广西和云南两地微小按蚊的杂交试验

对广西和云南两地微小按蚊进行杂交试验。结果杂种F_1雌蚊都能育,卵巢发育正常。(Y×G)F_1雄蚊均不能育,其睾丸畸形胀大。(G×Y)F_1雄蚊虽能育,但睾丸略显萎缩,与亲本回交所产的卵孵化率均极低。杂种雌蚊卵巢营养细胞多线染色体的X染色体和常染色体均有不联会区段,以38区的不联会最为恒定。上述结果表明两地微小按蚊已出现不完全生殖隔离现象,有可能是微小按蚊复合体的两个亲缘蚊种。     

微小按蚊和溪流按蚊翅斑形态的比较

目的：比较微小按蚊和溪流按蚊翅斑的形态，了解它们的变异情况，寻找可靠的鉴别特征。方法：微小按蚊采自云南省景洪县基诺乡，溪流按蚊采自广西壮族自治区凌云县。将母蚊产的卵，在实验室饲养至成蚊，再将成蚊的翅制成玻片标本，在显微镜下测量标本的翅长和部分翅斑的长度。结果：共检查微小按蚊雌蚊翅５２个，雄蚊翅６０个，溪流按蚊雌蚊翅４０个，雄蚊翅６０个。认为翅前缘脉上分脉前白斑（ＰＳＰ）的有无和分脉白斑与分脉暗斑比例（ＳＰ／ＳＤｒａｔｉｏ）的大小，是鉴别微小按蚊和溪流按蚊的重要依据。结论：无论是雌蚊还是雄蚊，微小按蚊的翅斑形态与溪流按蚊的翅斑形态均有较为明显的差异。     

微小按蚊A、C的PCR和同工酶鉴别比较研究

目的?摇比较PCR和同工酶两种鉴别微小按蚊A、C亲缘种的方法。 方法 将现场采集后经形态初步鉴定为微小按蚊的样本，经PCR产物酶切片段长度多态性分析（PCR-RFLP）与乌头按蚊和杰普尔按蚊区分，等位基因特异扩增法（PCR-ASA）进一步鉴别微小按蚊A和C。再将用此方法鉴别后的微小按蚊羽化24 h内单只虫体样本，采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳，加以辨别区分。 结果 经测序验证，PCR方法可以简单明确地将微小按蚊A、C加以鉴别。几种用于鉴别的同工酶中，只有酯酶（EST）同工酶对微小按蚊A、C具鉴别意义。 结论 对于微小按蚊A、C的鉴别，PCR方法明显优于同工酶方法。     

云南省微小按蚊A、C种群密度高峰及嗜血习性的观察

目的研究云南省勐腊县微小按蚊A、C种群密度高峰及其与当地疟疾发病的相关性,并比较微小按蚊A、C的嗜血习性。方法在云南省勐腊县选取人房,逐月收集微小按蚊,以复合PCR方法分子鉴别其为微小按蚊A或C,观察密度高峰;收集当地疟疾发病情况,分析其与微小按蚊A或C密度高峰的相关性。对勐腊和元江县人房和牛栏采集的吸血蚊经复合PCR方法分子鉴别后,以ELISA方法检测胃血来源。结果微小按蚊A的密度高峰出现在9月,微小按蚊C则在7月,两者密度高峰的出现均会引起当地疟疾发病人数的增加。微小按蚊A的吸人血率(19 .1 %)略高于微小按蚊C的(12 .8 %) ,但无统计学意义。结论微小按蚊A、C的的种群密度高峰略有不同,两者均嗜吸牛血,尚不能认为微小按蚊A、C的嗜血习性存在差异。     

我国微小按蚊A、C的形态和染色体核型研究

目的对微小按蚊A、C的形态和有丝分裂期染色体核型进行比较研究,观察并筛选具有鉴别意义的特征。方法将现场采集后经形态学鉴别初步认定为微小按蚊的样本带回实验室单管饲养,待其产卵后,经多重PCR方法鉴别为微小按蚊A或C。子代羽化后的成蚊标本使用解剖镜、光学显微镜和扫描电镜进行形态学观察和比较。取子一代四龄幼虫的脑神经节制作染色体核型,吉氏染色,显微镜下观察。结果微小按蚊A和C的形态学差异主要表现为是否存在膊白斑（HP）、V2．1白斑及喙腹面白斑,尤其是V2．1白斑和喙腹面白斑,微小按蚊A不出现或出现率极低,微小按蚊C则有很高的出现率,具有稳定差异。光学显微镜和扫描电镜下微小按蚊A、C翅前缘脉、V2．1及翅燧处鳞片及翅目上小钩均未见差异。微小按蚊A、C的常染色体着丝点指数和相对长度均无明显差异,性染色体均为近中着丝粒核型,但略有不同。结论我国微小按蚊A、C的形态和染色体核型均存在一定的差异。     

微小按蚊种团酯酶同工酶比较研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( PAGE)技术比较分析了 3种 (微小按蚊、乌头按蚊、溪流按蚊 )雌按蚊酯酶 ( EST)酶谱 ,EST出现两组区带 ,微小按蚊 (含 2个不同地株 )存在遗传上的多态现象 ,乌头按蚊 EST酯酶相对简单。各自均有稳定的酶带 ,并可根据 Rm值结合各自特殊酶带区分成 3个不同的种     

广西、海南、云南微小按蚊3种同工酶谱比较研究

目的 探索我国微小按蚊复合体同工酶谱鉴别指标。方法选择广西微小按蚊（A.m.G）、海南微小按蚊（A.m.H）和云南微小按蚊（A.m.Y）的单雌线蚊匀浆，采用不连续性聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳法分离，特异性底物染色，比较观察乳酸脱氢酶（LDH）、醇脱氢酶（ADH）和酯酶（EST）3种同工酶谱。结果三地微小按蚊的LDH同工酶谱相同，均具1条Rm14酶带；ADH酶谱中三地微小按蚊均显一条酶带，A.m.G与A.m.H具相同酶带Rm34，而A.m.Y则是1条Rm40酶带；EST的主带谱A.m.G与A.m.H基本相似，前者显示Rm18、35和61、后者显示Rm18、35、39和61。而A.m.Y明显不同于A.m.G和A.m.H显示Rm18、39、43、50、56和59六条主带。结论ADH和EST同工酶谱在不同种的微小按蚊中存在明显差别，可能在区别我国微小按蚊姐妹种中有较大的应用价值。     

广西、海南、云南微小按蚊3种同工酶谱比较研究

目的　探索我国微小按蚊复合体同工酶谱鉴别指标。　方法　选择广西微小按蚊 (A .m .G)、海南微小按蚊(A .m .H)和云南微小按蚊 (A .m .Y)的单雌线雌蚊匀浆 ,采用不连续性聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳法分离 ,特异性底物染色 ,比较观察乳酸脱氢酶 (LDH)、醇脱氢酶 (ADH)和酯酶 (EST) 3种同工酶谱。　结果　三地微小按蚊的LDH同工酶谱相同 ,均具 1条Rm14酶带 ;ADH酶谱中三地微小按蚊均显一条酶带 ,A .m .G与A .m .H具相同酶带Rm 3 4,而A .m .Y则是 1条Rm 40酶带 ;EST的主带谱A .m .G与A .m .H基本相似 ,前者显示Rm18、3 5和 61,后者显示Rm18、3 5、5 9和 61。而A .m .Y明显不同于A .m .G和A .m .H ,显示Rm18、3 9、43、5 0、5 6和 5 9六条主带。　结论　ADH和EST同工酶谱在不同种的微小按蚊中存在明显差别 ,可能在区别我国微小按蚊姐妹种中有较大的应用价值。     

微小按蚊抗药性的历史及现状

微小按蚊是我国疟疾传播的主要媒介,为控制疟疾的流行,人们研制并使用了大量的杀虫剂.与此同时,蚊虫也对杀虫剂产生了抗药性.目前,蚊虫的抗药性问题已成为世界性难题,该文从微小按蚊抗性发展、影响蚊虫抗性的遗传基因两方面作了综述,以期为微小按蚊控制提供基础资料.     

微小按蚊密度评价灰色模型研究

目的　借助气象、环境与遥感监测指标建立微小按蚊密度评价模型。　方法　以云南省10县27乡为研究现场,收集1984～1993年各乡气象、环境、遥感与蚊媒监测资料。对18项指标与微小按蚊密度的关系进行灰色关联度分析,按照灰色阈值筛选评价指标,合成变量E,研究变量E与微小按蚊密度的关系,从而建立微小按蚊密度评价灰色模型。　结果　以0.70灰色阈值筛选微小按蚊密度评价指标并排列灰色关联序:干季月平均温度>干季最低温度>湿季最低温度>湿季归一化植被指数(NDVI)>湿季月平均温度>水田面积占耕地面积的比例>干季月最高温度>湿季月最高温度。微小按蚊密度灰色评价模型为:y=0.0578e0·0780(8X10'+7X12'+6X11'+5X15'+4X9'+3X4'+2X8'+1X7')模型判定的正确率为92.0%, e0.5=18%,最大相对误差为-15%,最小相对误差为4%,平均相对误差为21%。结论 借助微小按蚊密度评价模型可以对疟疾疫点微小按蚊密度进行拟合评价。     

微小按蚊种团mtDNA-COII基因变异的研究

目的　研究我国微小按蚊种团成员 (微小按蚊A/C、乌头按蚊、瓦容按蚊及杰普尔按蚊 )的线粒体DNA(mtDNA)COII基因的分子变异和种系发生关系。　方法　单蚊提取DNA ;mtDNA COII基因的扩增和测序 ;用最大似然法DNAML构建种系发生树。　结果与结论　我国存在微小按蚊A、C两个亲缘种 ,两者COII基因 1 6个位点存在碱基置换 ,突变频率为 2 .3 % ,变异小于其它种团成员     

元江县微小按蚊卵巢营养细胞多线性染色体观察

云南省元江县采集的微小按蚊分别单只雌蚊驯养，解剖分离卵巢营养细胞，染色后光镜观察、记录染色体图谱。经观察365个卵巢多线染色体标本。其染色体由5臂共3条染色体组成：Ⅰ号染色体为具端着丝点的性染色体（X染色体），仅见一臂；Ⅱ号为1对具亚中着丝点的常染色体，分右臂（2R）和左臂（2L）；Ⅲ号为1对具中着丝点的常染色体，含右臂（3R）和左臂（3L）。与广西微小按蚊卵巢营养细胞多线染色体比较，发现有12处差异。     

进化速率不同的分子标记对微小按蚊新亲缘种的研究

目的选择进化速率不同的核糖体rDNA-ITS2、rDNA-28S-D3基因和线粒体DNA（mtDNA）COⅡ基因作为分子标记，研究我国微小按蚊变异及新的亲缘种。方法用蛋白酶K消化单蚊蚊腿，提取基因组DNA，PCR特异扩增rDNA-ITS2、rDNA-28S-D3和mtDNA-COⅡ基因片段，对PCR产物进行纯化、测序和序列分析，并基于mtDNA-COⅡ基因采用最大似然法构建种系发生树。分析微小按蚊变异地位和进化关系。结果1）云南元江微小按蚊rDNA-ITS2扩增片段约700bp，其他微小按蚊为480bp左右；2）ITS2和D3序列分析显示3种单倍型，其中元江微小按蚊基因长度与碱基组成显著不同；3）mtDNA-COⅡ种系发生树显示元江微小按蚊与其他微小按蚊的亲缘关系较远。结论我国存在微小按蚊A和C之外的新的微小按蚊亲缘种。     

不同地区微小按蚊rDNA-ITS2序列差异

目的　比较我国云南、海南省、广西壮族自治区及泰国等不同地区微小按蚊核糖体 DNA第 2内转录间隔区 ITS2 )序列差异。　方法　取单只雌蚊蚊腿消化提取 DNA,PCR特异扩增 r DNA- ITS2片段 ,并对其扩增产物纯化、测序及分析。　结果　发现 2种不同的 ITS2序列 Gen Bank登录号 :AF4 16 783,AF4 16 784 ) ,分别与微小按蚊 A和 C同源 ,ITS2序列长度及 GC含量分别为 4 81bp,5 4 .0 4 %和 4 83bp,5 4 .2 3% ,两者无显著性差异 ;但 2 2个固定位点存在碱基置换和插入 /缺失 ,序列差异为 5 .8%。　结论　研究区内微小按蚊存在 A和 C两个不同的亲缘种     

Identification of two species within the Anopheles minimus complex in northern Vietnam and their behavioural divergences

Elucidating the complex taxonomic status of the major malaria vector taxa and characterising the individual species within each complex is important for understanding the complexity of the vector system in the south-east Asian region and will allow to estimate the impact of vector control measures. This applies to countries such as Laos, Cambodia and Vietnam that spend about 60% of their malaria control budget on implementing vector control activities. We used isozyme electrophoresis to clarify the Anopheles minimus s.l. species composition in northern Vietnam and identify behavioural divergences of individual species. Using different collection methods, adult mosquitoes were caught at monthly intervals from June to November 1995 in four villages. An. minimus s.l. could be distinguished from closely related species, An. aconitus and An. jeyporiensis, at the Octanol dehydrogenase (Odh) enzyme locus. Significant positive Fis values gave clear evidence of nonrandom mating within the An. minimus s.l. population. The highest heterozygote deficiency was observed at locus Odh, which was diagnostic for 2 sympatric An. minimus species in Vietnam similar to the An. minimus A and C species known from Thailand. We found no evidence for restricted gene flow between monthly samples, villages, or collection methods in either of the two An. minimus species. They occurred in sympatry, but in different proportions depending on the collection site, and had dissimilar resting and biting behaviours. Thus a vector control strategy will have a nonuniform effect on the various components of this diverse vector system.