%;浙江省11个铁皮石斛种质一年生、二年生、三年生样品平均总生物碱为0.025 3%,0.027 0%,0.032 6%,云南产一年生铁皮石斛平均总生物碱为0.034 3%。结论:不同种质、年龄的铁皮石斛总生物碱含量差异很大,并且总生物碱含量随着生长年限的增加而增加,云南产铁皮石斛总生物碱明显高于浙江产铁皮石斛,但正宗的铁皮石斛总生物碱含量具有明显限量范围,总生物碱含量明显偏离限量范围的样品可以基本确定为非铁皮石斛,总生物碱含量在此范围的样品必须结合多糖含量与其他活性化学组分才能真正辨别铁皮石斛药材的真伪与优劣。     

铁皮石斛HPLC特征图谱研究

目的:建立铁皮石斛HPLC特征图谱,为铁皮石斛鉴别提供可靠方法.方法:采用Ultimate XB C18(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-0.2％磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长280nm,柱温30℃.运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(国家药典委员会)进行分析.结果:以柚皮素为参照峰,初步构建了由6个特征峰组成的铁皮石斛乙醚部位HPLC特征图谱.结论:该法建立的特征图谱可为铁皮石斛鉴别提供参考.     

一种铁皮石斛立体栽培方法的研究

为了充分利用铁皮石斛设施栽培空间,揭示铁皮石斛立体栽培产量与功效成分的变化规律,提高产品质量、产量与效益。通过田间试验,研究铁皮石斛立体栽培的农艺性状、产量的变化规律;用苯酚-浓硫酸法与2010年版《中国药典》附录ⅩA测定多糖与浸出物含量。结果表明,铁皮石斛立体栽培土地利用率提高2.74倍,茎、叶、总鲜重与干重均高于地栽,多糖含量均值与地栽没有显著差异,但浸出物含量、多糖与浸出物总量明显高于地栽,特别是顶端2层多糖含量、多糖与浸出物总量明显高于其他层次与地栽。立体栽培能有效地提高空间利用率、单位面积产量,多糖与浸出物总量明显高于地栽;立体栽培层间铁皮石斛多糖存在极显著差异,可能与光照因子相关。