肾上腺脑白质营养不良蛋白慢病毒载体的构建和表达

目的 构建并表达野生型及突变型肾上腺脑白质营养不良蛋白（adrenoleukodystrophy protein,ALDP）的慢病毒载体,探讨ABCD1基因突变对ALDP结构和功能的影响。方法 选择ABCD1基因的H283R和P534R两个突变,首先采用生物信息学方法,进行突变致病性及突变体结构稳定性预测;再利用分子克隆技术,将ABCD1基因克隆到pLEX-MCS慢病毒载体,构建野生型慢病毒载体：pLEX-ABCD1,定点诱变构建2个突变型重组载体：pLEX-ABCD1-H283R和pLEX-ABCD1-P534R,并与其他包装载体共转染293T细胞包装病毒。收集病毒并感染宿主细胞,RT-PCR检测慢病毒感染细胞中野生型与突变型ABCD1 mRNA表达,免疫荧光及蛋白质免疫印迹法分析野生型与突变型ALDP亚细胞定位及表达。结果 生物信息学预测显示H283R和P534R为ALD致病性突变;RT-PCR结果显示慢病毒感染细胞中野生型与突变型ABCD1 mRNA均过表达;免疫荧光及蛋白质免疫印迹结果表明,H283R和P534R突变可能导致ALDP突变体表达量下降,但未观察到ALDP定位改变。结论 成功构建ABCD1基因慢病毒表达载体,并评估了H283R和P534R突变对ALDP表达及亚细胞定位的影响,为深入研究ALD发病机制提供了实验依据。     

肾上腺脑白质营养不良的临床表现及家系调查

肾上腺脑白质营养不良（ａｄｒｅｎｏｌｅｕｋｏｄｙｓｔｒｏｐｈｉｅｓ,ＡＬＤ）是一种罕见的隐性遗传性疾病,病变主要累及脑白质及肾上腺皮质,并呈进行性加重,临床表现兼有神经系统和肾上腺受累的症状。１９９６年我科收治１例ＡＬＤ病人,现将临床表现及家系调查介...     

X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中排除假基因干扰的一个新方法

目的:探讨X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中排除假基因干扰的新方法。方法:应用长链RT-PCR技术扩增3个X-连锁肾上腺脑白质营养不良患者的ABCD1基因编码区全长,再分4个片段进行二次PCR,并对PCR产物直接测序;应用巢式PCR对ABCD1基因相应区域进行扩增,其中第一轮PCR产物覆盖ABCD1基因从外显子6至3′非编码区的一个大片段,并对PCR产物进行测序,分析患者的基因组DNA,进一步确证其ABCD1基因突变。结果:在3个XALD患者的ABCD1基因上,存在3个不同的碱基改变(2235C>T,2065C>T和2190A>T),分别造成2个错义突变(R617C和P560L)和1个无义突变(K602X)。结论:应用巢式PCR能快速、有效地排除X-ALD分子诊断中ABCD1假基因的干扰。     

肾上腺脑白质营养不良7例报告

肾上腺脑白质营养不良７例报告刘圣珍李晨＊（青岛市市南区人民医院，＊青岛医学院神经科，青岛２６６０００）关键词遗传性疾病；肾上腺脑白质营养不良；计算机断层扫描肾上腺脑白质营养不良（ＡｄｒｅｎａｌＬｅｕｃｏｄｙｓ－ｔｒｏｐｈｙＡＬＤ）过去认为是一种罕见的...     

儿童脑型X-连锁肾上腺脑白质营养不良的临床特点及基因突变特征

目的 探讨儿童脑型X-连锁肾上腺脑白质营养不良的临床特点及基因突变特征.方法 回顾性分析2015年1月至2020年6月就诊于郑州大学第一附属医院的11例脑型X-连锁肾上腺脑白质营养不良患儿的病历资料,包括临床特征、实验室检查、影像学特征及基因检测结果.结果 11例脑型X-连锁肾上腺脑白质营养不良患儿均为男性,起病中位年...     

儿童肾上腺脑白质营养不良1例并文献复习

目的 总结儿童肾上腺脑白质营养不良（adrenoleukodystrophy, ALD）病例的临床、实验室及影像学检查特点,提高广大医师对该罕见疾病的认识、诊断及治疗。方法 对2017年中南大学湘雅医学院附属海口医院儿科1例儿童肾上腺脑白质营养不良病例的家系基因检测结果进行回顾性分析并文献复习,汇总儿童肾上腺脑白质营养不良的临床表现特点。结果 患儿血清极长链脂肪酸（very long chain fatty acids,VLCFAs）测定：C24:0,C26:0 ,C24:0/C22:0,C26:0/C22:0异常。促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropic hormone, ACTH）明显增高,血浆游离皮质醇值（8:00）明显降低,24 h尿游离皮质醇值明显降低。头颅MRI平扫显示双侧脑室后角旁对称性异常信号,呈特征性“蝴蝶翼”状。 全外显基因检测结果示在患儿ABCD1基因发现c.1534G>T的核苷酸变异,该变异导致第512号氨基酸由Gly变为Cys,为错义变异,而一代测序验证患儿母亲该位点为杂合子,患儿父亲该位点未见异常。确诊该患儿为肾上腺脑白质营养不良儿童脑型。结论 肾上腺脑白质营养不良临床上以智力下降、视力减退、四肢活动障碍为主,头颅MRI 有特征性改变,血清VLCFAs和患儿家系基因检测是诊断本病的特异方法,目前尚无有效治疗方法。如扩大家系成员基因检测分析,对孕母优生优育有实际意义。     

肾上腺脑白质营养不良一家系

先证者,男,13岁,因全身皮肤色素沉着8年余、行走不利3年、瘫痪半年、失语3个月.患儿自5岁开始皮肤进行性发黑,以头面部及肢体为著,常诉乏力,行走缓慢,四肢无力并进行性加重.7岁时双手已不能持物,两脚尖着地,行走困难,并言语不清、学习困难.11岁时退学.半年来失语、吞咽困难、呛咳、有时流涎,不能坐,不会翻身,尿潴留,大便困难,需家人辅助才能排出.     

肾上腺脑白质营养不良1例

<正>患者,女,25岁,主因年满19岁无月经,婚后3年不孕于2009年4月16日入院。19岁时因无月经来潮行人工周期治疗3年,其间每月可维持正常月经周期,22岁停止人工周期治疗后闭经。22岁结婚,丈夫体健,婚后未受孕。24岁再次人工周期治疗6个月,无月经。22岁后生须,皮肤渐黑,易激动,焦虑,恐惧,注意力涣散。患者2.5岁开口说话,3岁开始走路,行走     

肾上腺脑白质营养不良1例

患儿男性，11岁。以进行性智力减退3个月，语音不清，吞咽困难1周入院。患儿3个月前无明显原因出现记忆力减退，学习成绩下降，以后逐渐出现动作和反应迟钝，表情呆滞，家人未予注意。1周前患儿“感冒”后症状加重，且出现语音不清、构音障碍、吞咽困难来院就诊。入院时查体：神志清，反应迟钝，问话基本能正确回答，但语音低，不清楚，咽反射减弱，呼吸尚平稳。皮肤无色素沉着，毛发正常，心肺未见异常，外生殖器正常。     

变性高效液相色谱法在肾上腺脑白质营养不良分子诊断中的应用

目的：目的对4个肾上腺脑白质营养不良（ALD）家系进行基因突变分析。方法：应用变性高效液相色谱（DHPLC）技术检测了4个ALD家系的A／3091基因，并通过核苷酸序列分析确证突变位点。结果：所有患儿的母亲，患儿2、患儿3、患儿4弟弟及其表弟与正常对照的PCR产物混合物。均出现DHPLC洗脱双峰。而正常对照均为单峰，提示相应基因片段存在突变位点。上述出现异源双峰的PCR产物经直接测序．证实了相关突变的存在：患儿1母亲为fs Glu 471突变携带者；患儿2存在S108X突变；患儿3存在R617C突变；患儿4弟弟和表弟均存在A141T突变。结论：DHPLC能有效地检测ABCD1基因突变。并为进—步地基因突变筛查与产前诊断提供依据。     

肾上腺脑白质营养不良的诊断及误诊原因分析

目的 探讨肾上腺脑白质营养不良(ALD)的诊断及误诊原因。方法 分析6例ALD患者的临床和实验室资料。结果 6例患者中4例为儿童脑型,1例为单纯Addison病型,1例为青少年脑型。主要临床表现为进行性运动障碍、语言及智能倒退,伴或不伴肾上腺皮质功能减退。本组3例患者以皮肤色素沉着为首发症状,误诊为原发性Addison病;2例患者发病早期被诊断为球后视神经炎及多发性硬化。结论 充分认识ALD的临床表现特征,及早进行血极长链脂肪酸(VLCFA)检查是早期诊断ALD的关键。     

肾上腺脑白质营养不良的产前分子诊断

肾上腺随白质营养不良（adrenoleukodystmphy，ALD）是一种主要侵犯大脑白质、肾上腺等器官的X-连锁隐性遗传病。根据临床表现和发病时间，可将ALD分成儿童随型、肾上腺脊髓神经病型等7种表型。各型的共同特征是极长链饱和脂肪酸（very long chain fatty acids,VLCFA）在体内蓄积，引起大脑白质脱髓鞘、肾上腺功能不全等病理改变。其致病基因定位于染色体xq28，称ABCD1基因。ALD的病程呈进行性发展，预后不良，尤以儿童大脑型为甚，患者发病后的平均生存时间仅为3年左右。到目前为止，对ALD尚无效果确切的治疗手段，也无法逆转中枢神经系统损害。因此，对ALD携带者所怀胎儿进行产前诊断。防止携带ABCD1突变的婴儿出生，提高人口素质，有重要的意义。我们于2003年和2004年分别对2个ALD家系实施了产前分子诊断。     

应用DARMS排除肾上腺脑白质营养不良分子诊断中假基因的干扰

目的：应用扩增阻滞突变系统（ARMS）排除ABCD1假基因的干扰．对肾上腺脑白质营养不良（ALD）家系进行基因突变分析。方法：按ARMS引物设计原则设计上游引物（正常引物、突变引物）和下游公共引物，对家系成员的基因组DNA分别进行PCR扩增。结果：R617C突变患者及其母亲的突变引物均扩增出特异性条带（107bp），患者父亲和对照则未见条带．在基因组DNA水平证实了R617C突变的存在。结论：“DARMS”方法可以快速、有效地排除假基因干扰。     

新的肾上腺脑白质营养不良基因突变1例的鉴定

目的：对1例肾上腺脑白质营养不良(ALD)患及其家系成员的ALD基因的突变类型进行鉴定。方法：以外周血RNA为模板，采用长链RT-PCR技术，分4个片段扩增ALD基因mRNA的编码序列，对4个PCR产物进行直接测序，筛查整个基因编码区,通过限制性内切酶酶切分析患及其家系成员基因组ALD基因片段，以进一步确证所发现的基因突变。结果：位于患ALD基因第6外显子的第508位密码子存在一个新的错义突变CCC→CTC(P508L)，患母亲为突变携带，患父亲和妹妹不存在此突变。结论：发现中国ALD患一个新的ALD基因突变，即P508L突变。     

儿童肾上腺脑白质营养不良1例报告

肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy,ALD),又称Sexlinked-Schider病.我院于2006年2月收治1例,现报告如下.